不同管径二氧化钛纳米管对人牙龈成纤维细胞生物学行为的影响

目的探讨不同管径二氧化钛纳米管对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast,HGF)生物学行为的影响,以筛选具有良好软组织封闭效果的二氧化钛纳米管。方法在10、30和60 V电压下,利用阳极氧化法在钛表面制备管径分别为30、100和200 nm的二氧化钛纳米管,分别计为30、100和200 nm纳米管组,以未经处理的光滑纯钛片作为对照组。在各组试件表面培养HGF,免疫荧光染色观察2 d后各组细胞黏附形态,甲基噻唑基四唑法检测2 h后细胞黏附情况及培养1、3和7 d时细胞增殖情况,酶联免疫吸附测定检测各组培养7 d后的Ⅰ型胶原分泌量(每组每种实验各3个试件)。结果对照组HGF蜷缩成圆形,30和100 nm纳米管组HGF均呈现明显的同向伸展,200 nm纳米管组HGF分布稀疏且没有伸展。30和100 nm纳米管组细胞黏附A值(分别为0.603±0.021和0.773±0.045)及Ⅰ型胶原分泌量[分别为(36.5±9.5)和(47.7±4.5)μg/ml]均显著大于对照组[细胞黏附A值:0.427±0.057;Ⅰ型胶原分泌量:(22.2±5.9)μg/ml](P<0.05),且100 nm纳米管组细胞黏附A值显著大于30 nm纳米管组(P<0.05);200 nm纳米管组细胞黏附A值(0.250±0.046)及Ⅰ型胶原分泌量[(10.1±3.7)μg/ml]均显著小于对照组(P<0.05)。各时间点100 nm纳米管组细胞增殖A值均为最大,均显著大于相同时间点200 nm纳米管组和对照组(P<0.05),且培养3 d时亦显著大于30 nm纳米管组(P<0.05);各时间点200 nm纳米管组细胞增殖A值均为最小,除培养1 d时与对照组差异无统计学意义(P>0.05)外,均显著小于相同时间点其他组(P<0.05)。结论钛表面管径为100 nm的二氧化钛纳米管较适合HGF的黏附、增殖和Ⅰ型胶原分泌。     

不同管径钛纳米管对成纤维细胞增殖、伸展和胶原分泌功能的影响

目的:研究不同管径Ti-TiO2纳米管对成纤维细胞增殖、伸展和胶原分泌功能的影响.方法:以1、5、10、20 V电压阳极氧化制备不同管径Ti-TiO2纳米管试件,试件表面培养成纤维细胞,MTT法检测细胞增殖,扫描电镜观察形态,天狼星红苦味酸染色检测细胞胶原分泌功能.结果:1、5、10、20 V制备的纳米管径依次为15、30、50和100 nm.细胞在抛光表面的增殖均高于纳米管表面;第5天时,100 nm纳米管表面细胞的增殖显著高于其他(P＜0.01).第3天时,抛光表面细胞呈典型长梭型,纳米管表面细胞伪足明显.100 nm纳米管表面细胞的试件胶原分泌功能最大(P＜0.05).结论:100 nm纳米管对细胞增殖的抑制作用较小并能促进细胞的胶原纤维分泌功能.     

不同管径Ti-TiO2纳米管对成纤维细胞和成骨细胞黏附的影响

目的 研究不同管径Ti -TiO2纳米管对成纤维细胞和成骨细胞黏附的影响,探讨最适合细胞黏附的Ti-TiO2纳米管管径.方法 在1、5、10和20V电压下阳极氧化制备Ti-TiO2纳米管组试件,以抛光纯钛作为对照组,场发射扫描电镜观察试件表面形貌;分别接种成纤维细胞和成骨细胞,30、60、120 min后用胞核染色计数方法检测细胞黏附数,扫描电镜观察黏附细胞形态.结果 不同阳极氧化电压可形成15～ 100 nm管径Ti-TiO2纳米管.接种30、60和120 main后,5V纳米管组成纤维细胞黏附数依次为(141±9)、(388±14)和(489±15)个,均比同时间点其余纳米管组少(P ＜0.01);120 min时20V纳米管组成纤维细胞黏附数为(579±14)个,多于同时间点其余纳米管组(P＜0.01),但细胞伸展受到抑制.30、60和120 min时5V纳米管组成骨细胞黏附数依次为(198±10)、(431±10)和(501±10)个,除30 min时与对照组差异无统计学意义外,均比同时间点其余组多(P＜0.01),且细胞伸展良好;3个时间点20V纳米管组成骨细胞黏附数依次为(152±11)、(403 ±9)和(465±12)个,与同时间点其余纳米管组相比黏附数最少(P＜0.05).结论 纳米管不同程度抑制成纤维细胞的黏附,5V电压制备的纳米管可最大程度促进成骨细胞的黏附,同时抑制成纤维细胞的黏附.     

RGD肽修饰TiO2纳米管对成骨细胞黏附的影响

目的：评价RGD肽修饰的TiO2纳米管涂层对小鼠胚胎前成骨细胞MC3T3-E1早期生长粘附的影响。方法：利用化学偶联的方法在TiO2纳米管表面引入活性氨基,然后共价接枝RGDC多肽,采用SEM和荧光显微镜对纳米管改性后的形貌进行观察,并用SEM和活死细胞染色的技术观察MC3T3-E1细胞的早期黏附的细胞行为。结果：黏附肽修饰后的材料表面细胞早期黏附的数目更多,铺展的面积更大,丝足更多。结论：采用化学偶联活性RGD肽修饰可以提高TiO2纳米管对成骨细胞早期附着铺展作用。     

二氧化钛纳米管对兔胫骨内种植体旋转扭力的影响

目的　通过兔子动物模型评估种植体表面不同管径的TIO2纳米管对成骨细胞黏附、种植体扭力和成骨基因表达的影响。方法　将24个订做的螺旋状的长为6 mm,外径为2.5 mm的纯钛种植体分为3组。A组：对照组平滑面种植体;B组：表面为30 nm管径TiO2纳米管的种植体;C组：表面为70 nm管径TiO2纳米管的种植体。分别将种植体植入兔子胫骨,手术后四周,处死兔子,采用数字扭力仪通过反向旋转取下腿部种植体,测量种植体扭力,通过扫描电子显微镜分析种植体表面成骨细胞的粘附,通过实时PCR检测核心结合因子（Runx2）、胰岛素样生长因子（IGF）、I型胶原（col 1）和骨钙素（OCN）的基因表达水平。结果　表面为70 nm管径TiO2纳米管的种植体可以增强兔胫骨内种植体的扭力（P＜0.05）,并显著性的提高Runx2、IGF、col 1和 OCN等成骨基因的表达水平（P＜0.05）。结论　相对于30 nm管径纳米管,表面为70 nm管径纳米管的种植体可以获得良好的成骨反应,并且在早期植入期具有较高的界面强度。     

不同粒径的纳米ZrO2对SiO2复合树脂弯曲和抗压强度的影响

目的:观察不同粒径的纳米ZrO₂ 填料对SiO₂复合树脂的弯曲强度和抗压强度的影响,探究纳米ZrO₂的最佳粒径。方法:将经过硅烷偶联化的不同粒径的纳米ZrO₂颗粒加入SiO₂复合树脂中,合成ZrO₂ 质量分数相同,粒径分别为20 nm, 50 nm, 70 nm, 100 nm的ZrO₂/SiO₂复合树脂,分别为B、C、D、E组;纯SiO₂组为A组(对照组)。将试件固定于万能试验机上,以1.0 mm/min的速度垂直加压直至试样破坏,在树脂材料断裂后,对断裂面进行扫描电镜观察,并对不同组别的材料进行XRD扫描测试。结果:B组弯曲强度最高,与其他4组均有统计学差异(P<0.05);C、D、E 3组无显著性差异,与A组差异明显(P<0.05)。B组抗压强度最高,与其他4组均有统计学差异(P<0.05)。结论:粒径为20 nm的ZrO₂在一定范围内能够提高S...     

微纳复合结构对成纤维细胞黏附增殖的影响

目的：探讨经不同方法处理后的纯钛表面对成纤维细胞黏附增殖的影响。方法：将36个试件分平均为3组：机械抛光组（A组）;喷砂酸蚀组（B组）;喷砂酸蚀碱热组（C组）,每组均12个试件。通过扫描电子显微镜（SEM）观察分析3组试件表面微观结构和细胞在试件表面的铺展情况,激光共聚焦显微镜（CLSM）检测各试件表面的粗糙度;运用CCK-8试剂盒在450 nm波长下检测各试件对成纤维细胞（ L929）黏附与增殖的吸光度值（ OD值）。结果：A组表面光滑,试件表面成纤维细胞骨架大多呈梭形铺展,伸展较差;B组和C组表面粗糙,且C组表面可见微纳复合结构,试件表面成纤维细胞骨架呈三维空间向铺展,表面黏附成纤维细胞数量明显多于A组和B组。观察第1,3,5 d试件表面细胞增殖情况,可见粗糙表面较光滑表面更利于成纤维细胞的增殖。结论：喷砂酸蚀碱热方法处理后的纯钛表面形成微米-纳米复合孔洞,表面活性好,促进成纤维细胞早期黏附及表面铺展,且不抑制细胞的增殖。     

钛表面TiO2纳米管仿生修饰对成骨细胞骨功能基因表达的影响

目的:钛种植体表面制备TiO₂纳米管并在其表面仿生构建钙磷涂层,探索该涂层对成骨细胞骨功能基因表达的影响。方法:采用阳极氧化法在钛基底表面制备TiO₂纳米管,并进行碱热处理后在其表面构建仿生钙磷涂层,扫描电镜观察其表面结构的改变,能谱分析其表面化学成分的改变,采用实时定量PCR检测成骨细胞在其表面骨相关基因表达差异。结果:仿生处理可以在TiO₂纳米管表面制备出纳米絮状的钙磷涂层,该涂层可以提高碱性磷酸酶和骨钙蛋白基因的表达(P<0.05)。结论:TiO₂纳米管仿生修饰更有利于成骨细胞的碱性磷酸酶和骨钙蛋白的基因表达。     

不同管径的TiO2纳米管对人牙周膜细胞的毒性研究

目的：研究不同管径的阳极氧化TiO2纳米管对人牙厨膜细胞（HPDLCs）的毒性效应。方法：采用阳极氧化法在钛基底表面制备不同管径的TiO2纳米管,扫描电镜观察其表面的微结构,肌动蛋白染色研究细胞在材料表面的粘附生长情况,活／死细胞双染色研究对原代培养的HPDLCs的毒性效应。结果：HPDLCs的肌动蛋白骨架在30nm管径的TiO2纳米管表面比70nm和120nm管径的TiO2纳米管更规律,培养24h后,70nm和120nm管径的TiO2纳米管对HPDLCs的毒性显著大于30nm管径的TiO2纳米管。结论：30nm管径的TiO2纳米管有利于HPDLCs的肌动蛋白组装,同时毒性效应最小,有利于HPDLCs的粘附和增殖。     

TiO2纳米管阵列负载依布硒缓释体系的优化构建及成骨活性初探

目的 在钛表面构建二氧化钛纳米管阵列加载依布硒(Ebselen, EB)的缓释体系，探究药物释放动力学及其对成骨细胞行为的影响。方法 通过阳极氧化法在钛基底表面制备出直径120 nm、长2μm的二氧化钛纳米管阵列(TiO₂ nanotubes, TNT),随后通过冻干法负载不同质量的EB,观察、分析载药后纳米管口的微形貌、表面元素组成以及药物释放特征；将MC3T3-E1成骨细胞接种于不同浓度的EB释出液中，基于微纳米形貌、促成骨性能和药物释放动力学特征，探寻TNT负载EB的最佳加载量。结果 纯钛基底制备形成的TNT在负载EB后可检测出特征性硒元素，当TNT表面负载的EB<5μg/cm²时可完整保留纳米管阵列结构，不同加载量的EB在24 h后均可完全释出，当EB浓度低于10μmol/L时可促进MC3T3-E1的增殖活性和成骨分化，其中，5μmol/L浓度的效果最佳。结论 当TNT表面负载EB<5μg/cm²时纳米管拓扑结构完整，EB浓度在5μmol/L时体外成骨活性最佳。     

不同管径二氧化钛纳米管对骨髓间充质干细胞生物学行为的影响

目的:研究不同管径二氧化钛纳米管(TNTs)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学行为的影响。方法:阳极氧化法分别制备管径30、100和200 nm的TNTs,MTT法检测细胞在材料表面粘附及增殖情况,碱性磷酸酶活性、胶原分泌量和细胞外基质矿化水平检测来评估细胞的成骨分化能力。结果:30 nm的TNTs促进BMSCs的早期粘附和增殖,但是其后期细胞增殖和成骨分化能力同对照组相比没有明显的统计学差异;200 nm的TNTs明显促进了BMSCs的成骨分化,但是其细胞粘附和增殖明显受到了抑制;100 nm的TNTs上BMSCs的早期粘附和增殖受到了轻微的抑制,但是随着时间的推移,其细胞增殖迎头赶上,而且其成骨分化能力显著大于对照组。结论:最适BMSCs生物学活性的应该是100 nm的TNTs。     

不同管径二氧化钛纳米管的抗菌性能研究

目的:探讨不同管径二氧化钛纳米管的抗菌性能。方法:通过电化学阳极氧化法,在10、30和60 V三组电压下,于纯钛表面制备了3组二氧化钛纳米管NT10、NT30和NT60。扫描电镜观察试样的表面形貌,X射线衍射仪检测其晶体结构,接触角测试仪测量其接触角,原子力显微镜观察试样的表面形貌并比较表面粗糙度。将金黄色葡萄球菌和牙龈卟啉单胞菌接种到不同材料表面,扫描电镜观察菌落形态,活细菌平板计数活菌数。结果:3组二氧化钛纳米管的管径分别约为30 nm(NT10)、100 nm(NT30)和200 nm(NT60),X射线衍射结果显示3种二氧纳米管均出现了锐钛矿的衍射峰,接触角检测结果显示3种二氧化钛纳米管的接触角随着管径的增加而减小,原子力显微镜检测结果显示3组纳米管的粗糙度值均明显变小(其中NT30展示出最小的粗糙度值)。3种不同管径纳米管的表面活细菌数均明显减少,其中表面粘附金黄色葡萄球菌最少的是NT60,表面粘附牙龈卟啉单胞菌最少的是NT30。结论:纯钛表面纳米化制备二氧化钛纳米管后均不同程度地抑制了细菌的粘附。     

TiO2-PEEK-CRGDS材料制备及抗牙龈卟啉单胞菌活性和细胞活性分析

目的:将聚醚醚酮(polyetheretherketone,PEEK)复合材料用纳米二氧化钛(TiO2)和CRGDS肽改性,制备得到TiO2-PEEK-CRGDS,评价其抗牙龈卟啉单胞菌活性和细胞活性.方法:使用等离子体浸没离子注入法(plasma-im-mersion ion implantation,PⅢ)制备Ti...     

小鼠骨骼肌细胞体外培养的增殖及分化关系

目的 :研究体外培养的小鼠骨骼肌细胞增殖及分化的关系 ,为临床肌肉损伤的治疗提供理论基础。方法 :采用细胞培养方法 ,对小鼠肌母细胞C2C12进行活细胞观察 ,采用MTT法研究骨骼肌细胞生长特性。结果 :C2C12小鼠肌母细胞 ,在对照组中不断增殖 ,表现为数量增加 ,而细胞的形态不发生改变。实验组在分化培养2 4h后部分细胞出现死亡 ,活细胞率下降 ,尤以 48h为著 ,72h后活细胞数量开始上升 ,存活的鼠肌母细胞开始出现分化现象 ,肌母细胞离开初始的细胞周期 ,而进入细胞分化阶段 ,形态上表现为细胞开始融合 ,形成多核肌管。结论 :体外培养的骨骼肌细胞的增殖和分化有非常密切的关系 ,细胞的增殖为分化做准备 ,分化时需要细胞退出增殖周期 ,活细胞率有所下降 ,肌管形成后活细胞基本保持不变。