阿尔茨海默病APPswe/PS1△E9双转基因小鼠脑区中老年斑的分布

目的:观察老年斑在不同月龄的APPswe/PS1△E9双转基因小鼠脑区中的分布.方法:将雄性的杂合子小鼠与C57BL/6J雌鼠交配,所生的小鼠提取鼠尾DNA,PCR扩增目的基因.取鉴定为阳性的2.5、4.5、8月龄的杂和子小鼠各3只,进行Thioflavine S和Aβ免疫组织化学染色,观察老年斑的沉积.结果:共生产小鼠F1代39只,鉴定为阳性的有17只,阳性率为43.6%.组织学染色发现2.5月龄小鼠的脑区未见老年斑沉积,而4.5月龄及8月龄小鼠的皮质及海马可见老年斑沉积,并且随着月龄的增加,老年斑的数目增多,面积增大.结论:APP-swe/PS1△E9双转基因小鼠在4月龄时已有老年斑的沉积,为研究AD提供了很好的载体.     

阿尔茨海默病APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠脑区中老年斑的分布

目的:观察老年斑在不同月龄的APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠脑区中的分布。方法:将雄性的杂合子小鼠与C57BL/6J雌鼠交配,所生的小鼠提取鼠尾DNA,PCR扩增目的基因。取鉴定为阳性的2.5、4.5、8月龄的杂和子小鼠各3只,进行Thioflavine S和Aβ免疫组织化学染色,观察老年斑的沉积。结果:共生产小鼠F1代39只,鉴定为阳性的有17只,阳性率为43.6%。组织学染色发现2.5月龄小鼠的脑区未见老年斑沉积,而4.5月龄及8月龄小鼠的皮质及海马可见老年斑沉积,并且随着月龄的增加,老年斑的数目增多,面积增大。结论:APP-swe/PS1ΔE9双转基因小鼠在4月龄时已有老年斑的沉积,为研究AD提供了很好的载体。     

轻度认知障碍脑脊液细胞因子与Tau蛋白和β淀粉样蛋白的关系

轻度认知损害（MCI）是介于正常衰老和痴呆之间的一种认知功能损害状态。是指有轻度记忆或认知障碍但并未发生痴呆,其发病与患者当时神经、精神及内科疾患无关。流行病学研究,Johnson等报道MCI2年后有40％进展为阿尔茨海默病（AD）,McKelvey等报道3年后是53％;Krasuki等报道4．5年后是100％,而相同年龄的正常个体每年发生AD的几率为1%～2％,因此许多学者认为MCI代表AD的极早期阶段。早期确诊MCI,可预防或推迟AD的发生。     

β淀粉样蛋白和肿瘤坏死因子对老年性痴呆患者的药效评价

目的测定老年性痴呆(Alzheimerdsease,AD)患者治疗前后β-淀粉样蛋白(β-AP)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,进而比较不同药物疗效。方法用放免法测定45例按用药不同分组的患者和30例正常对照组的β-AP和TNF-α含量。结果AD组血清β-AP和TNF-α均明显高于正常对照组疗后两者含量均低于治疗前;脑活素对AD疗效高于脑复康。结论测定β-AP和TNF-α含量变化,对AD患者病情预测和疗效评定有一定帮助。     

黄连解毒汤对APP/PS1双转基因AD小鼠海马区病理形态学及脑内β-APP基因mRNA的影响

目的:探讨黄连解毒汤(HLJDD)对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马CA1区的病理形态学及脑内β-淀粉样前体蛋白(β-APP)基因mRNA的影响。方法:选用3月龄的APP/PS1双转基因AD小鼠模型50只,随机分为对照组、安理申组、HLJDD大剂量组、HLJDD中剂量组、HLJDD小剂量组各10只,分别给予安理申或不同剂量HLJDD灌胃治疗6个月,对照组不予治疗,记录并比较各组死亡率;分别于6月龄和10月龄时采用HE染色观察各组海马CA1区神经细胞形态,采用改良甲醇刚果红染色观察各组老年斑形成情况;于末次灌胃治疗后,通过实时荧光定量PCR检测各组脑内β-APPmRNA水平。结果:各组小鼠死亡率差异无统计学意义;10月龄HLJDD各剂量组海马CA1区神经损伤情况较对照组明显减轻,老年斑数量少于对照组(P0.05);HLJDD各剂量组β-APPmRNA水平低于对照组(P0.05),其中以中剂量组水平降低最明显(P0.01)。结论:HLJDD能保护海马神经细胞。     

α-玉米赤霉醇改善Aβ诱导痴呆模型小鼠认知行为的实验研究

目的观察α-玉米赤霉醇(α-ZAL)对阿尔茨海默病(AD)小鼠模型认知行为的改善作用及其机制。方法将40只成年雌 性小鼠随机分为对照组、模型组、苯甲酸雌二醇(EB)组和α-ZAL组,每组10 只。除对照组外,其他组于实验开始后第7 天于脑室 内注射β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)3 nmol 造成拟AD痴呆模型。对照组和模型组肌肉注射橄榄油0.05 ml/d,共14 d;EB组肌肉注射EB0.1 nmol/d,共14 d;α-ZAL组肌肉注射α-ZAL 0.1nmol/d,共14 d。Morris 水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力。分光光度法和同位素法测脑内氧化应激指标和一氧化氮(NO)系统改变。结果模型组Morris 水迷宫末次寻台潜伏期明显延长(P<0.01),EB 组和α-ZAL组较模型组缩短(P<0.05)。模型组脑内过氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)下降(P<0.05),丙二醛(MDA)、原生型一氧化氮合酶(cNOS)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和NO上升(P<0.05);除α-ZAL组海马SOD和cNOS外(P>0.05),EB组和α-ZAL组各指标均优于模型组(P<0.01)。EB组和α-ZAL组之间无显著性差异(P>0.05)。结论α-ZAL和EB一样能通过提高脑内抗氧化和降低脂质过氧化能力,拮抗Aβ和NO的神经毒性,明显改善AD模型小鼠的认知行为。     

阿尔茨海默病患者血清Aβ1-42和血小板聚集功能联合测定的临床意义

目的：探讨血清β-淀粉样蛋白（Aβ-42）、血小板聚集功能（PAgT）在阿尔茨海默病（AD）诊疗中的临床意义。方法：采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测26例AD患者和28例健康对照者血清中Aβ1-42蛋白水平,采用比浊法检测其PAsT水平。结果：AD患者Aβ1-42水平为（38．5±12．4）Pg／ml明显低于于对照组（56．6±14．2）Pg／ml（P〈0．01）,PA盯水平为为（64．2±13．5）％则明显高于对照组（53．6±7．6）％（P〈0．01）。Pearson相关分析显示简易智能状态检查量表（MMSE）评分与PAgT呈明显负相关（r=-0．439,P〈0．05）。结论：动态检测AD患者血清AB1-42、PAgT水平的变化,在AD临床诊疗中有着重要意义。     

TRAIL在Aβ25-35诱导的大鼠海马组织中的表达

[目的]研究Aβ25-35诱导的AD大鼠TRAIL蛋白表达的变化,进一步阐明AD的发病机制.[方法]选用智能正常的健康雌性Wistar大鼠,双侧海马注射Aβ25-35,制备AD大鼠模型,免疫组化法观察大鼠海马组织TRAIL蛋白的表达.[结果]与正常组相比.模型组TRAIL蛋白表达阳性率明显升高,雌激素治疗组与模型组相比,TRAIL蛋白表达明显降低.[结论]TRAlL蛋白的表达引起神经元凋亡是AD的发病机制之一.     

过表达精神分裂断裂基因1对APP/PS1转基因阿尔茨海默病小鼠突触可塑性及学习记忆能力的改善

目的 探索精神分裂断裂基因1(DISC1)对APP/PS1转基因阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)小鼠突触可塑性及学习记忆能力的影响.方法 Western blot比较正常人和AD患者脑组织中DISC1的表达情况;体外培养C57胎鼠神经元,分为GFP组、GFP+Aβ组、DISC1+Aβ组,激光...     

阿尔茨海默病发病与淀粉样β蛋白1～42／α1-抗糜蛋白酶复合物及脂质代谢紊乱的关系

目的：研究淀粉样β蛋白(Aβ）1～42与α1-抗糜蛋白酶(antichymotrypsin，ACT)形成的复合物对神经胶质瘤细胞(DK-MG)脂质代谢的影响，探索脂质代谢紊乱与阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)发病机制的相关性。方法：实验于2001-01／2002-03在瑞典隆德大学附属马尔默医院Wallenberg实验室和首都医科大学宣武医院神经内科实验室完成，Aβ1～42与ACT溶液室温下以10：1摩尔比混合孵育2h，琼脂糖凝胶电泳和Western-blot检测反应产物Aβ1～42／ACT。观察在Aβ1～42／ACT存在的条件下，细胞对低密度脂蛋白(low-density lipoprotein，LDL)的摄取、降解和细胞内胆固醇的合成；红油O染色观察细胞内脂质的含量；RT-PCR检测LDL受体(LDLr)的mRNA表达水平。结果：Aβ1～42，ACT单克隆抗体染色证实Aβ1～42／ACT复合物的存在.与对照组细胞相比，Aβ1～42／ACT使细胞摄取LDL增加50％(t=10．30．P&;lt;0．01)，胞内脂质颗粒增加20倍(t=6．84，P&;lt;0．05)，LDLr的mRNA水平增加48％(t=20．79，P&;lt;0．01)。相反，Aβ1～42，ACT单分子对上述脂质代谢过程没有显著影响。Aβ1～42，ACT，Aβ1～42／ACT对LDL降解、细胞内胆固醇的合成都没有影响。结论：Aβ1～42／ACT复合物使神经胶质细胞内的脂质累积增加，可能是LDLr表达上调增加LDL摄取的结果。脂质代谢紊乱是AD发病的假说之-，Aβ1～42通过与ACT结合对脂质代谢造成的影响可能与AD的发病机制相关。     

霍乱毒素B亚单位-神经生长因子耦联制剂滴鼻对拟痴呆小鼠空间学习记忆的影响

目的观察霍乱毒素B亚单位(cholera toxin B subunit, CB)与神经生长因子(NGF)耦联制剂滴鼻治疗对拟痴呆小鼠学习记忆能力及胆碱能神经系统的影响。方法用改进的过碘酸钠法使CB-NGF耦联,滴鼻治疗脑室内注射β样淀粉蛋白(Aβ_25-35)的拟AD小鼠模型;CB-NGF 7-5 μg/d、15 μg/d滴鼻治疗7 d,Morris水迷宫检测其空间学习记忆能力;免疫组织化学染色胆碱乙酰化酶(ChAT)。结果未经治疗的模型鼠寻台潜伏期明显延长(P<0-01);在安全岛所在象限的停留时间明显缩短,斜角带区ChAT阳性细胞数量显著减少(P<0-001)。NGF及CB-NGF滴鼻治疗组寻台潜伏期有所缩短,在安全岛象限内的停留时间比模型组明显延长(P<0-01);基底前脑斜角带区ChAT染色明显增多(P<0-01)。结论CB-NGF滴鼻治疗可改善痴呆小鼠的空间认知能力,与其保护胆碱能神经有关。     

运动训练对D-半乳糖造阿尔茨海默病模型大鼠海马β位淀粉样蛋白42和裂解酶1的影响

目的:探讨游泳+跑台的混合运动训练对D-半乳糖所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马内β位淀粉样蛋白42和裂解酶1(Aβ42、BACE1)的影响。方法:将16只雄性SD大鼠随机分为安静注射组(C组)和运动注射组(T组),所有大鼠连续8周腹腔注射D-gal造阿尔茨海默病模型大鼠,同时,T组大鼠连续进行8周的游泳和跑台(均每周3次,交替进行)相结合的混合运动训练。运用WesternBlot法检测大鼠海马Aβ42蛋白表达量,运用RT-PCR法检测大鼠海马BACE1mRNA和IGF-1mRNA的表达量。结果:①与C组相比,T组大鼠海马内Aβ42蛋白表达量显著减少,具有极显著性差异(P<0.01);②C组比T组大鼠海马内BACE1mRNA表达量多,具有显著性差异(P<0.05);③与C组相比,T组大鼠海马内胰岛素源生长因子(IGF)-1mRNA表达增加,具有极显著性差异(P<0.01)。结论:游泳和跑步混合运动训练能延缓AD的发展进程,这可能与运动训练上调了AD大鼠海马内IGF-1mRNA表达有关。     

阿尔茨海默症及其防治

本文就阿尔茨海默症的病因、发病机制及防治作一综述。     

碱性纤维母细胞生长因子对AD细胞模型PKCγ活性影响

目的 研究碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞存活率、蛋白激酶Cγ(PKCγ)蛋白表达的影响.方法 经体外培养的PC12细胞分正常对照组(常规培养液)、Aβ损伤组(加入培养液及老化Aβ25-35)、bFGF组(加入培养液、bFGF及老化Aβ25-35).MTT法检测不同处理组PC12细胞存活率,Western Blot 免疫印迹法分析PKCγ蛋白表达变化.结果 Aβ损伤组PC12细胞存活率低于正常对照组(P ＜0.05),bFGF组细胞存活率高于Aβ损伤组(P＜0.05).Western Blot 结果 显示,Aβ损伤组PKCγ(0.68±0.07)较对照组PKCγ(0.8±0.08)表达显著下降;Aβ损伤组在加入不同浓度的bFGF后PKCγ的值分别为:1.04±0.10,1.20±0.12,1.39±0.03,1.69±0.16,较 Aβ损伤组 PKCγ(0.65±0.06)蛋白表达显著增强,并与 bFGF浓度呈正相关.结论 bFGF对Aβ诱导的PC12细胞损伤具有一定保护作用,可能是通过增强PC12细胞PKCγ蛋白表达而实现.     

帕金森病患者合并认知功能障碍与血清Aβ1-42、胱抑素C、尿酸水平的关系

目的:探讨帕金森病(PD)患者合并认知功能障碍与血清Aβ1-42、胱抑素C(CysC)、尿酸(UA)水平的关系。方法:收集108例散发型PD患者(PD组)及同期就诊于本院体检中心的108例健康体检者(对照组)的血清,记录人口学资料及血CysC、UA的检验结果,采用ELISA法检测2组血清的Aβ1-42水平。结果:PD组的血清Aβ1-42水平、UA水平低于对照组(P0.05),CysC水平高于对照组,差异均有统计学意义(P0.001)。中晚期PD患者较早期PD患者的CysC水平升高(P0.05)。随认知障碍加重,Aβ1-42水平呈现降低趋势,CysC呈升高趋势,但差异均无统计学意义(P0.05)。PD组的血清CysC水平与Mo CA评分中命名部分呈显著正相关(P0.01);PD组的UA水平与UPDRSⅢ评分负相关(P0.05),与MMSE评分、Mo CA评分正相关(P0.05)、视空间与执行功能、命名呈显著正相关(P0.01)。结论:PD患者血清Aβ1-42水平及血尿酸水平降低,CysC水平升高。     

丰富运动环境下甲基汞对海马神经毒性减轻效果的Morris water maze实验评价

目的 观察在胎儿期被甲基汞损伤的海马神经在成长过程中通过丰富的运动环境条件对其神经毒性减轻效果的影响。方法 C57BL/J6Cr鼠妊娠12～14日在3d内，连续经口投入4mg/kg甲基汞进行染毒，对照组用同量的生理盐水投入。出生后的雄性子代分别在单匹、多匹、多匹 运动装置(丰富运动环境)条件下饲养8周，然后进行Morris water-maze实验。结果 因甲基汞暴露到达坐标的时间(空间记忆水平)单匹和多匹群都表现出时间延长的倾向，而丰富运动环境群却没有观察到这一现象。结论 从Morris water-maze实验的现象上观察，丰富的运动环境条件对甲基汞的海马神经毒性具有减轻作用。     

血管性痴呆大鼠模型的改良

目的采用改良2-血管阻断法(2-VO)+硝普钠降压法制作血管性痴呆(VD)大鼠模型。方法夹闭双侧的颈总动脉20 min后,复灌10 min,连续3次,同时硝普钠降压。结果 2-VO+硝普钠降压法制作VD模型动物存活率高,海马神经元损伤明显,行为学异常。结论改良2VO+硝普钠降压法是制作大鼠血管性痴呆模型的理想方法之一。     

ApoE基因敲除小鼠认知功能障碍的Morris水迷宫观察

目的：评估ApoE基因敲除（ApoE knockout，ApoEKO）小鼠的学习记忆功能。方法：采用经典Morris水迷宫，测试3月龄雄性ApoEKO小鼠与C57BL／6J小鼠，共训练7天，记录每天的潜伏期与游泳轨迹，分析小鼠在目的象限停留的时间；第8天去除平台，记录小鼠停留各象限的时间百分比。结果：所有小鼠的潜伏期都逐渐缩短，C57BL/6J小鼠获取隐藏平台位置的速度明显比ApoEKO小鼠快，在目的象限停留的时间也明显比ApoEKO小鼠长，但这仅表现在最初几天，最终二者的成绩日趋接近，第8天空间搜索实验结果二者差异无显著性意义。结论：水迷宫测试成绩显示ApoEKO小鼠存在认知功能障碍，主要表现在训练最初阶段，即获取信息阶段：给予足够的训练后，ApoEKO小鼠的表现能够达到正常C57BL／6J小鼠的水平。