不同药性祛风通络方干预下UUO大鼠肾小管上皮细胞TRPV4变化规律研究

目的:通过观察祛风通络方及寒热加味方对UUO模型大鼠肾组织TRPV4表达及功能状态的影响,探索不同药性祛风通络方对TRPV4的调节作用及其对肾间质纤维化的防治机理。方法:挑选SD雄性成年大鼠80只,随机分为空白对照组和模型组,单侧输尿管结扎法建立UUO模型,分为模型对照组、温热大剂量组、温热小剂量组、寒凉大剂量组、寒凉小剂量组、祛风大剂量组、祛风小剂量组,进行药物干预。术后第21天将大鼠全部处死,取术侧肾脏组织,一半用作病理学染色,一半用于分子生物学检测。RT-PCR和Western法检测肾脏组织TRPV4、α-SMA、vimentin mRNA含量变化及蛋白表达情况。结果:(1)造模成功后21 d,模型组及干预组大鼠术侧肾脏体积较对侧增大,剖面肾实质不同程度萎缩,肾盂扩张呈囊状,模型组最为明显。(2)干预各组病理情况均不同程度改善,其中温热小剂量组改善最为明显。(3)温热大剂量组TRPV4 mRNA含量明显增加(P 0. 01),其余各组均表现不同程度下降。(4)治疗各组α-SMA mRNA含量均表现不同程度下降(P 0. 05),以温热小剂量组下降最为显著(P 0. 01),各组Vimentin的表达表现出与α-SMA同样的变化趋势。结论:(1) TRPV4可能通过基因或蛋白水平的上调(下调)感受药性之寒热。(2)祛风通络方及加味方可能延缓肾间质纤维化的进展,且温热小剂量治疗效果最好。     

加味六味地黄汤对UUO大鼠肾组织Wnt4/β-catenin信号通路介导调控FGF-23的影响

目的:观察加味六味地黄汤对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白表达的影响。方法:健康成年SD大鼠120只,随机分为4组:假手术组、模型组、中药组、缬沙坦组,各组组内分为1周、2周、4周3个时间点。假手术组和模型组予以生理盐水(2 ml/只/d)灌胃;中药组予以加味六味地黄汤组灌胃(2 ml/d);缬沙坦组在造模后给予缬沙坦(30 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃。HE染色和Masson染色观察肾脏病理改变,免疫组化和Western blot观察大鼠肾组织Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白的表达。结果:假手术组大鼠肾组织结构正常,模型组大鼠出现肾间质纤维化,中药组和缬沙坦组大鼠小管间质病变减轻。与假手术组相同时间点相比较,大鼠模型组肾功能(BUN、Scr)、小管间质半定量评分、Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白表达均显著增高,差异均有统计学意义(P 0. 01);与模型组大鼠相同时间点相比较,加味六味地黄汤和缬沙坦均能改善肾脏病理,显著降低BUN和Scr水平、小管间质半定量评分,下调肾组织Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白的表达(P 0. 05或P 0. 01)。结论:UUO大鼠肾组织Wnt4/β-catenin信号通路活化,并可能介导了FGF-23的转录,而加味六味地黄汤可能通过阻断Wnt4/β-catenin信号通路的活化,下调FGF-23的表达,发挥抗肾间质纤维化作用。     

黄芪对肾间质纤维化模型大鼠肾组织MMP-9／TIMP-1表达的影响

目的探讨基质金属蛋白酶9（MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP-1）在肾间质纤维化中的表达及黄芪抗纤维化的分子作用机制。方法采用单侧输尿管结扎（UUO组）造模。将24只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（UUO组）、厄贝沙坦治疗组（Irbesartan组）和黄芪治疗组（AM组）4组,每组6只。造模14d后抽血检测肾功能,取结扎侧肾组织观察肾间质病变,免疫组织化学染色法检测肾组织MMP-9和TIMP-1表达。结果①AM组血肌酐和尿素氮水平较UUO组低（P〈0．05）,肾纤维化程度较UUO组有明显改善（P〈0．01）。②肾组织TIMP-1表达,UUO组较Sham组显著升高（P〈0．01）,AM组较UUO组明显降低（P〈0．01）;肾组织MMP-9表达,UUO组与Sham组差异无统计学意义（P〉0．05）,AM组较UUO组显著升高（P〈0．01）。结论黄芪可改善UUO大鼠肾功能,并可通过抑制TIMP-1表达,调节MMP-9／TIMP-1平衡来发挥其抗纤维化的作用。     

缬沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏氧化应激的影响

目的：探讨血管紧张素Ⅱ-1型受体拮抗剂（AT1Ra）缬沙坦对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾脏氧化应激的影响。方法：Wistar大鼠行左侧输尿管结扎术,分为UUO模型组（n=11）,缬沙坦治疗组（n=11）,同时设假手术对照组（n=7）。术后第14天处死各组大鼠,进行HE和Masson染色,观察肾脏病理变化;比色法测定肾组织丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量;免疫组织化学方法测定α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达。结果：UUO组与假手术组大鼠比较,肾脏病理改变加重,肾组织MDA含量明显升高（P〈0.01）,SOD含量下降（P〈0.05）,肾组织α-SMA和TGF-β1的表达显著增加（P〈0.01）。缬沙坦治疗组与UUO组大鼠比较,肾间质纤维化减轻（P〈0.05）,肾组织MDA含量降低（P〈0.05）,SOD含量升高（P〈0.05）;同时肾组织α-SMA和TGF-β1的表达降低（P〈0.05）。结论：缬沙坦可通过减少UUO组肾组织脂质过氧化物的产生,增加抗氧化酶的含量,下调TGF-β1的表达,从而显著改善UUO所致的肾间质纤维化。     

下瘀血汤调控AQP2表达改善SHR肾小管损伤实验研究

目的:观察下瘀血汤对自发性高血压大鼠(SHR)肾小管水通道蛋白2(AQP2)表达的影响。方法:采用14周龄SPF级雄性SHR 32只,按照血压随机分为:模型组(M)、阳性药组(Y)、中药组(Z),中药高剂量加阳性药组(H),每组各8只,另设Wistar-Kyoto(WKY)大鼠8只为正常对照组(N),连续干预治疗8周。分别于0周、2周、4周、6周及8周检测大鼠尾动脉血压。8周后代谢笼收集24 h尿液,记录尿量,检测尿液渗透压,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测尿液中AQP2水平。实验结束后麻醉处死大鼠,留取肾组织标本,HE染色观察肾脏病理变化情况,免疫组化技术检测肾组织AQP2表达情况。结果:(1)模型组大鼠尾动脉舒张压明显升高(P 0. 01),中药组可能对血压有积极影响;(2)与正常组比较,模型组大鼠8周时24 h尿量减少(P 0. 05),尿液及肾组织AQP2蛋白表达升高(P 0. 01),肾组织病理损伤明显。与模型组比较,8周时中药组、中药高剂量加阳性药组24 h尿量增加(P 0. 05,P 0. 01),各治疗组尿渗透压下降(P 0. 05,P 0. 01),各治疗组尿液AQP2表达下调(P 0. 01),中药组肾组织AQP2平均光密度值下降(P 0. 05),各治疗组病理损伤均有不同程度改善。结论:下瘀血汤肾保护作用可能与调控AQP2表达相关。     

缬沙坦与螺内酯联合应用对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的:探讨缬沙坦与螺内酯联合应用对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响。方法:取6周龄SD大鼠50只,随机分为正常组、模型组、缬沙坦组、螺内酯组及缬沙坦+螺内酯联合治疗组,每组10只。采用单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型。正常组及模型组给予生理盐水10 ml·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,治疗组均给予缬沙坦10 mg·kg~(-1)·d~(-1)、螺内酯100 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃、缬沙坦10 mg·kg~(-1)·d~(-1)+螺内酯100 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,各组大鼠均于术后2周后处死。肾组织行HE染色及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法观察梗阻肾组织TGF-β1mRNA、BMP-7 mRNA的表达。结果:与假手术组相比,模型组的TGF-β1mRNA表达增多(P0.05),BMP-7 mRNA表达则显著降低,三组治疗组TGF-β1mRNA表达显著低于模型组(P值均0.05),而BMP-7mRNA表达则显著增加。联合治疗组与缬沙坦、螺内酯组的差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论:与单用缬沙坦、螺内酯相比,联合治疗能减轻UUO大鼠肾间质纤维化。     

美沙拉嗪对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质NF—kB和TGF—β1表达的影响

目的观察单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质核因子-kB（NF-kB）、转化生长因子β1（TGF-β1）的表达变化,探讨美沙拉嗪干预后对其表达的影响。方法将30只雌性SD大鼠随机分为假手术组（SOR组）、模型组（UUO组）、美沙拉嗪治疗组（MES组）,每组10只。建立单侧输尿管梗阻大鼠模型72h后灌胃给药：MES组给予美沙拉嗪（200mg·kg-1·d-1）灌胃给药;SOR组、UUO组给予等量生理盐水灌胃给药。建模成功后第10天检测各组血肌酐、尿素氮,并取梗阻侧。肾组织,行HE及Masson染色观察肾脏病理变化;免疫组织化学检测NF-xBp65和TGF-β1在肾间质的表达和变化。结果①UUO组术后第10天梗阻侧肾脏肾小管间质损害指数明显高于SOR组（P〈0．01）,MES组则低于UUO组（P〈0．05）。②UUO组大鼠。肾间质NF-kB p65及TGF-β1表达增加,明显高于SOR组（P〈0．01）,MES组则低于UUO组（P〈0．05）。结论单侧输尿管梗阻大鼠模型肾脏存在肾小管间质的炎症损伤和纤维化,美沙拉嗪通过抑制NF-kB p65和TGF-β1表达而减轻肾间质炎性损害和纤维化。     

温阳消癥方对单侧输尿管梗阻小鼠肾间质纤维化的影响

目的:研究温阳消癥方对单侧输尿管结扎小鼠肾功能及肾组织病理的影响。方法:32只C57小鼠随机抽取8只作为假手术组,其余24只采用单侧输尿管结扎法制作肾间质纤维化模型。造模成功后随机分为模型组、缬沙坦组、温阳消癥方组,每组8只,分组给药,治疗2周后眼眶采血并测定血清肌酐、尿素氮,同时取肾组织进行HE、Masson染色,观察肾脏病理改变。结果:与假手术组相比,模型组的血清肌酐、尿素氮水平明显升高(P <0. 001),肾间质纤维化改变明显,胶原染色阳性率百分比升高(P <0. 001);与模型组比较,缬沙坦组和温阳消癥方组的血清肌酐、尿素氮水平均有明显下降(P <0. 001),肾组织纤维化程度较轻,胶原染色阳性率百分比下降(P <0. 001);温阳消癥方组疗效优于缬沙坦组。结论:温阳消癥方能改善UUO小鼠的肾功能,减轻肾间质纤维化,其效果好于缬沙坦胶囊。     

UUO幼年大鼠肾间质微血管损伤趋势及其相关分子特征

目的:探讨单侧输尿管结扎模型(UUO)幼年大鼠肾间质纤维化过程中局部微血管损伤趋势及其特征分子血小板反应蛋白(TSP-1)与血管内皮生长因子(VEGF)组织定位表达和时相表达的趋势、潜在的病理意义,并评价用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)苯那普利干预的效应。方法:制备单侧输尿管结扎模型(UUO模型);分为正常对照组、UUO模型组、UUO模型治疗组;以术后第1、2、3、4周为时间点,取病变肾脏石蜡包埋并切片;HE染色评价肾组织常规病理变化,免疫组化方法检测大鼠肾组织CD34、TSP-1、VEGF的表达。用SPSS13.0统计软件进行统计学处理。结果:随试验时间的延长,CD34及VEGF在UUO模型组肾组织中表达量及面积显著减少(P0.01),TSP-1在UUO模型组肾组织中表达量及面积显著增加(P0.01),干预组这种变化趋势明显减缓。结论:在幼年大鼠梗阻性肾间质纤维化进展中,存在着肾间质微血管的损伤,这种损伤可能与VEGF和TSP-1对肾小管周围毛细血管调控作用失衡有关。早期应用ACEI干预可有效延缓肾间质纤维化的进程。     

补肾排毒合剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质MMP-9与TIMP-1基因表达的影响

目的：研究单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction，UUO）后大鼠肾间质MMP-9、TIMP-1基因的表达变化，探讨补肾排毒合剂对肾间质纤维化的保护作用。方法：采用UUO诱导肾间质纤维化的动物模型，将大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（UUO组）和补肾排毒合剂治疗组（REM组），用RT—PCR技术检测肾组织在术后3、10、20、30d MMP-9、TIMP-1的基因表达。结果：UUO组TIMP-1 mRNA的表达明显高于Sham组（P〈0．01），REM组TIMP-1 mRNA表达均明显低于UUO组（P〈0、01）。MMP-9 mRNA在UUO术后明显升高，第10天达到高峰，继之下降。REM组10d后下降幅度较小，在20、30d时间点高于UUO组（P〈0，01）。结论：补肾排毒合剂影响MMP-9／TIMP-1的基因表达，从而促进了ECM的降解过程，延缓肾间质纤维化的进展。     

防己黄芪汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β1、BMP-7的影响

目的：研究防己黄芪汤对肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）、骨形态发生蛋白-7（BMP-7）影响,进一步探讨其祛风化湿的作用机制。方法：采用大鼠单侧输尿管结扎（UUO）模型,予防己黄芪汤低、中、高剂量干预,设蒙诺对照组。肾组织切片染色观察病理,免疫组织化学方法、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测TGF-β1、BMP-7蛋白及基因表达水平。结果：防己黄芪汤干预组大鼠的肾间质纤维化有所改善,与模型组比较,其肾组织TGF-β1表达下降、BMP-7表达上调。结论：防己黄芪汤下调UUO大鼠肾组织TGF-β1、上调BMP-7的表达,可能是其改善肾间质纤维化、发挥祛风化湿作用的机制之一。     

洋川芎内酯A 对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用及机制研究

目的:探讨洋川芎内酯A(SenA)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏病变的保护作用。方法:50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、SenA低剂量(20 mg/kg)组、SenA高剂量(40 mg/kg)组及阳性对照(厄贝沙坦,20 mg/kg)组,行UUO术制备单侧输尿管模型,并于术后21天处死大鼠。根据试剂盒说明书检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的含量,HE染色法观察肾脏病理改变,免疫组化法检测肾组织α-SMA及CollagenⅠ蛋白的表达,Western blotting检测各组大鼠肾皮质Wnt4、β-catenin、p-GSK-3β、E-cadherin的表达水平。结果:与模型组比较,SenA低、高剂量组及阳性对照组大鼠血清中Scr、BUN含量明显降低(P<0.05),肾脏病变情况得到不同程度的改善。同时,SenA可明显减少大鼠肾组织中α-SMA和CollagenⅠ蛋白的分泌(P<0.05),下调Wnt4、β-catenin及p-GSK-3β的表达水平(P<0.05),并伴有E-cadherin蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:SenA可通过下调Wnt4/β-catenin信号通路,抑制肾组织细胞外基质沉积并改善肾功能,最终改善UUO模型大鼠肾间质纤维化的病变进程。     

槲皮素对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的:观察槲皮素(Que)对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏病理和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨槲皮素对肾间质纤维化的保护作用及作用机制.方法:采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化大鼠模型.将36只大鼠随机分为3组(n=12):假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)、槲皮素(剂量100 mg·kg-1·d-1)治疗组(Que组).术后10 d以化学比色法测定梗阻侧肾组织匀浆中羟脯氨酸(Hyp)的含量;HE和Masson染色观察大鼠肾脏病理变化;采用免疫组织化学法、Western blot法检测各组大鼠梗阻侧肾脏α-SMA的表达部位及蛋白表达水平.结果:HE和Masson染色联合图像分析显示大鼠UUO术后10 d梗阻侧肾脏呈现肾间质纤维化,经 Que治疗梗阻侧肾脏病理改变减轻(P＜0.05).免疫组织化学和免疫蛋白印记分析显示经Que治疗梗阻侧肾脏α-SMA染色阳性表达范围和相对表达丰度明显减少(P＜0.01).同时经Que治疗后肾组织匀浆中的Hyp含量降低(P＜0.05).结论:槲皮素可以减轻UUO大鼠肾间质纤维化,其作用机制与抑制肾小管上皮细胞转化成肌成纤维细胞有关.     

美沙拉嗪对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质NF-κB和TGF-β1表达的影响

目的 观察单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质核因子κB (NF-κB)、转化生长因子β1 (TGF-β1)的表达变化,探讨美沙拉嗪干预后对其表达的影响.方法 将30只雌性SD大鼠随机分为假手术组(SOR组)、模型组(UUO组)、美沙拉嗪治疗组(MES组),每组10只.建立单侧输尿管梗阻大鼠模型72 h后灌胃给药:MES组给予美沙拉嗪(200 mg·kg-1 ·d-1)灌胃给药;SOR组、UUO组给予等量生理盐水灌胃给药.建模成功后第10天检测各组血肌酐、尿素氮,并取梗阻侧肾组织,行HE及Masson染色观察肾脏病理变化;免疫组织化学检测NF-κB p65和TGF-β1在肾间质的表达和变化.结果 ①UUO组术后第10天梗阻侧肾脏肾小管间质损害指数明显高于SOR组(P＜0.01),MES组则低于UUO组(P＜0.05).②UUO组大鼠肾间质NF-κB p65及TGF-β1表达增加,明显高于SOR组(P＜0.01),MES组则低于UUO组(P＜0.05).结论 单侧输尿管梗阻大鼠模型肾脏存在肾小管间质的炎症损伤和纤维化,美沙拉嗪通过抑制NF-κB p65和TGF-β1表达而减轻肾间质炎性损害和纤维化.     

地龙组分对UUO大鼠BMP-7信号传导通路影响的研究

目的:通过实验研究观察地龙组分丝氨酸蛋白水解酶对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠BMP-7信号转导通路的影响,探讨地龙组分丝氨酸蛋白水解酶延缓肾间质纤维化的机制。方法:健康雄性wistar大鼠60只,随机分组:假手术组+模型组+地龙低剂量组+地龙高剂量组。采用单侧输尿管结扎法复制肾间质纤维化大鼠模型,取梗阻侧肾组织标本,免疫组织化学方法检测肾组织中BMP-7的表达;Western blot检测肾组织中ALK-2、P-Smad5的蛋白表达。结果:免疫组化结果显示:在对应的时间点,地龙治疗组与模型组大鼠相比,BMP-7蛋白表达显著增多(P<0.05)。Western blot检测结果显示:地龙治疗组ALK-2、P-Smad5的表达明显高于对应时间点模型组(P<0.05)。结论:地龙组分能够上调UUO大鼠肾组织ALK-2、P-Smad5蛋白水平,恢复BMP-7的生物活性,从而抑制肾纤维化的发展。     

坎地沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化及肾脏骨桥蛋白表达的影响

目的 观察坎地沙坦(CAN)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响,并观察骨桥蛋白(OPN)与肾间质纤维化的关系及CAN干预对肾脏OPN表达的影响,探讨其在纤维化中的作用机制.方法 (1)36只成年雄性SD大鼠随机分为3组,每组12只:假手术组(Sham)、UUO模型组(UUO)、坎地沙坦治疗组(CAN).UUO模型组和CAN组大鼠行左侧输尿管结扎术,Sham组只游离左侧输尿管但不结扎.CAN组于术前1 d开始用CAN治疗[10 mg/(kg·d)]灌胃.术后第7、14天分别处死大鼠,左侧肾脏组织行Masson染色,免疫组织化学方法检测肾组织中OPN的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测OPN mRNA表达水平.结果 Masson染色结果显示术后7 d和14 d UUO组大鼠肾纤维化阳性面积分别为15.2%和24.8%,CAN组为1O.1%和18.5%.CAN组与UUO组大鼠术后7 d和14 d大鼠肾纤维化阳性面积差异有统计学意义(P＜0.05).UUO模型大鼠OPN蛋白及mRNA水平均较Sham组明显升高(P＜0.01),CAN组OPN蛋白及mRNA水平较UUO组明显降低(P＜0.05),但较Sham组高(P＜0.01).结论 CAN能有效地延缓UUO大鼠肾间质纤维化的进展,其延缓肾间质纤维化作用可能与下调OPN蛋白和mRNA有关.     

大黄酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的抗氧化保护作用

目的观察大黄酸（RH）对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质损伤的抗氧化保护作用。方法将30只雄性SD大鼠分成假手术组（Sham组）6只;UUO模型组（UUO组）和RH干预组（UUO＋RH组）各12只。除Sham组外,UUO组和UUO＋RH组分别在第3、7天测定大鼠左肾皮质匀浆中脂质过氧化物标志物丙二醛（MDA）及抗氧化酶过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）含量。结果UUO组较Sham组肾脏病理改变加重、肾组织MDA含量升高（P〈0.05）、SOD和CAT含量下降（P〈0.05）;UUO＋RH组较UUO组肾间质纤维化程度减轻、。肾组织MDA含量降低（P〈0.01）、SOD和CAT含量升高（P〈0.01）。结论RH能减少单侧输尿管梗阻侧肾皮质脂质过氧化物的产生,同时增加抗氧化酶的含量,通过改善UUO大鼠肾脏氧化应激来发挥肾脏保护作用。     

蝉花菌丝对单侧输尿管结扎大鼠肾间质uPA、PAI-1蛋白及mRNA表达的影响

目的:探讨蝉花菌丝对单侧输尿管结扎大鼠肾间质uPA、PAI-1蛋白及mRNA表达的影响。方法:采用单侧输尿管结扎的方法制备单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化大鼠模型。实验分组为正常组、模型组、假手术组、冬虫夏草组、蝉花高剂量组、蝉花中剂量组和蝉花低剂量组,实验周期为25 d。采用免疫组织化学和原位杂交方法,分别检测肾组织uPA、PAI-1蛋白及其mRNA表达,使用图像分析系统对结果进行处理,采用SPSS11.5统计软件统计分析。结果:模型组肾小管间质中PAI-1蛋白及mRNA的表达均明显高于正常组和假手术组(P<0.01);而uPA蛋白及mRNA的表达则与正常组和假手术组差异无统计学意义(P>0.05);虫草组和不同剂量的蝉花菌丝组的PAI-1蛋白及mRNA表达量明显低于模型组(P<0.05～0.01);而uPA蛋白及mRNA的表达量则明显高于模型组(P<0.05～0.01);蝉花菌丝大剂量组的PAI-1蛋白及mRNA的表达量又较蝉花小剂量组和虫草组为低(P<0.05～0.01)。说明蝉花菌丝能下调UUO大鼠肾小管间质PAI-1蛋白及mRNA的高表达,上调UUO大鼠uPA蛋白及mRNA的低表达,并呈明显的量效依赖关系。结论:本研究表明蝉花菌丝通过调节UUO大鼠肾小管间质uPA/PAI-1蛋白及mRNA的表达紊乱而发挥抗肾间质纤维化的药理作用。     

MMP-3和TIMP-2在UUO大鼠肾间质的表达

目的:研究基质金属蛋白酶-3(MMP-3)/金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)在单侧输尿管梗阻幼年大鼠肾脏组织的分布、表达及变化。方法:72只Wistar雌性幼年大鼠单侧输尿管结扎制成UUO模型,并随机分为对照组及UUO模型组,于模型成功后第1、2、3、4周末为实验时间点,检测各组大鼠24h尿蛋白、血BUN、Scr,用免疫组化法研究MMP-3及TIMP-2在肾组织的分布、表达及变化。结果:光镜下MMP-3在对照组肾小管上皮细胞胞浆、肾小球的脏层上皮细胞有少量表达。在UUO组1周MMP-3表达增强,主要位于各级肾小管上皮细胞胞浆区及肾间质,2周后表达有所减弱,4周表达最弱。TIMP-2在对照组肾小管上皮细胞胞浆有少量表达,在肾小球无表达。在UUO组TIMP-2随疾病进展而表达逐渐增强(P<0.05),主要位于肾小管上皮细胞、肾间质细胞。结论:MMP-3与TIMP-2蛋白在UUO模型大鼠肾脏组织的表达失衡可能参与了肾组织纤维化的发生发展过程。     

黄葵胶囊对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的保护作用

目的：采用单侧输尿管梗阻（UUO）致肾间质纤维化大鼠模型,观察黄葵对肾脏转化生长因子β激活激酶（TAK1）表达的影响。方法：96只大鼠随机分为假手术组、模型组（UUO组）、黄葵治疗组及缬沙坦治疗组,术后7、14、21 d各组分别处死8只大鼠,HE及Masson染色观察UUO大鼠梗阻侧肾脏病理变化,原位杂交、RT-PCR及Western-bloting检测肾组织TAK1的表达。结果：在UUO术后第7天梗阻侧肾脏出现明显的间质纤维化,并随着时间的进展而明显;在不同时限内模型组及治疗组TAK1表达较假手术组比较均增高（P〈0.01）,经黄葵干预后,梗阻侧肾组织间质纤维化程度有所减轻,且TAK1表达明显减少（P〈0.01）。结论：黄葵可能通过下调TAK1表达,从而减轻间质纤维化的病程进展。