神经肽P物质对增生性瘢痕的作用与钙离子相关的研究

目的神经肽P物质可以促进人增生性瘢痕中肥大细胞组胺的释放,在此过程中对钙离子因素的作用进行定量分析,探讨增生性瘢痕中神经肽P物质与钙离子的相互作用及作用条件。方法2005年1月至2005年10月,将取自于西南医院整形美容外科烧伤患者的增生性瘢痕活体组织块切下后立即处理,修剪成0.5mm×0.5mm×0.5mm~1.0mm×1.0mm×1.0mm的组织块,测定作用后上清液中组胺含量,计算组胺释放率。结果在增生性瘢痕中,神经肽P物质对肥大细胞的作用受钙离子浓度影响,钙离子为5×10-3mol/L时,组胺释放率最高;乙二胺四乙酸去除钙离子后,组胺释放率最低;钙离子为1×10-3mol/L时,组胺释放有一低谷。结论神经肽P物质对肥大细胞的作用受钙离子浓度影响,研究神经肽P物质与增生性瘢痕的相互作用及作用条件,应用神经肽P物质及神经肽P物质受体拮抗剂阻断神经肽P物质对增生性瘢痕促增值与促瘙痒作用,有望成为治疗增生性瘢痕的新方法,并将在临床有广阔的应用前景。     

神经肽P物质对增生性瘢痕的作用与钙离子相关的研究

目的神经肽P物质可以促进人增生性瘢痕中肥大细胞组胺的释放,在此过程中对钙离子因素的作用进行定量分析,探讨增生性瘢痕中神经肽P物质与钙离子的相互作用及作用条件.方法 2005年1月至2005年10月,将取自于西南医院整形美容外科烧伤患者的增生性瘢痕活体组织块切下后立即处理,修剪成0.5 mm×0.5 mm×0.5mm～1.0 mm×1.0 mm×1.0 mm的组织块,测定作用后上清液中组胺含量,计算组胺释放率.结果在增生性瘢痕中,神经肽P物质对肥大细胞的作用受钙离子浓度影响,钙离子为5×10-3 mol/L时,组胺释放率最高;乙二胺四乙酸去除钙离子后,组胺释放率最低;钙离子为1×10-3 mol/L时,组胺释放有一低谷.结论神经肽P物质对肥大细胞的作用受钙离子浓度影响,研究神经肽P物质与增生性瘢痕的相互作用及作用条件,应用神经肽P物质及神经肽P物质受体拮抗剂阻断神经肽P物质对增生性瘢痕促增值与促瘙痒作用,有望成为治疗增生性瘢痕的新方法,并将在临床有广阔的应用前景.     

增生性瘢痕P物质含量的放射免疫测定

目的 测定增生性瘢痕组织中Ｐ物质含量是否高于非增生性瘢痕及正常皮肤。方法 用放射免疫法分别对增生性瘢痕、非增生性瘢痕及正常皮肤组织中Ｐ物质含量做定量分析研究。结果 增生性瘢痕组织中Ｐ物质含量显著高于非增生性瘢痕及正常皮肤组织（Ｐ〈０．０１）。结论 Ｐ物质在增生性瘢痕的发病过程中可能起重要作用。     

P物质在增生性瘢痕中的分布

为初步研究Ｐ物质（ＳＰ）在增生性瘢痕组织中的分布情况。作者采用兔抗ＳＰ血清和免疫组织化学链霉菌抗生物蛋白－过氧化酶连结法及ＤＡＢ染色技术，并用图像分析仪对染色结果进行半定量分析。发现增生性瘢痕组织中ＳＰ免疫反应阳性分布显著高于非增生性瘢痕及正常皮肤。认为ＳＰ在增生性瘢痕形成中可能起重要作用。     

增生性瘢痕P物质含量的放射免疫测定

目的测定增生性瘢痕组织中P物质含量是否高于非增生性瘢痕及正常皮肤。方法用放射免疫法分别对增生性瘢痕、非增生性瘢痕及正常皮肤组织中P物质含量做定量分析研究。结果增生性瘢痕组织中P物质含量显著高于非增生性瘢痕及正常皮肤组织(P<0.01)。结论 P物质在增生性瘢痕的发病过程中可能起重要作用。     

增生性瘢痕P物质含量的放射免疫测定

目的测定增生性瘢痕组织中Ｐ物质含量是否高于非增生性瘢痕及正常皮肤。方法用放射免疫法分别对增生性瘢痕、非增生性瘢痕及正常皮肤组织中Ｐ物质含量做定量分析研究。结果增生性瘢痕组织中Ｐ物质含量显著高于非增生性瘢痕及正常皮肤组织（Ｐ＜０．０１）。结论Ｐ物质在增生性瘢痕的发病过程中可能起重要作用。     

增生性瘢痕中肥大细胞的种类及分布

揭示瘢痕增生与肥大细胞的关系是本研究的目的。取临床病人的增生性瘢痕和相邻或相近部位的正常皮肤作电镜切片和特殊染色的光镜切片。光镜发现：瘢痕中肥大细胞主要分布在各层血管周围及胶原纤维束之间，其数量比正常皮肤中的多（Ｐ＜００１）；瘢痕中爱先蓝阳性肥大细胞的比值也比正常皮肤中的高（Ｐ＜００１）；增生性瘢痕中存在一定数量（１１２４％±０４５％）的粘膜肥大细胞。电镜发现：增生性瘢痕中存在一定量的较不成熟的肥大细胞和脱颗粒的肥大细胞；部分肥大细胞与成纤维细胞有胞膜接触。增生性瘢痕与肥大细胞有关     

增生性瘢痕中肥大细胞的种类及分布

揭示瘢痕增生与肥大细胞的关系是本研究的目的。取临床病人的增生性瘢痕和相邻或相近部位的正常皮肤作电镜切片和特殊染色的光镜切片。     

可乐定对脊髓P物质释放的影响

目的：研究可乐定对大鼠脊髓Ｐ物质释放的影响，旨在探讨可乐定镇痛作用的脊髓途径。方法：２０只ＳＤ大白鼠随机分为可乐定组和对照组，各１０只。可乐定组大鼠腹腔注射可乐定４０μｇ，对照组注射等量生理盐水。取脊髓腰段多聚醛固定的冰冻切片。Ｐ物质免疫组化显示用过氧化物酶－抗过氧化物酶法（ＰＡＰ法）。结果：可乐定用药组的大鼠脊髓后角中外区及背外侧我光密度ＯＤ值较对照组显著增高，Ｐ物质免疫反应产物显著增多，以Ⅰ－     

增生性瘢痕中肥大细胞类胰蛋白酶的表达及定位

目的研究肥大细胞类胰蛋白酶(mast cell trphase,MCT)在增生性瘢痕形成过程中的表达及分布情况,探讨MCT在增生性瘢痕及正常皮肤中是否存在差别。方法采集未经任何治疗的临床诊断为增生性瘢痕及正常皮肤手术切除各20例。采用免疫组织化学方法对增生性瘢痕及正常皮肤中的MCT进行定位,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法进行mRNA基因水平的半定量研究分析。结果MCT在增生性瘢痕中分布较正常皮肤明显增多(P<0.01),主要集中在各层血管周围及胶原纤维束之间,以真皮浅层分布较多;RT-PCR半定量结果显示,增生性瘢痕中MCTmRNA有高表达,而且明显高于正常皮肤,差异具统计学意义(P<0.01)。结论增生性瘢痕中MCT在分布及基因水平半定量表达均较正常皮肤明显增多,故有理由推论MCT在增生性瘢痕的形成过程中可能起重要作用。     

P物质对人增生性瘢痕组织块中组胺释放的影响

目的观察P物质(SP)对人增生性瘢痕(HS)组胺释放的影响及两者相互作用的条件。方法人HS和正常皮肤(NS)的标本分别取自笔者单位行整形术的8例烧伤患者,切下后立即用等渗盐水清洗,并修剪成0．5～1．0 mm~3的组织块。利用荧光分光光度计测定在不同浓度SP、不同SP作用时间、不同浓度Ca~(2+)的作用条件下,组织块中肥大细胞(MC)脱颗粒释放组胺的情况,并计算释放率。结果当SP浓度达到1×10~(-6)mol/L时,HS即有明显的组胺释放,释放率为(50．0±3．6)%,明显高于0 mol/L SP[(44．0±3．2)%,P＜0．01],并呈剂量依赖性。5×10~(-5)mol/L SP作用15 min内,HS已有约90%的组胺释放,并呈时间依赖性。当Ca~(2+)浓度为5×10~(-3)mol/L时,HS组胺释放率最高,基本呈剂量依赖性,但在Ca~(2+)浓度为1×10~(-3)mol/L时,释放率却出现一过性下降。在上述3个条件下,HS中SP对MC脱颗粒释放组胺的作用均明显强于NS(P＜0．01)。结论人HS中SP对MC的作用明显强于人NS,可能与瘢痕的增生和瘙痒有密切的关联。     

P物质及其受体在慢性胰腺炎组织的表达和临床意义

目的 了解P物质及其受体NK－1R在正常胰腺和慢性胰腺炎中的表达，探讨它们与慢性胰腺炎时疼痛发生的关系。方法 25个慢性胰腺炎标本取自慢性胰腺炎手术，男性18例，女性7例，正常胰腺组织取自20个器官捐献者，男性11例，女性9例。应用实时定量逆转录整合酶链反应（RT－PCR）技术，检测正常胰腺和慢性胰腺炎组织中P物质和NK－1R的mRNA水平，应用Western blot技术检测NK－1R的蛋白水平，应用免疫组织化学方法进行NK－1R的组织学定位。将P物质及其受体NK－1R mRNA水平与疼痛的程度，发作频率和病程进行分析，寻找其中的相关性。结果 与正常胰腺相比，慢性胰腺炎组织中P物质和NK－1R mRNA和蛋白都过度表达，NK－1RmRNA水平与疼痛的程度，发作频率和病程明显相关。免疫组化检查显示，NK－1R的表达主要位于胰腺腺泡，胰腺导管，神经纤维和炎性细胞。结论 慢性胰腺炎组织中P物质和NK－1R的表达水平都明显上调，扰乱了神经激肽的作用环节，NK－1R的过度表达与疼痛发生有关。     

Determination of histamine and polyamines in calcified tissues of mice: Contribution of mast cells and histidine decarboxylase to the amount of histamine in the bone

Summary A simple method for determining histamine and polyamines in various tissues was devised. The method, however, could not be applied to calcified tissues, because the high concentration of Ca²⁺ in the extract interferes with the chromatographic separation of these amines. By treating the extracts from calcified tissues with K₂CO₃, we succeeded in removing the Ca²⁺, and the method could then be applied to determine the amines in bone tissues of mice. By using this method, we examined the contribution of mast cells and histidine decarboxylae (HDC) to the amount of histamine in the bone. The results indicate that (1) the HDC activity in the bone is the highest among the tissues of normal mice, and the histamine produced by the HDC in the bone is metabolized rapidly; (2) a major part of HDC in the bone is present in the bone marrow cells other than mast cells, and most of histamine in the bone is attributable to the histamine pooled in mast cells; (3) mast cells in the diaphysis are located largely along the endosteal lining; and (4) the method devised in this study may be useful for studying the roles of histamine (or mast cells) and polyamines in calcified tissues.     

P物质对胃癌细胞增殖的作用

目的观察不同浓度P物质对体外培养的胃癌细胞的促增殖作用及其途径。方法人胃癌细胞系MKN45在RPMI1640培养液中培养。采用免疫组织化学染色的方法观察胃癌细胞表达P物质特异性受体NK-1的情况。运用^3H-胸腺嘧啶脱氧核苷掺入指数作为判断细胞增殖的指标，向胃癌细胞的培养液中加入不同浓度的P物质，并运用SP的受体NK-1的特异性拮抗剂（ASN-1377642）后观察SP对胃癌细胞的增殖情况的改变。结果免疫组织化学染色方法证实，人胃癌细胞系MKN45表达SP的特异性受体NK-1；在一定的浓度范围内SP可促进低分化MKN45的增殖并呈剂量依赖性，受体NK-1的特异性拮抗剂可以抑制SP对胃癌细胞的促增殖作用。结论胃癌细胞表达SP的受体NK-1，SP对胃癌细胞有促增殖作用；其作用的完成是通过与受体NK-1结合有关。