人和常用实验动物牙龈结合上皮的形态结构比较研究

目的:研究人和常用实验动物牙龈结合上皮(Junctionalepithelium,JE)的形态结构,筛选适合实验用的动物、部位和方法。方法:分别选取6例人、3头猪、4条犬、6只家兔、6只大鼠下颌磨牙及牙龈颊舌向的黏膜组织石蜡切片,HE染色结合图像分析,研究JE的形态结构。结果:人、猪、犬、家兔和大鼠JE宽度分别为(1.019±0.133)mm、(0.862±0.073)mm、(1.111±0.104)mm、(0.404±0.010)mm和(0.285±0.032)mm,均占龈沟上皮(Gingivalsulcularepithe鄄lium,GSE)与JE宽度和的60%左右。猪、狗JE形态结构与人相似,细长呈条索状,形态规则,向冠方增厚,与GSE连续,两者可从细胞形态和染色上区别;家兔、大鼠与人差别较大,JE位于GSE牙面侧,形态不规则,向根方增厚,冠方与GSE分离,GSE角化明显。结论:猪、狗的JE形态结构、牙颌发育与人十分接近,可作为JE研究的首选实验动物;掌握人和常用动物的JE解剖、生理特点及取材要点,筛选合适的研究对象,可为进一步研究JE生物学特性提供有用的参考资料和方法。     

机械损伤大鼠结合上皮后的组织修复观察

目的：观察两种机械方式破坏大鼠结合上皮（JE）后的组织修复过程。方法：12只健康sD大鼠分别用探针、龈下刮治器损伤左、右下前牙JE,于2、7、14、21d处死大鼠,HE、PCNA染色,镜下观察计数。结果：第2天大量炎细胞浸润,上皮PCNA阳性细胞散在分布;第7天炎症减轻,上皮PCNA阳性率开始增加,增殖并部分和牙面贴附;14d纤维组织增殖明显,上皮增厚;21dJE基本修复。结论：龈下刮治对牙周损伤比探损伤重;结缔组织的快速增殖可能会阻止UE形成。     

牙体充填材料和根管桩对根管冠向封闭能力的影响

目的 :研究临床常用牙体充填材料和根管桩对根管冠向封闭能力的影响。方法 :6 0个离体单根管牙从颈部截断 ,逐步后退法预备根管 ,CCQ糊剂加牙胶尖侧压法充填 ,横断面统一制备 3mm× 2mm× 2mm洞形。随机分为 4组 :复合树脂组、银汞合金组、根管桩组、对照组 (不作洞形充填 )。经冷热循环 ,牙体表面封闭后行染液渗漏 ,制备透明牙标本 ,体视显微镜观察渗漏深度。结果 :各组实验牙均发生不同程度的染液渗漏 :复合树脂组 ( 3.35± 2 .0 1)mm和银汞合金组 ( 3.6 7± 1.4 0 )mm渗漏深度最短 ,两者无显著性差异(P >0 .0 5 ) ;根管桩组 ( 6 .0 0± 2 .13)mm渗漏深度长于前两组 (P <0 .0 5 ) ;对照组 ( 10 .4 7± 3.6 9)mm渗漏深度最长 ,与其他各组均有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :复合树脂和银汞合金在根充后冠向封闭能力无明显差异 ;根管桩的使用会加大微渗漏程度     

尼古丁对大鼠颅骨缺损修复效能的影响

目的:探讨尼古丁对大鼠颅骨骨缺损修复效能的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为对照组和尼古丁组。尼古丁组注射尼古丁溶液0.5mg/kg/d,对照组给予生理盐水。20d后行颅骨极量骨缺损制备,术后继续注射尼古丁溶液或生理盐水。骨缺损制备后21d和56d,两组每次分别处死6只大鼠,通过四环素荧光示踪、骨计量学方法及新骨矿物质含量测定技术比较两组颅骨缺损修复情况。结果:骨缺损制备后21d,均有新骨在骨缺损内形成,尼古丁组成骨区域四环素标记较稀疏。荧光双标间距和平均矿化沉积速率比较,两组间差异有非常显著性意义(P<0.01)。新骨矿物质含量测定,对照组新骨矿化程度较高。结论:尼古丁对大鼠骨缺损修复产生不利影响。     

根向复位瓣治疗Ⅲ度根分叉病变的临床评价

目的:评价根向复位瓣治疗下颌第一磨牙Ⅲ度根分叉病变的近期临床疗效。方法:选择患有双侧下颌第一磨牙Ⅲ度根分叉病变的慢性牙周炎患者10例,经牙周基础治疗4周后对其中一侧的下颌第一磨牙进行根向复位瓣(ARF)手术治疗,对侧同名牙则继续行龈下刮治和根面平整(SRP)。测量术前和术后6个月各临床指标包括垂直探诊深度(VPD)、临床附着水平(CAL)、角化龈宽度(WKG)的变化,进行统计学分析。结果:术后6个月ARF组根分叉充分暴露,无探诊出血和根面龋,VPD为(2.25±0.54)mm,比术前减少(5.57±0.47)mm,与术前和对照组相比较,差异均有高度显著性(P<0.01);CAL增加(0.15±0.15)mm,与术前比较无显著性差异(P>0.05);WKG减少(0.32±0.11)mm,与对照组比较差异无显著性(P>0.05),但有平均(1.33±0.72)mm的附着龈形成。结论:根向复位瓣治疗下颌第一磨牙Ⅲ度根分叉病变的近期疗效满意。     

尼古丁诱导人牙周膜成纤维细胞凋亡的实验研究

目的：了解在体外培养环境中,尼古丁对人牙周膜成纤维细胞凋亡的影响。方法：将尼古丁作用于培养至第6代的人牙周膜成纤维细胞后,通过四唑盐比色法、流式细胞仪研究尼古丁能否诱导人牙周膜成纤维细胞凋亡。结果：四唑盐比色法证实当尼古丁浓度在0.05～4mg/L之间时,对牙周膜成纤维细胞的抑制呈浓度依赖性,流式细胞仪分析提示,当尼古丁浓度在0.5～4mg/L之间时,对牙周膜成纤维细胞的凋亡率呈浓度依赖性。结论：尼古丁对人牙周膜成纤维细胞有一定的毒性作用,通过抑制牙周膜成纤维细胞增殖和诱导凋亡加重对周膜的破坏。     

尼古丁调控人牙周膜细胞自噬水平的实验研究

目的 探讨尼古丁对人牙周膜细胞（hPDLCs）自噬水平的影响。方法 选取因正畸治疗而拔除的前磨牙,采用组织块法分离培养hPDLCs。通过Western blot法筛选尼古丁影响hPDLCs自噬的最佳作用时间及浓度,使用透射电子显微镜（TEM）和免疫荧光染色法检测该作用时间及浓度下hPDLCs自噬体形成情况和自噬标志蛋白LC3的表达情况。结果 LC3Ⅱ蛋白表达在尼古丁作用的12 h内持续升高,从而确定12 h为最佳作用时间;LC3Ⅱ蛋白表达上调具有尼古丁浓度依赖性,1×10^-5 mol·L^-1为尼古丁最佳作用浓度。TEM和免疫荧光染色证实尼古丁在此浓度及作用时间下hPDLCs细胞质内自噬体的数量增加,自噬标志蛋白LC3表达升高。结论 在一定条件下,尼古丁能够上调hPDLCs自噬水平,为进一步研究细胞自噬与吸烟相关牙周炎的关系奠定了基础。     

尼古丁对舌鳞状细胞癌Cal27细胞的生物学影响

目的 探讨吸烟对舌鳞癌患者Cal27细胞系的影响。方法 将舌鳞癌Cal27细胞传代培养,将对数生长期细胞分为空白对照组、尼古丁组及 7型烟碱乙酰胆碱受体（ 7nAChR）抑制组。空白对照组不作任何处理,尼古丁组用尼古丁连续处理细胞1周, 7nAChR抑制组给予尼古丁及 7nAChR抑制剂α-银环蛇毒素（ -BTX）处理细胞1周。采用电子显微镜观察空白对照组及尼古丁组细胞形态;采用CCK-8试剂盒检测空白对照组及尼古丁组细胞增殖力;细胞划痕实验检测空白对照组及尼古丁组细胞迁移能力;Transwell小室检测空白对照组及尼古丁组细胞侵袭能力;免疫印迹实验测定尼古丁组、空白对照组及 7nAChR抑制组细胞Wnt信号通路蛋白相对表达水平。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果 Cal27细胞形态为不规则多角形,体积较大,周围可见伪足伸展,在细胞培养基上呈铺路石样排列。空白对照组、尼古丁组及 7nAChR抑制组Cal27细胞形态无显著差异。孵育96 h后,尼古丁组细胞数显著大于空白对照组及 7nAChR抑制组（P<0.05）;相同时间内尼古丁组细胞划痕愈合程度显著大于空白对照组与 7nAChR抑制组（P<0.05）;相同时间内,尼古丁组穿过小室细胞数显著大于空白对照组及 7nAChR抑制组（P<0.05）;尼古丁组细胞β-catenin、c-Myc、p-GSK3β及Ror2等Wnt通路蛋白相对表达水平显著高于空白对照组及 7nAChR抑制组细胞（P<0.05）。结论 尼古丁可通过激活Wnt信号通路,提高舌鳞癌Cal27细胞增殖、迁移及侵袭能力。     

大鼠尼古丁实验性牙周炎动物模型的建立

目的:建立大鼠实验性牙周炎动物模型并观察尼古丁对其的影响.方法:采用36只SD大鼠,丝线结扎上颌右侧第二磨牙颈部,左侧未结扎作为自身对照.随机分为生理盐水对照组、尼古丁每日低剂量组和高剂量实验组, 分别给予生理盐水、尼古丁每日0.83 mg/kg、1.67 mg/kg腹腔注射.给药第14、28天处死动物,取材.采用组织学、Micro-CT方法观察大鼠牙周破坏情况.结果:第14、28天各组大鼠结扎侧第二磨牙龈沟出血指数(SBI)、牙周探诊深度(PD)、牙槽骨丧失值(ABL)均高于对照侧(P＜0.01),尼古丁给药后各测量值进一步加重,并呈浓度依赖性.仅给予尼古丁亦可造成大鼠非结扎侧牙槽骨吸收.结论:组织学、Micro-CT方法证实牙颈部丝线结扎方法可成功的建立牙周炎实验模型,腹腔注射尼古丁可致加重大鼠牙槽骨丧失.     

The Study of CalciumPhosphate Cement Filling Root Canal for Promoting Apical Closure

目的探索磷酸钙水门汀用作根充材料,促进根尖孔闭合的可行性。方法以三只犬为实验对象,人为造成根端开放后,采用磷酸钙水门汀充填根管,以氢氧化钙、羟基磷灰石糊剂作对照,于术后4、12、20周处死动物,组织学观察根尖孔闭合及根尖周修复过程。结果磷酸钙水门汀充填根管12周,根尖即有均质的钙化组织形成;20周时,根尖孔完全被钙化组织封闭,且根尖周组织炎症反应逐渐减弱至消失。对照组未能完全封闭根尖孔。结论磷酸钙水门汀与软硬组织有良好的相容性,具有促进根尖孔闭合的生物学作用。     

牙囊在牙根发育中作用的实验研究

目的 研究牙囊在牙根发育中的作用。方法 8只出生5 d的Balb/c小鼠随机分为含牙囊组和去除牙囊组,取其双侧下颌第一磨牙牙胚分别异位移植到Balb/c成年裸鼠背部肌层中,移植后第7天和第14天分别取出植入的牙胚,常规制片,苏木精-伊红染色,观察牙胚发育情况。另取1只出生5 d的Balb/c小鼠的下颌第一磨牙牙胚作为对照。结果 肉眼观察发现移植后牙胚生长于肌肉浅层,组织相容性好,表面有丰富的毛细血管。组织学观察表明：移植后的两组牙胚牙冠均可部分继续发育并矿化,但含牙囊组牙胚比去除牙囊组发育更快,体积较大,钙化程度较高。虽然两组牙胚上皮根鞘根向延伸均不明显,但含牙囊组牙根有一定程度的发育,牙齿有根向生长的趋势,而去除牙囊组牙齿未见根向生长的趋势。移植后第7天两组牙胚均出现炎症反应,到移植后第14天则均未见明显的炎症。结论 牙囊在牙齿发育特别是牙根的形成中起重要作用,能够引导牙根向正常方向生长并形成牙根。     

三金羟磷灰石糊剂封闭根尖的实验研究

目的：比较三金羟磷灰石根管封闭剂与传统根管封闭剂的封闭能力。方法：采用美兰渗漏染色法测定3种根管封闭剂的根尖渗漏染色长度。结果：三金羟磷灰石糊剂、碘仿糊剂、氧化锌丁香油糊剂的根尖渗漏平均染色长度分别为2．40mm,4.37mm,5.80mm。三金羟磷灰胡剂与碘仿糊剂及氧化锌丁香油糊剂的美兰渗入长度有显著差异（P＜0．01）。碘仿糊剂与氧化锌丁香油糊剂的美兰渗入长度无显著差异。结论三金羟磷灰石根管封闭剂与传统根管封闭型比较,具有很好的根尖封闭效果。     

葛根素影响去势雌性大鼠牙周炎症的实验研究

目的探讨葛根素对去势SD大鼠牙周炎形成和发展的影响。方法雌性3月龄SD鼠60只分为6组,A组（正常对照组）、B组（牙周结扎组）、C组（去势组）、D组（去势结扎组）、E组（去势葛根素组）、F组（去势结扎葛根素组）各10只。C、D、E、F组大鼠分别经腹部切口摘除双侧卵巢;B组作假手术。B、D、F组在大鼠右侧上颌第一磨牙牙颈部结扎1根0.2 mm不锈钢丝。E、F组大鼠术后1周开始每天腹腔注射100 mg/kg葛根素;B、C、D组大鼠每天腹腔注射相应剂量生理盐水。给药12周后分别观察各组大鼠牙槽骨吸收值、血钙值、血磷值、血清碱性磷酸酶含量以及牙槽骨组织病理学改变。结果所有牙周结扎组都表现出不同程度的局部牙周炎症;各去势组大鼠都存在不同程度的骨质疏松改变,注射葛根素组病理学表现较未注射葛根素组为轻。血清钙水平去势各组与正常对照组差异均有统计学意义（P〈0.05）;血清碱性磷酸酶水平去势各组与正常对照组差异有统计学意义（P〈0.05）;血清磷水平在各组间差异无统计学意义（（F=1.764 1,P〉0.05）。A、C、E组未观察到明显的牙周骨质吸收,B、D、F组牙槽骨吸收值分别为（0.21±0.08）mm、（0.55±0.07）mm、（0.42±0.10）mm,3组两两比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论在局部刺激因素存在的前提下,雌激素水平降低可增加大鼠对牙周炎症的易感性和反应程度;葛根素对伴随雌激素降低的牙周炎的发生发展有一定的阻缓作用。     

茶多酚对复发性阿弗它溃疡大鼠模型外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的：探讨细胞免疫与复发性阿弗它溃疡（recurrent aphthous ulcer,RAU）发病机制的关系及茶多酚（tea polyphenols,TP）对RAU的免疫调节作用。方法：用免疫方法建立SD大鼠RAU动物模型,将RAU大鼠随机分成阴性对照组、溃疡糊剂组和3个TP治疗组。用流式细胞仪检测成模前后及用药前后各组大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4^＋、CD8^＋细胞数量及比值。结果：实验大鼠溃疡模型成模后外周血CD4^＋及CD4^＋／CD8^＋较成模前显著降低（P〈0．01）,CD8^＋改变无统计学意义（P〉0．05）。茶多酚各治疗组外周血CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋回升,与阴性对照组有显著性差异（P〈0．05）,茶多酚各治疗组间比较没有显著性差异（P〉0．05）。结论：RAU的发生与细胞免疫功能抑制有关,TP对大鼠RAU具有免疫调节作用,其免疫调节作用与给药方式无关。     

辛伐他汀与骨粉复合物填充大鼠胫骨骨缺损修复作用的实验研究

目的研究辛伐他汀作为激活物对大鼠胫骨骨缺损修复的促进作用。方法实验组用辛伐他汀与Bio-Oss骨粉复合物填入大鼠胫骨骨缺损模型,对照组骨缺损单纯填入Bio-Oss骨粉,空白组骨缺损部位不放入骨粉。术后4、8、12周分别处死大鼠,定性、定量分析,观测骨增量变化和骨缺损修复进程。结果空白组无法正常愈合;实验组在新骨生成和改建速度上明显好于对照组。结论辛伐他汀有促进新骨生成作用,加速了骨缺损修复进程。     

PTH对大鼠髁突发育影响的实验研究

目的：观察不同条件下、不同浓度的PTH对发育期大鼠髁突软骨细胞增殖功能和髁突发育的影响。方法：消化法培养大鼠髁突软骨细胞,PTH不同作用方式下MTT法检测细胞增殖能力。24只SD大鼠,分别在其发育期于左侧髁突关节腔内注射不同浓度（1μg/kg、5μg/kg、10μg/kg）PTH,待发育期结束后,处死,取双侧髁突,通过大体、组织学观察髁突生长情况。结果：低浓度间断PTH培养组的髁突软骨细胞增殖功能明显大于持续作用组和对照组,以含PTH0.001μg/mL培养液间断作用组的细胞增殖功能最强,而含PTH0.01μg/mL培养液持续作用组的细胞增殖最弱。注射PTH侧髁突体积均略大于未注射侧、对照组和空白组。苏木精-伊红染色见各组髁突表面基本完整、光滑,层次清晰。结论：小剂量间断的PTH作用对髁突软骨细胞的增殖有促进作用,局部注射PTH对髁突发育是否有促进或抑制作用有待进一步研究。