缺氧诱导因子1和缺氧诱导因子2在人类着床前胚胎的表达

目的研究缺氧诱导因子1(HIF-1)和缺氧诱导因子2(HIF-2)在人类着床前胚胎各个阶段的表达,探讨这两个氧调节基因在人类早期胚胎发育过程中的作用和意义。方法收集不育症患者捐赠的胚胎,采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR分别定性和定量在5%和20%O2条件下体外培养的人胚胎的HIF-1α和HIF-2αmRNA。采用免疫荧光染色检测人胚胎的HIF-1α和HIF-2α蛋白。结果巢式RT-PCR分别检测了5%和20%O2体外培养的2、4、6、8细胞胚胎和囊胚发现,所有34个胚胎均表达HIF-1α和HIF-2αmRNA。实时荧光定量PCR5%O2培养的人囊胚HIF-1α与18SrRNA的Ct比值为(1.22±0.05);20%O2培养的人囊胚,这一比值是(1.02±0.07);两者比较差异显著(P<0.05)。人胚胎在体外常氧培养条件下的HIF-1αmRNA水平显著高于低氧培养。5%O2培养的人囊胚HIF-2α与18SrRNA的Ct的比值为(1.29±0.04);20%O2培养的人囊胚,这一比值是(1.19±0.11);两者比较无显著差异(P>0.05)。人胚胎在体外低氧培养条件下的HIF-2αmRNA水平与常氧培养无显著差异。5%和20%O2体外培养的2、4、6、8细胞,各个发育阶段人胚胎的HIF-1α和HIF-2α免疫荧光染色均阳性。结论研究结果显示人类着床前胚胎在体外常氧和低氧培养时均表达HIF-1α和HIF-2α。二者可能通过广泛的靶基因系统参与早期胚胎的生长发育和着床过程,在早期胚胎的调控可能不在转录水平,而在转录后水平。     

缺氧诱导因子2与肿瘤的研究进展

缺氧诱导因子2是bHIM—PAS超家族成员之一,可上调与血管形成、胚胎发育、能量代谢、红细胞生成、糖酵解有关基因的转录和表达,在肿瘤发生、发展、转移中起重要作用。     

缺氧诱导因子-1α在结肠肿瘤中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在结肠肿瘤中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学方法,对30例结肠癌患者癌组织及癌旁组织、10例结肠腺瘤患者腺瘤组织中H1F-1α的表达情况进行检测,并分析HIF-1α表达与结肠癌临床病理特征之间的关系。结果HIF-1α阳性率在结肠癌和结肠腺瘤组织中分别为73．3％（22／30）和10．0％（1／10）,而在癌旁组织中无表达（P〈0．05）。结肠癌组织中HIF．1et的表达水平与患者性别、年龄、病理组织学类型及分化程度无关（P〉0．05）,而与区域淋巴结转移状况及Dukes分期密切相关（P〈0．05）。结论HIF-1α过度表达与结肠癌的浸润、转移密切相关,可能作为判断预后的重要指标。     

缺氧诱导因子在肿瘤生长中的作用

缺氧诱导因子1(hypoxia—inducible factor-1，HIF-1)是普遍存在于人和哺乳动物细胞内的缺氧应答调控因子，在缺氧条件下维持氧稳态的关键性物质。临床研究表明，恶性肿瘤内存在乏氧细胞使肿瘤更具有侵袭性，易发生远处转移，主要是乏氧的存在能使肿瘤细胞的一些基因和蛋白的合成及表达增加。HIF-1在这个过程中起中枢纽带作用。本文拟对HIF-1的结构、功能、调节及其在肿瘤生长中的作用进行综述。     

缺氧诱导因子-1与缺氧诱导因子-2同肿瘤关系的比较

缺氧诱导因子（hypoxia-inducible factor）是广泛存在于人和哺乳动物体内的一种转录因子。可以上调多达150种靶基因的表达，如促红细胞生成素（EPO）、血管内皮生长因子（VEGF）、糖酵解酶等，是细胞在缺氧应答反应中最重要的调节因子。目前发现的缺氧诱导因子成员有HIF-1、HIF-2、HIF-3 3种，HIF-1在1992年由Semenza和Wang首次报道，对其功能研究也就相应地开展，     

缺氧诱导因子-1α和缺氧诱导因子-2α在人非小细胞肺癌表达的比较

目的 观察缺氧诱导因子(HIF)-1α和HIF-2α在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达并探讨其临床意义.方法 采用实时定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot法检测不同缺氧时程HIF-1α和HIF-2α的mRNA和蛋白表达,比较两者差异.进一步运用免疫组织化学技术检测两者在140例NSCLC患者标本中的表达,结合相关临床病理因素探讨其临床意义.结果 在缺氧条件下,HIF-1α蛋白在4h即迅速升至峰值,之后快速下降,而HIF-2α蛋白则表现为逐步上调并持续维持在较高表达水平.在140例NSCLC的标本研究中,HIF-2α与肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期关系密切(P<0.05),并且是预后的不良因素(P<0.05).结论 HIF-2α可能是肿瘤适应乏氧环境的主要调节因子,相较于HIF-1α、HIF-2α在NSCLC的靶向治疗研究中更具有价值.     

缺氧诱导因子1α与脯氨酸羟化酶3在肝癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和脯氨酸羟化酶3(prolyl hydroxylase 3,PHD3)的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学Envision二步法检测103例HCC组织、14例癌旁肝组织和13例正常肝组织中HIF-1α和PHD3的表达,并分析其与临床病理特点间的关系。结果:HIF-1α在HCC组织中的表达阳性率显著高于癌旁肝组织,其阳性表达与肿瘤最大径、脉管瘤栓、术后2年生存率、肿瘤分级和TNM分期显著相关(P<0.05)。正常肝组织不表达HIF-1α。PHD3在HCC组织中阳性表达明显高于癌旁肝组织和正常肝组织,其在HCC中阳性表达与脉管瘤栓、肿瘤分级和术后2年生存率显著相关(P<0.05)。生存分析显示,HIF-1α和PHD3阳性表达组病人术后生存期较阴性表达组明显缩短。COX多因素分析显示,HIF-1α和PHD3阳性表达是HCC的独立预后因素。结论:HIF-1α和PHD3可能在HCC的发生、发展、浸润和转移中起重要作用。对HCC中HIF-1α、PHD3表达的检测有助于判断HCC的恶性程度及预后分析。     

缺氧诱导因子-1α在前列腺癌中的表达及意义

目的　探讨缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)蛋白在前列腺癌 (CaP)中的表达及意义。　方法　应用免疫组化SP法检测 42例CaP和相应癌旁组织 ,12例高分级前列腺上皮内瘤 (PIN )以及 9例正常前列腺组织 (NP)中HIF 1α的表达 ,免疫印迹技术分析不同氧浓度诱导下CaP细胞株PC 3M的HIF 1α蛋白水平。　结果　 3 3例 (78.6% )CaP和 9例PIN组织HIF 1α蛋白表达阳性 ,有远处转移的CaP组织中HIF 1α表达显著高于无转移者 (P <0 .0 5) ,癌旁组织及正常前列腺组织中无阳性表达 ;PC 3M细胞株中HIF 1α表达水平随氧浓度减小而明显升高 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。　结论　HIF 1α表达是CaP形成的早期事件 ,其水平升高可能导致肿瘤向恶性发展表型 ,HIF 1α可作为CaP的早期诊断指标和治疗新靶点     

婴幼儿血管瘤中缺氧诱导相关因子的表达

目的:本实验通过观察缺氧诱导相关性因子HIF-1α在人活体血管瘤及外周血中的表达情况,探讨EPC从骨髓中释放到外周循环并聚集到血管瘤生长部位的可能机制。方法:收集婴幼儿血管瘤手术切除标本,采用免疫组化SP法对切片分别进行HIF-1α及SDF-1α的表达水平检测。收集婴幼儿血管瘤及对照组患儿血清,应用酶联免疫吸附测定法检测VEGF-A及MMP-9的浓度。结果:免疫组化检测结果显示,HIF-1α和SDF-1α在消退期组及对照组中仅有微弱表达,而在增生期组中有显著表达;半定量分析结果比较显示,HIF-1α和SDF-1α在增生期组的阳性表达率均大于消退期及正常组的阳性表达率。ELISA检测结果显示,VEGF-A和MMP-9在增生期组的表达量均大于消退期及正常组的表达量。结论:HIF-1α、VEGF-A、SDF-1α及MMP-9等蛋白调节因子在增生期血管瘤中有显著表达;缺血缺氧可诱发EPC从骨髓中动员并转运至外周循环,这一过程可能在婴幼儿血管瘤发生发展过程中起重要作用。     

缺氧诱导因子1α在缺氧缺血性损伤中的研究进展

目的 分析缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)在缺氧缺血性损伤及其修复过程中的作用和可能机制.方法 查阅和分析近年有关HIF-1α在缺氧缺血性损伤及其修复中作用的相关文献,并作进一步综合分析.结果 HIF-1α参与了多种器官或组织的缺氧缺血性损伤及其修复过程.结论 HIF-1α对治疗临床常见缺氧缺血性损伤具有良好的应用价值和发展前景.     

低氧诱导因子在生物医学中的作用

氧平衡在生物个体的生长和发育过程中具有重要的作用.细胞和组织为适应低氧调节转录子诱导多种基因参与到血管形成、铁代谢、葡萄精代谢和细胞的增殖及存活,而回应这些反应的要素因子是低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1).不断发展的生理学相关基因通过新的机制来降低细胞内氧浓度,上调感应和信号转导以触发HIF的低氧诱导转录活性.该途径最重要的是存在于所有的细胞和所有的真核生物中.现就HIF在生物医学中的作用作一综述.     

NDRG2基因在原发性肝细胞肝癌及正常肝组织中的表达研究

目的探讨NDRG2基因在人原发性肝细胞肝癌及正常肝组织中的表达及其临床意义。方法收集原发性肝细胞肝癌及正常肝组织标本,采用免疫组化ABC法、Western blot法及Real-time PCR法检测原发性肝细胞肝癌及正常肝组织标本中NDRG2蛋白和mRNA的表达情况,并结合图像分析,比较两者表达的差异。结果 NDRG2蛋白在肝癌组织及正常肝组织中的表达阳性率分别为16.67%(5/30)和100%(30/30),2组差异有统计学意义(P<0.05),且阳性表达呈现在细胞质中,细胞核中未见有表达。图像分析结果显示,NDRG2蛋白在肝癌组织中表达的相对含量为0.029 0±0.005 9,在正常肝组织中为0.109 2±0.002 8,前者低于后者,其差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot法检测结果与免疫组化染色结果相一致,在肝癌组织及正常肝组织中均检测到NDRG2蛋白,肝癌组织中NDRG2蛋白相对表达量为1.13±0.15,低于正常肝组织的1.57±0.18(P<0.05)。Real-time PCR分析结果显示肝癌组织中NDRG2 mRNA表达量为0.89±0.15,低于正常肝组织的1.48±0.17(P<0.05),但肝癌Edmondson-Steiner分级的各级肝癌组织之间NDRG2 mRNA表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 NDRG2基因在原发性肝细胞肝癌及正常肝组织中可能存在差异性表达,提示该基因可能参与了肝细胞肝癌的发生和发展,但其具体作用及调控机理有待进一步研究。     

缺氧诱导因子-1α在去势前后大鼠腹叶前列腺中表达的变化

目的探讨与缺氧相关的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是否参与去势后前列腺萎缩过程.方法24只SD大鼠分为3组,其中A组(n=8)为假手术对照组,B组(n=8)为去势组,C组(n=8)为雄激素替代组(去势后肌注十一酸睾酮50mg/kg);术后3天处死,通过半定量RT-PCR检测与HIF-1α在去势前后前列腺表达变化.结果去势后大鼠前列腺的体积萎缩变小;雄激素替代组出现前列腺增生变大;对照组正常的大鼠前列腺有HIF-1 α mRNA低水平表达,去势组HIF-1α mRNA表达量增加,雄激素替代组HIF-1αmRNA表达量减少,与正常对照组比较,去势组的HIF-1α mRNA的表达量显著增加(P＜0.05),雄激素替代组的HIF-1αmRNA的表达量显著减少(P＜0.01).结论前列腺组织的缺氧参与去势后大鼠前列腺的早期萎缩过程.     

组织因子 mRNA在肝癌患者组织中表达升高的意义

目的 检测组织因子(TF)在肝癌组织中的表达并探讨其临床意义.方法 采用RT-PCR方法检测肝癌、癌旁及对照组肝组织(各27例)中TF mRNA的表达,并结合临床病理资料进行分析.结果 TF在肝癌组织中的表达阳性率及相对表达强度分别为62.96%(17/27)和0.567±0.268,均较癌旁组织的33.33%(9/27)和0.469±0.184及对照组肝组织的29.63%(8/27)和0.353±0.121高(P＜0.05),其相对表达强度与肿瘤大小、肝内和肝外转移及门静脉癌栓有关(P＜0.05),而与患者性别、AFP、HBsAg、是否合并肝硬变、肿瘤分化程度、癌灶数目、包膜浸润及淋巴转移均无关(P＞0.05).结论 TF在肝癌组织中的表达升高与部分侵袭转移指标有关,提示其可能参与了肝细胞癌的发生及侵袭、转移.     

Hypoxia‐inducible factor and mammalian target of rapamycin pathway markers in urothelial carcinoma of the bladder: possible therapeutic implications

What’s known on the subject? and What does the study add? The hypoxia‐inducible factor (HIF) and mammalian target of rapamycin (mTOR) pathways are important in tumorigenesis and novel agents targeting these respective pathways have shown promising activity in several malignancies. The current study demonstrates the expression of HIF and mTOR related pathway markers in urothelial carcinoma providing a rationale for clinical trials evaluating agents targeting these pathways.

OBJECTIVE

To investigate the rationale for using targeted therapies against hypoxia‐inducible factor (HIF) and mammalian target of rapamycin (mTOR) pathways in urothelial carcinoma of the bladder, by studying the immunohistochemical expression of molecules of these pathways in urothelial carcinoma, as recent pre‐clinical studies and clinical trials have shown the potential utility of such targeted therapies.

PATIENTS AND METHODS

Immunohistochemical stains were performed on a tissue microarray prepared from 92 cases of ≥ pT2 urothelial (transitional cell) carcinoma of bladder, using antibodies against HIF‐1α and VEGF‐R2, and phospho‐S6 and phospho‐4E BP1, molecules of HIF and activated mTOR pathways, respectively. Immunoreactivity was graded from 0 to 3+ (0, 0–5%; 1+, 6–25%; 2+, 26–50%; 3+, > 50% tumour cells positive).

RESULTS

In all, 58, 34, 35 and 17% of the tumours showed grade 2–3+ expression of phospho‐4E BP1, phospho‐S6, HIF‐1α and VEGF‐R2, respectively. Moderate correlation for immunoreactivity was observed between molecules within the same pathway [(phospho‐4E BP1 with phospho‐S6 (rho = 0.411), and HIF‐1α with VEGF‐R2 (rho = 0.265)], but not between molecules across pathways.

CONCLUSIONS

Urothelial carcinomas of the bladder express molecules of the HIF and mTOR pathways, providing a rationale for clinical trials evaluating agents targeting these pathways. Correlation between molecules within the same pathway, and not across pathways, suggests that investigating the usefulness of a specific targeted agent might benefit from pre‐treatment evaluation of pathway marker expression.     

缺氧诱导因子-α和血管内皮素-1及血管内皮生长因子在胃肠道间质瘤中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮素-1（ET-1）和血管内皮生长因子（VEGF）在胃肠道间质瘤（GIST）中的表达关系及其对患者预后判断的价值。方法收集2003年1月至2006年12月中南大学湘雅医院（50例）、湖南省邵阳市中医院（36例）行手术治疗的86例GIST患者肿瘤标本,采用免疫组织化学染色方法检测标本中HIF-1α、ET-1和VEGF的表达。计数资料采用r检验,应用Spearman等级相关分析处理HIF-1α、ET-1和VEGF之间的相关性。Kaplan—Meier法计算患者生存率,生存分析比较采用Log—rank检验。结果86例患者中,HIF-1仅阴性23例、阳性30例、强阳性33例,阳性表达率为73．3％（63／86）;ET-1阴性29例、阳性28例、强阳性29例,阳性表达率为66．3％（57／86）;VEGF阴性24例、阳性26例、强阳性36例,阳性表达率为72．1％（62／86）。HIF-1α、ET-1和VEGF的表达两两均呈正相关（r=0．594,0．655,0．347,P〈0．05）;上述3种检测指标与GIST的美国国立卫生研究院（NIH）危险度分级、浸润转移、肿瘤直径和核分裂象有关（,=15．565、10．841、12．574、21．125,8．171、10．002、10．354、17．317,14．710、16．230、11．116、18．886,P〈0．05）;而与患者的性别、年龄、肿瘤原发部位无关（X2=0．059、0．071、5．070,0．468、0．074、1．665,0．231、0．370、3．712,P〉0．05）;进-步分析发现：上述3种检测指标阳性表达率随GISTNIH危险度分级的升高、出现浸润转移和肿瘤直径的增大而增加。86例患者随访率为91．9％（79／86）,3、5年生存率分别为82％和69％。中位随访时间为40．2个月（2—66个月）。HIF-1仪、ET．1和VEGF阳性患者的5年生存率分别为42％、45％和42％,显著低于阴性患者的64％、65％和63％（,=6．325,6．124,6．287,P〈0．05）。结论HIF-1d、ET-1和VEGF在GIST中的表达两两呈正相关,这3种检测指标提示肿瘤的恶性程度及患者预后。