异基因造血干细胞移植治疗伴RUNX1胚系突变家族性血小板疾病伴急性髓系白血病1例报告并文献复习北大核心CSCD

随着基因测序技术的进步, 家族性血小板疾病伴髓系恶性肿瘤(FPD/MM)的诊断率越来越高。2016年WHO在造血淋巴组织肿瘤疾病分类首次提出了胚系易感性髓系肿瘤的概念, 其中大多数为遗传易感性骨髓增生异常综合征(MDS)、MDS/骨髓增殖性肿瘤(MPN)、急性髓系白血病(AML), 极少部分转化为淋系肿瘤。我们应用异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗1例伴RUNX1胚系突变的FPD/AML患者, 报道如下并对相关文献进行复习。     

正常核型急性髓系白血病NPM1、FLT3-ITD突变与外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比相关性研究

本研究旨在分析NPM1和FLT3-ITD突变与急性髓系白血病患者外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比的相关性。回顾分析我中心2009年1月至2011年12月份初治正常核型急性髓系白血病患者51例,其中男性22例,女性29例,中位年龄47岁（14-83岁）。采用聚合酶链式反应检测NPM1及FLT3-ITD突变状态。结果表明,与无NPM1突变患者相比,突变者初诊时外周血白细胞数较多（30.7×109/L vs 8.6×109/L,P=0.002）;FLT3-ITD突变患者较无突变患者具有更多的外周血白细胞数（42.38×109/L vs 11.45×109/L,P=0.033）及更高的骨髓原始细胞百分比（74.0%vs 60.25%,P=0.036）。外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比在NPM1、FLT3-ITD无突变组、单独NPM1突变组、单独FLT3-ITD突变组到NPM1、FLT3-ITD双突变组逐步升高（均P〈0.05）。白细胞数大于12.55×109/L的患者NPM1突变率明显升高（P=0.002）,大于37.85×109/L者FLT3-ITD突变率明显升高（P=0.033）;原始细胞比例大于72.25%的FLT3-ITD突变率明显升高（P=0.008）。NPM1突变患者首疗程完全缓解率（CR）明显高于无突变者（78.13%vs 40.0%,χ2=4.651,P=0.031）。结论：NPM1及FLT3-ITD突变患者白细胞计数及原始细胞比例大,提示NPM1与FLT3-ITD突变均可能促进白血病细胞增殖,且二者可能具有协同效应。     

骨髓中CDKN1C的表达在骨髓增生异常综合征和继发性急性髓系白血病患者中检测的临床意义

目的探讨骨髓中蛋白细胞周期激酶抑制剂1C(CDKN1C)的表达在骨髓增生异常综合征(MDS)和继发性急性髓系白血病(AML)患者中检测的临床意义。方法选取125例MDS/AML患者作为研究对象,同时选取20例健康人群作为健康对照组,分析MDS/AML患者骨髓CD34+细胞中CDKN1C mRNA和蛋白表达水平,比较不同CDKN1C的表达水平MDS患者生存率,采用Cox回归分析MDS和AML患者生存率影响因素,并分析治疗方法对不同CDKN1C的表达水平MDS患者生存率的影响。结果 MDS/AML患者骨髓CD34+细胞中CDKN1C mRNA和蛋白表达水平显著高于健康对照组(t=5.324,7.326,P=0.002,0.000),且与BM计数呈正相关(r=2.014,P=0.004);CDKN1C高表达水平组患者的生存率显著低于CDKN1C低表达水平组和CDKN1C中表达水平组(P0.05);Cox回归分析结果显示高龄、高BM计数、细胞遗传学风险差以及CDKN1C阳性显著影响MDS/AML患者生存率(95%CI=1.10～1.32,1.92～4.40,1.18～2.67,1.03～2.32,P=0.034～0.000);MDS/AML化疗的CDKN1C阳性表达组患者生存率显著低于CDKN1C阴性表达组患者(t=5.314,P=0.002)。结论 MDS/AML患者骨髓中CDKN1C的表达显著增高,CDKN1C高表达显著影响化疗MDS/AML患者的生存率。     

ASXL1突变在髓系疾病中的研究进展

ASXL1是Trithorax和Polycomb家族的增强子,在维持基因表达稳态中发挥着重要作用.近年来,在多种髓系肿瘤患者的造血细胞中都发现了ASXL1突变,包括慢性粒单核细胞白血病（43％）、骨髓增生异常综合征（14％）、骨髓增殖性肿瘤（10％）和急性髓系白血病（20％）等.ASXL1突变主要以移码突变和无义突变为主.ASXL1突变的广泛性表明它可能在髓系肿瘤的发病机制和恶性转化中发挥着重要作用,但是ASXL1突变在髓系疾病发生及体内正常造血中的作用及机制尚不完全清楚.本文对ASXL1的结构与功能特点,ASXL1突变与患者临床特征和疾病进展的关系,ASXL1突变与其它基因突变的关系,及敲除或沉默ASXL1的体内外模型进行了综述.     

急性髓系白血病中uPA和uPAR的表达及意义

目的观察急性髓系白血病人骨髓单个核细胞uPAR（CD87）的表达及血浆uPA的水平,并探讨其临床意义。方法用ELISA法测定22例急性髓系白血病患者（观察组）及34例良性血液病患者（对照组）血浆中uPA表达水平,用流式细胞学技术测定骨髓单个核细胞uPAR水平,比较两组之间的表达差异。结果血浆中uPA水平和骨髓单个核细胞uPAR水平急性髓系白血病组均高于良性血液病组,差异具有显著性（P〈0.05）;pearson相关分析显示uPA表达水平及uPAR水平之间存在正相关性（观察组r1=0.614,对照组r2=0.921;P〈0.05）。结论急性髓系白血病患者血浆uPA水平及骨髓单个核细胞uPAR表达均升高,二者具有协同表达关系,联合检测对于急性髓系白血病的病情监控和预后分析有临床指导意义。     

联合骨髓形态与基因检测在骨髓增生异常综合征与溶血性贫血中的诊断意义

目的：分析形态及遗传检测参数的差异在骨髓增生异常综合征（M DS ）与溶血性贫血（H A ）鉴别诊断中的临床意义。方法选取解放军总医院2011年1月至2013年12月确诊的MDS患者56例,HA患者44例,分析比较其临床一般参数、骨髓形态参数（骨髓原始细胞计数及病态造血）及遗传参数（染色体及基因检测）检测的差异。结果 MDS组与HA组患者的一般临床参数比较,差异无统计学意义（P＞0．05）;而MDS组患者骨髓细胞病态造血较HA组患者更明显,组间比较差异有统计学意义（P＝0．001）,特别是红系及巨核系病态造血;MDS组患者的骨髓原始细胞计数较 HA组更高,比较差异有统计学意义（P＝0．002）;且染色体异常与基因异常更频繁发生于MDS组患者,与HA组比较差异有统计学意义（P＝0．000）。结论 MDS患者与 HA患者的鉴别诊断可以联合形态及遗传检测,达到更加及时、准确的检测目的。     

RUNX1基因突变在髓系肿瘤中的研究新进展

RUNX1基因突变在骨髓增生异常综合征(MDS)、急性髓细胞白血病(AML)等多种血液肿瘤中发生率较高,并且提示患者预后不良。近年研究结果显示, RUNX1突变在髓系肿瘤的发生、发展中起重要作用,是其第Ⅱ类致病基因。笔者通过RUNX1蛋白结构与功能、不同髓系肿瘤中 RUNX1突变的发生情况、 ...     

急性髓系白血病患者NPM1、FLT3和C-KIT基因突变的检测及其预后分析

本研究旨在评估NPM1、FLT3和C-KIT基因突变在急性髓系白血病（AML）患者中的发生频率和对预后的影响,并探讨这些突变与临床特点、细胞遗传学及生存情况的关系。对我院2010年8月至2012年10月收治的78例初治AML患者,采用PCR扩增产物直接测序法或毛细管电泳法检测NPM1、FLT3和C-KIT基因的突变情况,了解这些突变阳性患者的临床特征。结果显示,NPM1突变患者在AML中的发生率为14.1%,在正常核型AML中的发生率为26.7%。NPM1基因突变者发病年龄偏高（P〈0.05）,外周血白细胞和血小板数高（P〈0.05）,CD34低表达（P〈0.05）,而在性别比例、骨髓原始细胞比例、血红蛋白浓度、CD117和HLA-DR表达水平、完全缓解（CR）率、总生存（OS）率、复发率方面差异无统计学意义（P〉0.05）。78例AML患者中9例（11.5%）FLT3-ITD突变阳性,3例FLT3-TKD（3.8%）突变阳性,无同一患者同时发生这两种突变;FLT3-ITD突变者外周血白细胞和骨髓原始细胞比例较高（P〈0.05）,总生存率偏低（P〈0.05）,多见于正常核型（P〈0.05）,而在性别比例、年龄、外周血血小板数、血红蛋白浓度、完全缓解率、复发率方面差异无统计学意义（P〉0.05）。FLT3-TKD突变例数较少,未单独进行统计学分析。6例（7.7%）C-KIT突变阳性。C-KIT突变在异常核型AML中的发生率较高（P〈0.05）,复发率较高（P〈0.05）,总生存率较低（P〈0.05）,而在性别、年龄、骨髓原始细胞比例、外周血象、完全缓解率方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：NPM1、FLT3和C-KIT突变检测有利于指导AML患者的治疗及预后评估。     

骨髓增生异常综合征患者42例分子及细胞遗传学特征分析

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者分子及细胞遗传学特征。方法回顾性分析42例2015年3月至2016年3月山西医科大学第二医院住院MDS初发患者各亚型分布,采用R显带技术及直接测序法分析患者的核型及基因突变情况。结果 42例患者其中难治性血细胞减少伴单系发育异常(RCUD)7例,难治性贫血伴环状铁粒幼红细胞(RARS)2例,难治性血细胞减少伴多系发育异常(RCMD)7例,难治性贫血伴原始细胞增多-1(RAEB-1)9例,难治性贫血伴原始细胞增多-2(RAEB-2)15例,MDS-未分类(MDS-U)2例;15例染色体核型异常(35.7%),染色体异常的发生率与患者的年龄(χ~2=0.258,P=0.611)、性别(χ~2=0.019,P=0.890)均无明显相关性。DNMT3A突变2例(4.8%),TET2突变10例(23.8%),ASXL1突变9例(21.4%),SF3B1突变2例(4.8%),RUNX1突变2例(4.8%)。RAEB组与非RAEB组除骨髓原始细胞比例有差异(U=4.5,P<0.001)外,白细胞计数(WBC)(U=192.0,P=0.542)、血红蛋白含量(HGB)(U=183.0,P=0.402)、血小板计数(PLT)(U=215.5,P=0.99)及中性粒细胞绝对值(ANC)(U=212.5,P=0.929)均无统计学差异。结论分子及细胞遗传学可以作为MDS患者诊断、分层及预后判断的重要指标。     

急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征患者NPM基因突变的研究

目的探讨染色体核型正常的急性髓系白血病（AML）和骨髓增生异常综合征（MDS）患者NPM基因突变。方法染色体核型正常的AML患者40例（初治28例，首次完全缓解期12例），MDS患者33例，用基因组DNAPCR法扩增NPM基凶第12外显子，PCR产物纯化后直接测序，发现突变患者，将PCR产物克隆至pUCm—T载体，转化大肠杆菌DH5α，至少挑选5个以上重组克隆，小量制备质粒后进行测序。结果共发现NPM突变患者6例（AML4例，MDS2例），A型突变4例，B型突变1例，新发现突变1例（命名为R型）。结论新发现了一个NPM突变类型，并在国内外首次证实MDS患者也存在NPM基凶突变，为进一步研究NPM突变与AML及MDS发生的关系提供了重要线索．     

Mitochondrial gene mutation

Mitochondrial DNA(mtDNA) anomaly was emerging as a cause of idiopathic cardiomyopathy in addition to sarcomeric gene mutation. Meanwhile, several point mutations and deletions in mtDNA initially recognized as major causes of mitochondrial encephalomyopathies are now clarified to share 1% cause of diabetes mellitus. These results indicate that mtDNA mutations will be a significant candidate for cardiomyopathies. Screening of cardiomyopathic patients with mtDNA point mutations revealed that there were at least several % of mtDNA anomaly (MELAS type) among them. They also showed specific findings in ultrastructures of the cardiac muscle.     

Identification of G6PD Mediterranean mutation by amplification refractory mutation system

Aim: To examine the plasma nitrate/nitrite (NOx—two end products of the nitric oxide metabolism) and endothelin (ET) concentrations, and response to acute adrenaline induced hypertension in diabetic rats. Materials and methods: Four groups of 4-month-old rats were used: control rats (C, n=10) rats received adrenaline (A, 40 μg/kg i.v., n=10), rats received streptozotocin (S, 50 mg/kg i.v., n=8), and rats received STZ and adrenaline (SA, n=9). The experiments were performed 4 weeks after the STZ administration. Plasma NOx, ET, glucose, and mean arterial blood pressure (MAP) were measured. Results: Plasma ET concentrations were significantly increased in diabetic rats (S and SA) in comparison with the controls and adrenaline-only administered rats. NOx concentrations in diabetic groups (S and SA) were significantly decreased in comparison with the controls. Acute adrenaline induced hypertension in diabetes leads to a significant decrease of NOx concentrations in comparison with the controls, adrenaline-only administered and STZ-only administered rats. There was no difference between the MAP in diabetic and control rats. Adrenaline injection caused a significant increase of MAP in A and SA groups. Plasma glucose concentrations in diabetic rats (S and SA) were significantly increased in comparison with the nondiabetic groups (C and A). There was a weak but significant correlation between the NOx and ET concentrations in the controls, which probably reveal the balance between these vasoactive factors. In A, S, and SA groups, no significant correlation between the NOx/ET was found. Conclusion: An impairment of the NOx and ET formation could be involved in the pathogenesis of diabetes mellitus and especially acute hypertension and diabetes. A lack of correlation between the NOx and ET probably indicated that in diabetes and acute hypertension, a primary mechanism of compensatory nitric oxide might be lost.     

Uromodulin mutation and hyperuricemia

The discovery of uromodulin mutations as a cause of FJHN and MCKD2 raises a new question; Why the mutant uromodulin causes uricemic underexcretion and hyperuricemia? Moreover, an old and still unsolved question is now highlighted; What is the physiological function of uromodulin? Recent experimental data on intracellular trafficking of uromodulin mutants and histopathological findings on renal biopsy specimens of patients are introduced. Hypotheses on mechanisms of FJHN/MCKD2 and supporting and contrary experimental findings are reviewed.     

血小板糖蛋白Ⅰbα因子突变（A156V）导致其与血管性血友病因子 …

目的：研究在流休切应力作用下表达突变的细胞与固着的血管性血友病因子（ｖＷＦ）相互作用中ＧＰⅠｂα突变（Ａ１５６Ｖ）的意义。方法在ＧＰⅠｂαｃＤＮＡ中直接诱发的突变克隆到哺乳类表达载体ｐＤＸ的ＥｃｏＲⅠ位点,随后将突变的ｃＤＮＡ转染在ＣＨＯβⅨ细胞。人的ｖＷＦ通过甘氨酸和氯化钠沉淀及在Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱分离的方法从血液冷沉淀制剂中纯化。纯化的ｖＷＦ固着在盖玻片上,在平行板液流室中进行细胞滚动研     

SPG4型和SPG31型遗传性痉挛性截瘫的MRI研究

目的：探讨SPG4型和SPG31型遗传性痉挛性截瘫（HSP）的MRI特征。方法：对经基因确诊的SPG4型和SPG31型2个家系8例HSP患者的MRI图像进行分析,并与16例性别及年龄相匹配的健康对照者MRI图像进行对照研究。采用1.5T MRI扫描仪对24例受试者行颅脑及脊髓MRI检查,分别测量C2、C7、T4、T9椎体水平脊髓横断面积,测量结果进行统计学分析。结果：8例患者颅脑MRI检查均未见明显异常。SPG31型HSP患者C2、C7、T4、T9椎体水平脊髓横断面积分别是（50.13±3.43）mm2、（40.45±2.00）mm2、（22.03±4.55）mm2、（26.10±4.55）mm2,与其对照组间差异有统计学意义（P值均<0.007）。SPG4型HSP患者脊髓横断面积与其对照组间差异无统计学意义。结论：SPG4型和SPG31型HSP患者颅脑MRI表现正常;SPG4型HSP患者脊髓MRI未见异常;SPG31型HSP患者可见颈髓及胸髓萎缩,蛛网膜下腔扩大。