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相似文献
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1.
目的:观察青蒿琥酯(Art)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMC)凋亡及Bcl-2基因表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:用不同浓度的青蒿琥酯刺激脂多糖诱导增殖的大鼠肾小球系膜细胞,HE染色观察凋亡细胞形态,DAPI荧光染色观察细胞核凋亡情况,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫细胞化学结构和计算机图文分析系统检测Bcl-2的表达。结果:青蒿琥酯对系膜细胞凋亡有明显诱导作用,呈一定剂量依赖性;并能明显地抑制脂多糖诱导上调的Bcl-2基因的表达,且高浓度组的抑制作用强于低浓度组。结论:青蒿琥酯能够剂量依赖性的诱导大鼠系膜细胞凋亡,其机制可能与调控Bcl-2的表达有关。  相似文献   

2.
牛磺酸对系膜细胞增殖及凋亡的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 观察牛磺酸对系膜细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用的可能机制。方法 用噻唑蓝MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,吖啶噔活体染色观察细胞凋亡形态,免疫细胞化学结合计算机图文分析系统检测cjn,cfos表达。结果 在5-50mmol/L浓度范围内牛磺酸能剂量依赖性地抑制系膜细胞增殖,可使G0-G1期细胞增多,S期细胞减少,并能明显抑制c-jun,c-fos的表达(P<0.01),而牛磺酸并不诱导系膜细胞的凋亡。结论 牛磺酸可显著抑制系膜细胞增殖,使系膜细胞阻滞于G0-G1期;牛磺酸对系膜细胞增殖的抑制作用与其抑制c-jun,c-fos的表达有关。牛磺酸对系膜细胞凋亡无诱导作用。  相似文献   

3.
阿霉素诱导人肝癌细胞凋亡机制的研究   总被引:4,自引:2,他引:2       下载免费PDF全文
探讨阿霉素诱导HCC-9204细胞凋亡的作用机制,及其与凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的关系。方法用TUNEL法和流式细胞仪观察和检测阿霉素对HCC-9204细胞增殖周期的影响以及细胞凋亡,并检测HCC-9204细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果阿霉素能够显著诱导HCC-9204细胞凋亡,染色显示有典型的凋亡特征。在药物处理24h后流式细胞仪检测出显著的“亚二倍体峰”。阿霉素作用HCC-9204细胞后,Bcl-2蛋白表达明显减少(P<0.05);而Bax蛋白的表达虽有所增加,但与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。结论阿霉素能诱导癌细胞凋亡,是其发挥抗癌作用的重要机制之一,这可能与其下调Bcl-2基因表达有关。  相似文献   

4.
目的:本研究以RNA干扰技术下调PAR(prostate androgen regulated)基因表达,探讨其对前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡及其相关蛋白Bcl-2/Bax表达水平的影响。方法:PC3细胞转染靶向PAR基因的siRNA,MTT法检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果:PC3细胞PAR基因表达水平下调,此时处于G2-M期的细胞增加,为(29.95±3.25)%;细胞凋亡率亦明显增加,为(20.61±2.73)%,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01),同时Bcl-2蛋白表达下降,Bax表达水平升高,Bax/Bcl-2比值升高。结论:PAR基因表达下调可诱导细胞G2-M期阻滞和凋亡,其机制为抑制凋亡相关蛋白Bcl-2表达,同时促进Bax表达。  相似文献   

5.
目的探讨辣椒素(capsaicin)对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)T6细胞系生长的影响及其机制。方法用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测终浓度50、100、150、200μmol/L的辣椒素对大鼠肝星状细胞T6细胞株生长的影响;采用流式细胞仪检测辣椒素对大鼠肝星状细胞T6细胞凋亡率的影响;Western blotting法检测Bcl-2、Bax、细胞色素酶c(Cyt c)蛋白的表达。结果辣椒素能显著抑制大鼠肝星状细胞T6细胞株增殖,呈时间浓度依赖性(P<0.05)。辣椒素作用24 h后T6细胞凋亡率与对照组相比明显升高(P<0.05),与对照组相比,辣椒素作用组Bcl-2蛋白表达量明显下降,bax蛋白的表达明显上升,Cyt c蛋白的表达明显上升,Bcl-2/Bax灰度值明显下降(P<0.05)。结论辣椒素抑制T6细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能是与下调Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达,促进Cyt c蛋白的释放有关。  相似文献   

6.
许静  陈杰  罗子玲  官碧琼  何炳洪  孙萍萍  袁芳 《骨科》2015,34(4):432-435
目的观察孕烷X受体(PXR)诱导药克霉唑对肝脏缺血-再灌注损伤后肝细胞凋亡影响,并探讨其机制。方法建立大鼠肝脏缺血-再灌注模型,32只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型对照组和克霉唑小剂量组、大剂量组进行肝缺血-再灌注损伤。TUNEL法检测肝组织中凋亡细胞,Western blot检测肝脏CYP3A1、Bcl-2、Bax、PARP表达水平。结果克霉唑小剂量组、大剂量组与模型对照组比较,细胞凋亡数减少,组织损伤减轻,凋亡细胞百分率明显降低,Bcl-2/Bax比值明显升高,抑制PARP剪切,提示有较好的抗凋亡作用,均差异有统计学意义;作为PXR特异性强诱导药克霉唑,与假手术组比,能明显诱导CYP3A1基因表达。结论PXR特异性强诱导药克霉唑可能通过促进Bcl-2表达及抑制Bax表达而拮抗肝细胞凋亡,从而减轻肝脏缺血-再灌注损伤,也与抑制PARP剪切有关。  相似文献   

7.
目的:研究邻-氨基酚去甲表鬼臼毒素(ODE)抗骨肉瘤SOSP-9607细胞作用及机理。方法:采用MTT比色法测定体外抗骨肉瘤SOSP-9607细胞作用,透射电子显微镜观察细胞凋亡形态学;采用激光共聚焦显微镜测定SOSP-9607细胞内Ca^2+、Mg^2+.pH值和线粒体膜电位(MMP)的荧光强度;免疫细胞化学技术检测细胞内Bcl-2和Bax表达。结果:ODE时间、浓度依赖性地抑制SOSP-9607细胞生长,诱导细胞凋亡具有典型的凋亡形态特征如细胞膜表面微绒毛消失、核固缩、核碎裂等;剂量依赖性地增加SOSP-9607细胞内Ca^2+,Mg^2+浓度而降低细胞内pH值和线粒体膜电位;使SOSP-9607细胞内Bcl-2蛋白表达下降而Bax蛋白表达增加。结论:邻-氨基酚去甲表鬼臼毒素在体外实验中能明显抑制骨肉瘤SOSP-9607细胞生长,其作用机制可能与改变细胞内环境稳态及Bcl-2和Bax蛋白表达而诱导细胞凋亡有关。  相似文献   

8.
目的 探讨雌激素对脂多糖诱导的体外培养大鼠成骨细胞凋亡基因Bcl-2、Bax、Fas表达的影响,为明确雌激素抑制脂多糖诱导的大鼠成骨细胞凋亡的机理提供依据。方法 新生SD大鼠颅骨第2.3代成骨细胞随机分为对照组、脂多糖组、脂多糖+雌激素组等3组,每组细胞分别培养24、48、72h,5、7、14d后作免疫组化染色,计数各组阳性细胞率,并比较组间的差异性。结果 对照组成骨细胞有少量Bcl-2、Bax、Fas表达,脂多糖组细胞Bax和Fas表达显著升高(P〈0.05),高峰期为72h,Bcl-2的表达无明显变化(P〉0.05);脂多糖+雌激素组细胞Bax和Fas表达显著降低(P〈0.05),高峰期仍为72h,且Bcl-2的表达显著升高(P〈0.05)。结论 脂多糖使成骨细胞Bax和Fas表达增强,而对Bcl-2的表达无明显影响;雌激素能抑制脂多糖增强成骨细胞Bax和Fas表达的作用,能使Bcl-2的表达明显增强,使Bcl-2/Bax比值增大从而抑制脂多糖诱导的大鼠成骨细胞凋亡。  相似文献   

9.
目的:体外观察塞来昔布对人膀胱癌T24细胞株的抑制作用,并探讨其可能的机制。方法i采用MTT法检测塞来昔布对T24细胞的生长抑制作用;采用Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态;采用Western印迹法检测塞来昔布作用前后T24细胞COX-2蛋白的表达变化;采用RT—PCR法检测塞来昔布作用前后T24细胞Bcl-2及Bax基因的表达变化。结果:塞来昔布(≥100μmol/L)作用24h及48h后能明显抑制T24细胞的生长并诱导凋亡;塞来昔布100μmol/L作用,24h及48h后,T24细胞COX-2蛋白表达量下降,Bcl-2基因表达亦下调,而Bax基因在塞来昔布作用24h后变化不明显,48h后表达上调。结论:塞来昔布能抑制T24细胞增殖并诱导其凋亡,可能与下调Bcl-2、上调Bax基因表达有关。  相似文献   

10.
目的:探讨二十二碳六烯酸(DHA)对人肝癌细胞株Bel-7402增殖和凋亡的影响及其机制。方法:用不同浓度的DHA(0,25,50,100,200 μmol/L)分别作用人肝癌Bel-7402细胞24,48,72 h后,用MTT法检测细胞的增殖情况、Western blot检测Bcl-2和Bax蛋白的表达,并分别用流式细胞仪、real-time PCR和caspase-3活性检测试剂盒检测上述梯度浓度的DHA作用 Bel-7402细胞48 h后的凋亡情况、Bim基因表达和caspase-3活性。结果:不同浓度、不同时间DHA作用后,Bel-7402细胞增殖明显抑制,呈浓度和时间依赖性(均P<0.05);细胞Bax蛋白表达增加、Bcl-2蛋白表达降低,呈明显浓度依赖性(均P<0.05),但无明显时间依赖性(均P>0.05)。不同浓度DHA作用48 h后,Bel-7402细胞凋亡率、Bim基因表达和caspase-3的活性均明显增加,且均呈浓度依赖性(均P<0.05)。结论:DHA可抑制人肝癌Bel-7402细胞的增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与激活线粒体凋亡通路有关。  相似文献   

11.
目的探究洛伐他汀预处理对急性心脏缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响。方法将24只SD大鼠随机均分为3组:模型对照组(C);洛伐他汀(Lovastatin)组(L),胃管直接灌注洛伐他汀每天15ms/ks,2周;洛伐他汀L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)组(N),洛伐他汀每天15mg/kg直接灌胃同时腹腔注射L-NAME 30ms/kg,2周。2周后建立在体急性缺血再灌注心脏模型,观察洛伐他汀对缺血再灌注前、后心肌细胞Bcl-2、Bax凋亡相关蛋白表达以及心肌细胞凋亡的影响。结果各组血脂指标差异无统计学意义,洛伐他汀上调心肌细胞内Bax凋亡相关蛋白表达(P〈0.05),对Bcl-2凋亡相关蛋白影响不明显(P〉0.05);明显降低缺血再灌注心肌细胞凋亡指数(P〈0.05)。结论洛伐他汀有效减少心脏缺血再灌注后心肌细胞凋亡,具有非降脂的延迟性心肌保护作用。其抗凋亡作用不受抑制一氧化氮合酶(NOS)活性和改变心肌细胞内凋亡相关蛋白Bax表达影响,具体机制须进一步实验探究。  相似文献   

12.
洛伐他丁对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响   总被引:7,自引:2,他引:5  
目的:研究他丁类降脂药物对肾小球系膜细胞增殖的影响。方法:应用羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂洛伐他丁来观察其对培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响。用含有或没有洛伐他丁和甲羟戊酸及其代谢产物的10%胎牛血清或血小板源生长因子(PDGF)刺激培养的大鼠肾小球系膜细胞,然后用测定溴化脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)的整合来评估DNA的合成并测定细胞的数量,结果:洛伐他丁对10%的胎牛血清刺激系膜细胞DNA的合成抑制是剂量依赖性,并且能够抑制细胞的生长,甲羟戊酸,焦磷酸牛儿基牛儿酯能够显著地逆转洛伐他丁的抑制作用。结论:洛伐他丁通过影响甲羟戊酸的合成抑制鼠肾小球第膜细胞的增殖,这可能为治疗系膜增殖性肾小球疾病提供一个新的方法。  相似文献   

13.
Objective To investigate the effects and underlying mechanism of the scavenger receptor CD36 in high glucose - induced rat glomerular mesangial cells apoptosis. Methods The mesangial cells of rats were divided into 4 groups: control group (5.6 mmol/L glucose), mannitol group (24.2 mmol/L mannitol+5.6 mmol/L glucose), high glucose group (30 mmol/L glucose), CD36 mono- antibody group (30 mmol/L glucose+CD36 mono-antibody). The intracellular ROS level was detected by confocal microscopy with fluorescent probe CM - H2DCFDA. MDA, GSH - PX, 8 - OHDGA in cell supernatant were detected. Apoptosis was determined by flow cytometry followed by Annexin V-FITC/PI double stains. The expression of CD36, Bax and Bcl-2 were detected by RT-PCR and Western blotting. Results The expression of CD36 was detected in glomerular mesangial cells. The highest level was found in high glucose group in 24 hours. There was no significant difference found between control group and mannitol group with respect to intracellular ROS generation, MDA, 8-OHDG, GSH-PX level, apoptosis rate, expression of CD36, Bax and Bcl-2 (all P>0.05). There was no significant difference in the expression of CD36 between CD36 mono - antibody group and high glucose group (P>0.05). Compared to control group, the intracellular ROS generation, MDA and 8-OHDG levels, apoptosis rate, the expression of CD36 and Bax were significantly increased, the GSH-PX level and the expression of Bcl-2 were significantly lower in high glucose group (all P<0.05). Compared to the high glucose group, the intracellular ROS generation, MDA and 8-OHDG levels, apoptosis rate, the expression of Bax were suppressed but the GSH-PX level and the expression of Bcl-2 increased in CD36 mono-antibody group (all P<0.05). The intracellular ROS level was positively correlated with apoptosis rate, protein expression of CD36 and Bax gene, was negatively correlated with Bcl - 2 protein expression. Conclusions CD36 was involved in the high glucose induced apoptosis of mesangial cells which was potentially mediated by an increased level of oxidative stress.  相似文献   

14.
目的:研究尼卡地平诱导系膜细胞调亡在大鼠Thy1系膜增生性肾小球肾炎模型(Thy1模型)中的作用及其与Bcl-2/Bax的表达的关系。方法:(1)应用兔抗大鼠Thy1.1血清建立大鼠Thy1模型;(2)建立模型第7d,腹腔注射尼卡地平(6mg/kg),以等量生理盐水为对照;(3)应用浸条法测定尿蛋白;(4)应用原位末端标记法检测细胞凋亡;(5)应用免疫组化检测Bcl-2/Bax蛋白的表达。结果:注射尼卡地平组尿蛋白程度明显减轻,恢复较生理盐水组快,常规HE染色显示尼卡地平组肾小球内有核细胞数较生理盐水组少,同时肾小球内凋亡细胞数也增多,尼卡地平组肾小球内Bcl-2蛋白阳性细胞数减少,而Bax蛋白阳性细胞数无明显变化,且Bcl-2阳性细胞数与肾小球内细胞数呈负相关。结论:尼卡地平通过诱导系调亡减轻大鼠Thy1模型的肾小球损害,其机制可能与Bcl-2蛋白表达减少有关。  相似文献   

15.
宫内生长迟缓引起大鼠肾单位数目减少的机制研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 探讨宫内生长迟缓(IUGR)引起肾单位数目减少的机制。方法 采用孕期全程低蛋白(6%蛋白)营养建立IUGR大鼠模型。选取IUGR新生雄鼠作为研究对象,采用Ki-67免疫染色和TUNEL法检测肾组织细胞的增殖和凋亡;实时定量PCR测定肾组织WT1、Bcl-2、Bax及p53的mRNA表达水平;免疫组织化学法及Western印迹法检测肾组织中WT1和Bcl-2蛋白质表达。2周龄时测定肾单位数目。结果 2周龄时,IGUR大鼠肾单位数目明显少于对照组(P<0.01)。与对照组相比,IUGR新生鼠生肾区TUNEL阳性细胞数明显增多;肾脏WT1、Bcl-2 mRNA表达减少,Bcl-2 mRNA/Bax mRNA的比例降低.而p53 mRNA的表达差异无统计学意义;肾组织中WT1和Bcl-2蛋白质的表达量及在生肾区的分布也明显减少。结论 IUGR大鼠肾单位数目减少可能与肾发生中细胞凋亡增加相关,而WT1、Bcl-2表达减少,Bcl-2/Bax比例降低可能是细胞凋亡增加的分子机制之一。  相似文献   

16.
Gronowicz GA  McCarthy MB  Zhang H  Zhang W 《BONE》2004,35(3):621-628
The ability of insulin-like growth factor II (IGF-II) to modulate apoptosis was studied in murine osteoblasts. At 72 h of culture, 0.01, 0.1, and 1.0 nM IGF-II produced a dose-dependent increase in apoptosis assayed by TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL) and confirmed with acridine orange-ethidium bromide staining. A maximal increase of 5.0-fold above control was found with 1 nM IGF-II. A time course of treatment with 0.1 nM IGF-II demonstrated a significant increase in apoptosis compared to vehicle-treated cells by 48 h. IGF-II-induced apoptosis could not be inhibited by a blocking antibody to the IGF-I receptor. Human osteoblast cultures demonstrated a similar dose-dependent increase in apoptosis with IGF-II. No significant effect of IGF-II was found on proliferation in murine osteoblast cultures. Western blot analysis demonstrated that IGF-II decreased Bcl-2 protein levels, but not Bax, resulting in a significant reduction in the Bcl-2/Bax ratio. To determine if overexpression of Bcl-2 could block IGF-II-induced apoptosis, osteoblasts were isolated from a transgenic mouse that overexpresses human Bcl-2 in bone through a construct utilizing the 2.3 kb promoter region of the Type I collagen gene linked to a 1.8 kb region of human Bcl-2 (Col2.3Bcl-2). At 72 h, IGF-II significantly increased apoptosis in a dose-dependent manner in osteoblast cultures from the control littermates. In osteoblasts from Col2.3Bcl-2 mice, no significant effect on apoptosis was found with 0.01, 0.1, or 1.0 nM IGF-II. Western blot analysis of Bcl-2 and Bax levels demonstrated a transient decrease in the Bcl-2/Bax ratio at 24 h with no decrease in the ratio at 48 or 72 h. Thus, IGF-II appears to promote osteoblast apoptosis, and overexpression of Bcl-2 is able to block IGF-II-induced apoptosis.  相似文献   

17.
重楼含药血清对大鼠系膜细胞增殖及凋亡的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
【摘要】 目的 探讨重楼治疗肾小球疾病的作用机制。 方法 以脂多糖诱导MC增殖。提取大鼠的含药血清作用于体外培养的大鼠系膜细胞(MC),观察重楼对MC增殖、凋亡的影响。用活细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖。以Hoechst染色及流式细胞仪检测细胞凋亡。用RT-PCR检测bcl-2 mRNA水平。 结果 重楼含药血清可抑制MC异常增殖、诱导MC凋亡,呈剂量依赖性。重楼各剂量组MC凋亡率[低、中、高剂量组分别为(11.72±0.32)%、(19.76±0.35)%、(18.71±0.41)%]较脂多糖组[(4.68±0.25)%]均显著增高(P均< 0.01),重楼中剂量组与低剂量组间差异有统计学意义(P < 0.01)。重楼各剂量组MC bcl-2 mRNA表达[低、中、高剂量组分别为(51.06±0.77)%、(44.06±0.66)%、(35.68±0.67)%]较脂多糖组[(59.62±1.12)%]显著减少(P < 0.01)。重楼呈剂量依赖性降低MC bcl-2 mRNA表达水平(P < 0.01)。 结论 重楼含药血清可抑制MC增生和诱导MC凋亡,其机制可能与抑制抗凋亡基因bcl-2 mRNA的表达有关。  相似文献   

18.
Ischemia/reperfusion induces oxidative injury to proximal and distal renal tubular cells. We hypothesize that Bcl-2 protein augmentation with adenovirus vector mediated bcl-2 (Adv-bcl-2) gene transfer may improve ischemia/reperfusion induced renal proximal and distal tubular apoptosis through the mitochondrial control of Bax and cytochrome C translocation. Twenty-four hours of Adv-bcl-2 transfection to proximal and distal tubular cells in vitro upregulated Bcl-2/Bax ratio and inhibited hypoxia/reoxygenation induced cytochrome C translocation, O(2) (-) production and tubular apoptosis. Intra-renal arterial Adv-bcl-2 administration with renal venous clamping augmented Bcl-2 protein of rat kidney in vivo in a time-dependent manner. The maximal Bcl-2 protein expression appeared at 7 days after Adv-bcl-2 administration and the primary location of Bcl-2 augmentation was in proximal and distal tubules, but not in glomeruli. With a real-time monitoring O(2) (-) production and apoptosis analysis of rat kidneys, ischemia/reperfusion increased renal O(2) (-) level, potentiated proapoptotic mechanisms, including decrease in Bcl-2/Bax ratio, increases in caspase 3 expression and poly-(ADP-ribose)-polymerase fragments and subsequent proximal and distal tubular apoptosis. However, Adv-bcl-2 administration significantly enhanced Bcl-2/Bax ratio, decreased ischemia/reperfusion induced O(2) (-) amount, inhibited proximal and distal tubular apoptosis and improved renal function. Our results suggest that Adv-bcl-2 gene transfer significantly reduces ischemia/reperfusion induced oxidative injury in the kidney.  相似文献   

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