芪蓝颗粒对SD大鼠舌黏膜癌变过程中EGFR变化的影响

目的：探讨中药芪蓝颗粒阻癌抑癌的作用机制。方法：SD大鼠150只,随机分为A、B、C、D、E共5组,A、B、C、D组用0.002%4NQO制备大鼠舌癌变模型,其中B、C、D组在制备模型的同时,用不同剂量芪蓝颗粒进行干预,A组为模型对照组,E组为正常对照组。各组于中药干预的9、18、27、36周时分别处死7只动物,取舌组织光镜下观察其病理变化,采用免疫组化技术检测各组表皮生长因子受体（EGFR）的表达。结果：A组总体癌变率39.29%,明显高于B、C、D组（P〈0.05）。A组中EGFR的表达从正常口腔黏膜→各级异型增生→癌变,其阳性表达率呈递增趋势,差异有统计学意义（P〈0.01）。在大鼠异常增生舌组织中A组的EGFR阳性表达率为6/11明显高于B、C、D组,差异有统计学意义（P〈0.05）。在大鼠舌癌组织中进行中药干预组EGFR的阳性表达明显低于A组（P〈0.05）,差异有统计学意义（P〈0.05）。E组EGFR蛋白表达均为阴性。结论：芪蓝颗粒具有明显的抑癌阻癌效果,它可能通过下调细胞中EGFR的表达水平,起到抑癌阻癌的作用。     

芪蓝颗粒对大鼠舌黏膜癌变模型淋巴细胞亚群的影响

目的：观察芪蓝颗粒对大鼠舌黏膜癌变模型淋巴细胞亚群的影响,并探讨其阻癌抑癌的免疫学机制。方法：SD大鼠150只,随机分为五组（A、B、C、D、E组）,A、B、C、D组以4NQO饮水喂养诱导大鼠舌黏膜癌变,A组不作干预,作为阳性对照;B、C、D组分别给予不同剂量的芪蓝颗粒干预癌变过程,9、18、27、36周取舌标本进行组织病理学观察,并取新鲜全血,流式细胞术检测各样本全血中CD3^＋细胞、CD4^＋T细胞、CD8＋T细胞的百分比,CD4/CD8比值及NK细胞。E组作为正常对照组。结果：多元方差分析表明,各组及各病理分级的CD3^＋细胞、CD4^＋T细胞百分比存在显著性差异（P〈0.05）。组间比较,芪蓝颗粒干预组的CD3^＋、CD4^＋水平介于正常组与癌变模型组之间,统计表明：E组〉C组〉A组（P〈0.05）。结论：芪蓝颗粒有阻癌抑癌作用,能降低致癌剂对机体免疫系统的影响,稳定CD3细胞水平,主要是通过稳定CD4^＋辅助性T细胞的水平,增强机体的防癌能力。     

芪蓝颗粒对大鼠舌黏膜癌变中Bcl-2及P53表达的影响

目的观察芪蓝颗粒对4-硝基喹啉-1-氧化物（4NQO）诱导的大鼠舌癌变的抑制及对Bcl-2蛋白、P53蛋白表达的影响。方法SD大鼠150只,随机分为癌变模型组,低、中、高剂量芪蓝颗粒干预组以及正常对照组,以4NQO饮水喂养诱导大鼠舌黏膜癌变,同时给予芪蓝颗粒干预癌变过程,取9、18、27、36周舌标本进行组织病理学观察,采用Polymer法检测大鼠舌组织中Bcl-2蛋白及P53蛋白的表达。结果芪蓝颗粒干预的各组大鼠的癌变率均低于癌变模型组（P〈0.05）。芪蓝颗粒干预各组及正常对照组中Bcl-2蛋白、P53蛋白的阳性表达明显低于癌变模型组（P〈0.01）。结论芪蓝颗粒可抑制口腔粘膜癌变,对细胞凋亡相关的Bcl-2蛋白和P53蛋白的调控可能是其抑癌机制之一。     

复方绞股蓝对金地鼠颊囊癌变过程中PCNA变化的影响

实验采用免疫组化技术,以增殖细胞核抗原(PCNA)为检测指标,对复方GP阻断金地鼠颊囊癌前病变的作用进行观察,发现复方GP能有效地降低PCNA阳性细胞标识率,与模型对照组相比,有显著性差别.说明复方GP通过抑制细胞异常增殖而发挥阻癌抑癌效果.     

四味中药及其配伍对大鼠舌癌变阻断作用的药效研究

目的：对中药有效成分绞股蓝甙（GP），黄芩甙（BC），丹参酚酸（SM），灯盏花素（EB）以及复方（黄芩甙＋灯盏花素）干预4NQO诱导的大鼠舌癌模型进行动态研究，评价其疗效。方法：在4NQO诱导的大鼠舌癌模型基础上，将150只大鼠随机分成8组（绞股蓝甙组，黄芩甙组，丹参酚酸组，灯盏花素组，黄芩甙＋灯盏花素1组，黄芩甙＋灯盏花素2组，正常对照组，癌变模型组），于12～16周分别处死动物，采用组织病理学方法和免疫组织化学方法（增殖细胞核抗原）检测组织标本，利用SAS统计软件进行数据处理，方差分析进行统计。结果：组织病理学结果显示：中药干预组的上皮异常增生程度明显低于模型组，特别是黄芩甙＋灯盏花素1组和黄芩甙组。免疫组织化学方法：增殖细胞核抗原（PCNA）中药干预组（黄芩甙＋灯盏花素1组、黄芩甙＋灯盏花素2组、BC组、EB组、SM组、GP组）与正常对照组之间增殖细胞阳性率的差别无统计学意义（P〉0．05）；癌变模型组与中药干预组（黄芩甙＋灯盏花素1组、黄芩甙＋灯盏花素2组、BC组、EB组、SM组、GP组）、正常对照组之间增殖细胞阳性率的差别均有统计学意义（P〈0．01），中药干预组间两两比较，增殖细胞阳性率的差别无统计学意义（尸〉0．05）；检测细胞凋亡率显示：经方差分析，各组间有统计学差别fF=5．07。P〈0．0001）。进一步用SNK法进行两两比较，癌变模型组和正常对照组以及中药干预组之间比较均有统计学差异。结论：黄芩甙＋灯盏花素1组能明显降低黏膜上皮异常增生发生率，能有效抑制细胞的过度增殖，有效诱导异常细胞的凋亡，对上皮轻度异常增生有明显的癌化学预防作用。     

4NQO诱导大鼠舌黏膜癌变过程中HSF1的表达及意义

目的：探讨热休克因子1（ HSF1）在4?硝基喹啉?1?氧化物（4NQO）饮水法诱导大鼠舌黏膜癌变过程中的表达及意义。方法：80只Wistar大鼠随机分两组,实验组用0．001％～0．004％4NQO递增性喂养大鼠8～28周,对照组则用普通自来水喂养,分别于8、16、20、24、28周处死大鼠,通过大体标本、HE染色观察大鼠舌部组织学改变,同时采用免疫组化染色方法观察HSF1在大鼠舌癌变全过程的表达情况。结果：随4NQO作用时间延长和浓度递增,大鼠舌背后部黏膜相继出现颗粒状、白色斑块、疣状突起、菜花状新生物和溃疡状改变。诱导后8、16、20、24、28周,舌癌的发生率分别为0、20．0％、50．0％、66．7％、100％。HSF1在对照组大鼠舌背黏膜上皮中不表达或者微弱表达,而在实验组大鼠随着舌黏膜异常增生程度的增加,HSF1表达明显增强;在原位癌中,HSF1弥漫分布于整个癌巢中;在舌黏膜浸润癌中HSF1在癌上皮中表达有所降低,而在癌基质成纤维细胞中HSF1表达增强。结论：4NQO饮水法可诱导大鼠舌黏膜发生癌变,成功建立大鼠舌癌模型,同时HSF1在大鼠舌癌发生、发展过程中发挥重要作用。     

复方绞股蓝对金地鼠颊囊部变过程的PCNA变化的影响

实验采用免疫组化技术，以增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）为检测指标，对复方ＧＰ阻断金地鼠颊囊癌前病变的作用进行观察，发现复方ＧＰ能有效地降低ＰＣＮＡ阳性细胞标识库，与模型对照相比，有显著性差别。说明复方ＧＰ通过抑制细胞异常增殖而发挥阻癌抑癌效果。     

核仁组织区在Wistar大鼠腭黏膜癌变过程中表达的变化

目的:研究Wistar大鼠腭黏膜癌变过程中核仁组织区(NOR)的变化及与癌变趋势的关系。方法:通过化学诱导法建立大鼠口腔癌模型,采用银染核仁组织区法对7例正常黏膜和63例不同癌变发展阶段黏膜细胞的增殖状态进行检测。结果:随着异常增生程度和组织病理学分级的增加,AgNOR颗粒计数逐渐增多。单纯性增生、异常增生、原位癌、浸润性鳞癌与正常黏膜相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AgNOR的表达在口腔黏膜癌变过程中逐渐增强。     

口腔粘膜上皮癌前及癌变中PCNA和P53的表达

目的：检测口腔粘膜上皮癌前及癌变组织中ＰＣＮＡ和ｐ５３的表达，探讨口腔癌变的机理。方法：采用免疫组化的方法检测８０例口腔粘膜病变组织中ＰＣＮＡ和ｐ５３的表达。结果：正常口腔粘膜基底层有少数ＰＣＮＡ阳性细胞，随着粘膜异常增生程度的加重到鳞癌，ＰＣＡＮ表达的阳性分级升高，ＰＣＮＡ的相对含量也升高。Ｐ５３的阳性表达仅见于重度异常增生及鳞癌组织中。结论：对ＰＣＮＡ和ｐ５３的研究有助于探讨口腔粘膜癌变多阶段发生过程的机理，并可为监测癌变提供生物学指标。     

实验性口腔癌发生过程中增殖细胞核抗原表达的研究

目的：利用金黄地鼠颊癌模型,探讨口腔癌发生过程中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达变化及其规律。方法：０．５％二甲基苯并蒽（ＤＭＢＡ）丙酮液处理地鼠颊粘膜,每周３次,３、６、９和１２周分批处死动物;对照组不处理。利用抗ＰＣＮＡ单克隆抗体,免疫组化方法（ＬＳＡＢ）检测ＰＣＮＡ的表达情况。结果：正常地鼠颊粘膜ＰＣＮＡ表达主要位于基底层和少数棘层细胞,３周单纯增生类似正常,６～９周上皮呈不同程度异常增生,ＰＣＮＡ表达扩展至棘层,甚至全层,与异常增生程度呈正相关;１２周鳞癌形成时,ＰＣＮＡ表达明显增加,且见明显异质性。结论：ＤＭＢＡ诱导地鼠颊癌发生过程中存在ＰＣＮＡ异常表达,且与癌变进展有关,提示ＰＣＮＡ表达可作为口腔癌变监测的生物学标志之一。     

金地鼠致癌模型PCNA,BrdU核标记观察结果相关分析

癌变的早期诊断对提高疗效具有特殊意义。为寻求简捷、高效、超前、可靠的诊断口腔粘膜癌前病变的方法，实验以DMBA（二甲基苯并蒽）诱导的金地鼠颊囊致癌模型为对象，采用PCNA（增殖细胞核抗原）、BrdU（溴脱氧尿嘧啶）核标记技术手段检测颊囊粘膜组织，并与经典的光镜观察诊断作对照。对三种观察结果行相关分析，发现三者间有高度显著的相关性，证实免疫组化方法在癌变诊断中的实用价值。实验还发现PCNA和BraU检测结果比较敏感、简捷，可靠性较好，因而是有希望的早期诊断癌变的手段之一。     

4-硝基喹啉-1-氧化物诱导大鼠舌癌过程中Notch1的表达特点

目的：研究 Notch1在大鼠舌癌模型发生发展过程中的表达变化。方法：将40只 SD 大鼠随机分为对照组（A 组10只）和实验组（B、C、D组各10只）,使用质量百分比浓度为0．004％的4-硝基喹啉-1-氧化物（4-nitroquinoline-1-oxide,4NQO）饮用水喂养实验组 SD大鼠,用蒸馏水喂养对照组 SD大鼠。B、C、D组分别于8、16、24周取大鼠舌体组织;A 组在8、16、24周同时各取3只、3只、4只作为正常对照。行常规组织学观察,并使用免疫组织化学法检测 Notch1在病变不同阶段的舌粘膜内的表达。结果：4NQO可以有效诱导大鼠舌黏膜鳞状细胞癌的发生。在不同的给药时间点,可以诱导大鼠舌黏膜产生不同程度的癌前病变。Notch1在正常舌黏膜、癌前病变、舌鳞癌中的表达逐渐增高（P＜0．01）。随着异常增生程度的增加,阳性表达部位逐渐由基底层向表层扩展,且 Notch1的膜型表达逐渐增多。结论：Notch1的高表达及其在细胞膜上的集中表达可能与舌癌的发生、发展过程相关。     

增殖细胞核抗原及P53在舌癌中的表达

目的：研究ＰＣＮＡ、Ｐ５３在舌癌中表达的相关性及与肿瘤病理分级、淋巴结转移、预后的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法,观察４６例病理确诊的舌癌石蜡标本中ＰＣＮＡ指数及Ｐ５３阳性率的表达。结果：ＰＣＮＡ在所有病例均有不同程度表达,４６例中２８例呈Ｐ５３阳性表达（６０．９％）。Ｐ５３阳性组中ＰＣＮＡ指数明显高于Ｐ５３阴性组（Ｐ＜０．００１）。ＰＣＮＡ指数随舌癌病理分级的升高而增加（Ｐ＜０．０２５）。Ｐ５３阳性率在Ⅱ、Ⅲ级舌癌明显高于Ⅰ级舌癌（Ｐ＜０．０５）。在有淋巴结转移及术后生存小于３年组中ＰＣＮＡ指数及Ｐ５３阳性率均明显高于无淋巴结转移及术后生存３年以上组（Ｐ＜０．００１,Ｐ＜０．０５）。结论：联合检测ＰＣＮＡ及Ｐ５３对判断舌癌恶性度,预测淋巴结转移趋势和预后及指导临床治疗有重要价值。     

金地鼠颊囊癌模型PCNA,BrdU及光镜观察结果的相关分析

癌变的早期诊断对提高疗效具有特殊意义，为了寻求简捷，高效，超前，可靠的诊断方法，实验以ＤＭＢＡ（二甲基苯并蒽）诱导的金地鼠颊囊致癌模型为对象，以ＰＣＮＡ（增殖细胞核抗原）ＢｒｄＶ（溴脱氧尿嘧啶）等免疫组化技术为手段；以光镜观察诊断为对照，对三种观察结果进行相关分析，发现三者间有高度显著的相关性，证实了免疫组化方法在癌变诊断中有一定的参考价值，实验还发现ＰＣＮＡ和ＢｒｄＵ检测结果比较每天敏感，简捷，     

大鼠正畸牙牙周膜中增殖细胞核抗原表达的研究

目的通过观察大鼠正畸牙移动过程中牙周膜内增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达变化,探讨正畸过程中细胞增殖变化的机制。方法选用幼年SD大鼠,建立正畸牙移动模型,分别在加力后24 h、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d处死动物,制备标本。进行免疫组化分析。结果对照组大鼠牙周组织中增殖细胞核抗原弱表达,实验组牙周膜中张力侧增殖细胞核抗原24 h时表达上调,3、5 d达最顶峰,7 d后逐渐下调,21 d趋于正常。结论正畸力促进牙周组织中细胞增殖,从而完成牙周组织的改建。