体外药敏试验ATP-TCA与流式细胞仪在肝癌化疗中的应用

目的 探讨体外化疗药敏试验系统（ATP-TCA系统）联合流式细胞仪（FCM）在肝癌化疗中的应用及其结果之间的关系。方法 取24例肝癌切除，活检或穿刺组织行体外药敏试验和流式细胞仪P170检测，并分析二者间的关系。结果 ATP-TCA的可评估率为91.67%;10种化疗药物的敏感率分别为：氟尿嘧啶5.00%，诺消灵5.00%，顺铂14.26%，足叶乙甙19.05%，草酸铂19.05%,丝裂霉素23.81%，表阿霉素28.57%，开普拓45.46%，健择47.62%，泰素63.64%；P170检测阳性率为57.14%；丝裂霉素，表阿霉素的敏感率在P170阴性表达时高，开普拓健择，泰素的敏感率高且在P170阳性表达和阴性表达时无显著差异。结论 ATP-TCA法联合FCM可较好用于肝癌化疗药物的筛选；丝裂霉素，表阿霉素可用于P170阴性表达的病人，开普拓，健择，泰素可用于P170阳性表达的病人。     

贫血对胃肠肿瘤化疗药物敏感性的影响

2001年1月至2004年2月间，作者共收治经手术切除及病理确诊胃癌218例和大肠癌病人271例，其中胃癌伴发贫血78例，大肠癌伴发贫血65例。通过MTT法试验，对新鲜肿瘤标本进行肿瘤细胞的化疗药物敏感性检测，探讨胃癌、大肠癌伴发不同程度贫血时，肿瘤细胞对化疗药物敏感性的差异，以指导这类病人的临床化疗。     

流式细胞术的凋亡检测技术在人胃肠实体瘤药敏试验中的应用

目的化疗药能诱导肿瘤细胞凋亡，据此将流式细胞术的经典凋亡检测技术应用到临床特异性抗肿瘤药物的筛查，实现快速，准确的药物敏感性报告。方法应用流式细胞术的AnnexinV／PI技术，检测67例临床手术切除的胃肠肿瘤在不同化疗药物诱导下发生的凋亡。结果7种化疗药物诱导的胃肠肿瘤凋亡率有显著差异，胃癌的凋亡率以紫杉醇，丝裂霉素，氟尿嘧啶最高；而大肠癌以氟尿嘧啶，丝裂霉素，奥沙利铂诱导的凋亡率最高。联合化疗方案，胃癌以氟尿嘧啶联合紫杉醇的敏感率及凋亡率最高；大肠癌以氟尿嘧啶联合奥沙利铂的敏感率及凋亡率最高。结论不同肿瘤或同一肿瘤的不同个体，对化疗药物的敏感性均不同。临床可应用凋亡检测技术作为快速的药物敏感性检测方法，为肿瘤化疗筛选合适的个体化有效方案，避免无效化疗。     

消化道肿瘤转移淋巴结中P糖蛋白和谷胱甘肽S转移酶π的表达与肿瘤化疗药物敏感性的关系

目的 探讨消化道肿瘤淋巴结转移灶中P糖蛋白(P-gp)和谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)的表达与化疗药物敏感性的关系及其临床意义.方法 对54例胃癌和大肠癌新鲜肿瘤组织及转移淋巴结进行肿瘤细胞培养化疗药敏性实验,行原发灶和转移灶P-gP和GST-π免疫组化染色.结果 ①肿瘤原发灶和淋巴结转移灶中P-gp和GST-π表达一致率较低,分别为22%(k=-0.0133,P=0.8698)和50%(k=0.1137,P=0.1496);淋巴结转移灶中P-gP和GST-π表达强度均明显高于原发灶(Z=-3.0448,P=0.0023;Z=-2.1178,P=0.0034).②VCR、OPT、OXA、DDP、MTX对淋巴结转移灶肿瘤细胞抑制率明显低于原发灶(均P<0.05),仅VP-16对原发灶的抑制率明显低于转移灶(P=0.0406).③原发灶中P-gp表达程度与5-FU、VCR和PTX对肿瘤细胞抑制率呈负相关(r=-0.4142～-0.5712,均P<0.05),GST-π表达程度与5-FU、VCR、OPT和PTX的抑制率呈负相关(r=-0.3927～-0.4951,均P<0.05);转移灶中P-gP表达程度与VP-16、PTX和eADM对肿瘤细胞抑制率呈负相关(r=-0.3802～-0.4624,均P<0.05),GST-π表达程度与5-FU、VCR、DDP的抑制率呈负相关(r=-0.3996～-0.5345,均P<0.05).结论 消化道肿瘤淋巴结转移灶中P-gP和GST-π的表达以及对化疗药物的敏感性均存在与原发灶不同的异质性,淋巴结转移灶具有更强的耐药倾向.术后辅助化疗的靶目标应针对淋巴结转移灶.     

流式细胞仪在膀胱癌多药耐受研究中的应用

目的：探讨流式细胞仪（ＦＣＭ）在膀胱癌多药耐受研究中的应用。方法：利用蛋白质印迹,免疫细胞化学和ＦＣＭ检测并比较膀胱癌多药耐受细胞ＥＪ／ＭＲＰ的多药耐受糖蛋白（Ｐ－ｐｇ）和多药耐受相关蛋白（ＭＲＰ）的表达;利用ＦＣＭ检测了ＥＪ／ＭＲＰ药物耐受的功能水平。结果：ＥＪ／ＭＲＰ高表达ＭＲＰ,无明显Ｐ－ｇｐ表达,ＦＣＭ的检测结果与蛋白质印迹,免疫细胞化学的结果一致,但检测更简便,功能检测显示柔红霉素（ＤＮ     

肿瘤多向耐药基因及临床应用的研究进展（文献综述）

肿瘤多向耐药基因是目前肿瘤药物治疗及手术后化疗防治复发失败的重要影响因素，本文意在总结近年来，对多向耐药基因与其表达蛋白Ｐ－ＧＰ１７０研究的分子生物学特性，在临床各种肿瘤中的检测以及其逆转方法的研究和临床应用，从而进一步探讨临床肿瘤治疗中存在的问题和今后研究的方向。     

组织培养药敏测试法在表浅膀胱肿瘤化疗药敏测试中的应用价值

目的：探讨Hoffman式组织培养药敏测试法在表浅膀胱癌腔内化疗药敏测试中的应用价值。方法：对31例表浅膀胱癌分别进行Hoffman式组织培养，对丝裂霉素C(MMC)进行改良MTT法药敏测试，检测MMC在浓度为1g/L、作用时间为2h情况下对表浅膀胱癌的生长抑制率。采用MMC 40mg加生理盐水40m1对表浅膀胱癌进行术后标准腔内化疗，并随访20个月。结果：18例培养成功，15例进入药敏测试，其中9例对MMC敏感，6例不敏感。术后腔内化疗随访结果显示敏感者有2例复发，不敏感者有5例复发；单因素Kaplan—Meier生存分析显示敏感者无复发生存率明显高于不敏感者。与临床实际疗效比较，该药敏测试法的特异性为75．0％，敏感性为85．7％，准确率达80．0％。结论：组织培养药敏测试法不仅可以检测表浅膀胱癌对化疗药物的敏感性，还能预测利用敏感药物进行腔内化疗的预后。     

MTT法体外测定胃癌化疗药物敏感性

采用MTT法测定89例胃癌细胞对10种化疗药物的体外敏感性，并运用免疫组化法检测30例肿瘤细胞的多药耐药基因(MDR1)。结果显示89例胃癌细胞对化疗药物的敏感性依次为5—FU＞MMC＞ADM＞HCPT＞cBP＞cDDP＞MxT＞MTx＞Ara—C＞VP16。30例患者中15例MDR1阳性。笔者认为以MTT法检测胃癌细胞对化疗的敏感性有助于指导临床选用肿瘤敏感性化疗药物，并可避免盲目选用肿瘤非敏感性化疗药对机体造成的毒性反应。在检测肿瘤对化疗药物敏感性的同时，应检测多药耐药基因，及时发现耐药病人，以便采用其他有效的治疗方法。     

胃肠肿瘤术后低渗热灌注腹腔化疗预防腹腔复发的临床疗效

目的评价胃肠肿瘤手术后低渗热灌注腹腔化疗对预防腹腔复发的临床疗效.方法以35例胃肠肿瘤术后患者行低渗热灌注顺铂腹腔化疗结合全身化疗为实验组,45例行术后辅助化疗为对照组.结果实验组与对照组2年腹腔复发率分别为14.2%和37.8%(P＜0.05),2年生存率分别为77.1%及51.1%(P＜0.05),两组之间毒副反应无显著性差异(P＞0.05).结论胃肠肿瘤术后低渗热灌注腹腔化疗可降低腹腔复发率并提高患者生存率,是一种高效、安全、简便的新方法.     

肿瘤体外药敏试验三磷酸腺苷生物发光法在肝癌化疗中的应用

目的：探讨肿瘤体外药敏试验三磷酸腺苷生物发光法（ATP－TCA）在肝癌综合治疗中的应用。方法：取36例肝癌手术、活检和穿刺标本行ATP－TCA。结果：ATP－TCA的可评估率为94．44％；10种化疗药物的敏感率分别为：5－氟脲嘧啶（5－Fu）8．33％、诺消灵（MIT)8．33％、顺铂（CDDP）11．11％、草酸铂（OXA）13．89％、足叶已甙（VP－16）19．44％、丝裂霉素（MMC）25．00％、表阿霉素（EPI）27．78％、开普拓（CPT）44．44％、健择（GEM）47．22％、泰素（TAX）63．89％。结论：ATP－TCA法可用于肝癌化疗中化疗药物的筛选。     

恶性骨肿瘤化疗药物敏感性研究

目的　分析恶性骨肿瘤化疗药物敏感性和多药耐药性 ,为制定敏感的个体化化疗方案提供依据。　方法　取恶性骨肿瘤新鲜标本 3 2例 (骨肉瘤 2 0例 ,其它恶性肿瘤 12例 ) ,运用流式细胞术检测化疗药物作用后的瘤细胞凋亡情况及其P170蛋白表达 ,分析其化疗敏感性和耐药性。结果　不同化疗药物作用后的骨肉瘤细胞凋亡百分比分别为 :甲氨喋呤 ( 3 0 5 0± 10 2 2 ) % ,阿霉素( 2 6 2 8± 9 3 5 ) % ,丝裂霉素 ( 2 3 11± 7 3 8) % ,足叶乙甙 ( 18 17± 6 14 ) % ,长春新碱 ( 4 4 4± 2 5 5 ) % ,环磷酰胺 ( 1 2 2± 0 5 9) %。P170蛋白表达较高者化疗敏感性均较低。　结论　流式细胞术分析化疗药物作用后的恶性骨肿瘤细胞凋亡及其P170蛋白表达 ,对预测肿瘤的化疗敏感性和耐药性有一定意义。     

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目的 探讨体外化疗药物敏感试验系统（ATP-TGA系统）在消化道恶性实体肿瘤的应用及体会。方法 取肝癌，胃癌，结肠癌，直肠癌共42例的手术，活检和穿刺标本应用体外药敏试验ATP-TCA法。结果 ATP-TCA的可评估率为88.10%,10种化疗药物的敏感率分别为：氟脲嘧啶11.11%，顺铂13.89%。足叶乙甙19.44%，草酸铂22.22%。诺消灵25.00%。丝裂霉素27.78%，表阿霉素38.89%。开普拓44.45%。健择52.78%。泰素62.16%。结论 ATP-TCA法可用于消化系恶性实体肿瘤化疗中的化疗药物的筛选。     

Application of flow cytometry in clinical renal transplantation

Flow cytometry (FC) may be considered as a fundamental technique in studying cell biology and pathology. It combines the quantitative character of biochemical methods with the multiparametric capacities of microscope analysis in a high-precision process for rapid analysis of individual cell characteristics. Three original FC techniques routinely applied in the field of renal transplantation are reported in the present study. They concern the donor-recipient cross-match test, the morphological analysis of urinary sediment and the modulation of the density of various membrane antigens on the lymphocyte surface. A common factor underlies all these methods: they aim to provide the physician with a reliable diagnostic tool in clinical renal transplantation.     

超选择动脉置泵灌注化学药物治疗晚期胃肠道癌

目的 评价术中超选择性动脉内置泵,术后区域灌注化疗对晚期胃肠道癌的疗效。方法 随访观察79例手术证实不能切除的晚期胃肠道癌症患者,经超选择性动脉内置泵灌注化学药物的疗效。其中胃癌42例,直肠癌26例,结肠癌11例。结果 化学药物治疗（化疗）后,完全缓解者（CR）1例;部分缓解者（PR）69例,其中11例行二期根治性癌灶切除术,有效率89%（70/79）,置泵术后生存满1、2、3年者分别为84%（66/79）,28%（22/79）,9%（7/79）,平均生存期为20.6个月。结论 术中超选择性动脉内置泵,术后泵内区域灌注化疗是治疗晚期胃肠道癌症的有效方法,可以延长患者的生存期。提高手术切除率。     

DNA analysis with flow cytometry and image cytometry in colorectal polyps

Ploidy was studied with flow and image cytometry in 51 polyps removed endoscopically from 44 patients. Evaluation was carried out on frozen material in 34 cases and on material fixed in formalin and embedded in paraffin in the remaining 17. Data analysis showed a statistically significant correlation between polyp size and aneuploidy frequency (P>0.05). No statistically significant correlation was found between aneuploidy frequency and histological type. The linear correlation study did, however, show a correlation tendency between histological type and aneuploidy (R=0.42211).     

腹腔化疗和静脉化疗对免疫的影响

目的：比较术后腹腔化疗和静脉化疗对胃肠道癌患者免疫的影响。方法：将36例胃肠道癌患者分两组,每组18例,一组接受腹腔化疗,另一组接受静脉化疗,检测血清中T细胞亚群和sIL-2R水平。结果：血清CD3,CD4和sIL-2R水平化疗后前明显下降（P＜0．01）,CD3,CD4,CD8在两治疗组之间相似（P＞0．1）,但sIL-2R水平腹腔化疗较静脉化疗低（0．05＜P＜0．1）。结论：腹腔化疗化静脉化疗对机体免疫的影响小,提倡多疗程的腹腔化疗。     

胃肠道癌腹膜转移的化疗策略

腹膜转移是严重影响胃肠道癌患者预后的独立不良因素,"种子-土壤"学说被认为是解释腹膜转移的主要理论。由于腹膜转移结节初发时体积小,早期诊断尤为困难,因此,腹膜转移的风险评估就显得尤为重要。目前诊断方法已由临床病理因素逐渐向细胞学、乃至分子层面纵深发展,而包括影像组学在内的多组学整合评估,也进一步丰富了腹膜转移的精准诊断...     

流式细胞术在人ABO血型特异性抗体检测中的应用

目的 建立以流式细胞仪检测人ABO天然血型特异性抗体的技术,并检验其效果.方法 将52份健康志愿者的血清样本与标准化人源红细胞混合,加入异硫氰基荧光素标记的羊抗人IgM或IgG二抗,用流式细胞仪检测样本中抗红细胞抗原A和B的特异性IgM及IgG抗体.检测结果与酶标仪法进行对比.结果两种方法对于血型IgM抗体水平变化趋势检测的关联性较好,二者的Spearman等级相关系数为0.730(P＜0.05),但流式细胞术的特异性、灵敏性和重复性优于酶标仪法,A型和B型血清样本(各16例)中,流式细胞术结果转为阴性的IgM抗体滴度为1∶1024～1∶512,而酶标仪法则为1∶64～1∶32.用流式细胞术在O型血清中检测到IgG抗体.结论 流式细胞术可以进行ABO血型IgM和IgG抗体的检测,效果优于传统方法,并可半定量检测抗体水平.

Abstract：

Objective To establish and validate a standard method using flow cytometry (FCM)in human ABO blood group antibody (Ab) detection. Methods Sera samples from 52 blood donors were incubated with standardize red blood cells (RBCs), and anti-A/B antibody (IgM/IgG) was measured by indirect flow cytometry after adding secondary isotype-specific fluoresce labeled Ab. The results were compared with those by using ELISA reader. Results The changes of anti-A/B IgM measured by both methods correlated well and an overall correlation coefficiency of 0.730 for IgM was obtained by Spearman's rank testing (P＜0.05). FCM showed better specificity, sensitivity and reproducibility over ELISA reader. In blood group A samples (n = 16) or B samples (n = 16) ,the antirespectively. IgG blood group Ab could only be detected in blood group O sera. Conclusion Compared with traditional methods,FCM is a more objective method to offer accurate detection of natural ABO blood group Ab (IgM/IgG) and allowed semi-quantitative measurement of antibody levels.