基质细胞衍生因子1对阿尔茨海默病小鼠脑内Aβ的清除作用

目的观察基质细胞衍生因子1（SDF-1）对阿尔茨海默病小鼠脑内β淀粉样蛋白（Aβ）的清除作用,并研究其作用机制。 方法将12只APP/PS转基因小鼠按随机数字表法分为治疗组和对照组,治疗组给予侧脑室SDF-1注射,对照组给予侧脑室磷酸缓冲盐溶液（PBS）注射,每周1次,连续注射8周。治疗8周后,采用免疫荧光组织化学方法观察并比较2组注射后小鼠脑内Aβ斑块的数量和面积,以及小胶质细胞分布及斑块相关的小胶质细胞的数量。 结果治疗8周后,治疗组小鼠海马区域Aβ斑块的相对面积和数量为（0.4527±0.0711）%和（0.004837±0.001074）%,与对照组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;治疗组小鼠皮质区域Aβ斑块的相对面积和数量与对照组比较,差异亦均有统计学意义（P<0.05）。治疗8周后,治疗组海马和皮质区域斑块相关的小胶质细胞的数量与对照组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论SDF-1α侧脑室注射可能减少APP/PS1小鼠脑内Aβ的斑块,其作用机制可能是SDF-1增加了小胶质细胞向Aβ斑块的趋化作用,从而促进Aβ斑块的吞噬清除。     

pEGFP/A_2M(FP_6)转染神经干细胞海马移植治疗APP/PS1双转基因AD小鼠的实验观察

目的:携带pEGFP/A2M(FP6)的神经干细胞(NSCs)定向移植到APP/PS1双转基因AD小鼠海马内,观察移植细胞的分化、迁移,脑内Aβ沉积的变化,以及对AD小鼠学习记忆功能的影响。方法:APP/PS1转基因AD小鼠分为假手术(SO)组、人工脑脊液(ACSF)组、转染pEGFP的NSCs(pEGFP-NSCs)组及转染pEGFP/A2M(FP6)的NSCs(pEGFP/A2M(FP6)-NSCs)组,移植物小鼠海马CA1区定位注射,水迷宫实验检测小鼠认知功能,免疫组化观察小鼠脑内移植细胞的分化、迁移及Aβ病理变化。结果:pEGFP/A2M(FP6)-NSCs组和pEGFP-NSCs组转基因小鼠逃避潜伏期较SO组及ACSF组显著缩短(P<0.05);pEGFP/A2M(FP6)-NSCs组转基因小鼠逃避潜伏期较pEGFP-NSCs组缩短(P<0.05)。pEGFP/A2M(FP6)-NSCs组和pEGFP-NSCs组转基因小鼠海马及皮质内,部分Aβ染色阳性斑块周围可见表达EGFP的移植细胞。pEGFP/A2M(FP6)-NSCs组转基因小鼠额叶、海马区域,Aβ染色阳性斑块数量和平均面积均较其他3组显著减少(P<0.05)。移植的NSCs,部分细胞Nestin染色呈阳性,部分细胞GFAP染色呈阳性,少数细胞MAP-2染色呈阳性。结论:移植pEGFP/A2M(FP6)NSCs到APP/PS1双转基因AD小鼠海马,可减少AD小鼠脑内Aβ斑块沉积,部分移植的NSCs分化为神经元及星形胶质细胞,小鼠的学习记忆功能显著改善。     

APP/PS1转基因AD小鼠脑内淀粉样斑块与铁沉积的磁敏感成像研究

目的 应用三维增强磁敏感成像(3D-enhanced susceptibility weighted angiography,ESWAN)技术检测APPswe/PSEN1de9基因突变型小鼠(购自美国Jackson Laboratory,简称为APP/PS1转基因小鼠)脑不同部位的平均相位值(mean phase value,MPV),并探讨其与铁蛋白及淀粉样斑块分布的相关性。材料与方法 APP/PS1转基因小鼠及野生型对照组小鼠行T1WI、T2WI和ESWAN序列扫描,测量小鼠脑皮质区、海马区及丘脑区MPV。对鼠脑组织进行铁蛋白和Aβ蛋白的免疫组化染色,并分别计数感兴趣区内染色斑块数量和面积所占百分比。对感兴趣区MPV与斑块数量、斑块面积百分比采用Pearson检验进行相关分析。结果 APP/PS1转基因小鼠与对照组小鼠皮质区(t=-2.201,P=0.045)和海马区(t=-2.524,P=0.024)的MPV值差异均具有统计学意义。APP/PS1转基因小鼠与对照组小鼠丘脑区的MPV差异不具有统计学意义(t=-2.094,P=0.055)。APP/PS1转基因小鼠每组中的MPV与铁蛋白斑块数量与范围分别具有显著相关性(P0.05);淀粉样斑块与铁蛋白的数量与范围分别具有相关性(P0.05)。结论 APP/PS1转基因小鼠脑内MPV与脑内铁沉积具有显著相关性。APP/PS1转基因小鼠脑内皮质区、海马区及丘脑区的铁沉积持续进行,并且与淀粉样斑块的形成具有相关性。     

参乌胶囊对APP转基因小鼠学习记忆能力及脑β-淀粉样肽含量的影响

目的观察中药参乌胶囊对APP转基因小鼠学习记忆能力的影响及其作用机制.方法将APP 695V717I转基因小鼠随机分为模型组、参乌小剂量(0.4g/kgg/kg·d)组和大剂量(1.2·d)组,同月龄同背景C57BL/6J小鼠为对照组.各组老鼠从4月龄至10月龄灌胃给药或水,然后应用Morris水迷宫和物体识别实验检测小鼠的学习记忆能力;用放射免疫法检测小鼠脑皮层匀浆中β-淀粉样肽(Aβ)的含量;用刚果红染色检测皮层淀粉样斑块的数目.结果模型小鼠在Morris水迷宫实验中的游泳时间和游泳距离较对照组明显延长(P<0.01),对新物体的探索相对时间缩短,皮层可溶性Aβ含量升高(P<0.05),脑内淀粉样斑块明显增多(P<0.01).与模型组比较,参乌胶囊大剂量组游泳时间缩短(P<0.05),对新物体的探索相对时间延长(P<0.05);大、小剂量组小鼠脑内可溶性Aβ含量和脑内淀粉样斑块均明显减少(P<0.01).结论参乌胶囊可明显改善APP转基因小鼠学习记忆能力,其作用机制是通过抑制脑内Aβ的产生而实现的.     

APP/PS1小鼠不同时期灰质体积变化与Aβ沉积和学习记忆功能的相关性分析

目的:分析阿尔兹海默病(AD)双转基因APP/PS1模型小鼠大脑灰质体积变化与其学习记忆能力和相关脑区β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积的相关性,以期为探明AD动物模型的病理特征提供可靠的行为学和影像学依据。方法:共纳入野生组(WT)和APP/PS1组2组小鼠,每组36只。WT组小鼠选用C57-BL/6小鼠,APP/PS1组选用APP/PS1双转基因小鼠,2组均分别由2、6、12不同月龄小鼠组成,每组每个月龄小鼠12只。通过Morris水迷宫测试(定位航行实验和空间探索实验)检测2组小鼠空间记忆学习能力和空间记忆提取能力;采用磁共振T2加权成像(MRI T2WI)扫描检测小鼠大脑双侧内嗅皮质和海马的灰质体积变化情况;分离和制备2组不同月龄小鼠大脑石蜡切片,采用Thioflavine-s(Th-s)荧光染色检测2组小鼠大脑双侧内嗅皮质和海马的Aβ沉积情况;采用Pearson相关分析法分析2组小鼠不同时期的灰质体积变化与其学习记忆能力和对应脑区Aβ沉积的相关性。结果:①Morris水迷宫测试结果:与WT组比较,APP/PS1组2月龄小鼠行为学结果无明显区别,差异无统计学意义(P0.05);APP/PS1组6、12月龄小鼠逃避潜伏期明显增加、穿越平台次数明显减少,差异具有统计学意义(P0.05)。②MRI T2WI扫描结果:与WT组比较,APP/PS1组2月龄小鼠灰质体积无明显变化,差异无统计学意义(P0.05);APP/PS1组6月龄小鼠内嗅皮质体积明显缩小,APP/PS1组12月龄小鼠内嗅皮质和海马体积均明显缩小,差异具有统计学意义(P0.05)。③Th-s荧光染色检测结果:WT组、APP/PS1组2月龄小鼠均未检测出Aβ沉积;与WT组比较,APP/PS1组小鼠6月龄内嗅皮质和海马可检测到少量Aβ沉积,而12月龄时内嗅皮质和海马则可检测出大量致密Aβ斑块,差异具有统计学意义(P0.05)。④相关性分析结果:APP/PS1组小鼠内嗅皮质和海马体积变化与逃避潜伏期呈明显负相关关系(r=-0.729,P0.001;r=-0.643,P0.001);APP/PS1组小鼠内嗅皮质和海马体积变化与穿越平台次数呈明显正相关关系(r=0.705,P0.001;r=0.719,P0.001);APP/PS1组小鼠内嗅皮质和海马体积变化与Aβ沉积呈明显负相关关系(r=-0.865,P0.001;r=-0.885,P0.001)。结论:APP/PS1转基因小鼠可能于6月龄时就发生学习记忆功能障碍,且随时间渐进性加重;这种学习记忆功能障碍可能与大脑内嗅皮质和海马体积萎缩有关;而Aβ过度沉积可能是导致大脑灰质体积萎缩的因素之一。     

喹硫平对阿尔茨海默小鼠淀粉样β蛋白42表达的影响及机制研究

目的探索喹硫平对阿尔茨海默小鼠淀粉样β蛋白42(Aβ42)的表达的影响及其机制。方法C57BL/6小鼠20只作为对照组,APP/PS1小鼠40只分为APP/PS1组、APP/PS1+喹硫平组,各20只。APP/PS1+喹硫平组小鼠通过腹腔给予喹硫平溶液2.5 mg/(kg·d),连续给药2个月,对照组和APP/PS1组小鼠每天腹腔给予等量双蒸水。通过新事物识别实验检测三组小鼠的记忆功能;通过Western blot检测三组小鼠海马脑区Aβ42蛋白、核因子-κB(NF-κB)p65蛋白的表达水平;通过酶联免疫吸附(ELISA)检测海马脑区白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平,免疫荧光染色计算小胶质细胞数量。结果与对照组比较,APP/PS1小鼠对新事物的探索时间显著降低(P<0.05),小胶质细胞明显激活,小胶质细胞的数量显著增加(P<0.05),IL-10和TNF-α的表达水平均显著增加(P<0.05),Aβ42、NF-κB p65蛋白表达水平显著增加(P<0.05);与APP/PS1组比较,APP/PS1+喹硫平组小鼠的探索时间显著延长(P<0.05),小胶质细胞数量显著减少(P<0.05),IL-10和TNF-α表达水平均显著降低(P<0.05),Aβ42、NF-κB p65蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论喹硫平能降低Aβ42蛋白的产生,促进AD小鼠的记忆功能恢复,其发生机制可能与小胶质细胞激活和NF-κB信号通路活化相关。     

电针百会穴对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆及脑源性神经营养因子表达的影响

目的观察电针百会穴对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆功能及脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的作用机制。方法将30只4月龄雌性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、百会组和非穴组,每组10只,另取10只同窝阴性野生小鼠为野生组。百会组电针百会穴,非穴组电针非穴,干预28 d,野生组和模型组不干预。采用Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆能力;免疫组化技术观察小鼠大脑皮质β-淀粉样蛋白的沉积;Western blotting和RT-PCR法检测小鼠皮质脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白和基因的表达情况。结果与模型组相比,百会组小鼠逃避潜伏期缩短(P0.05),跨越平台次数明显增加(P0.01);β-淀粉样蛋白的沉积减少(P0.05);BDNF蛋白和基因的表达明显增多(P0.01)。非穴组与模型组相比无显著性差异(P0.05)。结论电针百会穴可改善APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆功能,其作用机制可能与增加大脑皮质BDNF蛋白和基因的表达,降低β-淀粉样蛋白的沉积有关。     

抗人甲状腺球蛋白人源化单克隆抗体的制备

目的获得抗人甲状腺球蛋白（hTg）人源化单克隆抗体。方法从分泌抗人甲状腺球蛋白的杂交瘤细胞株hTg-60中提取总RNA,逆转录-酶链聚合反应（RT-PCR）扩增出鼠源性单克隆抗体hTg-60的VH及VL基因,经基因测序分析,设计出人源化抗体的基因引物,获得抗Tg单克隆抗体人源化VH及VL基因并将其克隆入真核表达载体,转染中国仓鼠卵巢细胞（CHO）,表达人源化抗hTg抗体。结果成功获得了6株能稳定分泌抗hTg人源化抗体的细胞株。结论为进一步获得人源化的hTg抗体及临床应用奠定了基础。     

高强度间歇运动训练上调APP/PS1转基因阿尔兹海默病小鼠海马线粒体自噬的研究

目的:观察高强度间歇运动训练干预是否能改善APP/PS1转基因AD小鼠病理表现,并探讨线粒体自噬在其间的生物学效应。方法:8月龄雄性APP/PS1转基因小鼠分为转基因模型安静组(SED-Tg)和转基因模型+高强度间歇运动训练组(HIIT-Tg),C57BL/6野生型小鼠纳入野生型安静组(SED-Wt)。HIIT-Tg组动物进行12周高强度间歇运动训练。避暗被动回避实验检测学习记忆能力,JC-1荧光探针检测海马线粒体膜电位,二氯荧光素探针检测海马线粒体ROS,Western Blot法检测脑海马Aβ-42、BDNF、AMPK、PINK1、Parkin、Bnip3蛋白表达。结果:(1)SED-Tg组与SED-Wt组比较,逃避潜伏期、线粒体膜电位、BDNF、AMPK、PINK1、Parkin和Bnip3蛋白表达显著降低(P0.05—0.01),线粒体ROS产生速率和Aβ-42蛋白表达显著升高(P0.01)。(2)HIIT-Tg组与SED-Tg组比较,逃避潜伏期、线粒体膜电位、BDNF、AMPK、PINK1和Parkin蛋白表达显著升高(P0.01),线粒体ROS产生速率和Aβ-42蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:高强度间歇运动训练可通过上调AMPK-PINK1/Parkin介导的线粒体自噬,改善线粒体功能,减少APP/PS1转基因AD小鼠脑海马Aβ积聚,提高记忆和学习能力。     

电针百会穴改善APP/PS1转基因小鼠空间学习记忆能力及对磁共振波谱的影响

目的:探讨电针百会穴对APP/PS1转基因小鼠空间学习记忆能力及氢质子磁共振波谱(1H-MRS)的影响。方法:雄性APP/PS1转基因小鼠及雌性阴性小鼠育种后代,经PCR鉴定后将育种后代中15只转基因小鼠根据随机数字表分为模型组7只和电针组8只,8只同窝阴性小鼠作为正常组。电针百会穴干预4周,正常组及模型组同等条件抓取。Morris水迷宫观察小鼠空间学习记忆能力,1H-MRS检测小鼠脑内海马区N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、谷氨酸(Glu)水平。结果:Morris水迷宫试验显示,电针组小鼠逃避潜伏期较模型组显著缩短(P0.05),穿越平台次数增加(P0.05);与模型组小鼠比较,电针组小鼠海马区NAA、Glu水平均较高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:电针百会穴可改善APP/PS1转基因小鼠空间学习记忆能力,其作用机制可能与脑内海马区NAA、Glu含量增加有关。     

老年痴呆症模型小鼠蛋白磷酸化与短期丰富环境刺激的影响

背景：丰富环境刺激可提高对神经可塑性、学习记忆很重要的CAMKII、CREB蛋白的转录。目的：探讨短期丰富环境刺激对老年痴呆模型小鼠海马CAMKII和CREB蛋白磷酸化的影响。方法：实验分3组：长期环境组（以APP/PS1转基因C57/BL6小鼠作为老年痴呆症动物模型,从小鼠6月龄时开始进行长期的丰富环境刺激）、对照组（未进行长期环境刺激的APP/PS1转基因C57/BL6小鼠）与野生型组（非转基因的野生型C57/BL6小鼠）。在3组小鼠18月龄时,每组又随机分为基线组和刺激后两个亚组,对刺激后亚组施以为期1d的短期丰富环境刺激。结果与结论：野生型组的刺激后亚组海马CREB磷酸化水平显著高于基线亚组（P〈0.05）,CAMKII的磷酸化水平也有所升高;丰富环境组的刺激后亚组海马CAMKII磷酸化水平稍高于基线亚组,CREB磷酸化水平的区别不明显;对照组两个亚组海马的CAMKII和CREB磷酸化水平无明显区别。说明短期丰富环境刺激仅提高了丰富环境刺激后老年痴呆症小鼠的CAMKII磷酸化水平,但显著提高了野生型小鼠的CAMKII和CREB磷酸化水平。     

丹参大黄合剂对拟老年痴呆大鼠学习记忆能力及海马β淀粉样前体蛋白、早老素1mRNA表达的影响

目的探讨丹参大黄合剂对拟老年性痴呆（AD）大鼠学习记忆能力的影响及其机制。方法用D-半乳糖和三氯化铝联合用药制备拟AD动物模型。从造模的第20天开始,丹参大黄组灌胃给予丹参大黄合剂,连续70d。给药结束后,通过方形水迷宫、逆转录聚合酶链反应来观察丹参大黄合剂对拟AD模型大鼠学习记忆和海马β淀粉样前体蛋白（APP）、早老素1（PS1）基因表达的影响。结果丹参大黄合剂可以缩短拟AD模型大鼠水迷宫测试的潜伏期（P〈0.05）,减少其错误次数（P〈0.05）,同时降低海马APP、PS1 mRNA的表达（P〈0.05）。结论丹参大黄合剂能提高拟AD大鼠学习、记忆能力,可能与降低APP、PS1 mRNA的表达有关。     

人羊膜间充质干细胞静脉移植治疗转基因APP~＋小鼠的机制

背景：研究发现APP基因与阿尔茨海默病发病密切相关。课题组前期实验发现人羊膜间充质干细胞静脉移植可以促进阿尔茨海默病APP＋转基因小鼠的学习,记忆能力改善。目的：探讨人羊膜间充质干细胞尾静脉移植后,能否归巢到小鼠脑组织中,并分化为相关的中枢神经细胞,治疗阿尔茨海默病。方法：无菌条件下体外分离培养人羊膜间充质干细胞,传至第3代将细胞浓度调整为1×109L-1,经尾静脉注入0.5mL至细胞移植组转APP＋基因小鼠体内;对照组经尾静脉注入同体积的生理盐水;正常组转APP-基因小鼠不给予任何干预措施。采用免疫组化方法检测、测定Brdu标记的人第3代羊膜间充质干细胞在小鼠脑组织中的表达,各组小鼠脑组织中GFAP、Nestin和NSE的表达。结果与结论：光镜下观察可见,移植组小鼠脑组织中大部分细胞核被染成蓝色,但有一些细胞核被染成棕色或褐色,Brdu呈阳性。与对照组相比,移植组小鼠脑组织中的GFAP增加了近4倍,表达显著增加,甚至超过正常组的表达（P〈0.05）;Nestin的表达则显著升高,增加了近10%,但是还比正常组低了近20%（P〈0.05）。NSE的表达降低了近1/3,但仍高于正常组（P〈0.05）。表明人羊膜间充质干细胞尾静脉移植治疗阿尔茨海默病可能是通过羊膜间充质干细胞归巢到转基因APP＋小鼠脑组织中,并分化成中枢神经细胞的途径实现的。     

电针百会穴对APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠18F-FDGPET/CT成像及学习记忆的影响

目的:观察电针百会穴对APP/PS1双转基因小鼠葡萄糖代谢水平以及学习记忆的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的作用机制。方法:将30只雌性12月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、百会组和非穴组,每组10只,另取10只同窝阴性野生小鼠为野生组。百会组电针百会穴,非穴组电针非穴,每次30min,每天1次,每周5天,共治疗4周,野生组和模型组不干预。采用正电子发射断层扫描技术(PET)观察各组小鼠大脑18F-FDG摄取率的水平;Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆。结果:与模型组相比,百会组小鼠逃避潜伏期缩短(P0.05),跨越平台次数增加(P0.01);非穴组小鼠逃避潜伏期与模型组相比无显著性差异(P0.05);百会组小鼠18F-FDG摄取率高于野生组、模型组以及非穴组。结论:电针百会穴可改善APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆功能,其作用机制可能是通过改善小鼠脑内葡萄糖代谢从而发挥神经保护作用。     

APP/PS1转基因AD小鼠磁共振波谱及行为学的对照观察

目的 探讨氢质子磁共振波谱(1H-MRS)成像对APP/PS1转基因AD小鼠代谢变化的显示及其早期诊断价值.方法 35只APP/PS1AD小鼠(实验组)和20只同源野生型小鼠(对照组)在6、9月龄时接受Morris水迷宫测试及1H-MRS成像.1H-MRS测量小鼠大脑海马区N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、肌醇(mI)和肌酸(Cr)的峰下面积,计算NAA/Cr和mI/Cr比值并进行两样本均数t检验.结果 与对照组比较, 实验组小鼠6月龄时mI/Cr比值明显升高(t=2.904,P＜0.05),NAA/Cr比值明显降低(t=-7.535,P＜0.05).免疫组化检查显示海马区出现Aβ沉积斑块,周围包绕活化的胶质细胞;而行为学差异在9月龄时才有统计学意义(P＜0.05),表现为小鼠学习和记忆方面的损害.结论 1H-MRS是早期评价AD的高敏感性、高特异性的方法,mI、NAA的变化早于行为学改变.     

Memantine improves spatial learning in a transgenic mouse model of Alzheimer's disease

Memantine, a low- to moderate-affinity uncompetitive N-methyl-D-aspartate receptor antagonist, has been shown to improve learning and memory in several pharmacological models of Alzheimer's disease (AD). In the present study, the effect of memantine on locomotor activity, social behavior, and spatial learning was assessed in a transgenic mouse model of AD. Eight-month-old male C57BL/6J mice carrying mutated human APP and PS1 genes (APP/PS1) and their nontransgenic (NT) litter mates were administered a therapeutic dose of memantine (30 mg/kg/day p.o.) for 2 to 3 weeks. At this age, APP/PS1 mice show elevated levels of beta-amyloid peptides in several brain regions. APP/PS1 mice exhibited less exploratory rearing and increased aggressive behavior compared with NT mice. In the water maze test for spatial learning, APP/PS1 mice had longer escape latencies to both hidden and visible platforms, but they did not differ from NT mice in their swimming speed. Memantine significantly improved the acquisition of the water maze in APP/PS1 mice without affecting swimming speed. Memantine did not affect either locomotor activity or aggressive behavior in either genotype. These data indicate that memantine improves hippocampus-based spatial learning in a transgenic mouse model of AD without producing nonspecific effects on locomotion/exploratory activity.     

阿尔茨海默病转基因小鼠早期记忆功能障碍与氧化应激损伤关系的实验研究

目的 观察转APP/PS1基因阿尔茨海默病(AD)小鼠(APP/PS1小鼠)早期空间学习记忆功能及相关氧化应激反应指标的变化,并探讨它们之间的相关性.方法 应用Morris水迷宫评定APP/PS1小鼠及相应野生型(WT)小鼠的空间学习记忆功能,采用ELISA方法检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性以及丙二醛(MDA)和蛋白质羰基的含量,并进行相关性分析.结果 2组小鼠的空间学习能力无明显差异(P＞0.05),而APP/PS1小鼠在目标象限(定位航行实验中平台所置第二象限)中航行时间占总时间的百分比(29.02±4.27)%较WT小鼠(47.39±6.01)%显著下降(t=0.000,P＜0.05),APP/PS1小鼠在目标象限中航行路程占总路程的百分比(28.85±3.77)%较WT小鼠(46.70±5.60)%也显著下降(t=0.000,P＜0.05),提示APP/PS1小鼠的空间记忆功能较WT小鼠显著下降.2组小鼠脑组织中的MDA含量、SOD和GSH-PX活性均无明显差异(P均＞0.05),而APP/PS1小鼠脑组织中的蛋白质羰基含量(2.67±0.19)较WT小鼠(2.38±0.15)显著增加(t=0.0088,P＜0.05).相关性分析表明:APP/PS1小鼠蛋白质羰基含量与目标象限航行时间百分比呈显著负性相关(r=-0.639,P＜0.05),APP/PS1小鼠蛋白质羰基含量与目标象限航行路程百分比呈显著负性相关(r=-0.636,P＜0.05).结论 APP/PS1小鼠早期空间记忆功能损害与脑组织中的蛋白质羰基含量升高呈负性相关,提示氧化应激导致的蛋白质羰基化在AD早期记忆损害发病过程中具有重要作用.

Abstract：

Objective To investigate the spatial learning and memory ability,the changes of indicators of oxidative stress,and their relationship in transgenic APP/PS1 mouse model of Alzheimer's disease(APP/PS1 mice). Methods The spatial learning and memory ability were assessed by Morris water maze test,and the activity or content of SOD, GSH-PX, MDA, and protein carbonyl in brain tissues were measured by ELISA in the APP/PS1 and wild type (WT) mice. Furthermore, the relationship between the learning and memory performances and the indicators of oxidative stress was examined. Results No significant difference in the spatial learning was observed between the APP/PS1 and WT mice (P ＜0. 05). The spatial memory which was measured as the percentage of time traveling in the targeted quadrant to the total traveling time was significantlydeclined in the APP/PS1 mice(29. 02 ± 4. 27) % as compared with the WT mice(47. 39 ± 6. 01) %(t =0. 000 ,P ＜0. 05). The percentage of length of traveling in the targeted quadrant to the total length traveled was significantly lower in the APP/PS1 mice(28. 85 ±3.77)% compared with the WT mice(46. 70 ±5.60)% (t =0. 000,P ＜0. 05). These findings indicated that the spatial learning and memory ability of APP/PS1 mice was significantly decreased compared to WT mice. There was no significant difference in activity or content of SOD,GSH-PX,and MDA in brain tissues between the APP/PS1 and WT mice (P ＜ 0. 05), while the content of protein carbonyl was significantly elevated in the APP/PS1 mice (2. 67 ±0. 19) than in the WT mice (2. 38 ±0. 15)(t = 0. 008, P ＜ 0. 05). Correlation analysis revealed that the elevated protein carbonyl was negatively correlated with the percentage of length traveled in the targeted quadrant(r = - 0. 639, P ＜ 0. 05) and the percentage of time traveled in the targeted quadrant(r = - 0. 636 ,P ＜ 0. 05). Conclusion The spatial memory impairment was negatively correlated with the elevated protein carbonyl in the APP/PS1 mice, suggesting that protein carbonylation caused by oxidative stress might play an important role in the development of memory impairment in the early stage of Alzheimer's disease.     

硫辛酸对内毒素诱导的大鼠急性肺损伤的保护作用

目的：以内毒素（lipopolysaccharide,LPS）诱导法建立大鼠急性肺损伤（acute lung injury,ALI）模型,探讨不同剂量的硫辛酸（lipoic acid,LA）处理对大鼠ALI的保护作用.方法：选择健康SD大鼠90只,其中72只SD大鼠腹腔注射LPS 25 mg/kg,构建大鼠ALI模型,再按不同干预方法将72只大鼠分为LA阴性对照组（腹腔注射等量0.9％氯化钠液）、LA大剂量组[腹腔注射LA 120 mg/（kg·d）]、LA中剂量组[腹腔注射LA 60 mg/（kg·d）]、LA小剂量组[腹腔注射LA 30 mg/（kg·d）],每组18只;其余18只大鼠,仅腹腔注射等量0.9％氯化钠液（正常组）.检测各组大鼠处理24、48、72 h后肺组织中核因子κB （NF-kappa B,NF-κB）、白细胞介素1（interleukin 1,IL-1）、NO合成酶（NO synthetase,NOS）、NO、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor α,TNF-α）的水平.结果：LPS诱导后,LA阴性对照组大鼠肺组织中NF-κB、IL-1、NOS、NO、TNF-α在72 h时最高.与正常组大鼠比较,其余各组NOS、NO、TNF-α的水平均较高,差异有统计学意义（P＜0.05）;与LA阴性对照组比较,处理24、48、72 h后LA大剂量组IL-1、NF-κB、NOS、NO、TNF-α的水平明显下降（P均＜0.05）,LA中剂量组在处理24 h后的NOS、NO水平以及处理72 h的NO水平也明显下降（P均＜0.05）.结论：LA对ALI大鼠的治疗效果以大剂量组最为明显,其机制可能与LA抑制NF-κB激活以及下调肺组织中IL-1、NOS、NO、TNF-a的表达有关.