桂枝茯苓胶囊对前列腺增生模型大鼠的作用效果和机制研究

目的探讨桂枝茯苓胶囊对良性前列腺增生(BPH)模型大鼠的作用效果及可能存在的机制。方法将50只雄性SD大鼠,随机分为空白组(假手术组),前列腺增生模型组,非那雄胺组及桂枝茯苓胶囊高、低剂量组,共5组,每组10只。将SD大鼠去势后皮下注射丙酸睾酮,持续28d,建立大鼠前列腺增生模型。造模同时,空白组及模型组予以生理盐水,治疗组分别予以相应剂量的非那雄胺和桂枝茯苓胶囊,连续灌胃28 d。造模结束后,留取静脉血,将大鼠麻醉,取双侧前列腺组织后,处死大鼠。计算大鼠前列腺指数(前列腺湿重/体重),并对前列腺组织进行HE染色观察病理变化,通过Elisa检测大鼠血清和前列腺组织中的双氢睾酮(DHT)含量,通过qRT-PCR检测大鼠前列腺组织的VEGF和TGF-β1的m RNA表达含量。结果研究结果显示:与空白组相比,模型组的前列腺湿重(g)及前列腺指数(mg/g)明显增加(1009.31±56.97 vs 431.09±11.28;2.27±0.14 vs 1.00±0.03,P均0.01);与模型组比较,各治疗组的前列腺湿重及前列腺指数则明显降低,其中,桂枝茯苓胶囊高剂量组较低剂量组下降更明显(650.55±19.66 vs1009.31±56.97;1.49±0.05vs2.27±0.14,P均0.01)。Elisa检测显示,与空白组相比,模型组血清和前列腺组织中的DHT均升高,P均0.01,各治疗组与模型组比较,血清和前列腺组织中DHT均降低,其中非那雄胺组降低最明显,P均0.01。qRT-PCR结果显示,与空白组相比,模型组大鼠前列腺组织VEGF的表达水平升高,TGF-β1表达水平降低,各治疗组与模型组相比,前列腺组织中TGF-β1表达明显增高,而VEGF表达明显减少,其中桂枝茯苓胶囊高剂量组增高较为明显。结论研究发现桂枝茯苓胶囊能明显降低BPH模型大鼠前列腺湿重及前列腺指数,通过降低血清和前列腺组织的DHT以及降低前列腺组织中VEGF的表达水平,增高前列腺组织中TGF-β1的表达,可能是其治疗BPH的作用机制。     

电针“三阴”穴对自身免疫性前列腺炎大鼠炎症因子的影响

目的:观察电针"三阴"穴对自身免疫性前列腺炎大鼠局部炎症因子的影响。方法:在大鼠皮内注射同种异体Wistar雄性大鼠前列腺蛋白提纯液,辅以双重免疫佐剂复制自身免疫性前列腺炎大鼠模型。将40只雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、舍尼通对照组、电针组,每组10只。除正常对照组外,其余大鼠均造模处理,45 d后,正常对照组与模型组以抓取、捆绑、固定处理,电针组和舍尼通组分别给予电针"三阴"穴治疗和舍尼通药物灌胃。连续治疗2个疗程(每个疗程7 d,间隔1 d,共15 d)后处死各组动物,检测各组动物前列腺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、一氧化氮合酶(iNOS)、总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)水平。结果:与正常对照组比较,模型组前列腺组织中TNF-α表达显著升高[(32.20±1.65)pg/ml vs(15.31±1.36)pg/ml](P<0.01)、iNOS活性显著增强[(1.25±0.23)U/ml vs(0.81±0.33)U/ml](P<0.01),T-AOC活性显著减低[(1.11±0.15)U/ml vs(1.56±0.16)U/ml](P<0.01),MDA含量明显增高[(0.91±0.21)nmol/ml vs(0.66±0.14)nmol/ml](P<0.05);与模型组比较,电针组前列腺组织中TNF-α表达[(17.32±2.69)pg/ml]明显降低(P<0.01)、iNOS活性[(0.98±0.15)U/ml]显著减低(P<0.05),T-AOC活性[(1.44±0.26)U/ml]明显增加(P<0.05),MDA含量[(0.70±0.20)nmol/ml]明显减低(P<0.05)。结论:电针"三阴"穴能够降低促炎症细胞因子活性,降低血管通透性,减少炎症细胞侵润,并提高局部抗氧化防御系统活性,从而抑制前列腺组织形态结构的损伤,减轻炎症反应,达到治疗目的。     

夏荔芪胶囊对良性前列腺增生模型大鼠PCNA、caspase-3表达水平的影响

目的:探讨夏荔芪胶囊对良性前列腺增生(BPH)模型大鼠增殖细胞核抗原(PCNA)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)表达水平的影响。方法:50只雄性SD大鼠,随机分为5组,每组10只:空白组(假手术组),模型组,夏荔芪高、低剂量治疗组[1.20 g/(kg·d)、0.61 g/(kg·d)]及非那雄胺治疗组[0.8 mg/(kg·d)]。采用去势后皮下注射丙酸睾酮[0.5 mg/(kg·d),30 d],建立大鼠BPH模型。空白组及模型组予以生理盐水,治疗组予以相应药物,造模成功后连续灌胃30 d。实验结束后将各组大鼠于麻醉下留取双侧前列腺组织后处死,计算大鼠前列腺指数(前列腺湿重/体重);免疫组化法检测大鼠前列腺组织中PCNA的表达情况;免疫荧光法检测大鼠前列腺组织中caspase-3的表达水平。结果:与空白组相比,模型组的前列腺湿重(g)及前列腺指数(mg/g)明显增加(1 326±60 vs 471±17;2.89±0.18 vs 1.06±0.06,P均0.01);与模型组比较,各治疗组的前列腺湿重及前列腺指数则明显降低,其中,夏荔芪高剂量组较低剂量组下降更明显(914±36 vs 1 099±46;2.02±0.08 vs 2.39±0.11,P均0.01),而各治疗组中以非那雄胺组(817±53 vs 471±17;1.83±0.10 vs 1.06±0.06,P均0.01)降低最明显。免疫组化结果显示,与空白组相比,模型组大鼠前列腺组织中PCNA表达明显增多,各治疗组与模型组相比,前列腺组织中PCNA表达均有明显减少,其中夏荔芪高剂量治疗组减少较为明显。免疫荧光结果显示,与空白组相比,模型组大鼠前列腺组织caspase-3表达量降低,各治疗组与模型组相比,前列腺组织中caspase-3表达明显增高,其中非那雄胺治疗组增高较为明显。结论:夏荔芪胶囊能明显降低BPH大鼠前列腺湿重及前列腺指数,通过降低前列腺组织中PCNA的表达水平,增高前列腺组织中caspase-3的表达,可能是其治疗BPH大鼠的机制。     

水通道蛋白在去势大鼠精囊和前列腺的表达

目的:探讨去势大鼠精囊和前列腺分泌液体积的变化与精囊、前列腺组织水通道蛋白(AQPs)表达的关系。方法:健康雄性SD大鼠(n=18)随机均分为对照组、去势组、雄激素替代组,建立去势大鼠模型后,测定大鼠血浆睾酮水平,分别测定精囊和前列腺分泌液重量,Western印迹或/和免疫组化测定大鼠精囊、前列腺组织中AQP3、7、10~12的表达。结果:去势组大鼠睾酮水平[(30.98±28.84)ng/dl]较对照组[(700.78±123.8)ng/dl]和替代组[(688.08±132.47)ng/dl]显著减低(P0.05);去势组前列腺液量/前列腺重量、精囊液量/精囊重量[(1.11±0.3)%,(4.78±1.97)%]较对照组[(2.32±0.61)%,(57.36±11.86)%]和替代组[(2.13±0.56)%,(55.74±7.21)%]显著降低(P0.05)。免疫组化发现AQP3、7分别表达于前列腺和精囊腺上皮胞膜和胞质,AQP11表达于前列腺和精囊腺血管内皮细胞胞膜和胞质;Western印迹显示AQP3、7、10~12在去势组大鼠前列腺、精囊组织中的表达分别较对照组和雄激素替代组显著降低(P0.05)。结论:去势大鼠前列腺液、精囊液分泌显著减少可能与前列腺、精囊组织AQP3、7、10~12的表达减少有关。     

性激素对良性前列腺增生组织二氢睾酮结合容量的影响

目的 探讨睾酮(T)、雌二醇(E2)、孕酮(Po)对良性前列腺增生(BPH)组织二氢睾酮(DHT)结合容量的影响作用以及与BPH发生发展的关系.方法 27例BPH组织取自耻骨上经膀胱前列腺摘除术,制备组织提取液,乙醚萃取去除提取液中内源性类固醇激素,加入3H-DHT测定DHT结合蛋白的结合容量,并以3H-DHT等量和10倍量的T、E2、Po竞争结合蛋白从而影响组织DHT结合容最,观察结合容量的变化,分析结合容量变化与BPH的关系.结果 BPH组织胞质单纯DHT结合容量为(0.0160±0.0031)nmol/g湿组织,等量T、E2、Po作用的DHT结合容量分别为(0.0107±0.0011)、(0.0093±0.0017)和(0.0145±0.0033)nmol/g湿组织,T、E2组结合容量低于单纯DHT组,差异均有统计学意义(P＜0.01).Po组DHT结合容量与单纯DHT组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).10倍量T、E2、Po作用的DHT结合容量分别为(0.0102±0.0014)、(0.0096±0.0006)和(0.0121±0.001 6)nmol/g湿组织,低于单纯DHT组,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 BPH组织胞质有很高的DHT结合容量,T、E2、Po可以影响结合容量,继而作用于BPH的发生和发展过程.     

化痰祛湿方对肥胖少弱精子症大鼠模型脂代谢及精子质量的影响

目的:探究化痰祛湿方(HTQSD)对肥胖少弱精子症大鼠脂代谢与精子质量的干预作用及可能机制。方法:8周龄Wistar雄性大鼠,按照体重随机区组法分为空白组,模型组,五子衍宗丸(WZYZP)组,化痰祛湿方(HTQSD)高、中、低剂量组,每组16只。空白组给予普通饲料,其余各组大鼠给予高脂饲料喂养8周。在饲喂相应饲料的同时,空白组及模型组灌胃相同体积生理盐水,WZYZP组给予五子衍宗丸(1.07 g/kg),其余各组给予化痰祛湿方高、中、低剂量(26.25、13.125、6.5625 g/kg),灌药体积均为1 ml/100 g。于实验周期的第1、4、8周末测量各组大鼠的体重,第4、8周末检测血清TG、TC、HDL-C、LDL-C,肝脏、睾丸系数及精子活率和浓度,第8周检测血血红素氧合酶1(HO-1)mRNA表达水平。结果:造模及干预的第8周,与空白组相比,模型组大鼠体重显著增加[(523.1±25.54) g vs(451.50±27.53) g,P0.01],血清TG、TC、LDL-C显著升高[(8.58±0.39)nmol/L vs(2.18±0.28)nmol/L,(4.41±1.44)nmol/L vs(1.68±0.18)nmol/L,(2.06±0.17)nmol/L vs(0.48±0.57)nmol/L,P0.01],血清HDL-C、精子活率、精子浓度、HO-1 mRNA表达显著降低[(27.92±0.40)nmol/L vs(57.47±1.52) nmol/L,(11.31±4.87)%vs(39.66±2.77)%,(31.07±10.52)×10~6/ml vs(65.37±6.30)×10~6/ml, 0.16±0.03 vs 1.06±0.20,P0.01]。与模型组相比,HTQSD中剂量组体重显著下降[(445.13±34.19) g vs(523.1±25.54) g,P0.00],血清TG、TC、LDL-C水平显著降低[(2.05±0.27)nmol/L vs(8.58±0.39) nmol/L,(1.63±0.21) nmol/L vs(4.41±1.44) nmol/L,(0.45±0.07) nmol/L vs(2.06±0.17)nmol/L,P0.01],血清HDL-C、精子活率、精子浓度显著升高[(48.35±3.63) nmol/L vs(27.92±0.40) nmol/L,(32.84±6.22)%vs(11.31±4.877)%,(46.90±6.39)×10~6/ml vs(31.07±10.52)×10~6/ml,P0.01或P0.05],HTQSD低剂量组HO-1 mRNA表达显著增加(0.76±0.13 vs 0.16±0.03,P0.01)。结论:化痰祛湿方可以预防性调节大鼠的血脂,并且其可能通过改善血清中相关的抗氧化物,减轻氧化应激程度,改善少弱精子症大鼠精液质量。     

前列腺增生组织双氢睾酮结合容量的研究

目的 探讨组织双氢睾酮(DHT)结合能力在良性前列腺增生(BPH)病因中的作用。方法32例BPH患者的前列腺组织取自耻骨上经膀胱前列腺摘除术,制备组织胞浆、胞核提取液,以乙醚萃取的方法去除提取液中所有的内源性类固醇激素,加入3H-DHT测定结合的3H -DHT的含量。结果 BPH组织中DHT结合蛋白的总DHT结合容量均数约为0.024nmol/g湿组织,胞浆、胞核DHT结合容量分别为(0.01280.0020)nmol/g湿组织和(0.01120.0059)nmol/g湿组织,两者比较差异无显著性(P>0.05)。结论 BPH组织中的DHT结合蛋白具有较高的DHT结合容量,维持局部DHT 的高浓度,有利于DHT在前列腺组织增生过程中的作用。     

参精固本丸对大鼠睾丸氧化应激损伤后生精功能的修复

目的:探讨补肾活血中药参精固本丸对氯化镉造模的氧化应激损伤大鼠睾丸、附睾、精子的抗氧化及生精功能修复作用。方法:将SPF级Wistar大鼠随机分为6组,每组12只,分别为正常对照组、模型对照组、五子衍宗丸组、参精固本丸高剂量组、参精固本丸中剂量组、参精固本丸低剂量组。除正常对照组外,各组腹腔注射氯化镉1 mg/kg,24 h后各组分别灌胃给药,每天1次,共给药56 d。模型对照组和正常对照组予等体积生理盐水灌胃,参精固本丸高、中、低剂量组分别予以8倍等效剂量(11.2 g/kg)、4倍等效剂量(5.6 g/kg)、2倍等效剂量(2.8 g/kg)参精固本丸溶液灌胃,五子衍宗丸组予以4倍等效剂量(4.5 g/kg)五子衍宗丸溶液灌胃。56 d后,处死实验动物,分别称取大鼠精囊、附睾、睾丸的质量并计算相应脏器系数,大鼠睾丸、附睾、精囊行病理组织学检测。留取附睾内精液,测定大鼠附睾精子浓度、活力、正常形态精子百分率。同时测定大鼠睾丸组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,血清睾酮(T)水平。结果:①参精固本丸高、中、低剂量组睾丸系数分别为(0.403±0.090)、(0.357±0.150)、(0.348±0.140)g/100 g,精囊系数分别为(0.347±0.115)、(0.336±0.090)、(0.320±0.065)g/100 g,高剂量组附睾系数为(0.156±0.030)g/100 g,均显著高于模型对照组[(0.237±0.098)、(0.241±0.118)、(0.099±0.088)g/100 g](P0.05或P0.01);②高、中、低剂量组精子浓度分别为(58.1±32.2)、(36.0±36.2)、(31.9±32.7)×10~6/ml,显著高于模型对照组[(10.5±17.7)×10~6/ml](P0.05或P0.01);高、中剂量组精子总活力分别为(26.5±15.5)%、(18.9±8.2)%,高、中剂量组正常形态精子百分率分别为(85.3±23.3)%、(65.8±28.1)%,均显著高于模型对照组[(9.5±13.0)%、(36.2±40.2)%](P0.05或P0.01);③参精固本丸高、中剂量组睾丸的GSH-PX水平分别为(5.70±1.73)、(5.42±2.35) U/mg prot,SOD水平分别为(52.7±14.6)、(51.3±14.7) U/mg prot,均显著高于模型对照组[(3.62±2.22)、(41.3±8.8)U/mgprot](P0.05或P0.01);高、中、低剂量组睾丸MDA水平分别为(0.41±0.29)、(0.44±0.19)、(0.47±0.20) nmol/mgprot,显著低于模型对照组[(0.69±0.28) nmol/mgprot](P0.05或P0.01);高、中、低剂量组大鼠血清T水平分别为(3.62±0.96)、(3.48±1.33)、(3.24±0.83)nmol/L,显著高于模型对照组[(2.56±0.75) nmol/L](P0.05或P0.01);④模型对照组全部生精小管均发生凝固性坏死并钙化,生精细胞及支持细胞消失,精囊管腔内分泌物减少,上皮乳头萎缩;附睾萎缩,管腔缩小,管腔内未见精子。与模型对照组相比,随着剂量增加,参精固本丸组具有生精功能的生精小管面积逐渐增加,精囊上皮恢复为高柱状,附睾管管腔逐渐增大,管腔内精子逐渐增多,疗效与剂量间有依从关系,参精固本丸高、中剂量组疗效明显好于五子衍宗丸组。结论:参精固本丸可以拮抗氧化应激损伤,提高实验大鼠睾丸抗氧化物酶、血清T水平、精液质量,修复睾丸、附睾、精囊组织病理损伤,改善生精功能。     

5α还原酶抑制剂对人前列腺组织中双氢睾酮的影响

目的 探讨5α还原酶抑制剂对人前列腺组织中双氢睾酮(DHT)浓度的影响.方法 121例良性前列腺增生(BPH)患者随机分6组:A1组(口服爱普歹U特1个月,18例)、A2组(口服爱普列特3个月,22例)、B1组(口服非那雄胺1个月,23例)、132组(口服非那雄胺3个月,21例)、C组(未服5α还原酶抑制剂,25例)、D组(尸检前列腺标本,12例).放射免疫法测定前列腺组织中DHT含量.结果 A1、A2、B1、B2、C、D组前列腺组织DHT平均浓度为(132±11)、(105±9)、(124±13)、(108±10)、(367±35)、(332±30)gg/L.A1、A2、B1、B2与C组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).A1、A2组问比较差异有统计学意义(P＜0.05).A1与B1组、Bl与B2组、A2与B2组、C与D组组间比较差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论服用爱普列特和非那雄胺可以明显降低前列腺组织中DHT水平,爱普列特对前列腺组织DHT水平下降作用具有持续性,爱普列特与非那雄胺在降低前列腺组织中DHT水平上能力基本相当.     

玄驹提取物抗良性前列腺增生作用研究

目的研究玄驹提取物对良性前列腺增生(BPH)的抑制作用及其潜在机制。方法将40只成年雄性SD大鼠随机分成对照组(Control)、模型组(Model)、非那雄胺组(Finasteride)、玄驹组(XJ)以及联用组(XJF),每组8只。对照组仅切开阴囊皮肤后缝合,皮下注射植物油作为对照,其余四组行去势手术后,皮下注射丙酸睾酮建立大鼠良性前列腺增生模型,对照组和模型组均给予灌生理盐水,非那雄胺组灌非那雄胺,玄驹组予以灌玄驹提取物,联用组灌非那雄胺加玄驹提取物,持续灌胃4周。4周后取大鼠前列腺组织,称重,计算前列腺指数(PI),通过苏木精和伊红(HE)染色观察前列腺组织病理形态变化,定量聚合酶链反应技术(q PCR)检测前列腺组织中Bax及Bcl-2基因的m RNA表达,并采用蛋白印迹法(WB)检测前列腺组织Bax及Bcl-2基因的蛋白表达。结果治疗4周后,非那雄胺组、玄驹组及联用组大鼠的PI值分别为(1.35±0.15)、(1.50±0.06)、(1.30±0.11),与模型组(1.81±0.15)相比,药物组PI值均明显下降(P0.05),且前列腺组织增生情况得到了明显改善;非那雄胺组、玄驹组及联用组大鼠的Bax/Bcl-2 m RNA表达比值分别为(1.19±0.72)、(1.00±0.30)、(1.38±0.21),Bax/Bcl-2蛋白表达比值分别为(0.90±0.18)、(0.72±0.13)、(0.92±0.08),而模型组Bax/Bcl-2 m RNA表达与蛋白表达比值分别为(0.81±0.14)、(0.60±0.06),药物组Bax/Bcl-2 m RNA表达及蛋白表达比值均较模型组显著增加(p0.05),且联用组上调更加明显(P0.01)。结论玄驹提取物可以有效抑制前列增生情况,并且与非那雄胺联用具有协同增效作用,其作用机制可能与调节前列腺组织内Bax/Bcl-2比例平衡有关。