TMPRSS4在结肠直肠癌中高表达并影响结肠癌细胞的增殖及迁移能力

目的:探讨TMPRSS4基因对结肠癌细胞增殖及迁移的影响。方法 :采用免疫组化方法检测结肠直肠癌组织和正常肠上皮中TMPRSS4的表达,并应用RT-PCR和Western印迹法检测结肠癌细胞株中TMPRSS4的表达,通过RNAi方法下调结肠癌细胞SW480中TMPRSS4的表达后,进一步采用CCK-8法、细胞划痕和transwell迁移试验检测细胞增殖、运动及迁移能力的改变。通过流式细胞仪检测TMPRSS4下调后对细胞凋亡的影响。结果:结肠直肠癌高表达TMPRSS4;肠癌细胞株SW480在mRNA及蛋白水平均高表达TMPRSS4。下调TMPRSS4能抑制SW480的增殖能力(P<0.05),并诱导细胞凋亡增加(P<0.05)。此外,下调TMPRSS4降低SW480细胞的迁移能力(P<0.05)。结论:在高表达细胞株中下调TMPRSS4有助于抑制肠癌细胞增殖,增加细胞凋亡并降低细胞的迁移能力。     

蓝莓花青素对HepG2细胞凋亡及组蛋白乙酰化修饰的影响

目的:探讨蓝莓花青素对人肝癌HepG2细胞凋亡及组蛋白乙酰化修饰的影响。方法:从贵州麻江蓝莓中提取花青素,用高效液相色谱法检测花青素的含量并鉴定。观察蓝莓花青素孵育后,HepG2细胞的形态变化、细胞增殖与凋亡情况,以及细胞组蛋白H3K9、H3K14、H3K18、H3K27乙酰化修饰的情况。结果:与无处理的对照组HepG2细胞比较,不同浓度蓝莓花青素(50、100、150、200、300μg/mL)处理HepG2细胞48 h后,HepG2细胞体积明显缩小,细胞增殖明显抑制(均P0.05),凋亡明显增加,且作用呈随浓度增加而增强;不同浓度蓝莓花青素(50、100、200μg/mL)孵育48 h后,HepG2细胞组蛋白H3K9、H3K14、H3K18、H3K27乙酰化修饰明显增加(均P0.05),且呈浓度依赖性。结论:蓝莓中花青素对HepG2有抑制增殖的作用,其机制可能通过增加组蛋白乙酰化修饰而促进细胞凋亡有关。     

长链非编码RNA MLK7-AS1在结肠癌中的表达及其对结肠癌细胞增殖的影响

背景与目的:长链非编码RNA(lncRNA)MLK7-AS1是一种新发现的与多种肿瘤发生发展密切相关的lncRNA,但其在结肠癌中的表达及其作用尚未见报道。因此,本研究旨在探讨lncRNA MLK7-AS1在结肠癌中的表达以及其对结肠癌细胞生物学行为的影响。方法:用qRT-PCR检测lncRNA MLK7-AS1在21对结肠癌组织与相对应的癌旁组织手术标本以及在不同结肠癌细胞系(SW480、HCT116、SW620、DLD1、HT29、LOVO)与正常结肠上皮细胞(NCM460)中的表达。将结肠癌细胞转染lncRNA MLK7-AS1过表达质粒后,分别用MTS、平板克隆试验、流式细胞术、Western blot及qRT-PCR分别检测细胞活力、克隆形成能力、细胞周期以及细胞周期相关蛋白表达水平的变化。结果:lncRNA MLK7-AS1在结肠癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常组织;在各结肠癌细胞株中表达水平明显高于正常结肠上皮细胞(均P<0.05)。将lncRNA MLK7-AS1表达量相对较低的SW480与HCT116转染lncRNA MLK7-AS1过表达质粒后,两种细胞的细胞活力和克隆形成能力均显著增强(均P<0.05);G1期细胞比例明显减少,S期细胞比例明显增加(均P<0.05);细胞周期相关蛋白cyclin D1和CDK6的表达水平均明显上升(均P<0.05)。结论:lncRNA MLK7-AS1在结肠癌中高表达,其高表达可以促进结肠癌细胞增殖,其机制可能与上调细胞周期相关蛋白cyclin D1及CDK6表达有关。     

BMI-1和MMP-9在结肠癌细胞中的表达及意义

目的探讨BMI-1mRNA和MMP-9mRNA在结肠癌细胞中的表达及其意义。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测结肠癌细胞和人正常结肠平滑肌细胞中BMI-1mRNA和MMP-9mRNA的表达,分析二者的关系。结果在结肠癌SW620和LoVo细胞株中,BMI-1mRNA的表达量明显高于结肠癌细胞株SW480细胞和人正常结肠平滑肌细胞(P0.05);SW620和LoVo结肠癌细胞中MMP-9mRNA的表达亦明显高于SW480细胞和人正常结肠平滑肌细胞(P0.05)。在结肠癌细胞中BMI-1mRNA的表达与MMP-9mRNA的表达呈正相关(r=0.966,P0.05)。结论作为原癌基因,BMI-1可用作反映结肠癌细胞侵袭力的生物学指标。     

lncRNA TP53TG1在结肠癌中的表达及通过mi R-18a/CDC42轴对癌细胞发展的影响

目的:探讨lncRNA TP53TG1通过miR-18a/CDC42轴对SW620细胞发展的影响。方法:分析结肠癌组织、癌旁组织、SW620、NCM460细胞中lncRNA TP53TG1、miR-18a和CDC42的表达。检测下调TP53TG1对细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。采用生物信息学miRanda分析LncRNA TP53TG1作用靶点,检测TP53TG1和miR-18a的相关性。检测下调miR-18a或上调LncRNATP53TG1通过miR-18a对细胞增殖、侵袭和EMT的影响。TargetScan分析miR-18a靶点,检测miR-18a和CDC42之间的关系。分析CDC42 siRNA对细胞增殖、侵袭和EMT的影响。结果:和癌旁正常组织相比,结肠癌组织中lncRNA TP53TG1和CDC42表达上调,miR-18a表达下调;和NCM460细胞相比,SW620细胞中lncRNA TP53TG1和CDC42表达上调,miR-18a表达下调。lncRNA TP53 TG1 siRNA或CDC42 siRNA抑制细胞增殖、侵袭与EMT;lncRNA TP53T...     

辣椒素诱导HSP27高表达结肠癌SW480细胞凋亡机制

目的:探讨辣椒素诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的分子机制。方法:不同浓度辣椒素处理SW480细胞,CCK-8细胞计数试剂盒法检测生长抑制作用,流式细胞术检测早期凋亡,RT-PCR和Western blot方法检测细胞HSP27、casepase-3、casepase-9 mRNA及蛋白水平表达。结果:辣椒素可显著抑制SW480细胞生长,作用呈时间、剂量依赖性,并可促进细胞早期凋亡,下调HSP27、上调casepase-3、casepase-9 mRNA和蛋白水平的表达。结论:辣椒素可通过下调SW480细胞HSP27表达、上调casepase-3及casepase-9表达,而起到诱导细胞凋亡、抑制细胞生长的肿瘤抑制作用。     

钙黏蛋白12在结肠癌细胞株与结肠直肠癌组织中的表达及其影响

目的：研究钙黏蛋白12（cadherin-12,CDH-12）在结肠癌细胞株与结肠直肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞株增殖、侵袭、迁移的影响。方法：应用实时PCR和Western印迹法在7株结肠癌细胞株中筛选CDH-12高表达细胞株;shRNA瞬转干扰高表达细胞株SW1116,Western印迹法验证干扰效果;CCK-8检测癌细胞增殖活性变化;transwell实验验证癌细胞迁移、侵袭能力的变化;组织芯片免疫组织化学技术检测CDH-12在结肠直肠癌组织中的表达。结果：实时PCR和Western印迹结果显示CDH-12在细胞株中表达,SW1116和LoVo两个细胞株高表达CDH-12,在成功下调SW1116细胞中CDH-12表达之后,SW1116结肠癌细胞株的增殖、迁移、侵袭能力较对照组明显下降;免疫组化染色结果显示,CDH-12在结肠直肠癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织中的表达。结论：CDH-12在结肠直肠癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,证实了CDH-12为癌基因的可能性;下调CDH-12在结肠癌细胞株SW1116的表达可明显抑制细胞的增殖、迁移、侵袭能力,显示其在肿瘤细胞生长和转移中的重要作用。     

TXNDC9在结肠直肠癌组织中的表达及其影响

目的:探讨TXNDC9基因在结肠直肠癌组织和细胞中的表达,以及沉默TXNDC9高表达后对细胞株SW1116增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法:分别应用免疫组织化学技术、免疫印迹法观察TXNDC9在结肠直肠癌组织和细胞中的表达水平:应用小干扰RNA瞬时转染TXNDC9高表达的结肠癌细胞株SW1116,用实时PCR筛选最高效率的干扰片段,并用Western印迹法检测基因沉默效果:最后研究瞬时转染后SW1116细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果:结肠直肠癌组织中TXNDC9的表达明显高于对照的癌旁正常组织(P<0.01),细胞迁移和侵袭能力亦有明显下降(P<0.01)。结论:TXNDC9在结肠直肠癌组织中的表达显著高于癌旁正常黏膜上皮,并与肿瘤的大小和浸润深度相关,SW1116是TXNDC9基因高表达的细胞株之一,下调TXNDC9表达能显著抑制该细胞的增殖能力、细胞迁移和侵袭能力。TXNDC9基因对维持肿瘤细胞的增殖和运动能力有重要作用,并可能成为抑制肿瘤生长和转移的有效途径。     

YB-1蛋白在结肠癌组织中的表达部位及意义

目的：探索YB-1蛋白在结肠癌组织、正常结肠组织、结肠癌细胞株、正常结肠细胞株中的表达量及其与结肠癌患者临床病理的关系。方法：采用免疫组化检测YB-1蛋白在103例结肠癌组织及相应癌旁组织、30例正常结肠组织中的表达情况;采用Western blot法检测核移位YB-1蛋白在结肠癌组织、相应癌旁组织、正常结肠组织、人结肠腺癌细胞株LS-174T、正常细胞株SW480中的表达。结果：免疫组化结果显示YB-1蛋白主要表达于癌细胞胞浆,其阳性率为（75.73%,78/103）,明显高于癌旁组织（37.86%,39/103）及正常组织（30%,9/30）,其差异有统计学意义（P＜0.05）。其中37例（35.92%,37/103）结肠癌组织伴有明显核阳性表达,且核阳性表达与结肠癌肿瘤直径大小、有无淋巴结转移、有无远处转移或直接侵犯及癌细胞分化程度相关（P＜0.05）。Western blot检测同样证实核移位YB-1蛋白在结肠癌组织中（0.382±0.095）明显高于癌旁组织（0.251±0.043）及正常结肠组织（0.238±0.045）,其差异有统计学意义（F=21.268,P＜0.05）。核移位YB-1蛋白在LS-174T中的表达（0.548±0.031）明显高于SW480（0.269±0.017）,其差异有明显统计学意义（F=64.273,P＜0.05）。结论：YB-1蛋白量的变化与核转移及结肠癌细胞的增殖分化密切相关,有可能成为结肠癌治疗的新靶点。     

脆性组氨酸三联体基因转染对人结肠癌细胞株SW480奥沙利铂敏感性的影响

目的 观察脆性组氨酸三联体基因(FHIT)转染对人结肠癌细胞株SW480奥沙利铂敏感性的影响.方法 将重组真核表达质粒pRc/CMV2-FHIT通过脂质体转染技术导入人结肠癌细胞株SW480,筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染了空质粒pRc/CMV2的SW480细胞(SW480-pRc/CMV2)和正常SW480细胞为对照.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测FHIT基因的mRNA转录水平.以奥沙利铂作用于3组细胞,用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞的生长抑制率,用流式细胞仪检测奥沙利铂处理前后各组结肠癌细胞的凋亡率及细胞周期的变化.结果 SW480-FHIT细胞的RT-PCR产物经凝胶电泳有明显的阳性条带,而对照组则无;经奥沙利铂处理后,转染FHIT基因的SW480细胞的凋亡水平与空质粒转染组及结肠癌细胞株组比较明显增高(第2、3、4天A值比较P<0.05),并且FHIT基因与奥沙利铂有轻度的协同促进凋亡作用;同时奥沙利铂处理前后实验组结肠癌细胞的生长周期较对照组均出现了明显的G_0/G_1期阻滞,且细胞的生长抑制率存在浓度和时间依赖性.结论 外源性FHIT基因表达与奥沙利铂协同促进SW480细胞凋亡及细胞周期阻滞,FHIT基因可增加结肠癌细胞对奥沙利铂的敏感性.     

C/EBPα在结肠直肠癌的表达及对癌细胞的作用

目的:检测C/EBPα在结肠直肠癌中的表达情况,探讨下调C/EBPα表达对结肠癌细胞增殖、凋亡以及细胞周期的影响。方法:利用RT-PCR和免疫组织化学技术检测C/EBPα在结肠直肠癌组织及相邻正常组织中的表达,分析C/EBPα表达与临床病理特征的关系。用Western印迹法筛选C/EBPα,发现SW620为高表达C/EBPα肠癌细胞株。通过RNA干扰技术下调结肠癌细胞株SW620中C/EBPα表达后,利用CCK8和流式分析技术检测SW620细胞增殖、凋亡和细胞周期的变化。结果:C/EBPα在结肠直肠癌组织中高表达,且与肿瘤浸润深度有关(P<0.05),促进SW620细胞凋亡(P     

Wnt通路激活的结直肠癌细胞抑制肿瘤浸润性树突细胞成熟的机制研究

［摘要］ 目的 大部分肠癌存在Wnt通路激活,基础研究发现Wnt通路可影响肿瘤免疫,但其在结肠癌中的作用不明。本研究主要探讨Wnt通路激活对结肠癌免疫微环境的影响以期发现结直肠癌免疫治疗新靶点。方法 免疫荧光技术验证SW480和NCM460 Wnt通路状态;qPCR和Western blot技术对比Wnt通路激活的结肠癌细胞系SW480和正常肠上皮细胞NCM460 IL?1β表达水平的不同;分离人外周血单核细胞,用集落刺激因子（GM?CSF）和IL?4联合诱导形成未成熟树突细胞（iDC）,再加入IL?1β刺激诱导成熟树突细胞（mDC）,用流式细胞技术检测mDC细胞表面成熟分子表达量。结果 SW480细胞核表达beta?catenin,提示Wnt通路激活。使用Wnt通路抑制剂（ICG?001）处理SW480后IL?1β mRNA和蛋白表达水平均升高,且随浓度升高而升高,使用wnt通路激活剂（Licl）处理NCM460后IL?1βmRNA和蛋白表达水平均低于对照组,且随浓度升高而降低,且IL?1β蛋白表达量均与非磷酸化β?连环蛋白（active β?catenin）表达量呈负相关关系。IL?1β可促进iDC成熟,IL?1β 50 ng/mL组HLA?DR、CD86表达率分别为（69±3.62）%、（84.3±4.7）%,与RPMI组及TNF?a 10 ng/mL组相比,表达显著上调（P<0.001）。结论 Wnt通路激活的结直肠癌可能通过减少IL?1β的表达来阻碍肿瘤微环境中DC的成熟。     

胰岛素样生长因子1对结肠癌细胞凋亡的影响及其机制研究

目的研究胰岛素样生长因子1(IGF-I)通过磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI-3K/Akt)信号通路对结肠癌细胞株SW480凋亡率的影响及凋亡抑制蛋白survivin表达水平的变化。方法在培养结肠癌SW480细胞株时,采用不同浓度的IGF-I不同时间作用于SW480细胞,然后采用Western blot检测凋亡抑制蛋白survivin表达变化。100 ng/mL IGF-I作用于SW480细胞2 h内,Westernblot检测Akt的磷酸化表达变化;Akt特异性抑制剂LY294002处理前后,利用Western blot检测Akt磷酸化表达的变化,Western blot及细胞免疫荧光检测survivin表达的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率的改变。结果IGF-I能上调SW480细胞的survivin表达,且其表达水平与IGF-I的作用时间、浓度呈依赖性(IGF-I作用SW480细胞不同时间后,survivin蛋白表达显著升高,并在12 h时达到峰值,所有实验组survivin蛋白的表达均显著高于对照组;IGF-I浓度为100 ng/mL时,survivin蛋白的表达达到顶峰);IGF-I快速激活SW480细胞中PI-3K/Akt信号通路(IGF-I作用SW480细胞15,30 min后,p-Akt蛋白的表达达到高峰);IGF-I能通过PI-3K/Akt信号通路上调SW480细胞survivin的表达;IGF-I能通过PI-3K/Akt信号通路抑制SW480细胞凋亡[利用流式细胞术检测空白组、刺激组、阻断组各组SW480细胞的凋亡率,分别为(5.18±0.415)%,(0.85±0.052)%,(3.15±0.411)%,各组之间差异有统计学意义(P0.05)]。结论IGF-I可通过PI-3K/Akt通路诱导survivin表达,从而抑制结肠癌细胞SW480的凋亡。     

Wnt通路激活的结直肠癌细胞抑制肿瘤浸润性树突细胞成熟的机制研究

目的大部分肠癌存在Wnt通路激活,基础研究发现Wnt通路可影响肿瘤免疫,但其在结肠癌中的作用不明。本研究主要探讨Wnt通路激活对结肠癌免疫微环境的影响以期发现结直肠癌免疫治疗新靶点。方法免疫荧光技术验证SW480和NCM460 Wnt通路状态;qPCR和Western blot技术对比Wnt通路激活的结肠癌细胞系SW480和正常肠上皮细胞NCM460 IL-1β表达水平的不同;分离人外周血单核细胞,用集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4联合诱导形成未成熟树突细胞(i DC),再加入IL-1β刺激诱导成熟树突细胞(mDC),用流式细胞技术检测m DC细胞表面成熟分子表达量。结果 SW480细胞核表达beta-catenin,提示Wnt通路激活。使用Wnt通路抑制剂(ICG-001)处理SW480后IL-1βmRNA和蛋白表达水平均升高,且随浓度升高而升高,使用wnt通路激活剂(Licl)处理NCM460后IL-1βmRNA和蛋白表达水平均低于对照组,且随浓度升高而降低,且IL-1β蛋白表达量均与非磷酸化β-连环蛋白(activeβ-catenin)表达量呈负相关关系。IL-1β可促进iDC成熟,IL-1β50 ng/mL组HLA-DR、CD86表达率分别为(69±3.62)%、(84.3±4.7)%,与RPMI组及TNF-a 10 ng/mL组相比,表达显著上调(P0.001)。结论 Wnt通路激活的结直肠癌可能通过减少IL-1β的表达来阻碍肿瘤微环境中DC的成熟。     

姜黄素对结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响及作用机制

目的:探讨姜黄素对结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响及其作用机制。方法:体外培养人结肠癌SW480细胞株、人结肠癌SW620细胞株至对数生长期，选用不同浓度的姜黄素分别处理两种结肠癌细胞，采用MTT、克隆、流式细胞术、Transwell、Western blot等实验观察姜黄素对结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移等生物学作用的影响。结果:MTT实验和克隆实验结果表明姜黄素能够抑制结肠癌细胞的增殖，流式细胞术实验结果表明姜黄素可诱导结肠癌细胞的凋亡，Transwell实验结果表明姜黄素能够抑制结肠癌细胞的迁移和侵袭，Western blot实验结果表明姜黄素可抑制P13K/AKT信号通路。结论:姜黄素可显著抑制结肠癌细胞增殖、侵袭、迁移，诱导结肠癌细胞凋亡，其机制可能与抑制P13K/AKT信号通路有关。     

PPIB蛋白对结肠癌成瘤的影响和低氧机制

目的:研究肽酰脯氨基顺反异构酶B(peptidyl-prolyl cis-trans isomerase,PPIB)蛋白对结肠癌细胞成瘤的影响,探讨结肠癌低氧发病的机制。方法:应用RNAi技术,构建下调PPIB蛋白表达的稳转结肠癌细胞株,移植到BALB/c裸鼠皮下,检测PPIB蛋白下调组与对照组的成瘤差异。TUNEL法检测两组移植瘤的细胞凋亡水平。低氧培养结肠癌细胞株,Western印迹法检测PPIB的表达水平与低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的关系。结果:下调PPIB蛋白表达后,在裸鼠皮下成瘤的能力显著减弱。SW480-si PPIB下调组的移植瘤体积显著小于SW480-NC对照组(P<0.01)。TUNEL检测显示下调组的癌细胞凋亡比例显著高于对照组(P<0.001)。在低氧环境下培养后,结肠癌细胞的PPIB蛋白表达水平随着低氧条件下HIF-1α的上调而升高(P<0.05)。结论:PPIB蛋白在结肠癌中因为低氧环境而表达升高,且在升高后通过抑制癌细胞的凋亡而发挥促进结肠癌形成和进展的作用,是一个极具临床应用价值的防治结肠癌的分子靶点。     

母系印迹表达基因3在结直肠癌组织中表达及其与血管生成的关系

目的:探讨结直肠癌组织中长链非编码RNA母系印迹表达基因3(MEG3)的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法:用RT-PCR法检测42例结直肠癌患者癌组织与对应的癌旁组织标本,以及人结肠癌SW48细胞与人正常结肠NCM460细胞中MEG3表达,分析MEG3表达与患者临床病理因素的关系;免疫组化法检测上述组织标本中血管内皮生长因子(VEGF)的表达及血管密度,分析VEGF表达、血管密度与MEG3表达的相关性。结果:MEG3相对表达量在结直肠癌组织明显低于癌旁组织(0.12 vs.1.00,P=0.003),在SW48细胞中明显低于NCM460细胞(0.15 vs.1.00,P=0.007);MEG3的相对表达量与患者肿瘤位置、浸润深度、分化程度和淋巴结转移无明显关系(均P0.05)。结直肠癌组织中,VEGF表达与血管密度均明显高于癌旁组织(0.13 vs.0.09;50.34 vs.36.57,均P0.05);MEG3表达水平和VEGF表达水平及血管密度均呈负相关(r=-0.304、-0.342,均P0.05)。VEGF是MEG3表达水平的独立影响因素(P=0.005)。结论:结直肠癌组织中MEG3表达降低,从而可能促进肿瘤组织VEGF表达量与血管生成。     

转录因子E2F-3靶向FOSB对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探究转录因子E2F-3对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法在体外培养人的结直肠癌细胞系RKO、SW480、DLD1、LOVO和人的结肠正常上皮细胞NCM460, 并用反转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测结肠上皮细胞NCM460和结直肠癌细胞SW480、RKO、DLD1、LOVO中E2F-3的转录水平。分别将E2F-3的siRNA-E2F3和siRNA-NC阴性对照转染于细胞系RKO中, 设为实验组(si-E2F3)与阴性对照组(NC)。采用平板克隆实验细胞与细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活性。Transwell迁移和侵袭实验与细胞划痕实验用来检测细胞的迁移及侵袭能力。RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)分别可以检测E2F-3靶向蛋白FOSB的表达水平。两样本间对比采取t检验, 多组间差异采用单因素方差分析。结果 miR-210-3p在结直肠癌细胞系中表达均高于人正常结肠上皮细胞, 其中以RKO中升高最为明显, 相较NC[(2.349±0.095)倍比(1.000±0.013)倍, t=65.82, P<0.01], 差异有统...     

细胞密度对结肠癌细胞整合素αγβ6表达和基质金属蛋白酶9分泌的影响

目的 探讨细胞密度对结肠癌细胞整合素αγβ6表达和基质会属蛋白酶9(MMP-9)分泌的影响. 方法用流式细胞仪榆测结肠癌细胞系WiDr和人正常角质细胞系HaCaT细胞株在高、低细胞密度培养条件下αγβ6表达的情况;用Biotrak MMP-9测定仪和明胶酶谱法分别测定不同的结肠癌细胞WiDr和SW480细胞株在高、低密度培养条件下MMP-9的活性和分泌水平. 结果表达αγβ6的结肠癌WiDr细胞出现细胞密度依赖的αγβ6表达增加,而正常角质细胞系HaCaT细胞在高、低密度培养条件下αγβ6表达无改变.Biotrak MMP-9活性分析显示,每个表达αγβ6的WiDr细胞和SW480β6细胞的MMP-9分泌量在高密度培养条件下分别是(3.3±1.2)×10-7-ng和(27.2±3.0)×10-7ng,在低密度培养条件下分别足(1.8±0.7)×10-7ng和(10.9±2.0)×10-7ng,而每个缺乏αγβ6表达的SW480 wild细胞在高、低细胞密度培养条件下分别足(3.9±1.7)×10-7ng和(3.8±0.7)×10-7ng,MMP-9分泌水平无明显变化(t=0.47,P＞0.05).明胶酶谱分析显示SW480 β6细胞的MMP-9活性水平在高密度培养时比低密度培养明显增加,而SW480 wild和HaCaT细胞的MMP-9活性水平无明显改变.结论 细胞高密度诱导结肠癌细胞αγβ6表达,促进MMP-9的分泌,构成了癌细胞永生化侵袭浸润性生长的基础.     

生长抑素施他宁对结肠癌SW480细胞生长抑制和凋亡作用的实验研究

目的:探讨应用生长抑素类似物施他宁对人结肠癌细胞株SW480细胞的生长抑制和凋亡作用,及细胞周期的影响.方法:采用MTT比色法测定不同浓度施他宁对SW480细胞增殖的抑制作用;漉式细胞仪洲定SW480细胞细胞周期分布、增殖指教、凋亡率.结果:生长抑素施他宁能够明显抑制人结肺癌细胞株SW480细胞增殖(P<0.01),且呈浓度和时间依赖性(P<0.01,P<0.01).结论:生长抑素施他宁可押制人结肠癌细胞株SW480的生长;生长抑素可能通过押制G1/G2期SW480细胞进入S期及促进细胞凋亡两种途径抑制人结肠癌细胞株SW480增殖,影响其凋亡.