5-氟尿嘧啶对胰岛β细胞胰岛素分泌及凋亡的影响

目的 观察5-氟尿嘧啶(5-Fu)对NIT-1细胞株胰岛素分泌、凋亡、超微结构及增殖的影响,探讨其诱发糖尿病的机制.方法 以不同浓度5-Fu处理小鼠胰岛细胞株NIT-1细胞,分别以放射免疫分析法、AnnexinV/PI双染色流式细胞术检测细胞胰岛素释放量及细胞凋亡率的变化;以透射电镜观察细胞超微结构的变化;以噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖.结果 在5-Fu(5.0～40.0 mg/L)作用下,NIT-1细胞高浓度葡萄糖刺激下(16.7 mmol/L)的胰岛素释放量明显降低,呈剂量依赖性(P＜0.01).5.0、10.0、20.0和40.0 mg/L浓度的抑制率分别为9.2%、30.4%、50.7%和69.4%.在10.0～40.0mg/L浓度范围内凋亡率明显增高(P＜0.05);透射电镜观察显示,凋亡早期线粒体肿胀、内质网扩张,后期则出现染色体边集等典型的凋亡征象.同时,在5-Fu(5.0～160.0mg/L)作用下,细胞增殖明显降低,其作用呈浓度依赖性(P＜0.01)和时间依赖性(P＜0.05).结论 5-Fu可抑制在高浓度葡萄糖刺激下的胰岛β细胞分泌胰岛素,由此所引起的胰岛素分泌下降可能与诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖而导致的β细胞超微结构改变及数量减少有关.     

当归挥发油对增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及胶原合成的影响

目的:探讨当归挥发油对增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡和胶原合成的影响。方法:体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,用噻唑蓝比色法检测细胞增殖活性,用流式细胞术分析细胞周期及凋亡,用放射免疫法测定胶原合成。结果:1mg/L、4mg/L和16mg/L当归挥发油组与对照组相比G0/G1期细胞、G2/M期减少,显著增加了S期细胞(P<0.05)。凋亡率随当归挥发油浓度增大逐渐增大(P<0.05)。当归挥发油呈剂量和时间依赖性抑制细胞合成胶原(P<0.05或0.01)。结论:当归挥发油抑制成纤维细胞的增殖和胶原合成。     

当归挥发油对增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及胶原合成的影响

目的:探讨当归挥发油对增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡和胶原合成的影响。方法:体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,用噻唑蓝比色法检测细胞增殖活性,用流式细胞术分析细胞周期及凋亡,用放射免疫法测定胶原合成。结果:1mg/L、4mg/L和16mg/L当归挥发油组与对照组相比G0/G1期细胞、G2/M期减少,显著增加了S期细胞(P<0.05)。凋亡率随当归挥发油浓度增大逐渐增大(P<0.05)。当归挥发油呈剂量和时间依赖性抑制细胞合成胶原(P<0.05或0.01)。结论:当归挥发油抑制成纤维细胞的增殖和胶原合成。     

新颖海洋化合物SZ-685C抑制GH3细胞增殖并诱导其凋亡

目的 探讨SZ-685C对大鼠垂体生长激素腺瘤细胞(GH3)系的增殖和凋亡影响. 方法 用胎鼠成纤维细胞(MEF)作为对照,MTT检测0、2.5、5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5、20.0和30.0 μmol/LSZ-685C对GH3细胞增殖活性影响和药物的半数抑制浓度(IC50),结晶紫染色观察不同浓度SZ-685C对GH3细胞集群生长的影响;光镜和Hoechst 33342染色观察细胞凋亡的形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率. 结果 SZ-685C能抑制GH3细胞的增殖,并具有浓度依赖性,IC50为(12.9±0.47)μmol/L,而作为正常对照的MEF在此浓度下,细胞增殖活性没有明显变化;SZ-685C作用GH3细胞48 h后更换完全培养基培养12d,结晶紫染色观察肿瘤细胞的集群生长仍受到明显抑制,表现为克隆数的骤减;光镜和Hoechst 33342染色观察到细胞发生凋亡的形态学证据,流式细胞的检测在不同浓度SZ-685C的作用下,细胞凋亡比例从2.0％上升至36.4％. 结论 SZ-685C能抑制GH3细胞增殖,其增殖抑制作用可能通过促进细胞凋亡的方式,加速了细胞死亡进程,为其可能作为临床新型抗垂体瘤药物提供了初步的实验依据.     

环孢素A对抑制外周血内皮祖细胞增殖活性的作用

目的 观察环孢素A(CsA)对培养的人外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖和凋亡的影响.方法 采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,贴壁培养获得EPCs.比色法测定EPCs增殖能力;TUNEL染色检测EPCs凋亡情况;逆转录聚合酶链法检测EPCs凋亡相关基因的表达.观察不同浓度的CsA对EPCs增殖能力的作用;用10 mg/L的CsA干预24 h和48 h对EPCS增殖能力的影响,以及干预48 h对EPCs凋亡以及凋亡蛋酶-3(easpase-3)、凋亡调控基因bcl2和bax表达的影响.结果 100μg/L的CsA能明显抑制EPCs的增殖,CsA在10～10000μg/L浓度范围内,抑制作用成浓度依赖性.10 mg/L的CsA明显增加EPCs的凋亡和caspase-3基因表达,抑制bcl2基因表达而减小bcl2/bax比值.结论 CsA能明显抑制培养的人外周血EPCs增殖、增加其凋亡;抑制bcl2基因表达是其诱导EPCs凋亡的机制之一.     

熊果酸纳米脂质体微粒对小鼠黑色素瘤细胞生长的抑制作用及其机制

目的探讨熊果酸纳米脂质体微粒(UA-PL-NP)对体外培养的黑色素瘤细胞生长的抑制作用及其机制。方法体外培养小鼠黑色素瘤细胞(B16),采用噻唑蓝(MTT)比色法观察熊果酸纳米脂质体微粒对其增殖活性的影响,Western blot法观察其对基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响,同时采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。实验中采用顺铂作为阳性对照。结果MTT检测熊果酸纳米脂质体微粒对B16细胞增殖有明显抑制作用,并呈浓度和时间依赖性,UA-PL-NP作用24hIC50值为7.68 mg/L,顺铂作用24 h IC50值为9.33 mg/L;流式检测UA-PL-NP浓度为7.68 mg/L,作用24 h后B16鼠黑色素瘤细胞的凋亡率为(53.20±7.13)%;浓度9.33 mg/L顺铂作用24 h的凋亡率为(36.10±5.85)%;阴性对照组24 h凋亡率为(7.87±2.31)%;Westerm blot检测对照组MMP-9蛋白含量是UA-PL-NP组3.106倍,是顺铂组的2.022倍;顺铂组MMP-9蛋白含量是UA- PL-NP组的1.537倍。结论熊果酸纳米脂质体微粒能促进瘤细胞的凋亡从而抑制B16鼠黑色素瘤细胞的增殖,并降低MMP-9蛋白的表达,具有抑制肿瘤侵袭和转移的作用。     

西妥昔单抗单用及与化疗药物联合对膀胱癌细胞株T-24的增殖抑制作用

目的 观察西妥昔单抗(Cetuximab)单用及与丝裂霉素(MMC)、阿霉素(ADM)、羟基喜树碱(HCPT)联用对人膀胱癌T-24细胞的增殖抑制作用.方法 选用Cetuximab(0～500 mg/L)和MMC(0～50 mg/L)、ADM(0～10 mg/L)、HCPF(0～10 mg/L),单独或联合作用于T-24细胞,CCK-8法检测细胞增殖抑制作用;金氏公式判断两药联用的协同效应;流式细胞仪检测凋亡率.结果 Cetuximab、MMC、ADM、HCPT对T-24细胞存在程度不同的增殖抑制作用,其20%～30%抑制的工作浓度(IC_(20～30))分别为20.0、0.5、0.1、0.2 mg/L;以该浓度的Cetuximab分别与MMC、ADM、HCPT联合,协同指数q值分别为1.22、1.17、1.25;联合组凋亡率分别为(18.9±1.9)%、(20.1 ±1.9)%、(21.6±2.4)%,显著高于单独药物组(P＜0.05).结论 Cetuximab对膀胱癌T-24细胞存在一定的增殖抑制作用,与化疗药物MMC、ADM、HCPT联合均可取得较好的协同效应,这可能与其进一步促进T-24细胞凋亡有关.     

鱼藤素对胃癌细胞MKN-45增殖及凋亡的影响

目的:研究鱼藤素对胃癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:利用CCK8检测不同浓度(0、1、10和25μmol/L)鱼藤素作用于胃癌细胞MKN-45 24、48、72和96 h后对其增殖的影响;AnnexinⅤ-FITC/PI检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期;利用倒置相差显微镜观察鱼藤素作用后细胞形态的变化;DAPI及Hoechst染色观察细胞核变化。结果:1μmol/L鱼藤素作用于MKN-45细胞24 h后抑制率为(28.82±0.002)%。随着鱼藤素浓度(10、25μmol/L)增加,作用时间(48、72、96 h)延长,其抑制作用增加,表明其抑制作用呈时间-剂量依赖关系。不同浓度(1、10和25μmol/L)鱼藤素作用于细胞48 h后,早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率显示鱼藤素显著促进细胞凋亡。细胞周期检测发现,与对照组比较,1μmol/L鱼藤素作用于细胞48 h后,S期细胞比例升高,G_0/G_1期及G_2/M期细胞比例下降;10μmol/L鱼藤素作用于细胞48 h后,G_2/M期细胞比例升高,G_0/G_1期细胞比例下降(P     

葛根素抑制吡格列酮诱导的成骨细胞凋亡

目的观察葛根素对吡格列酮诱导的成骨细胞凋亡的影响。方法 MTT法检测不同浓度葛根素(0.01-100μmol/L)和吡格列酮(20μmol/L)作用于MC3T3-E1细胞24 h后细胞增殖活性影响。流式细胞仪测定葛根素和吡格列酮对MC3T3-E细胞凋亡的影响。Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Bcl-2、Bax的表达情况。结果 1、与对照组相比,吡格列酮组的细胞增殖活性明显下降(P0.05),而0.1-10μmol/L葛根素组细胞增殖活性明显增强(P0.05)。2、与吡格列酮组相比,加入0.1-1μmol/L葛根素后细胞的增殖活性明显增强(P0.05)。3、加入1μmol/L的葛根素后,吡格列酮导致的细胞凋亡率上升受到抑制(P0.05)。4、吡格列酮处理后caspase-3、caspase-8、Bax蛋白的表达上调,Bcl-2蛋白的表达下调,而加入葛根素共同作用后,caspase-3蛋白表达下调,Bcl-2蛋白的表达上调。结论葛根素可以抑制吡格列酮诱导的成骨细胞凋亡。     

pEGFP-Survivin对GBC-SD细胞生长的抑制及对化疗敏感性的影响

目的 观察重组质粒pEGFP-Survivin对胆囊癌细胞(GBC-SD)化疗敏感性的影响.方法 以噻唑蓝(MTT)比色法检测GBC-SD、GBC-SD/EGFP和GBC-SD/Survivin 3种细胞的增殖活性;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot测各组细胞中Survivin mRNA和蛋白质水平的表达;以合适浓度的顺铂(DDP,3.0 ms/L)作用相同的时间后,用MTY法检测3种细胞存活率,流式细胞仪测细胞凋亡,并用MIT法筛选IC_(50)值,TUNEL法观察细胞核改变;另外检测DDP作用后各组细胞的Caspase-3蛋白酶活性的变化.结果 GBC-SD和GBC-SD/EGFP细胞的增殖活性大致相同,而GBC-SD/Survivin细胞的增殖活性明显下降;RT-PCR和Western blot均发现GBC-SD/Survivin细胞中的Survivin表达水平较其余两种细胞明显下降(分别下降了74.7%和71.5%);在给予了DDP作用后,GBC-SD/Survivin细胞存活率和IC_(50)[(2.03±0.24)ms/L]明显较低,细胞凋亡率较高(84.3%),而3种细胞用TUNEL法染色后均可见棕色凋亡细胞核.给予了DDP作用后,各组细胞Caspase-3活性均呈现先升高后下降的趋势,但GBC-SD/Survivin细胞中Caspase-3的活性明显高于另外两种细胞.结论 pEGFP-Survivin表达的Survivin shRNA能明显降低GBC-sD细胞中Survivin的表达,提高对化疗药物的敏感性.     

Presenteeism and Absenteeism Before and After Total Hip and Knee Arthroplasty

BackgroundAbsenteeism is costly, yet evidence suggests that presenteeism—illness-related reduced productivity at work—is costlier. We quantified employed patients’ presenteeism and absenteeism before and after total joint arthroplasty (TJA).MethodsWe measured presenteeism (0-100 scale, 100 full performance) and absenteeism using the World Health Organization’s Health and Work Performance Questionnaire before and after TJA among a convenience sample of employed patients. We captured detailed information about employment and job characteristics and evaluated how and among whom presenteeism and absenteeism improved.ResultsIn total, 636 primary, unilateral TJA patients responded to an enrollment email, confirmed employment, and completed a preoperative survey (mean age: 62.1 years, 55.3% women). Full at-work performance was reported by 19.7%. Among 520 (81.8%) who responded to a 1-year follow-up, 473 (91.0%) were still employed, and 461 (88.7%) had resumed working. Among patients reporting at baseline and 1 year, average at-work performance improved from 80.7 to 89.4. A Wilcoxon signed-rank test indicated that postoperative performance was significantly higher than preoperative performance (P < .0001). The percentage of patients who reported full at-work performance increased from 20.9% to 36.8% (delta = 15.9%, 95% confidence interval = [10.0%, 21.9%], P < .0001). Presenteeism gains were concentrated among patients who reported declining work performance leading up to surgery. Average changes in absences were relatively small. Combined, the average monthly value lost by employers to presenteeism declined from 15.3% to 8.3% and to absenteeism from 16.9% to 15.5% (ie, mitigated loss of 8.4% of monthly value).ConclusionAmong employed patients before TJA, presenteeism and absenteeism were similarly costly. After, employed patients reported increased performance, concentrated among those with declining performance leading up to surgery.     

The German emergency and disaster medicine and management systemdhistory and present

As well for optimized emergency management in individual cases as for optimized mass medicine in disaster management, the principle of the medical doctors approaching the patient directly and timely, even close to the site of the incident, is a long-standing marker for quality of care and patient survival in Germany. Professional rescue and emergency forces, including medical services, are the “Golden Standard” of emergency management systems. Regulative laws, proper organization of resources, equipment, training and adequate delivery of medical measures are key factors in systematic approaches to manage emergencies and disasters alike and thus save lives. During disasters command, communication, coordination and cooperation are essential to cope with extreme situations, even more so in a globalized world. In this article, we describe the major historical milestones, the current state of the German system in emergency and disaster management and its integration into the broader European approach.     

Tendon and Ligament Healing and Current Approaches to Tendon and Ligament Regeneration

Ligament and tendon injuries are common problems in orthopedics. There is a need for treatments that can expedite nonoperative healing or improve the efficacy of surgical repair or reconstruction of ligaments and tendons. Successful biologically-based attempts at repair and reconstruction would require a thorough understanding of normal tendon and ligament healing. The inflammatory, proliferative, and remodeling phases, and the cells involved in tendon and ligament healing will be reviewed. Then, current research efforts focusing on biologically-based treatments of ligament and tendon injuries will be summarized, with a focus on stem cells endogenous to tendons and ligaments. Statement of clinical significance: This paper details mechanisms of ligament and tendon healing, as well as attempts to apply stem cells to ligament and tendon healing. Understanding of these topics could lead to more efficacious therapies to treat ligament and tendon injuries. © 2019 Orthopaedic Research Society. Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 38:7–12, 2020     

肝内胆管囊腺瘤和囊腺癌的CT、MRI及病理表现

目的探讨肝内胆管囊腺瘤和囊腺癌的CT、MRI和病理特点。方法回顾性分析经手术病理证实的6例肝内胆管囊腺瘤和2例肝内胆管囊腺癌的影像及临床病理资料，将病变的影像表现与其病理大体形态及组织学表现作对照分析。结果6例肝内胆管囊腺瘤，女4例、男2例；2例肝内胆管囊腺癌均为女性病人；8例病人平均年龄55岁。所有病灶均表现为多房囊性肿块，肿瘤囊腔各分房内常为多种液体成分，在CT上可表现为不同密度、在MRI上可表现为不同信号强度。囊内出现多发大小不等的壁结节在胆管囊腺癌内更常见，囊内有分隔但无壁结节只见于胆管囊腺瘤。在7例CT扫描中，4例胆管囊腺瘤和1例胆管囊腺癌可见囊壁或分隔上钙化，囊壁、囊内分隔及囊内结节均为轻、中度延迟增强。肿瘤中出现卵巢样间质见于3例胆管囊腺瘤和1例胆管囊腺癌，且均为女性病人。结论肝内胆管囊腺瘤和囊腺癌是肝脏不常见的囊性肿瘤，影像上多房、囊内有分隔且各分房囊内密度或信号不一致，高度提示肝内胆管囊腺瘤或囊腺癌的诊断，如囊内伴有多发大小不等的结节，则进一步提示囊腺癌的可能。但影像学表现不能区分肿瘤中有无卵巢样间质。