大鼠冠状动脉微血栓模型的建立

背景冠状动脉微血管阻塞在急性冠状动脉综合征时相当常见,并且对预后产生不利影响.设计随机对照的实验研究.目的建立大鼠冠状动脉微血栓模型,为进一步研究冠状动脉微血管阻塞的病理生理意义奠定基础.地点、材料和干预实验在福建医科大学附属协和医院鼠类动物实验室完成.实验选取24只SPF级雄性成年SD大鼠,按随机数字表法将大鼠分为实验组和对照组,每组各12只.钳夹升主动脉后自主动脉根部注入月桂酸钠1.0 mg/kg,1.5 h后取标本.主要观察指标注入月桂酸钠后大鼠冠状动脉微血管内皮损害及微血栓形成情况;早期缺氧心肌情况.结果①注入月桂酸钠1.5h后冠状动脉微血栓组所有大鼠均出现微动脉血管内皮损伤及微动脉血栓形成,对照组无此情况(P＜0.01);冠状动脉微血栓组微动脉内皮损伤率为(10.17±2.33)%,血栓形成率为(9.42±2.02)%.②Nagar-Olsen染色显示心肌缺血区域占所观察心肌横截面面积的(7.52±2.26)%,对照组无心肌缺血(P＜0.01).结论月桂酸钠可稳定地诱发冠状动脉微血栓形成,此模型可作为冠状动脉微血栓及微栓塞研究的平台.     

微血管内血栓形成与参芪脑保颗粒的预防作用

目的：研究中药参芪脑保颗粒对大鼠肠系膜微血管内血栓形成的预防作用。方法：实验于2001-09／12在解放军总医院微循环实验室进行。将24只Wistar大鼠随机分为实验对照组和参芪脑保预防组，分别给予饮用水及参芪脑保颗粒灌胃，连续5d，于第6天用光化学法制成肠系膜血栓模型，观察光照后微血管内血栓形成的时间、不同时间点血栓形成的大小及血栓占管腔的面积比。结果：参芪脑保预防组比实验对照组血栓出现时间晚；血栓的大小在光照后1min[(15．39&;#177;6．54)&;#215;100μm^2]，10min[(22．28&;#177;7．84)&;#215;100μm^2]也较对照组小[(17．05&;#177;2．45)，(25．45&;#177;9．12)&;#215;100μm^2]，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)，参芪脑保预防组血栓占管腔的面积比在光照后1min[(38．10&;#177;13．24)％]，10min[(52．09&;#177;17．12)％]，均较实验对照组小[(42．0&;#177;17．87)％，(56．63&;#177;14．62)％，P&;lt;0．05]。结论：参芪脑保颗粒对大鼠肠系膜微血管内血栓形成有预防作用。     

超早期联合应用中药对缺血性脑卒中大鼠脑组织结构、含水量及酶活性的影响

目的：观察联合应用中药脑髓康、参麦注射液、蝮蛇抗栓酶超早期治疗对脑梗死模型大鼠神经缺损体征和脑细胞受损的改善作用及对脑组织超氧化物歧化酶、丙二醛的影响。方法：实验分为7组：模型制作后超早期治疗组，模型制作后2，4，6，10h治疗组，模型对照组，正常对照组。用颈内动脉注射月桂酸钠方法复制大鼠急性脑梗死模型，脑髓康灌胃给药，参麦注射液、蝮蛇抗栓酶股静脉注射给药。结果：超早期治疗组和2h治疗组对改善脑水肿有明显效果。超早期治疗组脑组织含水量[(77．35±1．34)％]与模型对照组[(80．16±1．89)％]比较明显减少(P<0．01)；2h治疗组脑组织含水量[(77．63±1．24)％]与模型对照组比较明显减少(P<0．05)。4，6，10h治疗组对改善脑水肿效果不明显(P>0．05)。超早期治疗组和模型制作后2，4，6，10h治疗组均能明显升高脑内超氧化物歧化酶水平，降低丙二醛水平，与模型对照组[超氧化物歧化酶水平为(2．94±0．56)NU／mg，丙二醛水平为(4．58±0．39)nmol／L]比较均有显著性差异(t=4．48—9．28，P均<0．01)。电镜显示超早期治疗组和模型制作后2h治疗组脑内超微结构比模型组有明显改善。结论：联合应用中药脑髓康、参麦注射液、蝮蛇抗栓酶超早期治疗可明显减轻缺血脑组织水肿，减轻过氧化反应导致的损伤，改善微血管、神经细胞、胶质细胞的超微结构，恢复神经元功能。     

急性外周神经损伤时大鼠c-fos和c-jun mRNA表达的时序性变化

目的：了解c-fos，c-jun mRNA在大鼠背根神经节细胞的表达情况，探讨急性外周神经损伤对大鼠背根神经节的c-fos，c-jun mRNA表达的影响。方法：建立大鼠的坐骨神经切断模型，利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法，检测急性外周神经损伤后，在不同的时间点(5，15，30，60，120min)大鼠的背根神经节的c-fos，c-jun mRNA表达。结果：损伤后5min损伤组与对照组间c-fos，c-jun表达[(0．51±0．18)％，(0．63±0．17)％]差异无显著性意义(P>0．05)。c-fos于损伤后30～120min表达为(1．41±0.22)％，(1．22±0.21)％，(0．98±0．17)％．与对照组比较，差异有显著性意义(P<0．05)；c-jun于损伤后15—120min表达为(0．63±0．17)％，(0．80±0.20)％，(1．47±0．17)％、(2．68±0．22)％，(1.60±0．18)％，与对照组比较，差异有显著性意义(P<0.05)。损伤后c-fos，c-jun mRNA表达逐渐升高，呈时间依赖性。结论：c-fos，c-jun是神经细胞损伤的敏感标志，急性外周神经损伤能引起c-fos，c-jun mRNA表达的时序性变化，为基因水平认识和防护外周神经损伤提供理论依据。     

弱激光对老年冠心病患者血流动力学参数的影响

背景：有报道针刺内关穴对心血管系统有特异的生理效应。采用氦氖激光束替代针刺在内关穴进行照射改善老年冠心病患者的心脏功能。目的：观察氦氖激光内关穴照射对老年冠心病患者循环系统的影响。设计：自身前后对照观察。单位：武警河南省总队医院。对象：2000／2001武警河南省总队医院康复疗养的老年冠心病患者40例。男28例，女12例；年龄66～85岁，平均70岁；病程2～20年；合并原发性高血压15例。高脂血症7例。方法：采用氦氖激光照射内关穴，波长为632．8nm，功率为5mW，15min／穴，1次／d，20次为1个疗程。治疗前、首次治疗后即刻和第1疗程结束后检测血流动力学指标。主要观察指标：①老年冠心病患者氦氖激光照射前后心脏功率参数中心脏总功率、左心室有效功率及左心排指数的变化。②心肌收缩力参数中左室总泵力、左室喷血压、左室有效泵力及射流压力的变化。③冠状动脉循环参数中心肌耗氧量、冠状动脉缺血阈值及心肌柔顺性参数的变化。④心肌弹性模量的变化．结果：纳入老年冠心病患者40例，全部进入结果分析，无脱落者。①首次治疗后与治疗前比较：心脏功率参数(心脏总功率、左心排指数、左室有效功率参数)均降低[(534．086&;#177;90．923)，(616.587&;#177;137．426)J／min；(4．821&;#177;0．622)，(5．469&;#177;1．144)L／min&;#183;m^2；(116.528&;#177;22.476)，(136．603&;#177;30．796)J／min．P&;lt;0．05或P&;lt;0．01]，冠状动脉循环参数中的心肌耗氧量降低，冠状动脉缺血阈值参数升高[(22．783&;#177;4．174)，(25．255&;#177;6．125)mL／min，(180．108&;#177;31．210)，(157．031&;#177;35．056)g／cm^4s^2，P&;lt;0．01]。②第1疗程结束后与治疗前比较：心脏功率参数心脏总功率降低[(489．291&;#177;118．434)，(616．587&;#177;137．426)J／min，P&;lt;0．05]，冠状动脉循环参数中心肌耗氧量降低，冠状动脉缺血阈值升高[(22.472&;#177;6．011)，(25．255&;#177;6．125)mL／min，(193．757&;#177;51．704)，(157．031&;#177;35．056)g／cm^4s^2．P&;lt;0．01]。结论：采用氦氖激光照射器将氦氖激光束替代针刺在内关穴进行照射治疗老年冠心病，能发生热效应、生物学效应和电磁场的场效应等，激发“经络”的生理功能，达到改善心脏负荷率和心肌的耗氧量，提高组织的供氧量和利用率，改善冠状动脉舒缩功能，使冠状动脉供血和循环改善。     

骨髓干细胞动员与缺血心肌血管再生

目的：探讨动员急性心肌梗死大鼠骨髓干细胞归巢于梗死心肌后实现血管再生的能力。方法：实验选用10～12周龄的雄性Wistar(清洁级)大鼠60只，随机分为3组：急性心肌梗死+动员组、急性心肌梗死组及对照组，每组20只。结扎Wistar大鼠左冠状动脉制作心肌梗死模型，用骨髓干细胞动员剂粒细胞集落刺激因子动员自体骨髓干细胞释放并归巢于心肌梗死灶，于造模后24，48h和4周杀死大鼠，取出心脏，通过免疫组化方法观察心肌梗死灶、边缘区和正常心肌组织CD34阳性细胞、血管内皮生长因子及其受体的表达，以及Ⅷ因子表达，并应用流式细胞术比较动员前后外周血中CD34阳性细胞数量的变化。结果：急性心肌梗死+动员组大鼠造模24h，4周后外周血CD34细胞数量分别为(0．919&;#177;0．187)％，(0．834&;#177;0．110)％，明显高于造模前【(0.043&;#177;0．023)％】及心肌梗死组大鼠造模24h，4周后【(0．071&;#177;0.104)％，(0.062&;#177;0.296)％】(t=2.697，2.354，2.492，2.195，P&;lt;0.05)。急性心肌梗死+动员组大鼠心肌梗死区可见CD34阳性细胞浸润；制模后4周，急性心肌梗死+动员组微血管新生数明显多于急性心肌梗死组和对照组(t=3.125，3.308，P&;lt;0.01)。急性心肌梗死+动员组大鼠梗死灶及周围组织中血管内皮生长因子及其受体的表达量均明显高于急性心肌梗死组及假手术组(t=2．099～3．398，P&;lt;0．05)。结论：骨髓干细胞动员的方法在大鼠急性心肌梗死模型中，能通过动员内皮干细胞归巢于梗死灶内，有效促进微血管形成；还通过上调血管内皮生长因子及其受体的表达，促进血管再生，促进缺血心脏功能恢复。     

血管内皮功能障碍与冠状动脉硬化的关系

目的评定血管内皮功能障碍与冠状动脉粥样硬化的关系。方法306例怀疑冠心病的患者冠状动脉造影后行超声扫描肱动脉血管内皮功能检测，其中男195例，女111例，平均年龄(57&;#177;12)岁。根据冠状动脉造影结果分成3组，A组172例，有明显的血管狭窄，即血管内径狭窄≥50％；B组8l例，血管内径狭窄&;lt;50％；C组53例，无血管狭窄。所有患者均于冠状动脉造影后3d内行肱动脉内皮功能检测。结果3组间基础血管内径、血流速度差异无显著性意义(t=1．02；P&;gt;0．05)。反应性充血内径变化值A组与B组(t=4．78；P&;lt;0．05)、C组(t=16．92；P&;lt;0．001)以及B、C两组间(t=6．89；P&;lt;0．01)差异具有显著性意义；反应性充血血流速度变化值A组与B组(t=5．57：P&;lt;0．05)、C组(t=12.08;P&;lt;0．001)，以及B、C两组间(t=8．56；P&;lt;0．01)差异均有显著性意义。结论 肱动脉内皮功能不良可间接反应冠状动脉内皮依赖性舒张功能受损，与冠状动脉狭窄密切相关，是冠状动脉病变良好的预测指标。     

参七汤对大鼠缺血心肌内皮素基因表达的影响

目的：研究参七汤对心肌缺血大鼠心肌内皮素影响的分子机制。方法：将SD大鼠随机分为正常对照组、缺血组和参七汤组，利用垂体后叶素造模，分别测定各组心肌内皮素浓度及内皮素-1基因的表达。结果：参七汤组心肌内皮素浓度明显低于缺血组(2．28&;#177;0．50，6．87&;#177;1．70，P&;lt;0．01）。免疫组化显示缺血组心肌内皮素-1染色灰度值明显低于参七汤组(心房肌：167．63&;#177;4．28，182．75&;#177;7．74，P&;lt;0．01；心室肌：154．38&;#177;4．05，182．97&;#177;2．14，P&;lt;0．05)。结论：参七汤可显著降低缺血心肌内皮素浓度，可能是参七汤所代表的益气补元活血法能有效抑制缺血心肌内皮素-1基因的表达及蛋白合成。     

心理应激对不同行为类型者血浆环核苷酸含量的影响

背景：在分子生物学基础上探讨冠心病发病中介机制研究的较少，而从这一水平上研究冠心病的发病机制十分有利于其预防和控制。目的：了解不同行为类型应激者血浆环核苷酸变化，为探讨心理行为因素引起冠心病的中介机制的研究提供前瞻性资料。设计：前瞻性研究。地点、对象和方法：通过问卷从300名志愿者中随机筛选出A型行为与B型行为高考生各19人为研究对象，考前80d和考前1d分别于16：30～17：00抽取潍坊一中A、B型行为学生静脉血，检测血浆环核苷酸含量，观察心理应激(应激源为高考)对不同行为类型者血浆环核苷酸含量的影响。主要观察指标：应激前后血浆环核苷酸含量。结果：应激前A型行为高考生的血浆环一磷酸腺苷(cAMP)含量[(15.46&#177;3.56)nmol／L]显著高于B型行为的高考生[(12.09&#177;2.78)nmol／L]，差异有非常显著性意义(t=3.25，P&lt;0.01)；应激后，A型行为高考生的cAMP，cAMP／环一磷酸鸟苷(cGMP)降低[分别为(10.911&#177;3.950)，(5.526&#177;1.488)nmol／L]，与应激前比较，差异有显著性意义(t=12.25，8.14，P&lt;0.001)，cGMP升高了[(2.962&#177;0.764)nmol／L](t=9.06，P&lt;0.001)；B型行为高考生的cAMP，cAMP／cGMP降低[分别为(7.379&#177;1.762)，(3.677&#177;1.488)nmol／L](t=7.42，7.56，P&lt;0.001)；cGMP升高了[(2.280&#177;0.685)nmol／L](t=-7.52，P&lt;0.001)；A型行为考生cAMP，cAMP／cGMP下降幅度显著大于B型行为高考生(t=3.56，3.83，P&lt;0.001)。结论：高考应激对A型行为高考生血浆环核苷酸含量影响显著大于B型行为高考生。     

不同波形低频脉冲磁场对大鼠心肌微血管内皮细胞的影响

目的研究在固定时间和频率的情况下不同波形的低频脉冲磁场(LF PMFs)对大鼠心肌微血管内皮细胞（CMECs）增殖、细胞周期、凋亡、迁移、细胞骨架以及一氧化氮（NO）分泌能力的影响。 方法磁场频率为15 Hz，磁场强度分别为0.6 mT、1.2 mT、1.8 mT、2.4 mT,作用时间为4 h/d,连续作用5 d的情况下，以矩形和三角形2种波形磁场分别作用于离体大鼠心肌微血管内皮细胞，对照组不加干预。 结果矩形波磁场促进内皮细胞增殖(P<0.01)，使其细胞周期分布发生改变(P<0.01)，DNA合成期(S期)和合成后期（G2期）细胞比例增加，凋亡率降低(P<0.05)，细胞迁移能力显著增强(P<0.01)，曝磁后细胞骨架结构发生重构，应力纤维增多, NO分泌能力增加(P<0.01)；三角波磁场0.6 mT组和2.4 mT组促使CMECs增殖(P<0.05)，细胞周期改变(P<0.05)，凋亡率降低(P<0.05)，迁移能力增强(P<0.05)，细胞骨架重构，NO分泌能力提高(P<0.05)。而三角波磁场1.2 mT组和1.8 mT组上述效果均不明显(P＞0.05)。 结论大鼠CMECs的增殖、细胞周期、凋亡、迁移、细胞骨架以及NO分泌能力除受LF PMFs频率和强度影响外，还受磁场波形的影响。【关键词】低频脉冲磁场；心肌微血管内皮细胞；增殖；细胞周期；凋亡；迁移；细胞骨架；一氧化氮