振动力学刺激对骨质疏松性骨折愈合的影响

目的本研究旨在探讨高频率低能量的振动力学刺激对骨质疏松性骨折愈合的影响。方法59只大鼠建立大鼠卵巢切除骨质疏松模型,建模成功后构建股骨骨折模型,并随机分为振动力学刺激组和对照组。骨折后第5天开始对振动组使用高频率低能量振动平台(35Hz,峰振幅0.3重力加速度)行每天20min的振动力学刺激,对照组则行假治疗。每周摄X线片观察骨折愈合的情况,并采用显微计算机断层扫描和生物力学测试评估骨痂生成的情况及其力学属性。结果 X线随访显示,振动组的骨折愈合速度和愈合率均优于对照组。前者新生矿化骨痂的体积在治疗后第2周和第4周时均显著高于后者。第8周时,振动组成熟骨痂的体积以及整体的力学强度均显著优于对照组。结论高频率低能量振动力学刺激可促进骨质疏松性骨折的愈合。     

运用高频率低能量振动促进骨折愈合的实验研究

目的 本研究旨在探讨全身性的高频率低能量振动对骨折愈合的作用.方法 建立大鼠闭合性股骨骨折髓内固定模型(n=55),并随机分为治疗组(n=28)和对照组(n=27).骨折后第5天开始对治疗组使用高频率低能量振动平台(35 Hz,峰振幅0.3 g)治疗,对照组则行假治疗.采用二维(X线)及三维(显微计算机断层扫描)的影像学方法和生物力学测试对骨折愈合的情况进行评估,并行统计学比较分析.结果 治疗后2周治疗组新生的矿化骨痂在上维及三维定量分析中均明显多于对照组,差异有统计学意义(P<0.001和P=0.014).治疗后4周治疗组的骨折愈合率(85.7%)高于对照组(57.1%),骨折愈合的生物力学属性也优于埘照组,差异有统计学意义(P=0.023).结论 高频率低能量振动可刺激骨折部位骨痂的生成及矿化,从而促进骨折愈合.     

低强度超声波对骨折愈合中胶原代谢影响的实验研究

目的：探讨低强度超声波对骨折愈合中Ⅰ,Ⅱ型胶原代谢的影响。方法：建立大鼠双侧胫骨近侧皮质骨缺损的动物模型,随机分为2组,实验组每日接受低强度超声波刺激,而对照组给与假刺激,于术后10,20,30天处死动物取标本（骨痂）进行组织学及免疫组化染色（SABC法）,结果：组织学检查显示,实验组的血肿机化,吸收,软骨性骨痂和软骨内化骨明显早于对照组;免疫组化检查显示;实验组在20天时Ⅱ型胶原的表达明显高于对照组,在30天时I型胶原的表达也略高于对照组,结论：低强度超声波通过增加骨痂内I、Ⅱ型胶原的合成来促进骨折的愈合,其中以Ⅱ型胶原的作用尤其明显。     

活血化瘀汤对大鼠骨折愈合过程中血清骨钙素和Ⅰ型胶原表达的影响

目的:研究活血化瘀汤在骨折愈合过程中对骨钙素(bone gamma carboxyglutamate protein,BGP)和Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)表达的影响,探讨该方在骨折愈合中对软骨内成骨的作用。方法:选用雄性SD大鼠60只,造成左胫骨中段闭合折骨标准的骨折模型,术后采用髓内针固定。随机分成中药组(麻醉苏醒后灌服活血化瘀汤,n=30)和对照组(麻醉苏醒后灌服等量生理盐水,n=30),分别于灌胃后3、5、7、14、21d腹主动脉取血,然后取骨折端上下各0.5cm长的一段骨质。应用Elisa技术,动态观察骨钙素和Ⅰ型胶原表达的变化。结果:血清骨钙素、Ⅰ型胶原在骨折愈合过程中表达持续增高,且表达具有一致性;活血化瘀汤组血清骨钙素、Ⅰ型胶原的表达均较生理盐水组明显(P<0.05)。结论:活血化瘀汤能调控骨钙素和Ⅰ型胶原表达,可能通过影响大鼠骨折愈合过程中软骨内成骨,促进骨折愈合。     

骨质疏松性骨折愈合过程中的骨重建因子

一般性骨折愈合过程分为血肿机化演进期、原始骨痂形成期和骨痂改造塑形期；而骨质疏松性骨折愈合过程分为纤维骨痂期、软骨骨痂期和骨性骨痂期。骨质疏松性骨折愈合的组织学观察表明，纤维骨痂期主要是成纤维细胞合成Ⅲ型胶原；软骨骨痂期主要是成软骨细胞合成、分泌Ⅱ型胶原；骨性骨痂期主要是随着软骨内成骨的出现和发展，Ⅱ型胶原消失，逐渐由抗张力性能较强的Ⅰ型胶原所取代。一般来说，实验性骨质疏松性骨折的愈合方式与一般性骨折愈合方式相似，软骨内成骨和膜内成骨共同参与了骨质疏松性骨折的修复过程，但以软骨内成骨为主。     

低强度超声波促进骨折愈合过程中I、X型胶原蛋白的基因表达

目的 研究低强度超声波刺激下骨折处I、X型胶原的基因表达规律,从分子水平探索低强度超声波促进骨折愈合的作用机制.方法 应用兔双侧桡骨骨折模型,采用左右自身对照.36只新西兰雄性大白兔,分为6组.右侧骨折处每日行超声刺激20rain,左侧不行刺激.分别于术后3、7、10、14、21、28d取骨折处骨痂及纤维组织,进行骨痂厚度的测量和组织学观察.RT-PCR方法半定量分析I、X型胶原mRNA的表达规律.结果 自术后10d开始至28d,实验侧的骨痂厚度明显高于对照侧.术后10、14、21、28d HE染色显示成软骨细胞及成骨细胞提早出现而且量多,细胞外基质合成增加.I型胶原mRNA表达于术后14、21d含量明显高于对照侧,软骨内细胞外基质蛋白合成增加,增加新骨基质的含量.X型胶原mRNA表达于术后14d明显高于对照侧,术后21d达高峰,然后下降.结论 低强度超声波作用可以增加骨折处骨痂含量,其加快骨折愈合通过刺激骨痂增生,使矿化过程提前发生所致.低强度超声波刺激可以增加I、X型胶原的mRNA含量,促使软骨内成骨过程中软骨细胞的增多和细胞外基质的钙化.     

降钙素对骨质疏松性骨折修复过程胶原基因表达的影响

目的 探索降钙素对骨质疏松性骨折愈合过程中基质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响,阐明降钙素促进骨质疏松性骨折愈合的机制。方法 选用96只2个月龄SD雌性大鼠,64只行双侧卵巢切除(OVX)后,随机平分为降钙素组和对照组,其余32只为假手术组;10周后所有大鼠在右侧挠骨下端制作1 mm骨缺损的骨折愈合模型。降钙素组从骨折术前1 w至术后8w连续每天皮下注射鲑鱼降钙素2 IU/kg,另2组注射等量生理盐水。采用原位杂交技术分析7d,14d,28d,56d,4个时间点降钙素对骨折修复过程中基质I、 II、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响。结果 降钙素治疗下,骨基质I型胶原mRNA表达的量与对照组比较有显著性差异,假手术组>降钙素组>对照组; Ⅲ型胶原mRNA的表达变化则与之相反。降钙素组软骨性骨痴向骨性骨痴转换时间较对照组缩短。结论 降钙素能影响胶原mRNA的表达,明显促进骨质疏松性骨折的愈合。     

骨痂组织冰冻切片前胶原及转化生长因子－β1基因表达的原位定位

目的观察骨痂组织中前胶原、转化生长因子－β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１,ＴＧＦ－β１）基因表达模式,分析ＴＧＦ－β１在骨折愈合过程中的作用,探索骨组织冰冻切片原位杂交技术。方法采用不脱钙的大鼠骨痂组织冰冻切片进行原位杂交,观察骨痂组织中前胶原和ＴＧＦ－β１基因的表达,并与先前研究作对照。结果杂交信号清晰,定位良好,特异性高。骨折第１周末,成纤维细胞的Ⅲ型前胶原基因表达占主导,Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ阳性成骨细胞也出现于膜内化骨区。ＴＧＦ－β１在分化、增殖的成骨细胞以及接近成熟的软骨细胞有显著表达。骨折第２周末,Ⅱ型前胶原和ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ在成熟的软骨细胞大量表达,而Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达也明显增加。骨折第４周末,软骨骨痂基本被骨组织替代,见散在Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达阳性的成骨细胞。同时证实共有表型表达的现象存在。结论实验结果与以往有关研究结果的吻合,提示ＴＧＦ－β１在骨折愈合过程中,尤其在细胞分化、增殖中,起重要的调节作用。同时,也说明了此方法是一种快捷、灵敏、又不失特异性的骨组织原位杂交方法。     

骨质疏松性骨折膜内成骨和软骨内成骨特点的定量研究

目的通过去势大鼠骨折模型,探讨骨质疏松性骨折愈合过程中膜内成骨和软骨内成骨的特点。方法57只6月龄雌性SD大鼠,随机分为卵巢切除组(OVX)和对照组(SHAM),术后3个月pQCT随访观察到OVX组的骨密度(BMD)显著下降。随后OVX组和SHAM组均构建闭合性股骨骨折模型,每周摄X线片随访骨折愈合情况并行骨痂定量分析。第2、4、8周取材,行显微CT(micro-CT)三维骨痂定量分析和组织学分析,并于第8周采集标本进行生物力学测试。结果SHAM组膜内成骨的新生骨量在骨折愈合早期显著高于OVX组(P=0.031),骨折区域的软骨形成也较OVX组活跃,但未构成显著性差异。随着软骨内骨化的进行,SHAM组软骨内成骨区域的新生骨量显著高于OVX组(P=0.023)。骨折后8周时,SHAM组骨折愈合率高于OVX组,生物力学强度也明显优于OVX组(P=0.044)。结论骨质疏松对骨折愈合中膜内成骨和软骨内成骨的过程均产生负性作用,其分子生物学机制有待进一步探讨。     

阿胶对骨愈合过程中相关基因表达影响

目的：揭示阿胶在骨愈合过程中对6种相关基因表达的干预作用，了解阿胶的调节靶点，探索建构中药基因组学的途径。方法：通过在大鼠胫骨打孔的方法建立单因素干扰模型，并将150只大鼠随机分为正常组、模型组和阿胶组，每组50只，分别在实验的第4、7、14、2l、28天时，采用原位杂交方法检测Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型前胶原mRNA、转化生长因子(TGF-β1 mRNA)、骨形态发生蛋白(BMP-2mRNA)、血管内皮生长因子(VEGF mRNA)的变化。结果：阿胶在骨愈合早、中期可促进Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型前胶原的mRNA、TGF-β1 mRNA的表达，阿胶组的表达高于模型组和正常组；而BMP-2mRNA及VEGFmRNA的表达量在骨愈合过程中无明显改变，在骨愈合早、中期阿胶组和模型组的表达高于正常组。结论：在骨愈合早期、中期，阿胶可加强巨核细胞的聚集及增强其活性，并可促进软骨细胞、成骨细胞的增殖及合成活性，加快软骨内骨化，促进骨愈合；而对血管形成无明显作用。