FK506对肝脏保存再灌注中ICAM-1 mRNA表达的影响

本研究建立离体大鼠肝脏保存再灌注模型 ,观察肝脏保存再灌注中细胞间粘附分子 1(ＩＣＡＭ 1)ｍＲＮＡ表达变化和ＦＫ5 0 6的作用。材料和方法一、动物模型及分组健康Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠 5 4只 ,体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ ,随机分为9组 ,每组 6只。于下腔静脉注入肝素 5 0Ｕ ,游离门静脉 ,胆总管 ,肝上、下腔静脉 ,分别插管 ,右肾静脉平面结扎 ,切断肝下下腔静脉 ,经门静脉原位灌注 1℃乳酸林格液 2 0ｍｌ,迅速切除肝脏。正常组 :(保存 0ｈ组 ,6只 )切除肝脏后立即与灌注系统连接 ,行离体鼠肝循环再灌注 ,灌注液为自制ＫＨＢ平衡液 ,加入新鲜…     

大鼠肾缺血再灌注损伤中ICAM-1表达的变化

目的:观察细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)在大鼠肾缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)不同时间点表达的变化并与肾功能恶化程度做相关性分析,从而探讨ICAM-1在肾I/R损伤中所起的作用.方法:应用苦味酸法和二乙酰一肟反应法测定大鼠肾I/R不同时间点血肌酐和尿素氮值, HE染色光镜下观察石蜡包埋切片肾组织损伤的形态学改变,免疫组化法分析ICAM-1在肾I/R不同时间点表达的变化.结果:肾功能检测发现, 再灌注1 h后血肌酐和尿素氮值开始增高和正常对照组比较有统计学差异(P＜0.05),12 h达峰值.HE染色光镜下观察肾组织细胞以近端肾小管变性、坏死为主,I/R各时间点肾组织病理损伤变化与肾功能变化规律相一致.再灌注后早期ICAM-1表达以内皮细胞为主,后期肾脏各部均可表达,小管上皮尤甚.肾脏表达的ICAM-1与肾功能恶化程度存在明显的正相关(P＜0.01).结论:I/R早期肾脏即有ICAM-1表达,其表达量与肾功能恶化程度呈正相关,提示ICAM-1在肾I/R损伤发病机制中起促进作用.     

丹参对肝脏保存再灌注中肝窦内皮细胞损伤的影响

我们采用离体大鼠肝脏保存再灌注模型 ,观察肝脏保存再灌注中肝窦内皮细胞结构和功能的改变 ,并探讨丹参的保护作用。一、材料与方法1.肝脏保存液及灌注液成分 :ＢｅｌｚｅｒＵＷ保存液购自美国Ｄｕｐｏｎｔ ｐｈａｒｍａ公司。自制ＫＨ平衡灌注液 :含氯化钠 118ｍｍｏｌ/Ｌ、氯化钾 4.74ｍｍｏｌ/Ｌ、氯化钙 1.2 4ｍｍｏｌ/Ｌ、硫酸镁1.18ｍｍｏｌ/Ｌ、硫酸钾 1.19ｍｍｏｌ/Ｌ、碳酸氢钠 2 4.9ｍｍｏｌ/Ｌ、葡萄糖 5ｍｍｏｌ/Ｌ ,加蒸馏水至 10 0 0ｍｌ,ｐＨ调为 7.4。2 .动物模型及分组 :健康Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠 5 4只 ,体重 2 0 0～ 2 …     

ICAM-1mRNA在大鼠缺血/再灌注肝脏组织中的表达

目的探讨肝脏缺血/再灌注损伤过程中,肝脏组织中ICAM-1mRNA的表达规律及其意义。方法应用RT-PCR技术,观察缺血时间分别为15min、30min及45min的三组大鼠肝脏于再灌注60min时ICAM-1mRNA的表达情况。结果三组肝脏缺血前及缺血末组织内仅有少量ICAM-1mRNA表达于肝细胞,但于再灌注60min时,ICAM-1mRNA表达程度则显著增强,且缺血时间越长的肝脏,其表达强度越高。结论肝脏的缺血能明显诱导再灌注期间肝细胞表达ICAM-1mRNA,增强肝窦内皮细胞的粘附力,进而引发一系列病理生理改变。     

氧自由基在肝脏保存再灌注损伤中的作用及丹参的保护作用

目的 探讨氧自由基在肝脏保存再灌注损伤（ｈｅｐａｔｉｃ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ,ＨＰＲＩ）中的作用及丹参的保护作用。方法 建立大鼠肝脏保存再灌注模型,分别检测肝脏保存０、８、１６、２４、３２小时组在不同灌注时间点组织超氧化物酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）和灌注液俗 草转氨酸（ＡＳＴ）的变化,并观察肝细胞形态学的改变。结果 与正常组（保存０小时组）比较,保存１     

异氟醚对大鼠缺血-再灌注损伤肝脏细胞黏附分子-1表达及中性粒细胞浸润的影响

目的 观察常温下异氟醚麻醉对大鼠部分肝脏缺血--再灌注(IR)损伤的影响,探讨异氟醚抗炎作用参与减轻肝脏IR损伤的可能机制.方法 雌性SD大鼠32只,随机均分为四组,A组,大鼠行腹腔注射1%戊巴比妥钠40mg/kg麻醉,进行手术但不阻断入肝血流;B组,1%戊巴比妥钠麻醉后行部分肝脏IR;C组,大鼠仅接受1.0 MAC异氟醚吸入麻醉,不阻断血流;D组,采用1.0 MAC异氟醚麻醉,并建立肝脏IR模型.肝脏IR损伤模型通过夹闭肝动脉和门静脉左支(支配肝左叶和中叶)建立,造成约70%肝脏缺血60min,再灌注3h,立刻取肝组织和血液标本.检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)、肝组织内髓过氧化物酶(MPO)活性、肝组织细胞间黏附分子(ICAM-1)表达及肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA转录水平,并进行HE染色行病理学检查.结果 B组血清ALT、AST水平和ICAM-1的表达、MPO活性明显高于A、C、D组(P<0.05),而D组明显高于A、C组(P<0.05);抑制肝脏再灌注后ICANI-1的表达以及MPO的活性(P<0.05).结论 异氟醚麻醉减轻肝脏IR损伤,可能与抑制ICANI-1和减少中性粒细胞(PMN)浸润有关.     

红花对兔肠缺血再灌注损伤后肠壁ICAM-1表达的影响

目的：观察红花注射液对兔肠缺血再灌注损伤后肠组织细胞间黏附因子1表达影响。方法：制备兔肠缺血再灌注损伤模型。30只日本大耳兔,随机均分为三组：假手术组（S组）,缺血再灌注组（IR组）和缺血再灌注＋红花注射液组（SI组）。肠组织常规病理染色观察,并采用免疫组织化学法检测各组肠组织标本细胞间黏附因子1表达的改变。结果：细胞间黏附因子1蛋白在各组肠组织血管内皮细胞中均有表达,尤其在黏膜下层中表达显著。S组兔肠表达较弱,IR组肠血管上皮细胞上细胞间黏附因子1蛋白表达增强,与S组比较,差异有显著性（P〈0．01）。SI组与IR组比较明显下降（P〈0．01）。光镜观察比较SI组与IR组可见,多数肠黏膜上皮细胞变性、坏死程度明显减轻。结论：红花在兔肠缺血再灌注损伤中能有效减少炎性渗出、抑制微循环通透性的增加,阻断肠缺血再灌注损伤的病理生理过程。     

肾缺血-再灌注损伤大鼠SDF-1、ICAM-1表达与肾小管坏死评分的相关性研究

目的 探讨肾缺血-再灌注损伤(IRI)大鼠基质细胞衍生因子(SDF)-1、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)与肾小管坏死评分的相关性。方法 将60只SD大鼠随机分成手术组、假手术组两组,每组各30只。根据手术后检测时间不同,每组再分为6个不同时段的亚组(1、6、12、24、48、72 h组),每个亚组有5只大鼠。手术组建立大鼠肾IRI模型,假手术组大鼠仅予游离双侧肾动脉后缝合切口。检测各个时间点肾功能、肾小管坏死评分及肾脏组织SDF-1、ICAM-1表达变化。对手术组大鼠肾组织SDF-1、ICAM-1表达与肾功能和肾小管坏死评分进行Pearson直线相关分析。结果 手术组术后血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)较术前及相应时间段假手术亚组明显升高(均为P<0.05),且于术后12 h显著升高,高峰期在术后48 h。手术组肾小管坏死评分随时间的延长逐渐增高(均为P<0.05);肾小管坏死评分最高在手术48 h组(P<0.05)。与手术1 h组比较,手术6 h组大鼠肾组织SDF-1、ICAM-1表达开始明显增多(均为P<0.05);手术后48 h达高峰,于手术后72 h开始下降。手术组的肾组织SDF-1、ICAM-1表达与术后各时间段BUN、Scr、肾小管坏死评分呈正相关(r=0.614、0.662、0.751;0.640、0.703、0.785;均为P<0.05)。结论 当大鼠肾组织发生IRI时,SDF-1、ICAM-1表达上调,BUN、Scr升高,肾小管坏死评分升高,而且SDF-1、ICAM-1的表达与BUN、Scr、肾小管坏死评分呈正相关,提示SDF-1、ICAM-1表达增高程度可以作为反映肾IRI后严重程度的指标。     

丹参对大鼠离体保存再灌注肝脏IL-10 mRNA的影响

目的：探讨丹参对大鼠离体保存后再灌注肝脏IL-10 mRNA的影响.方法：建立离体大鼠肝脏保存再灌注模型,.应用RT-PCR方法检测UV液、UV液＋丹参保存并再灌注的离体肝脏的IL-10 mRNA表达.结果：丹参保存1 6、24、32 h再灌注的大鼠离体肝脏IL-10 mRNA表达分别为68.55±5.37、49.73±3.74、32.65±2.39;明显高于对照组（37.62±3.3723.70±2.35、1371±1.28）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：丹参能够增加肝脏保存后再灌注IL-10 mRNA表达,对肝脏保存再灌注损伤可能具有防治作用.     

雌激素对大鼠肝切除肝缺血再灌注损伤中核因子-κB/IκB传导通路的影响及保护作用

目的 观察雌激素对大鼠肝切除肝缺血再灌注损伤中核因子-κB(NF-κB)/抑制蛋白(IκB)传导通路影响.方法 制作肝切除肝缺血再灌注损伤动物模型,雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组);肝切除肝缺血再灌注组(I/R组);肝切除肝缺血再灌注+雌激素组(I/R+ E2 组).分别在缺血再灌注后1、3、6h光镜下观察肝组织病理学改变,检测血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的水平和肝组织丙二醛(MDA)的含量及超氧化物岐化酶(SOD)的活性,免疫组织化学法测定肝组织NF-κB的表达,Western blot检测NF-κB抑制蛋白(IκB-α)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 再灌注后I/R组在各时相血清ALT、AST均显著高于I/R +E2组,并于6h达到峰值(P＜0.05).与I/R+E2组和Sham比较,I/R组肝细胞凋亡率显著升高(P＜0.01);肝组织中IκB-α表达降低,而NF-κB表达增高(P＜0.05);ICAM-1 和MDA的结果变化和NF-κB表达水平变化类似,SOD呈相反变化.在光镜下观察,I/R组肝小叶结构紊乱,肝窦淤血,肝细胞水肿变性,肝细胞片状坏死,在Sham组和I/R +E2组上述病理学变化明显改善.结论 雌激素对肝切除肝脏缺血再灌注损伤有显著保护作用,其作用机制可能与雌激素影响NF-κB/IκB传导通路、减轻脂质过氧化反应、减少炎症介质释放及抑制细胞凋亡有关.     

丹参对肢体缺血再灌注所致肺损伤的保护作用

目的；通过动物实验方法观察丹参对肢体缺血再灌注所致肺损伤的保护作用。方法：１１０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成正常对照，缺血３ｈ和缺血３ｈ用丹参３个组。实验组用于缺血、再灌注１、２、３和２４ｈ取材，光镜下对比观察和组织学评估。结果：肢体缺血和再灌注后，实验组肺泡隔增厚、水肿、毛细血管扩张、充血、大量多核白细胞浸润，贴壁，部分肺不张。用丹参组的病理改变明显轻于未用丹参组。结论：丹参能有效地减轻肢体缺血再灌注所致的肺损伤。     

Hydrogen Gas Ameliorates Hepatic Reperfusion Injury After Prolonged Cold Preservation in Isolated Perfused Rat Liver

Hydrogen gas reduces ischemia and reperfusion injury (IRI) in the liver and other organs. However, the precise mechanism remains elusive. We investigated whether hydrogen gas ameliorated hepatic I/R injury after cold preservation. Rat liver was subjected to 48‐h cold storage in University of Wisconsin solution. The graft was reperfused with oxygenated buffer with or without hydrogen at 37° for 90 min on an isolated perfusion apparatus, comprising the H₂(+) and H₂(?) groups, respectively. In the control group (CT), grafts were reperfused immediately without preservation. Graft function, injury, and circulatory status were assessed throughout the perfusion. Tissue samples at the end of perfusion were collected to determine histopathology, oxidative stress, and apoptosis. In the H₂(?) group, IRI was indicated by a higher aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT) leakage, portal resistance, 8‐hydroxy‐2‐deoxyguanosine‐positive cell rate, apoptotic index, and endothelial endothelin‐1 expression, together with reduced bile production, oxygen consumption, and GSH/GSSG ratio (vs. CT). In the H₂(+) group, these harmful changes were significantly suppressed [vs. H₂(?)]. Hydrogen gas reduced hepatic reperfusion injury after prolonged cold preservation via the maintenance of portal flow, by protecting mitochondrial function during the early phase of reperfusion, and via the suppression of oxidative stress and inflammatory cascades thereafter.     

丹参对大鼠缺血再灌注肾组织一氧化氮合成酶mRNA表达的影响

目的：探讨丹参对肾缺血再灌注损作保护效应的分子机制。方法：以大鼠缺血再灌汪肾损伤为模型，采用组织细胞原位杂交有图像分析技术技术，检测cNOS（eNOS和nNOS）及iNOSmRNA在缺血再灌注肾组织中的表达，并测定肾组织NOS总活性有血肌酐（Cr）。结果：①3种NOS在正常肾组织中均有表达，其中eNOS表达最丰富，cNOS／iNOS比值为2．29。②缺血时，肾组织NOS总活性显著下降，3种NOSmRNA在皮质、髓质有小球中的表达均下调，以eNOS最显著，cNOS／iNOS比值呈下降（2．01）趋势。③再灌注后，3种NOSmRNA的表达明显上调，以iNOSmRNA最明显，cNOS／iNOS的比值降至1．77。④肾缺血注射丹参后再灌注，iNOSmRAN表达明显下调，而nNOSmRAN则显著上调，cNOS／iNOS比值处于正常范围（2．14），Cr含量下降至正常水平。结论：①皮质肾小管上皮中iNOS活性升同与再灌汪后肾功能进一步受损密切相关。②缺血再灌注肾损伤中，丹参抑制iNOSmRNA和促进cNOSmRNA的表达是其介导肾保护效应的重要分子机制。③cNOS／iNOS比值的恒定对肾血流量和肾小球滤过率（GFR）的调节可能具有重要的意义。     

穿孔素mRNA表达与大鼠肝移植急性排斥反应的关系

目的 探讨大鼠肝脏移植术后外周血和胆汁中穿孔素mRNA表达水平与急性排斥反应的关系,寻求一种早期诊断急性排斥反应的非侵袭性方法.方法 建立大鼠原位肝移植模型及胆道引流模型,实验分为4组: 空白对照组(n=20),行单纯胆汁引流;同基因移植组(n=30);异基因移植+环孢素A(CsA)组(n=30);异基因移植组(n=30),术后未行免疫抑制剂治疗.应用RT-PCR方法分别检测各组术后第1、3、5、7和10天外周血和胆汁中穿孔素mRNA的表达水平,同时行肝脏病理组织学观察.结果 空白对照组、同基因移植组外周血中无穿孔素mRNA表达;异基因移植组外周血中穿孔素mRNA 在术后第3天开始表达,而后逐渐升高,术后第5天明显增高,术后第7～10天维持在较高水平.而异基因移植+CsA组外周血中穿孔素mRNA的表达持续呈低水平,各时间点表达与异基因移植组比较差异有统计学意义(P＜0.05).外周血穿孔素mRNA表达水平与Banff组织学诊断分级变化规律一致.各组胆汁中穿孔素mRNA表达均为阴性.结论 检测外周血中穿孔素mRNA表达可作为监测急性排斥反应较敏感的无创性方法.     

脑缺血／再灌注损伤及丹参的脑保护作用

脑缺血／再灌洼损伤是一个极其复杂的病理生理过程。其最终结果将造成脑神经细胞损伤。如何治疗脑组织在缺血／再灌注的损伤已成为临床研究的热点。中药丹参是一种活血化瘀药，目前己广泛用于治疗心脑血管疾病。本文就脑缺血／再灌注损伤机制以及丹参的脑保护作用作一综述。     

Lidocaine-metabolizing Activity after Warm Ischemia and Reperfusion of the Rat Liver In Vivo

The effect of warm ischemia on lidocaine-metabolizing activity was examined in vivo. Total liver ischemia was produced for 1 hr in Sprague-Dawley rats by clamping the portal vein and hepatic artery at the hilum. Livers were then reperfused, and liver microsomes were prepared before and 0, 2, 6, and 24 hr, and 3, 6, and 10 days after reperfusion. Microsomal lidocaine-metabolizing activity and cytochrome P-450 content were examined. Lidocaine N-deethylase activity was decreased from 2.25 ± 0.33 to 0.97 ± 0.21 nmol/mg protein/min (mean ± SD) 24 hr after reperfusion. This inhibition was prolonged, and activity gradually recovered after 10 days. The cytochrome P-450 content showed the same tendency. On the other hand, serum levels of alanine aminotransferase increased significantly 2 hr after reperfusion and returned to control levels 3 days after reperfusion. Liver blood flow recovered rapidly after unclamping and reached baseline levels within 6 hr. Our results suggest that after warm ischemia, prolonged hepatic dysfunction in drug metabolism, which cannot be detected by evaluating serum enzymes or liver blood flow, exists at the microsomal level.     

二氮嗪对鼠缺血-再灌注心肌细胞凋亡的作用

目的观察心肌线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂二氮嗪(diazoxide,DZ)对缺血-再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡的作用。方法50只大鼠随机分为5组,每组10只,取离体心脏制备Langendorff模型。对照组:切开胸腔取正常心肌,不进行灌注;A组:建立Langendorff离体灌注模型,停灌30min,复灌生理盐水60min;B组:心脏稳定搏动后给予常规含钾心脏停搏液灌注,其余实验步骤同A组;C组:心脏稳定搏动后给予常规含钾心脏停搏液 DZ(20mg/kg)灌注,其余实验步骤同A组;D组:心脏稳定搏动后给予格列苯脲(3mg/kg),10min后给予心脏停搏液 DZ灌注,其余实验步骤同A组。再灌注30min、60min或相应的时间点测定[Ca2 ]m含量、丙二醛(MDA)含量、细胞色素C(CytC)蛋白、线粒体、胞浆中Caspase-3活性、Caspase-3 mRNA的表达和心肌细胞凋亡情况。结果I/R后A组、B组、C组和D组心肌线粒体内[Ca2 ]m、MDA、CytC蛋白含量、Caspase-3 mRNA表达水平、Caspase-3活性和心肌细胞凋亡指数均较对照组增高;而C组上述指标均明显低于A组、B组和D组(P<0.05)。结论含DZ的心脏停搏液能抑制心肌细胞凋亡,减轻心肌I/R损伤。     

Protective Effect of Ischemic Preconditioning on Cold Preservation and Reperfusion Injury Associated With Rat Intestinal Transplantation

OBJECTIVE: To define the protective effect of ischemic preconditioning on cold ischemia and reperfusion injury associated with intestinal transplantation, and the role of nitric oxide in this process. SUMMARY BACKGROUND DATA: Ischemia/reperfusion injury continues to be a significant obstacle in small bowel transplantation. Preconditioning is a mechanism that protects against this injury. METHODS: To study the capacity of preconditioning to prevent cold ischemia-associated injury and the inflammatory response associated with intestinal transplantation, the authors studied a control group of animals, cold ischemia groups with or without previous preconditioning and with or without previous administration of L-NAME or NONOS, and intestinal transplantation groups with or without previous preconditioning and with or without previous administration of L-NAME or NONOS. RESULTS: Histologic findings and the release of lactate dehydrogenase into the preservation solution showed that preconditioning protects against cold ischemic preservation-associated injury. Preconditioning also prevented the inflammatory response associated with intestinal transplantation, measured by the above parameters and by neutrophil recruitment in the intestine. Inhibition of nitric oxide eliminates the protective effect. CONCLUSIONS: Preconditioning protects the intestinal grafts from cold preservation and reperfusion injury in the rat intestinal transplantation model. Nitric oxide is involved in this protection.     

三甲氧苄嗪对大鼠离体心脏再灌注损伤的保护作用

目的　探讨三甲氧苄嗪增补于心脏停搏液中对离体鼠心再灌注损伤的保护作用。　方法　将 2 4只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组。离体鼠心在改良的 L angendorff- Neely灌注模型上 30分钟预灌注 ,12 0分钟停搏 ,30分钟再灌注。缺血前和再灌注期间测定血流动力学指标、心肌酶中血清肌酸激酶 (CK)、血清乳酸脱氢酶(L DH)、心肌超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化脂质 (L PO)含量、心肌三磷酸腺苷 (ATP)水平。电子显微镜观察心肌超微结构。　结果　再灌注后 ,实验组心功能、心肌超微结构的改善明显优于对照组 ,CK、L DH和 L PO含量显著低于对照组 (P<0 .0 1) ,SOD含量和心肌 ATP水平显著高于对照组 (P<0 .0 1)。　结论　三甲氧苄嗪增补于心脏停搏液中可显著减轻心肌缺血 -再灌注损伤 ,具有良好的心肌保护作用。     

参麦注射液抗肝缺血再灌注损伤的研究

目的：研究参麦注射液对肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法：将３７只成年雄性ＳＤ大鼠随机分成假手术对照组（ＳＯＣ）、缺血再灌注组（Ｉ／Ｒ）、缺血再灌注加参麦组（Ｉ／Ｒ＋ｓｈｅｎｍａｉ）。通过阻断大鼠肝门３０ｍｉｎ后再开放建立肝缺血再灌注损伤模型,在肝脏再灌注９０ｍｉｎ时测肝组织丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和测血ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ,并取肝组织作光镜及电镜观察。结果：再灌注９０ｍｉｎ时Ｉ／Ｒ＋Ｓｈｅｎｍａｉ组的肝组织ＭＤＡ生成,ＳＯＤ消耗,血清ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ升高值均少于Ｉ／Ｒ组（Ｐ＜０．０１）,且Ｉ／Ｒ＋Ｓｈｅｎｍａｉ组的肝细胞显微、超微结构损害的改变较Ｉ／Ｒ组轻。结论：参麦注射液能清除肝缺血再灌注过程中产生的氧自由基,对鼠肝缺血再灌注所致肝细胞的结构和功能损伤有保护作用