旋覆花素对过度训练致急性心肌损伤大鼠caspase-3和细胞色素c表达的影响

目的 探讨旋覆花素对过度训练致急性心肌损伤大鼠半胱氨酸天冬氨酸酶-3(caspase3)和细胞色素c表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠48只,体重200 ～ 220 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组:正常对照组(C组,n=8)、过度训练组(E组,n=24)和旋覆花素组(IB组,n=16).E组和IB组采用游泳致力竭法制备过度训练致大鼠急性心肌损伤模型.IB组于过度训练前24 h及过度训练前即刻分别经口灌入旋覆花素25 ml/kg.E组于过度训练后即刻、6、24h时,IB组于过度训练后6、24h时分别取8只大鼠,采集下腔静脉血样,采用ELISA法检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)浓度;然后处死大鼠,取心肌组织,采用免疫组化法检测心肌组织caspase-3和细胞色素c表达,光镜下观察心肌组织病理学结果.结果 与C组比较,E组和IB组过度训练后各时点血清cTnI浓度升高,心肌组织caspase-3与细胞色素c表达上调(P＜0.05);与E组比较,IB组过度训练后6、24h时血清cTnI浓度降低,心肌组织caspase-3与细胞色素c表达下调(P＜0.05).IB组心肌损伤程度轻于E组.结论 旋覆花素可减轻过度训练致大鼠急性心肌损伤,其机制与下调心肌组织caspase-3及细胞色素c表达有关.     

内皮素在过度训练致大鼠急性肾损伤中的作用及山莨菪碱的干预效应

目的：研究过度训练大鼠血浆和肾组织内皮素（ET-1）的变化及其意义,观察山莨菪碱的干预效应。方法：健康雄性Wistar大鼠56只随机分为对照组（CN,n=8）、力竭组（ES,n=32）和山莨菪碱组（AD,n=16）。对照组大鼠未进行力竭运动;力竭组又根据力竭后恢复时间分为力竭即刻（ESI）、力竭后6h（ES6h）、力竭后12h（ES12h）和力竭后24h（ES24h）组;山莨菪碱组于力竭运动前20rain腹腔注射山莨菪碱10mg／kg后进行力竭运动,分为力竭后6h（AD6h）及24h（AD24h）组。采用大鼠游泳至力竭建立过度训练模型;于力竭即刻、力竭后6h、12h和24h分别检测各组大鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）的水平;光镜观察肾组织结构的改变;放射免疫分析法测定血浆和肾脏组织ET—1含量,采用Pearson法分析力竭大鼠血浆及肾组织ET-1与血清BUN和Ser的相关性。结果：力竭即刻大鼠血清BUN、Ser即明显升高（P＜0．05）,6h达高峰（P＜0．05）,24h恢复到对照水平。力竭后即刻、6h、12h及24h大鼠肾组织结构变化轻微。力竭即刻组大鼠血浆和肾组织ET-1较对照组明显升高（P＜0．01）,力竭后6h组升高更加明显（P＜0．01）,力竭后12h组有所下降,但仍高于对照组（P＜0．01）,力竭后24h组恢复达对照组水平。力竭大鼠血浆及肾组织ET-1含量与血清BUN和Ser均呈明显的正相关（P＜0．001）。山莨菪碱组大鼠血浆和肾组织ET-1与同时间点力竭组比较明显降低（P＜O．05）,肾组织结构损伤减轻,肾功能明显改善（P＜0．05）。结论：过度训练大鼠血浆和肾组织ET-1含量的变化主要参与力竭后早期肾损伤的发生,山莨菪碱可明显抑制过度训练引起的肾组织内皮素的过度生成,进而对过度训练大鼠起到明显的肾脏保护作用。     

山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子对过度训练致急性心肌损伤大鼠的影响

目的探讨山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子对过度训练致急性心肌损伤大鼠的影响。方法雄性Wistar大鼠80只,体重200～220 g,随机分为5组:正常对照组(C组,n=8)、力竭对照组(E组, n=24)、山莨菪碱组(A组,n=16)、旋覆花素组(IB组,n=16)、苦碟子组(IS组,n=16)。采用游泳致力竭建立过度训练动物模型。A组于力竭前即刻腹腔注射山莨菪碱10 mg/kg,IB组于力竭前24 h和力竭前即刻口腔灌入旋覆花素25 ml/kg,IS组于力竭前即刻腹腔注射苦碟子20 ml/kg。取标本检测大鼠血清磷酸肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB)的活性,光镜观察心肌组织形态学,采用流式细胞术及TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡,并计算心肌细胞凋亡率。结果与C组比较,E组、A组、IB组和IS组血清CK及CK-MB升高,心肌细胞凋亡率升高(P<0.05);与E组比较,A组、IB组及IS组大鼠血清CK及CK-MB及心肌细胞凋亡率均降低(P<0.05)。光镜下,E组的心肌细胞核深染,有固缩现象;而A组、IB组及IS组的心肌心肌组织学变化均未见异常。结论山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子预先给药通过抑制心肌细胞的凋亡,可减轻过度训练致大鼠的心肌损伤。     

山莨菪碱与旋覆花素及苦碟子对过度训练大鼠肾组织上皮钙黏素表达的影响

目的：探讨过度训练大鼠肾组织上皮钙黏素表达的变化及山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子干预的影响。方法：将80只雄性Wistar大鼠随机分为安静对照组（CN）、力竭运动组（ES）、山莨菪碱干预组（AD）、旋覆花素干预组（IB）、苦碟子干预组（IS）。CN组为安静对照;ES组又根据力竭后恢复时间分为力竭即刻（ESI）、力竭后6h（ES6h）和力竭后24h（ES24h）;AD组、IB组、IS组均分别于力竭后6h和力竭后24h4取材观察各项指标。每个时间点8只大鼠。采用大鼠游泳至力竭建立过度训练模型。采用免疫组织化学法检测各组肾组织E-Cadherin蛋白表达的变化;采用CMIAS病理图像分析仪测量E-Cadherin蛋白表达的平均光密度。结果：对照组大鼠肾组织有E-Cadherin的丰富表达,广泛分布于肾小管上皮细胞膜上及细胞浆内;力竭即刻、6h及24hE-Cadherin表达逐渐减弱（P〈0.05）。山莨菪碱、旋覆花素和苦碟子组大鼠肾组织E-Cadherin表达比同期力竭组明显增强（P〈0.05）。结论：过度训练可引起肾组织E-Cadherin的表达下调,山莨菪碱、旋覆花素和苦碟子干预后可逆转这种变化,这可能是过度训练引起急性肾损伤及上述3种药物减轻OTIAKI的重要机制之一。     

过度训练可部分通过上调TLR4的表达激活死亡受体凋亡通路诱导大鼠肾小管上皮细胞凋亡

目的：观察过度训练大鼠肾组织TLR4、Fas及Caspase-8表达的变化,探讨TLR4在死亡受体凋亡通路中的作用。方法：将48只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组（CN）、力竭运动组（ES）、山莨菪碱干预组（AD）。CN组为安静对照;ES组又根据力竭后恢复时间分为力竭后即刻（ESI）、力竭后6 h（ES 6 h）和力竭后24 h（ES 24 h）;AD组于力竭运动前20 min腹腔注射山莨菪碱10 mg/kg后进行力竭运动,分为AD 6 h和AD 24 h组。采用大鼠游泳至力竭建立过度训练模型。采用Western印记测定肾组织TLR4和Fas的表达,免疫组织化学法检测肾组织Caspase-8的表达,并分别对TLR4与Fas、Caspase-8、肾组织细胞凋亡率进行相关性分析。结果：Western印记测定结果显示,过度训练大鼠肾组织TLR4及Fas的表达于力竭后即刻、6 h及24 h逐渐增高,均显著高于对照组（P〈0.05）。免疫组化显示,过度训练大鼠肾组织Caspase-8的表达于力竭后即刻、6 h及24 h逐渐增强,均显著高于对照组（P〈0.05）。过度训练大鼠肾组织TLR4与Fas、Caspase-8和细胞凋亡率的表达均呈正相关性（r=0.848,P〈0.05;r=0.916,P〈0.05;r=0.95,P〈0.05）。用山莨菪碱干预后,过度训练引起的肾组织TLR4、Fas及Caspase-8的过度表达均被显著抑制（均P〈0.05）。结论：过度训练可通过上调TLR4强化死亡受体凋亡通路,进而诱导大鼠肾小管上皮细胞凋亡。     

山莨菪碱对大鼠急性肾损伤时内质网应激的影响

目的 评价山莨菪碱对大鼠急性肾损伤时内质网应激(ERS)的影响.方法 雄性SD大鼠42只,体重200 ～ 220 g,采用随机数字表法将其分为3组:对照组(C组,n=6),双侧后肢肌肉注射生理盐水10 ml/kg;急性肾损伤组(AKI组,n=18),双侧后肢肌肉注射50％ (v/v)甘油10 ml/kg;山莨菪碱组(AD组,n=18),腹腔注射山莨菪碱10 mg/kg,20 min后处理同AKI组.C组于肌肉注射生理盐水后即刻(T0),AKI组和AD组于甘油给药后1 h(T1)、6 h(T2)、24 h(T3)分别随机取6只大鼠,采集肾组织标本,HE染色后行肾小管损伤评分,采用免疫组化和Western blot法测定肾组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和氧调节蛋白150(ORP150)表达.结果 与C组比较,AKI组和AD组各时点肾小管损伤评分升高,肾组织GRP78和ORP150表达上调(P＜0.01);与AKI组比较,AD组各时点肾小管损伤评分降低,肾组织GRP78和ORP150表达下调(P＜0.05或0.01).结论 山莨菪碱可抑制肾小管上皮细胞ERS,可能减轻了ERS途径诱导的细胞凋亡,从而减轻了大鼠急性肾损伤.     

过度训练可通过破坏Bax/Bcl-2平衡激活caspase依赖的凋亡通路诱导大鼠肾小管上皮细胞凋亡

目的 观察过度训练大鼠肾组织Bax、Bcl-2及 caspase-3的表达及其与肾小管上皮细胞凋亡的关系,探讨caspase依赖的凋亡信号途径在其中的作用及其机制。 方法 将48只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组（CN）、力竭运动组（ES）、旋覆花素干预组（IB）。CN组为安静对照;ES组又根据力竭后恢复时间分为力竭后即刻（ESI）、力竭后6 h（ES 6 h）和力竭后24 h（ES 24 h）组;IB组于力竭运动前24 h 给予旋覆花素25 ml/kg分3次灌胃后进行力竭运动,分为IB 6 h和IB 24 h组。采用大鼠游泳至力竭建立过度训练模型。TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡。免疫组织化学法检测肾组织Bax、Bcl-2及 caspase-3的表达。Western印迹法测定肾组织caspase-3蛋白的表达。用图像分析系统测定肾小管凋亡细胞、Bax、Bcl-2及 caspase-3表达的平均吸光度并计算Bax和Bcl-2的比值。用Pearson法分析Bax和Bcl-2的比值与caspase-3之间的相关性。用非参Spearman法分析Bax/Bcl-2的比值和caspase-3与细胞凋亡之间的相关性。 结果 TUNEL法显示,过度训练大鼠肾组织凋亡细胞主要分布在肾小管上皮细胞,力竭后即刻、6 h及24 h肾小管上皮细胞凋亡数呈进行性增多（P < 0.01）;免疫组化显示,过度训练大鼠肾组织caspase-3的表达及分布与Bax/Bcl-2比值变化及凋亡细胞的分布一致。图像分析显示,大鼠肾小管上皮细胞Bax/Bcl-2比值与caspase-3的表达于力竭后即刻、力竭后6 h、力竭后24 h逐渐增高（均P < 0.05）,均显著高于对照组（均P < 0.05）。Western 印迹测定结果也显示caspase-3蛋白表达的变化趋势。过度训练大鼠肾小管上皮细胞Bax/Bcl-2比值与caspase-3的表达呈正相关（r = 0.865,P < 0.05）;Bax/Bcl-2比值和caspase-3的表达与肾小管上皮细胞凋亡之间均呈正相关（r = 0.674,r = 0.837,均P < 0.05）。用旋覆花素干预后,过度训练引起的肾小管上皮细胞Bax/Bcl-2比值增高和caspase-3的过度表达及肾小管上皮细胞的过度凋亡均被显著抑制（均P < 0.05）。 结论 过度训练可通过破坏肾小管上皮细胞Bax/Bcl-2的平衡,激活caspase依赖的凋亡信号通路,进而诱导大鼠肾小管上皮细胞凋亡。这可能是过度训练引起肾小管上皮细胞凋亡的分子机制之一。     

山莨菪碱对过度训练大鼠肾小管上皮细胞Toll样受体4表达的影响

目的 评价山莨菪碱对过度训练大鼠肾小管上皮细胞Toll样受体4(TLR4)表达的影响.方法 雄性SD大鼠48只,体重200～220 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组:正常对照组(C组,n=8)、力竭运动组(E组,n=24)和山莨菪碱组(A组,n=16).采用大鼠游泳至力竭建立过度训练模型,A组于力竭运动前20 min腹腔注射山莨菪碱10 mg/kg后进行力竭运动.检测肾组织细胞凋亡和肾小管上皮细胞TLR4蛋白、TLR4 mRNA的表达水平.结果 与C组比较,E组和A组细胞凋亡率升高,肾小管上皮细胞TLR4蛋白和TLR4 mRNA表达上调(P＜0.05);与E组比较,A组细胞凋亡率降低,肾小管上皮细胞TLR4蛋白和TLR4 mRNA表达下调(P＜0.05).结论 山莨菪碱可通过下调过度训练大鼠肾小管上皮细胞TLR4表达,抑制肾脏细胞凋亡.     

PI3K/Akt信号通路在大鼠过度训练致急性肾损伤中的作用及山莨菪碱的干预效应

目的:探讨PI3K/Akt信号通路在过度训练致急性肾损伤中的变化和作用,以及山莨菪碱是否通过PI3K/Akt信号通路起到肾脏保护作用。方法:将60只大鼠随机分为四组:正常对照组(NC)、过度训练组(OT)、过度训练+山莨菪碱组(OTA)、过度训练+渥曼青霉素组(OTW)。除NC组外,其余各组分为建模后即刻、6 h和24 h三个亚组。通过一次性游泳力竭运动建立过度训练模型。OTW和OTA组于建模前20分钟分别腹腔注射渥曼青霉素25μl/kg和山莨菪碱10 mg/kg。于相应时点检测血肌酐、尿素、肌酸激酶水平;Western blot法检测肾组织Akt、p-Akt、Nrf2表达;TUNEL法检测肾脏细胞凋亡。结果:与NC组相比,OT组出现肾功能损伤和细胞凋亡,p-Akt、Nrf2表达上调(P0.05)。与OT组相比,OTA组部分时点肾功能改善,细胞凋亡减少,p-Akt、Nrf2表达进一步上调(P0.05)。OTW组总体表现与OTA组相反(P0.05)。各组间Akt表达无明显差异。结论:在过度训练致急性肾损伤中,PI3K/Akt通路激活增多,进而减少过氧化反应,改善肾功能,抑制细胞凋亡。山莨菪碱可通过该通路发挥肾脏保护作用。     

过度训练致急性肾损伤大鼠肾组织胰岛素样生长因子的表达及其意义

目的：研究过度训练致急性肾损伤大鼠肾组织胰岛素样生长因子（IGF-Ⅰ）的表达及其意义。方法：将40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组（CN）、力竭运动组（ES）。CN组为安静对照;ES组又根据力竭后恢复时间分为力竭后即刻（ESI）、力竭后6h（ES6h）、力竭后12h（ES12h）和力竭后24h（ES24h）。采用大鼠游泳至力竭建立过度训练模型。应用全自动生化仪检测肾功能;免疫组织化学法检测肾组织IGF-I、Bcl-2的表达;TUNEL法检测肾组织细胞凋亡;用图像分析系统测定肾组织凋亡细胞、Bcl-2表达的平均吸光度。结果：力竭即刻大鼠血尿素氮和肌酐明显升高（P〈0.05）,力竭后6h达高峰（P〈0.05）,于力竭后24h恢复正常。力竭即刻大鼠肾组织IGF-1蛋白表达明显减弱（P〈0.05）,之后逐渐增强,于力竭后12h恢复到安静对照组水平（P〉0.05）。力竭后12hBcl-2表达减弱（P〈0.05）,于力竭后24h恢复至正常水平（P〉0.05）。TUNEL法显示,过度训练大鼠肾组织凋亡细胞主要分布在肾小管上皮细胞,于力竭后即刻、6h及24h肾小管上皮细胞凋亡数呈进行性增多（P〈0.01）。结论：IGF-I可通过改善过度运动后肾脏的血流动力学,同时抑制肾脏组织细胞凋亡发挥其对肾脏的保护。     

围术期心肌缺血和心肌梗死研究进展

背景 围术期多种因素可能导致心肌缺血和心肌梗死,了解其发生机制,有效预防,可降低围术期心脏事件发生率.目的 探讨围术期心肌缺血和心肌梗死的发生机制及有效预防措施.内窖冠状动脉粥样硬化后冠脉内皮对交感神经、副交感神经兴奋的反应性发生改变以及围术期特殊的病理生理状态是围术期心肌缺血和心肌梗死发生的主要机制.对于冠心病患者加...     

远程预缺血的心肌保护机制

Remote myocardial preconditioning can protect myocardiuln. Some bioactive substances released from noncardiac tissues which suffer from ischemia and reperfusion protects the heart by neuronal and humoral paths. Preconditioning at a distance can attenuate myocardial intracellular acidosis and Ca^2＋ overload, reduce neutrophil and platelet infiltration, protect mitochondrial function and reduce free radicals. This method is simple to apply and have some clinical value. In order to safely apply this method to clinic, a further study on the remote myocardial preconditioning and its mechanism is necessary.     

围术期心肌缺血和心肌梗死研究进展

背景 围术期多种因素可能导致心肌缺血和心肌梗死,了解其发生机制,有效预防,可降低围术期心脏事件发生率.目的 探讨围术期心肌缺血和心肌梗死的发生机制及有效预防措施.内窖冠状动脉粥样硬化后冠脉内皮对交感神经、副交感神经兴奋的反应性发生改变以及围术期特殊的病理生理状态是围术期心肌缺血和心肌梗死发生的主要机制.对于冠心病患者加强围术期心肌缺血和心肌梗死的监测与诊断,加强围术期药物治疗维持斑块稳定性、维持氧供需平衡,并完善术后镇痛、加强保温、避免血糖过高可减少围术期心肌缺血和心肌梗死的发生.趋向 冠心病患者非心脏手术前常规预防性药物的治疗时间与获益的关系以及术前冠脉重建的价值尚需进一步探讨.     

Three-dimension structure of ventricular myocardial fibers after myocardial infarction

Background  

To explore the pathological changes of three-dimension structure of ventricular myocardial fibers after anterior myocardial infarction in dog heart.     

Laser myocardial revascularization

A significant number of patients with ischemic heart disease are not candidates for coronary artery bypass or percutaneous transluminal angioplasty and do not respond to medical management. This group includes those who have diffuse coronary artery disease, those with poor ventricular function, and those who have had poor results from previous surgery. Developing a method to directly revascularize the myocardium by creating channels through the ventricular wall has challenged many investigators. Early methods, including needle acupuncture, were successful in the acute phase, but long-term patency could not be achieved. Closure of the channels was due to fibrosis and scarring. Experiments in our laboratory demonstrated that myocardial channels, made with the CO2 laser, remained patent up to five years. Histopathologic examination of the channels showed minimal damage to the surrounding cells in the acute phase. Studies at intervals of two months to two years showed patent endothelialized channels, with no evidence of fibrosis. Channels created in the myocardium protected the ventricle against an ischemic event when the left anterior descending branch of the coronary artery was ligated. Clinical experience with direct myocardial revascularization by CO2 laser indicates it may be a viable method of treating those patients with ischemic heart disease who are not candidates for other forms of management. The treatment and early postoperative follow-up in one patient are described.     

Traumatic myocardial dysfunction

Traumatic myocardial dysfunction is a frequently unsuspected, undiagnosed contributor to deaths from trauma. Electrocardiography, serum enzymes, and radionuclide myocardial scans are insensitive indicators of cardiac injury following blunt chest trauma. First-pass biventricular radionuclide angiography can accurately determine right and left ventricular ejection fractions and assess left ventricular segmental wall motion. Since August, 1980, we have evaluated 74 consecutive patients with blunt chest and multisystem trauma. Electrocardiograms and measurements of the myocardial band isoenzyme of creatine kinase were obtained at admission and repeated at 24 hour intervals for 3 days. Radionuclide angiography was performed 24 to 48 hours after admission. The electrocardiogram was abnormal in 21 patients (28%), levels of creatine kinase isoenzyme were elevated in six, and radionuclide angiographic abnormalities were present in 55 patients (74%). Electrocardiographic abnormalities correlated anatomically with angiographic abnormalities in 16 patients (76%). On follow-up radionuclide angiography, abnormalities had disappeared in nine of 12 patients restudied at 3 weeks. This study documents that the electrocardiogram and creatine kinase isoenzyme elevations are static, insensitive indicators of traumatic myocardial dysfunction. Radionuclide angiography with studies of left ventricular segmental wall motion demonstrate that traumatic myocardial dysfunction, although sometimes transitory, is a dynamic phenomenon that is more common than previously suspected. First-pass radionuclide angiography and wall motion studies are practical and valuable adjuncts to the management of the injured patient.