滋肾化毒饮联合环磷酰胺对狼疮性肾炎患者外周血淋巴细胞Fas、FasL、Bcl-2表达的影响及临床疗效观察

目的:观察滋肾化毒饮联合间断性环磷酰胺(CTX)静脉冲击疗法对活动期狼疮性肾炎(LN)患者外周血淋巴细胞(PBL)凋亡调控因子及临床指标的影响.方法:将活动性LN患者40例,随机分为治疗组和对照组,每组各20例.治疗组予滋肾化毒饮联合间断性CTX静脉冲击疗法,对照组予间断性CTX静脉冲击疗法.观察治疗3个月前后的PBL的Fas、FasL、Bcl-2表达及临床指标变化,Fas、FasL、Bcl-2用免疫组化法测定.结果:治疗后两组Fas、FasL及治疗组Bcl-2表达下调(P＜0.05),而Fas、FasL表达下调幅度大于对照组(P＜0.05).治疗组SLEDAI、24 h尿蛋白、Hgb、Ccr、C3指标的改善优于同期对照组(P＜0.05).治疗组肝功能受损、白细胞减少、舌苔厚腻、失眠、痤疮发生率明显少于对照组(P＜0.05).结论:调控Fas、FasL介导的凋亡可能是CTX、激素、滋肾化毒饮有效治疗活动狼疮性肾炎机制之一.     

基质金属蛋白酶对狼疮性肾炎Fas介导凋亡的影响

目的 :通过检测 30例活动期狼疮性肾炎 (LN)患者肾小球中PCNA、Fas、P2 7、MMP - 2、MMP - 3蛋白的表达 ,以探讨基质金属蛋白酶对狼疮性肾炎肾小球系膜细胞凋亡的影响。方法 :30例患者全部行肾活检 ,分别进行常规病理检查 ,并通过连续切片和免疫组化SP法 ,测定PCNA、Fas、MMP - 2、MMP - 3在肾小球中的表达。结果 :30例患者 ,LNⅠ～Ⅱ型 10例 ,LNⅢ～Ⅳ型 2 0例 ,2组病例肾小球中MMP - 3表达无统计学差异 ,Fas、MMP - 2表达P <0 .0 5 ,PCNA表达P <0 .0 1。所有病例 ,肾小球中PCNA/P2 7比值 >1。结论 :活动期狼疮性肾炎肾小球中系膜细胞处于促凋亡状态 ,Fas介导的凋亡过程受到抑制 ,MMPs可在受体水平调节FasL抑制凋亡 ,也通过MMPs直接蛋白水解酶的作用 ,诱导细胞外基质积聚成分的改变 ,而存活信号的改变 ,会影响细胞凋亡。     

细胞凋亡在大鼠胰腺移植急性排斥反应中的作用

目的探讨细胞凋亡和相关因子Fas、FasL、bcl-2和bax在大鼠胰腺移植急性排斥反应中的作用,评价十二指肠黏膜活检在胰腺移植中诊断排斥反应的价值。方法选SD和Wistar大鼠行全胰十二指肠移植,实验分同基因胰腺移植组和异基因胰腺移植组。于移植术后第3、5及7d分批处死受体,取移植胰腺和十二指肠标本用HE染色和原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记技术(TUNEL)检测移植物。免疫组化法检测移植后胰腺和十二指肠Fas、FasL、bcl-2和bax的表达。结果异基因胰腺移植组胰腺和十二指肠病理评分相同者占61.1%(11/18);评分不同者占38.9%(7/18),其中胰腺评分较高者6例,十二指肠黏膜评分较高者仅1例。异基因胰腺移植组胰腺和十二指肠病理学评分和细胞凋亡指数均明显高于同基因胰腺移植组(P<0.05,P<0.01)。胰腺和十二指肠细胞凋亡指数与急性排斥反应的病理学评分成正相关(r=0.965,P<0.01;r=0.942,P<0.01)。随着术后时间延长,排斥反应分级上升,细胞凋亡增加,FasL表达升高,在异基因移植组bcl-2表达下降,而Fas和bax表达无明显变化。结论细胞凋亡与移植胰腺急性排斥反应的严重程度呈正相关,细胞凋亡指数可作为判断移植物损伤程度的指标。FasL和bcl-2与胰腺移植急性排斥及组织损伤密切相关。十二指肠黏膜活检有助于判断有无胰腺急性排斥反应发生。     

大肠癌浸润淋巴细胞Fas配基表达与癌细胞凋亡的关系

目的　研究结肠直肠癌浸润淋巴细胞Fas配基 (FasL)表达与癌细胞凋亡的关系。　方法　用免疫组化方法检测 86例结肠直肠癌及切缘正常大肠组织的Fas蛋白、FasL的表达 ;用TdT酶介导的DNA3′ OH末端 缺口染色方法检测癌细胞的调亡指数 ,并分析浸润淋巴细胞FasL表达与癌细胞凋亡指数的关系。　结果　 86例结肠直肠癌组织呈Fas蛋白染色阳性 5 3例 (6 1 6 % ) ,正常大肠组织则未见染色 ,癌组织旁浸润淋巴细胞FasL染色阳性 6 9例 (80 2 % )。癌组织Fas蛋白阳性组中 ,浸润淋巴细胞FasL染色程度与癌细胞凋亡指数呈正相关 (P <0 0 1) ,FasL染色越强 ,凋亡癌细胞越多。Fas蛋白阴性组中则不存在这种相关性。　结论　癌旁浸润淋巴细胞通过其表面的FasL与大肠癌细胞表面的Fas蛋白作用 ,是诱导癌细胞凋亡的途经之一。提高癌细胞Fas蛋白的表达及应用特异性Fas抗体 ,将为大肠癌治疗提供新思路。     

自身免疫性肝炎和原发性胆汁性肝硬化患者肝组织和外周血单个核细胞Fas及FasL的检测

目的 观察自身免疫性肝炎(AIH)和原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者肝组织和外周血单个核细胞(PBMC)Fas、FasL的表达,探讨细胞凋亡在自身免疫性肝病(AILD)发病机制中的作用.方法 采用免疫组织化学技术对10例AIH、20例PBC患者肝组织和PBMC中Fas、FasL进行检测,正常对照为10例健康献血者.结果 AIH 患者PBMC中Fas、FasL检出率分别为100%和90%, Fas、FasL平均阳性细胞率分别为78%和65%;PBC患者PBMC中Fas、FasL检出率均为90%,平均阳性细胞率分别为62%和59%.在肝组织中Fas、FasL表达于肝细胞和淋巴细胞:9例AIH Fas阳性颗粒见于肝细胞浆,其中1例胞膜、胞浆同时阳性;8例FasL阳性颗粒表达于肝细胞浆;Fas、FasL阳性肝细胞多聚集于汇管区周围.同时在汇管区周围浸润的淋巴细胞中也可见Fas或FasL的阳性表达.17例PBC患者Fas阳性颗粒表达于肝细胞浆,其中4例胞膜、胞浆同时阳性;16例PBC FasL阳性,见于肝细胞浆,在肝组织中浸润的淋巴细胞浆中Fas、FasL均有表达.AIH和PBC患者Fas、FasL表达显著高于正常对照.结论 AIH和PBC患者的Fas、FasL表达增加,细胞凋亡可能在AIH和PBC的发病机制中起重要作用.     

肿瘤坏死因子-α、Fas/FasL在急性胰腺炎肝细胞凋亡中的作用

目的 观察大鼠肝枯否细胞(KCs)产生的炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、Fas/FasL和核因子(NF)-κB在重症急性胰腺炎(SAP)肝细胞凋亡中的作用,并探讨其与全身炎症反应综合征(SIRS)之间的关系.方法 将50只SD大鼠随机分成3组:(1)假手术对照(SO)组;(2)SAP组;(3)SAP(枯否细胞抑制)组.SAP模型通过胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导.假手术及造模大鼠均24 h后处死,无菌条件下取肝脏组织,制作石蜡切片,免疫组织化学SP法检测TNF-α、Fas/FasL的表达,原位杂交法检测NF-κB的表达,TUNEL法检测肝细胞凋亡.结果 (1)TNF-α、Fas/FasL和NF-κB在SAP组高表达,阳性率分别为90.0%、85.0%和80.0%,与SO组比较差异均有统计学意义(P<0.05);SAP枯否细胞抑制组它们表达下降,与SAP组比较差异有统计学意义(P<0.05),与SO组比仍然高表达(P<0.05).(2)NF-κB与Fas/FasL及TNF-α的表达均密切相关,相关系数分别为r1=0.78(P<0.05),r2=0.88(P<0.05).(3)肝细胞的凋亡与TNF-α、Fas/FasL和NF-κB的表达呈正相关,相关系数分别为ra=0.72,rb=0.91,rc=0.34,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 在SAP时TNF-α能造成肝细胞凋亡并能引起全身炎症反应,NF-κB在SAP时细胞因子基因表达中起中心作用,Fas/FasL在肝细胞凋亡中起重要作用;枯否细胞在SAP时释放炎症因子造成肝损伤引起肝细胞凋亡,抑制枯否细胞能减轻SAP时肝细胞凋亡,从而降低SAP病死率,提高SAP的治愈率.     

Fas/FasL在异源融合瘤诱导结肠癌细胞早期凋亡中的作用

目的 探讨Fas/FasL通路在人异源树突状细胞（dendritic cell,DC）/结肠癌细胞融合瘤诱导结肠癌细胞凋亡中的作用.方法 使用50%聚乙二醇（PEG）将健康人外周血来源DC与结肠癌细胞SW480融合,用其致敏T淋巴细胞,采用流式细胞术检测致敏细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对结肠癌细胞凋亡的影响;使用免疫组化法分别检测SW480细胞Fas分子的表达以及T淋巴细胞活化前后FasL的表达情况.结果 结肠癌SW480细胞的早期凋亡率为46.88%;结肠癌SW480细胞高表达Fas分子用融合瘤致敏T细胞后,其FasL分子的表达明显增加.结论 异源树突状细胞融合瘤可能通过Fas/FasL通路来诱导结肠癌细胞的早期凋亡.     

狼疮肾炎的病理与临床分析

目的探讨狼疮性肾炎（LN）的病理类型与临床及实验室检查的关系。方法对34例狼疮性肾炎患者进行肾活检及病理分型,分析各病理类型的临床特点、实验室检查特点、临床活动性及肾脏病理活动性。结果病理类型Ⅳ型最多见（占55．9％）,Ⅳ型LN肾功能不全及血尿发生率高,肾脏病理活动性明显;Ⅳ型、Ⅴ型、Ⅴ＋Ⅳ、Ⅴ＋ⅢLN肾病综合征、大量蛋白尿发生率高。肾脏病理活动指数与系统性红斑狼疮的临床活动性及抗dsDNA抗体阳性率无相关性。结论狼疮性肾炎的病理类型与临床表现、实验室检查有一定联系;但二者之间关系不确定。     

狼疮性肾炎患者血浆与肾组织抗中性粒细胞胞浆抗体的表达

目的探讨抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）在狼疮性肾炎（LN）患者血浆及肾组织中的表达及其意义。方法回顾性分析40例LN患者的临床资料及ANCA检测结果,按。肾脏病变活动性评分、系统性红斑狼疮疾病活动性指数（SLEDAI）评分、尿蛋白含量进行分类统计。结果血浆ANCA阳性率为37.5％,肾组织ANCA阳性率为42.5％,两者呈正相关性（r=0.765,P=0.013）,但无统计学差异。肾脏活动性病变组的血浆ANCA和肾组织ANCA阳性率均高于肾脏慢性化病变组（P〈0.05,P〈0.01）,高尿蛋白组肾组织ANCA阳性率明显高于低尿蛋白组（P〈0.01）。结论ANCA可作为判断狼疮性肾炎（LN）肾脏病变及临床活动性的重要参考指标。     

Fas/FasL表达和细胞凋亡在大鼠同种异体肝移植免疫中的作用

目的探讨Fas和Fas配体 (fasligand ,FasL)与细胞凋亡在大鼠肝移植免疫中的作用。方法分别用免疫组织化学法及原位杂交法 ,在移植后不同的时间点 (1、3、5、7d)检测Fas FasL、Bcl 2 Bax和细胞凋亡在不同的大鼠肝移植模型中的表达情况。结果肝急性排斥组与自发耐受组相比 ,肝细胞凋亡多 ,汇管区FasL表达高而肝细胞FasL表达低 [(2 1 5± 2 5 )个细胞vs.(39 5± 0 5 )个细胞 ,P <0 0 5 ],并且Fas[(47 0± 8 1)个细胞vs.(14 5± 0 8)个细胞 ,P <0 0 5 ]和Bax[(2 1 4± 1 1)个细胞vs.(9 4± 0 9)个细胞 ,P <0 0 5 ]表达高。子代组与肝急性排斥组各指标表达类似 ,半肝组与自发耐受组各指标表达类似。在移植后第 5天 ,汇管区凋亡指数与肝细胞FasL的表达呈正相关 (r =0 76 0 ,P <0 0 1) ,而与肝细胞Fas(r =- 0 75 9,P <0 0 1)、Bax的表达呈负相关 (r =- 0 840 ,P <0 0 1)。结论肝实质细胞的凋亡与肝急性排斥反应有关 ,而其Fas、Bax的高表达可能介导了肝实质细胞凋亡的发生 ;汇管区浸润细胞凋亡与肝自发耐受有关 ,肝细胞FasL的高表达可能介导了浸润细胞凋亡的发生。     

LRP、P-gp、GST-π、TopoⅡ在肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨多药耐药(MDR)基因产物肺耐药蛋白(LRP)、P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在肺癌中的表达及其临床意义. 方法应用单克隆抗体、免疫组化技术SP法, 对58例肺癌标本进行上述4种MDR指标检测. 结果在肺癌组织中LRP、P-gp、GST-π、TopoⅡ表达的阳性率分别为79.3%、70.7%、82.8%和84.5%,其表达与性别、年龄、部位、临床分期无关(P>0.05);在未分化、小细胞型肺癌中LRP、P-gp、GST-π表达的阳性率明显降低(P<0.05);鳞癌、腺癌、支气管肺泡癌与小细胞癌相比,LRP、GST-π表达的强度明显增高(P<0.05);LRP、GST-π的表达强度随分化程度的降低而降低,TopoⅡ的表达强度随分化程度的降低而升高(P<0.05). 结论 LRP、P-gp、GST-π、TopoⅡ在未化疗过的肺癌组织中均有不同程度的高表达,且与肺癌的某些生物学行为有关,联合检测有助于化疗药物的选择及预后的判断.     

大肠重复癌MMR、p53、Bax、PCNA表达及微卫星不稳定性研究

目的探讨微卫星不稳定性 (MSI)在大肠重复癌与单发癌中的变化规律 ,及MMR、p5 3、Bax、PCNA表达与MSI的关系。 方法采用免疫组化、PCR SSLP法对 38例大肠重复癌患者的 5 1处癌灶及 35例单发大肠癌分别进行MMR、p5 3、Bax、PCNA表达的检测和 5个微卫星位点MSI检测。结果重复癌组复制错误阳性率为 5 3% (2 7/ 5 1) ,单发癌组为 17% (6 / 35 ) ,差异有显著性意义 (χ2 =11 2 5 ,P <0 0 1)。重复癌组中 ,RER 与MMR表达缺失有密切的相关性 ;RER 与 p5 3表达呈负相关 ;RER 组PCNA标记指数显著低于RER-组 ;RER 与低分化、近端大肠癌密切相关。结论MSI在大肠重复癌的发生上起着重要作用 ,MSI可作为预测大肠重复癌发生的重要标志。     

血管内皮因子、人表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子纳米缓释剂对血管内皮细胞影响的比较

目的制备血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、人表皮生长因子(EGF)可降解缓释微球,考察其生物活性的保存情况,以及它们对血管内皮细胞的作用.方法采用改良的乳化冷凝法交联制备VEGF、bFGF、EGF的明胶缓释微球,将它们加入血管内皮细胞的培养液中,用细胞计数法、四甲基偶氮唑盐微量反应比色法(MTT法)测定细胞增殖情况.结果VEGF、bFGF、EGF的缓释微球平均粒径(11.32±3.64)μm;培养1天后各组细胞计数、吸光度(A)值差异均无显著性;5天后,VEGF20ng缓释微球组细胞计数、吸光度(A)值明显高于其它组;7天后,VEGF20ng缓释微球组值仍高于其它组,但差异无显著性.结论VEGF、bFGF、EGF的缓释微球制备工艺简便,成球性好;能较长时间地持续释放活性VEGF,bFGF、EGF,可促进血管内皮细胞的增殖,其中VEGF效果最显著.     

BMP-7、USAG-1、gremlin三者与肾脏的关系

骨形态发生蛋白（BMPs）属于TGF-β超家族,是一种分泌性蛋白,系统发生中保守的信号分子,其中BMP-7是BMPs家族中的一员。BMPs的活性受到一些被称为BMP拮抗剂的分子的精密调节。BMP拮抗剂通过直接结合BMPs,抑制其与相应受体结合发挥作用。近年研究发现BMPs拮抗剂USAG-1和grem lin在肾脏分布较多,而肾脏又是产生BMP-7最多的脏器。     

结直肠癌中P-gp、GST-π、TopoⅡ的表达及意义

目的:探讨结直肠癌中P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和DNA拓扑酶Ⅱ(TopoⅡ)的表达及临床意义。方法:应用SupervisionTM法检测67例结直肠癌组织中P-gp、GST-π和TopoⅡ的表达。结果:P-gp、GST-π和TopoⅡ的表达阳性率分别为64·2%(43/67),59·7%(40/67)和61·2%(41/67)。P-gp、GST-π和TopoⅡ的表达与年龄、性别、肿瘤大小、发病部位、组织学分级、临床分期及有无淋巴结转移无关(P>0·05)。结论:应用免疫组化法检测结直肠癌组织中P-gp、GST-π和TopoⅡ的表达,对结直肠癌的化疗药物的选择和判断预后具有显著的临床意义。     

新辅助化疗对乳腺癌ER、PR、C-erbB-2、P53、Ki-67表达的影响

目的　探讨新辅助化疗对乳腺癌ER、PR、C-erbB-2、P53、Ki-67表达的影响。方法　通过免疫组化检测化疗前后38例乳腺癌ER、PR、C-erbB-2、P53、Ki-67的表达。结果　新辅助化疗前后ER、PR状态各有9例发生变化,C-erbB-2状态各有8例发生变化,P53状态各有10例发生变化,比较差异均无统计学意义;Ki-67状态有17例发生改变,比较差异有统计学意义。结论　新辅助化疗对ER、PR、C-erbB-2、P53表达状态无显著影响,而能显著降低Ki-67的表达。     

爆炸伤创面IL-1、IL-6、TNF-α、CRP的测定

[目的]检测兔肢体爆炸伤创面组织IL-1、IL-6、TNF-α和CRP含量。[方法]新西兰大白兔24只,随机分为炸伤后即刻取材组（A组,n=12）和炸后1h取材组（B组,n=12）;0.9g铜壳单质猛黑索金炸药（RDX）以海绵间隔5cm,绑于左下肢股部中段前外侧,电引爆,分别取爆炸中心区（Ⅰ区）、爆炸边缘区（Ⅱ区）、爆震区（Ⅲ区）的肌肉组织,测IL-1、IL-6、TNF-α、CRP的含量并取对侧肢体肌肉组织做对照研究。[结果]炸伤后两组各区标本IL-1、IL-6、TNF-α、CRP含量均比正常组织高,差异显著（P〈0.05）,且从Ⅰ区、Ⅱ区到Ⅲ区,含量依次降低,差异显著（P〈0.05）：A组：Ⅱ区与Ⅲ区的IL-1含量差别有显著意义（P〈0.05）。Ⅰ区与Ⅲ区、Ⅱ区与Ⅲ区的IL-6含量差别有极显著意义（P〈0.01）。Ⅰ区与Ⅲ区的TNF-α、CRP含量差别有极显著意义（P〈0.01）,Ⅰ区与Ⅱ区、Ⅱ区与Ⅲ区的含量差别有显著意义（P〈0.05）。其余各区的含量无统计学差异（P〉0.05）;B组：Ⅱ区与Ⅲ区的Ⅱ-1、IL-6、TNF-α含量差别有显著意义（P〈0.05）。Ⅰ区与Ⅲ区、Ⅰ区与Ⅱ区、Ⅱ区与Ⅲ区的CRP含量差别有显著意义（P〈0.05）。其余各区的含量无统计学差异（P〉0.05）。A、B两组比较,炸后组织中上述因子表达虽有增强,但差异无显著意义（P〉0.05）。[结论]肢体爆炸伤1h内,创面组织中IL-1、IL-6、TNF-α、CRP表达增强,不同区域间表达有差异。     

MMP-2、MMP-9、Cathepsin-D在淋巴结阴性乳腺癌中的表达及其与预后的关系

目的研究MMP-2、MMP-9(matrixmetalloproteinase,基质金属蛋白酶)、Cathepsin-D(组织蛋白酶D)在淋巴结阴性乳腺癌中的表达与预后的关系。方法用免疫组织化学ABC法检测270例淋巴结阴性乳腺癌患者肿瘤组织中MMP-2、MMP-9、Cathepsin-D的表达。结果肿瘤组织中MMP-2、MMP-9、Cathepsin-D的阳性率分别为56·7%(153/270)、59·6%(161/270)、55·6%(150/270);单因素分析MMP-2阳性、MMP-9阳性及两者共表达患者有较低的无复发生存率,多因素分析发现MMP-2和MMP-9共表达能独立预测患者的无复发生存率(RR=2·487;P<0·05)。结论在淋巴结阴性乳腺癌患者中MMP-2和MMP-9的阳性表达患者的预后较差。     

隐睾患儿血清FSH、LH、T水平及其临床意义

目的研究隐睾患儿血中促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LID和睾酮(T)激素水平变化,探讨其临床意义及在隐睾症发病中的作用。方法应用化学发光免疫技术检测42例隐睾症和23例斜疝(对照组)患儿血清FSH、LH、T水平。结果单侧隐睾症组和斜疝组之间血清FSH、LH和T水平无显著性差异(P＞0．05)；(2)双侧隐睾组血清FSH水平高于斜疝组,差别有统计学意义(P＜0．05)；单侧隐睾症组血清FSH高于斜疝组,低于双侧隐睾症组,差别无统计学意义(P＞0．05)。结论(1)血清中性激素LH和T水平的变化在隐睾发生中并不起主要作用；(2)血清FSH水平的升高可能反映睾丸功能损害严重程度。     

大肠癌组织中PTEN、VEGF、COX-2的表达及其相互关系的研究

目的 探讨 COX-2、PTEN、VEGF在大肠癌组织中的表达及其相互关系.方法 采用免疫组化方法检测58例大肠癌组织中COX-2、PTEN、VEGF的表达,并分析其相互关系.结果 58例大肠癌组织中COX-2、VEGF的阳性表达率分别为79.31%(46/58)、84.48%(49/58),显著高于正常大肠组织(P＜...