MTA1在膀胱癌的表达及其与预后的相关性

目的检测转移相关基因1(MTA1)在膀胱癌组织中的表达水平以及其对患者预后的影响。方法应用Western blot方法以及实时定量PCR法检测MTA1在7例膀胱癌组织及对应癌旁组织的表达情况,并应用免疫组织化学法验证MTA1在116例膀胱癌组织及癌旁组织的表达水平,分析其表达水平与患者年龄、肿瘤大小、T分期、淋巴结转移、淋巴管浸润等临床病例资料之间的关系,探讨MTA1对患者预后的影响。结果 Western blot和PCR证实在蛋白及mRNA水平MTA1在膀胱癌组织表达水平均高于其对应的癌旁组织(蛋白水平P=0.006,mRNA水平P=0.002)。免疫组化显示,MTA1在膀胱癌中的阳性率为63.79%,与患者的淋巴结转移(P=0.035)、淋巴管浸润(P=0.001)有关,而与患者的年龄、肿瘤大小、T分期等没有统计学意义;高表达MTA1的患者5年生存率显著低于无或低表达的患者(P=0.012);MTA1的表达是患者预后的独立因素。结论MTA1在膀胱癌中的表达水平显著高于癌旁组织,其表达水平影响患者的预后,可能在膀胱癌的转移过程中发挥关键作用,提示MTA1可作为膀胱癌预测、治疗的新靶点。     

EN2蛋白在前列腺癌组织的表达及其意义

目的 探讨同源异型盒蛋白EN2在前列腺癌的表达差异及其意义.方法 选取48例前列腺癌、22例高级别前列腺内瘤病(HGPIN)及48例前列腺增生症(BPH),采用免疫组织化学法检测上述组织中的EN2蛋白表达差异.选取其中14例前列腺癌及15例BPH,采用Western blot法检测EN2蛋白表达差异.结果 免疫组织化学法显示EN2蛋白在前列腺癌中表达增高,主要见于前列腺腺上皮细胞质内及部分细胞核.前列腺癌、HGPIN和BPH组织中EN2蛋白表达阳性率分别为87.50％、31.81％和27.08％,采用Kruskal-Wallis H检验,差异有统计学意义(P＜0.05).EN2在高、中、低分化前列腺癌患者中阳性率分别为75.00％、88.24％和88.90％.Western blot法检测显示EN2蛋白在前列腺癌组织的表达比BPH组织增高3倍.结论 同源异型盒蛋白EN2在前列腺癌表达增高,其中以中、低分化腺癌中明显,并能为前列腺上皮细胞分泌.     

核基质结合蛋白1在胰腺导管腺癌中的表达及意义

目的 探讨胰腺导管腺癌(PDAC)中核基质结合蛋白1(SATB1)的mRNA和蛋白表达水平及其与临床病理特征的关系,评价SATB1在PDAC预后判断中的价值.方法 应用免疫组织化学法检测49例PDAC组织及配对的癌旁组织石蜡标本SATB1蛋白表达水平,利用Western blot 和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测16对配对冷冻保存的新鲜PDAC组织、癌旁组织中SATB1蛋白和mRNA表达水平.结果 免疫组织化学结果显示,SATB1在13例PDAC中呈高表达,癌旁组织有5例高表达(26.5％比10.2％).SATB1的表达与PDAC分化程度(x2=4.131,P＜0.05)、淋巴结转移(x2 =5.000,P＜0.05)、T分期(x2=14.348,P＜0.05)和TNM分期(x2=6.69,P＜0.05)相关.阳性表达SATB1的PDAC患者术后中位生存时间为353 d,阴性表达SATB1者为508 d.RT-PCR和Western blot结果显示SATB1在PDAC患者中mRNA表达高于癌旁组织(t=2.432,P＜0.05),蛋白表达水平差异无统计学意义(t=0.324,P＞0.05).结论 SATB1在PDAC中表达呈上调状态,与PDAC临床病理因素及预后相关.     

Eph受体酪氨酸激酶A2和CD133在胃癌组织的表达及其与胃癌发生发展的关系

目的 探讨Eph受体酪氨酸激酶A2(EphA2)和CD133在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后关系.方法 采用免疫组织化学法检测82例胃癌患者手术切除的癌组织和癌旁组织中EphA2和CD133表达水平.结果 EphA2在胃癌组织中的表达率明显高于癌旁组织(86.59％比20.73％,P＜0.01),CD133在胃癌组织中的表达率明显高于癌旁组织(67.07％比10.98％,P＜0.01);EphA2表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移明显相关(P＜0.05),CD133表达水平与胃癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(P＜0.05).结论 EphA2和CD133过度表达可能在胃癌的发生、发展过程中发挥作用.     

Syntaxin 8蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨突触融合蛋白8(STX8)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:收集62例胃癌患者术后胃癌及癌旁组织,采用免疫组织化学染色和Western blot方法检测STX8的蛋白表达,并分析STX8表达与胃癌临床病理的关系。结果:免疫组织化学结果显示,STX8在胃癌组织中阳性表达,在大部分癌旁胃组织中为阴性表达,差异有统计学意义(P0.05);Western blot检测发现胃癌组织中STX8蛋白表达水平明显高于癌旁组织。相关分析发现syntaxin 8在胃癌组织中的高表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期及胃癌侵袭转移无关,但与发生远处转移相关。结论:STX8在胃癌组织中异常高表达,可能与胃癌的发生发展相关,也可能是潜在的胃癌分子诊疗靶点。     

MAT2A 基因在胃癌中的表达及临床意义

目的：探讨甲硫氨酸腺苷转移酶2A（MAT2A）在胃癌组织及癌旁组织中的表达及意义。 方法：分别应用real-time PCR及Western blot技术检测48例胃癌组织和30例癌旁正常胃组织中MAT2A mRNA与蛋白的表达。 结果：real-time PCR与Western blot结果显示,胃癌组织中MAT2A mRNA相对表达量明显高于癌旁正常胃组织（3.99±2.52 vs. 1.17±1.04）;MAT2A蛋白相对表达量明显高于癌旁正常胃组织（0.62±0.05 vs. 0.20±0.02）,差异均有统计学意义（均P<0.05）。 结论：MAT2A在胃癌组织中表达上调,提示其在胃癌发病机制中起了重要的作用,其作用机制值得进一步研究。     

MsrA在胃癌组织中的表达及意义

目的：探讨MsrA在胃癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中的表达及意义。 方法：采用免疫组织化学法和实时荧光定量RT-PCR法检测57例胃癌组织与癌旁正常胃黏膜组织中MsrA的表达。 结果：胃癌组织中MsrA的表达率及表达强度均低于癌旁正常胃黏膜组织（P<0.001）;胃癌组织MsrA mRNA相对量的中位数为3.757,癌旁正常胃黏膜组织中MsrA mRNA相对量的中位数为5.240,胃癌组织中MsrA mRNA的表达水平低于癌旁正常胃黏膜组织（P=0.016）。 结论：胃癌组织中MsrA的表达水平较正常组织下调。

     

CD55在胰腺癌中的表达及其意义

目的 探讨CD55在胰腺癌组织中的表达及其意义.方法 用实时荧光定量聚合酶链反应( qRT- PCR),免疫组化及Western blot检测CD55在12例胰腺癌及对应癌旁组织中的表达.结果 qRT - PCR结果显示CD55 mRNA在胰腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P＜0.05)；免疫组化染色显示胰腺癌组织中细胞阳性率(100%呈强阳性)明显超过癌旁组织(仅16.7%呈弱阳性)(P＜0.05)；Western blot检测结果显示在91.7%胰腺癌组织中CD55蛋白的表达量高于癌旁组织.结论 CD55在胰腺癌中相对高表达,对胰腺癌的发生发展可能有重要影响.     

FUBP1在肾透明细胞癌中的表达水平及其临床意义

目的:探索人远端上游元件结合蛋白(FUBP1)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达水平及其临床意义。方法:通过实时荧光定量PCR(real-time PCR)、蛋白免疫印迹实验(Western blot)和免疫组织化学检测FUBP1在ccRCC肿瘤组织、对应的瘤旁组织的表达情况。Western blot检测不同细胞系(786-O、Caki-1和HKC)之间FUPB1的表达情况。结果:在ccRCC肿瘤组织中,FUBP1的mRNA表达水平明显高于其对应的瘤旁组织(P0.05),蛋白表达情况一致。且在ccRCC肿瘤细胞中FUBP1表达水平较高。FUBP1的mRNA表达水平增高,肿瘤分期较高、体积较大。结论:FUBP1可能在ccRCC肿瘤形成中发挥作用,FUBP1的高表达促进ccRCC肿瘤形成。     

肿瘤抗原相关基因 MPS- 1在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨肿瘤抗原相关基因 MPS- 1在胃癌组织和细胞中的表达及其临床意义.方法采用逆转录聚合酶链反应( RT- PCR)和 Western印迹,检测 42例胃癌组织及其相应正常黏膜组织以及 AGS、 MKN- 45、 SGC 7901、 KATOⅢ、 N- 87和 SNU- 1 6株胃癌细胞中 MPS- 1的表达情况.结果 MPS- 1 mRNA在胃癌组织和细胞株中均有表达. MPS- 1 mRNA在胃癌组织中的表达水平为 1.37± 0.87,明显高于其在相应正常黏膜组织中的表达( 0.99± 0.67, P< 0.01). MPS- 1的表达与肿瘤的临床分期相关, TNM分期为Ⅲ、Ⅳ期标本中的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期的标本( P< 0.05);但与肿瘤患者的性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关.同时, MPS- 1在 6株胃癌细胞中的表达高于胃正常黏膜上皮细胞 GES- 1, RT- PCR与 Western印迹结果一致.结论胃癌抗原相关基因 MPS- 1可能在胃癌的恶性转变中发挥一定的作用,为今后胃癌免疫治疗提供了又一新的靶点.     

Bmi-1在胃癌中的表达及其意义

目的 探讨Bmi-1在胃癌组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系.方法 采用RT-PCR和Western blot技术检测44例胃癌组织和癌旁正常组织中Bmi-1的表达.结果 胃癌组织Bmi-1mRNA阳性表达率为72.73％,显著高于癌旁正常组织(13.64％)(P＜0.05);Bmi-1蛋白在胃癌组织中表达显著高于癌旁正常组织(P＜0.05);在有淋巴结转移以及远处转移的患者中Bmi-1的表达显著高于无淋巴结转移和无远处转移阴性患者(P＜0.05).但Bmi-1的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关,该4因素的分组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Bmi-1的表达上升可能与胃癌的发生及浸润、转移有关.     

TNIK在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨肿瘤坏死因子受体相关因子-2和Nck相互作用蛋白激酶(Traf-2 and Nck-interacting protein kinase,TNIK)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法回顾性收集2014年7月至2017年12月期间在郑州大学附属洛阳中心医院普通外科行手术切除并经病理科确诊的胃癌组织及其癌旁组织标本78份,以及同期胃溃疡组织标本42份。采用免疫组织化学染色法及Western blot法检测上述3种组织中TNIK蛋白的表达情况,并探索TNIK蛋白表达与胃癌临床病理学特征及预后的关系。结果免疫组织化学染色结果显示,胃癌组中,TNIK蛋白的阳性表达率为66.67%(52/78),癌旁组织组为11.54%(9/78),胃溃疡组为21.43%(9/42)。胃癌组的TNIK蛋白阳性表达率高于癌旁组织组和胃溃疡组(P<0.05),但癌旁组织组和胃溃疡组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot结果显示,在胃癌组中,TNIK蛋白的表达水平高于胃溃疡组及癌旁组织组,差异均有统计学意义(P<0.05);但癌旁组织组与胃溃疡组比较差异无统计学意义(P=0.772)。TNIK蛋白的表达与胃癌患者的性别、CEA值、肿瘤直径及病理学类型均无关(P>0.05),但与胃癌患者的年龄、TNM分期、分化程度、远处转移及淋巴结转移相关(P<0.05);TNIK蛋白阳性表达患者的预后差于阴性表达者(P<0.001)。结论TNIK蛋白在胃癌组织中高表达,且与胃癌预后不良因素及较差的预后相关,可能是潜在的胃癌诊治靶点。     

胃癌组织中Livin的表达及意义

目的 检测胃癌组织以及胃癌细胞株中Livin的表达,研究其与胃癌发生、发展的关系.方法 (1)采用免疫细胞化学染色确定Livin在胃癌中表达的部位.(2)用RT-PCR和Western blot检测Livin mRNA和蛋白在胃癌、癌旁、胃溃疡组织中的表达.结果 Livin在胃癌细胞株SGC-7901的细胞核和细胞质中均有表达.30例胃癌组织中Livin-α阳性表达率为67%(20/30).癌旁和胃溃疡组织中没有Livin-α、Livin-β表达.胃癌组织中Livin-α阳性表达率随TNM分期增加而增高(x2=11.719,P<0.05).Livin的表达率在胃癌的分化程度、生长部位、年龄、性别等方面比较差异无统计学意义(x2=1.607,0.000,0.156,0.419,P>0.05).结论 Livin-α在胃癌组织中的高表达,与胃癌的临床病理分级、分期有关,并在胃癌的发生、发展过程中起重要作用.     

聚糖蛋白抗体的制备及其在肝癌组织及细胞系蛋白表达检测中的应用

目的制备聚糖蛋白3(glypican-3,GPC3)抗体并应用其对肝癌组织及细胞系中GPC3蛋白表达进行研究,探讨GPC3蛋白作为肝癌潜在的新的肿瘤标志物的可能性。方法利用原核表达系统诱导表达了GPC3抗原并制备了特异性好的兔抗GPC3多克隆抗体,应用该纯化的抗体对40例组织(正常肝7例,肝细胞型肝癌26例,胆管细胞型肝癌7例)及4个细胞系(肝癌细胞系HepG2、HuH-7、Hep3B,非肝癌细胞系Hela)进行了蛋白印记杂交试验。结果Western blot结果显示,肝癌组织及肝癌细胞系HepG2、HuH-7、Hep3B细胞系中有相对相对分子质量约70000的蛋白主带,与GPC3的核心蛋白带相对分子质量大小相一致;正常肝组织不表达GPC3蛋白,肝细胞型肝癌中癌组织(HCC)及癌旁组织表达GPC3蛋白的比例分别为84.6%(22/26)及30.8%(8/26),7例胆管细胞型肝癌(ICC)中有2例癌组织及其旁组织表达GPC3。结论GPC3蛋白广泛存在于肝癌组织中,很可能成为一种新的肝癌肿瘤标志物。     

SOX9在胃癌组织中的表达及与预后的关系

目的探讨蛋白质分子生物标记物SOX9在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法回顾性分析2004．2006年浙江省人民医院收治的112例胃癌患者的临床资料．通过免疫组织化学（IHC）法检测112例原发胃癌组织及70例癌旁非肿瘤组织中SOX9蛋白表达情况。结果70例癌旁非肿瘤胃黏膜上皮中仅有5例（7．1％）为SOX9低表达;112例胃癌组织中94例（83．9％）出现不同程度的表达,其中SOX9高表达51例（45．5％）。胃癌组织中SOX9的表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小及其分化程度无关（P〉0．05）,而与肿瘤的Lauren分型（P〈0．05）、浸润深度（P〈0．01）、淋巴结转移（P〈0．05）、远处转移（P〈0．05）及肿瘤TNM分期（P〈0．05）有关。Kaplan-Meier生存分析显示．SOX9高表达患者的5年生存率显著低于SOX9低表达者（29．4％比49．2％．P=0．031）。多因素cox回归分析显示,分化程度（P=0．046）、浸润深度（P=0．001）和远处转移（P〈0．01）是影响胃癌患者预后的独立因素．而SOX9的高表达（P=0．948）不能作为影响胃癌预后的独立因素。结论胃癌组织中SOX9蛋白的表达与胃癌生长发展和侵袭转移有关并对胃癌患者预后有影响．但不是影响预后的独立因素。     

骨癌痛大鼠脊髓CX3CR1表达的变化

目的 评价骨癌痛大鼠脊髓趋化因子Fractalkine受体1(CX3CRl)表达的变化.方法 雌性未交配SD大鼠650只,体重150～180 g,随机分为3组:对照组(n=10)、假手术组(n=10)和骨癌痛组(n=40).对照组不给予任何处理,假手术组、骨癌痛组分别在左胫骨上端注射Hank液和Walker 256乳腺癌细胞5 μl.对照组和假手术组于术前1 d、术后6、12、18 d时测定机械痛阈和双后肢负重;骨癌痛组于术前1 d、术后6、12、18 d时各取10只大鼠测定机械痛阈和双后肢负重.对照组和假手术组于术后18 d时,骨癌痛组于术后6、12、18 d时各处死10只大鼠,取L4-6脊髓组织,采用免疫组化法测定CX3CR1阳性细胞计数,采用Western blot法测定CX3CR1表达.结果 与对照组和假手术组比较,骨癌痛组术后各时点机械痛阈降低,双后肢负重差,CX3CR1阳性细胞计数升高,CX3CR1表达上调(P<0.01).结论 脊髓CX3CR1可能参与了大鼠骨癌痛的发生和维持.     

miR-126在胃癌中的表达及其靶基因Crk的鉴定

目的:分析miR-126在胃癌中的表达水平并鉴定miR-126的靶基因,以阐明miR-126在胃癌发生机制中的功能。方法:采用qRT-PCR分别检测miR-126在胃癌细胞株、正常胃黏膜组织、永生化胃黏膜上皮细胞、胃癌及配对癌旁组织的表达水平,并与胃癌组织的临床病理指标进行相关性分析。采用生物信息学方法预测出miR-126的靶基因,并通过荧光素酶报告系统加以验证;采用qRT-PCR及Western印迹法检测miR-126对靶基因mRNA及蛋白质表达水平的影响。结果:qRT-PCR检测结果显示,miR-126在胃癌细胞株中的表达水平明显低于其在正常胃黏膜组织及永生化胃黏膜上皮细胞株的表达水平。miR-126在60例病人的胃癌组织中表达的水平显著低于其在配对癌旁组织中表达的水平;且胃癌组织miR-126表达水平低者,肿瘤组织体积较大,胃壁浸润较深,易发生淋巴结转移,病理分期也较晚。生物信息学分析提示Crk mRNA的3′UTR含有miR-126直接作用的靶序列,荧光素酶报告系统检测进一步验证了该靶序列,qRT-PCR及Western印迹法证实miR-126对Crk蛋白表达的调控发生在转录后水平。结论:miR-126有望成为研究胃癌的新型标志物;miR-126通过对其靶基因Crk的调控参与了胃癌的发生、发展过程。     

PRDX1在人胰腺导管腺癌中的表达及其与病理指标的关系

目的 探讨过氧化还原蛋白1（peroxiredoxin 1,PRDX1）在胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC）中的表达及与临床病理学参数的关系并评价其判断预后的价值。方法 采用免疫组织化学法分析117例PDAC组织石蜡切片及41例癌旁正常胰腺组织石蜡切片中的PRDX1表达,对PRDX1表达 水平与临床病理指标进行相关性分析,进行生存分析。采用Western blotting和实时定量PCR（qRT-PCR）检测9 对配对新鲜PDAC组织及癌旁正常胰腺组织中PRDX1蛋白质和mRNA水平的表达。结果 免疫组化显示PRDX1在PDAC中表达阳性率高于癌旁正常胰腺组织,差异有统计学意义（x2=9.761,P ＜0.01）;新鲜PDAC中PRDX1蛋白及mRNA表达明显高于配对的癌旁正常胰腺组织（t =9.187,P ＜0.01;t =7.829,P ＜0.011）;PRDX1表达与肿瘤直径、肿瘤TNM分期、淋巴结转移、病理分级有关（x2=8.876,P ＜0.01;x2=4.342,P ＜0.05;x2=9.273,P ＜0.01;x2=6.943,P ＜0.01）;PRDX1与术后复发率相关（x2=7.326,P ＜0.01）,PRDX1表达与生存期呈负相关（r =-0.845,P ＜0.05）。结论 PRDX1表达与PDAC的恶性程度有关,可作为判断PDAC预后的预 测因素。     

Bcl-2转录抑制因子1在胃癌中的表达及其生物学功能

背景与目的 失巢凋亡效应分子Bcl-2转录抑制因子1（Bit1）在胃癌组织中存在异常表达,Bit1在胃癌中功能及作用机制如何值得研究。本研究旨在进一步观察Bit1在胃癌组织中的表达,并初步分析其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法 用Western blot检测20例原发性胃癌患者癌组织及癌旁组织手术标本中Bit1蛋白的表达;将胃癌BGC-803细胞分别转染Bit1 shRNA慢病毒载体或空病毒载体后,以无处理的野生型BGC-803细胞为空白对照,用细胞免疫荧光实验验证转染效率与Bit1沉默效果,并分别用细胞划痕实验、Transwell侵袭实验、细胞增殖实验及TUNEL实验检测细胞侵袭、迁移、增殖及凋亡情况。结果 Western blot结果显示,与对应癌旁组织比较,Bit1在胃癌组织中蛋白表达水平明显上调（P<0.01）。免疫荧光结果显示,转染成功且Bit1被有效沉默。细胞行为学实验显示,与空白对照细胞比较,转染Bit1 shRNA后的BGC-803细胞的划痕愈合率明显降低、侵袭细胞数量明显减少、细胞增殖活性明显减弱、晚期凋亡细胞数明显增加（均P<0.05）;转染空载体的BGC-803细胞以上细胞行为学指标与空白对照细胞间的差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论 Bit1在胃癌中表达上调,并与胃癌细胞的恶性生物学行为密切相关,其有可能是与胃癌发生、发展、预后相关联的生物标志物及潜在治疗靶点。