环形精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽的核素标记及在健康动物体内的实验

目的：探讨^99Tc^m直接标记环形RGD-4CK九肽的可行性，观察^99Tc^m-RGD-4CK在健康动物体内的药代动力学、生物分布特点及显像表现。 方法：实验于2004—10／2005-11在解放军第三军医大学西南医院核医学中心完成。①采用预锡化法^99Tc^m直接标记RGD-4CK，3MM色谱纸层析测定标记率，通过HPLC分析、SepPakC18柱层析、体外稳定性实验、半胱氨酸置换实验及血清蛋白结合实验，评价^99Tc^m-RGD-4CK的放射化学性质。②选取雄性日本大耳兔9只，每只静脉注射37MBq^99Tc^m-RGD-4CK，分别于1．5，3．0，5．0，10，30，60，90，120，180，240min采血、称重并测定血样品放射性计数，结果经参考源校正后以MBq／L表示，所得数据应用DAS软件处理，结合α，β3受体在正常体内实际表达情况判断室模型。③选取小鼠40只，随机分为8组（n=5），每只静脉注射0．74MBq^99Tc^m—RGD-4CK，分别于1，5，20，60，90，120，180，240min处死小鼠，采集血液、心、肺、肝、肾、肠、肌肉、骨、脑，称重并测定放射性计数，结果经参考源校正后以每克组织百分注入剂量（％ID／g）表示。④选取雄性日本大耳兔3只，每只静脉注射37MBq^99Tc^m-RGD-4CK，应用SPECT进行显像，结合感兴趣时间-放射性曲线分析，观察家兔体内放射性的动态分布变化。 结果：40只小鼠和12只兔全部进入结果分析。①^99Tc^m-RGD-4CK标记率为（97．8&;#177;0．4）％，比活度为（11．90&;#177;0．05）PBq／mol；HPLC保留时间与洗脱液放射峰值时间基本一致，室温放置6h的放射化学纯度仍〉95％；SepPakC18柱层析游离^99Tc^m仅比纸层析高0．5％；与300mmol／L半胱氨酸37℃温育1h，游离^99Tc^m仅增加1．88％；^99Tc^m-RGD-4CK与血清蛋白无明显结合。^99Tc^m-RGD-4CK在健康家兔体内的药代动力学符合权重数为1／C的二室模型，分布相半衰期为（4．18&;#177;2．17）min，消除相半衰期为（69．32&;#177;0．00）min。③小鼠血液放射性清除迅速，通过肾脏排泄且快，其余组织器官放射性均随时间逐渐降低，而脑始终呈最低放射水平。④家兔SPECT显像示：各组织器官T—A曲线均随时间逐渐下降，与肾、心、肝相比，肺、胃、肌肉曲线呈低水平；1min双肾即显影，5min心、肝影开始减弱，肺放射性分布均匀，强度低于肝脏，膀胱显影；5min后膀胱影持续增强，20min后软组织影逐渐减弱；胆囊未显影，腹部呈持续低放射分布，胃区始终呈放射性缺损，颈部未见明显核素浓聚。 结论：^99Tc^m-RGD-4CK制备方法简便，标记率高（〉95％），具有良好的放射化学性质，体内稳定性好，具有比较理想的体内动力学。     

荷瘤裸鼠放射自显影受体辨别的实验研究

背景应用放射性核素标记小分子肽类配体进行肿瘤受体显像,针对肿瘤组织所表达的高密度αvβ3受体,发展放射性标记的含RGD序列的高选择性αvβ3受体拮抗剂,是目前肿瘤受体显像研究的热点.目的以实验动物为基础,探讨放射性核素标记小分子环形多肽RGD-4CY实现肿瘤αvβ3受体显像的可行性.设计完全随机的实验对照.地点和对象实验在解放军第三军医大学西南医院核医学中心完成研究对象为25只正常小鼠和15只荷人QBC939胆管癌裸鼠,由解放军第三军医大学实验动物中心提供,4～6周龄,体质量15～20g.干预采用Iodogen法标记、SEP-PAK C1 s柱分离纯化制备125I-RGD-4CY.取25只正常小鼠与15只荷人QBC939胆管癌裸鼠,经尾静脉注射125I-RGD-4CY 0.1 mL(370 kBq),分别于注射后10,30,60,120和240 min各取5只与3只处死,测定体内放射性的生物分布.取3只荷瘤裸鼠各注射0.1 mL(3.7MBq)125I-RGD-4CY,1 h后处死并行全身放射自显影.主要观察指标125I-RGD-4CY的放射化学纯度;125I-RGD-4CY的体内分布及动力学特点,肿瘤(T)与非肿瘤组织(NT)放射性比值;自显影图像中瘤体及正常组织的放射性分布.结果125I-RGD-4CY的放射化学纯度为99%.正常小鼠血液放射性清除和肝脏放射性下降迅速,肠道无明显增加,主要通过肾脏排泄,肌肉和肺的放射性120 min时分别仅为肝脏的32%与44%(t值为3.33与3.64,P＜0.05).荷瘤裸鼠各时相肿瘤的放射性均高于肌肉、肠道与肺(t值为3.18～13.24,P＜0.05～0.01),240min时T/NT值分别为26,8.7与26.放射自显影示肿瘤放射性浓聚影最强,肺、颈部及其他软组织呈低水平分布.结论放射性核素标记RGD-4CY有望成为一有效的肿瘤αvβ3受体显像剂.     

荷瘤裸鼠放射自显影受体辨别的实验研究

背量：应用放射性核素标记小分子肽类配体进行肿瘤受体显像。针对肿瘤组织所表达的高密度αvβ3受体，发展放射性标记的含RGD序列的高选择性αvβ3受体拮抗剂，是目前肿瘤受体显像研究的热点。目的：以实验动物为基础，探讨放射性核素标记小分子环形多肽RGD-4 CY实现肿瘤αvβ3受体显像的可行性。设计：完全随机的实验对照。地点和对象：实验在解放军第三军医大学西南医院核医学中医学中心完成研究对象为25只正常小鼠和15只荷人QBC939胆管癌裸鼠，由解放军第三军医大学实验动物中心提供，4—6周龄，体质量15—20g。干预：采用Iodogen法标记、SEP-PAK C18柱分离纯化制备^125I-RGD-4CY。取25只正常小鼠与15只荷人QBC939胆管癌裸鼠。经尾静脉注射^125I-RGD-4CY 0．1mL(370kBq)，分别于注射后10，30，60，120和240min各取5只与3只处死，测定体内放射性的生物分布。取3只荷瘤裸鼠各注射0．1mL(3．7MBq)^125I-RGD-4CY，1h后处死并行全身放射自显影。主要观察指标：^125I-RGD-4CY的放射化学纯度；^125I-RGD-4CY的体内分布及动力学特点，肿瘤(T)与非肿瘤组织(NT)放射性比值；自显影图像中瘤体及正常组织的放射性分布。结果：^125I-RGD-4 CY的放射化学纯度为99％。正常小鼠血液放射性清除和肝脏放射性下降迅速，肠道无明显增加，主要通过肾脏排泄。肌肉和肺的放射性120min时分别仅为肝脏的32％与44％(t值为3．33与3．64，P&;lt;0．05)。荷瘤裸鼠各时相肿瘤的放射性均高于肌肉、肠道与肺(t值为3．18～13．24，P&;lt;0．05～0．01)，240min时T／NT值分别为26，8．7与26。放射自显影示肿瘤放射性浓聚影最强，肺、颈部及其他软组织呈低水平分布。结论：放射性核素标记RGD-4CY有望成为一有效的肿瘤αvβ3受体显像剂。     

新型葡萄糖类似物~（99）Tc~mN-DGDTC的药代动力学和显像研究

目的探讨[99TcmN]2＋间接标记二硫代氨基甲酸脱氧葡萄糖（deoxyglucose dithiocarbamate,DGDTC）药代动力学特点以及在荷瘤模型小鼠和兔的显像效果。方法药代动力学研究：标记后的[99TcmN]-DGDTC化合物经耳缘静脉注射入健康成年新西兰大白兔体内,于特定时间点采血测定放射计数,以专业软件进行药代动力学计算。动物肿瘤模型显像：分别以荷瘤Balb/C小鼠和新西兰大白兔进行。分别移植H22鼠肝癌细胞系和VX2兔肝癌细胞系于10只小鼠和5只兔子皮下,待肿瘤成型后静脉注射99TcmN-DGDTC复合物行显像观察,并均以99Tcm-高锝酸盐显像作为对照研究。扫描方法：采集血流相、血池相和连续静态图像直至注射后2-4 h（小时）。结果药代动力学结果证明99TcmN-DGDTC复合物体内分布为二室模型,有效半衰期为34.05 min。显像结果证明99TcmN-DGDTC复合物能充分显示小鼠和兔肿瘤模型的病变所在,注射后2 h肿瘤区/周围组织放射计数比值大于2。结论药代动力学和显像研究结果充分证实了99TcmN-DGDTC作为新的肿瘤代谢显像剂的可行性。     

不同剂型神经生长因子体内静脉注射的靶向性分布

背景神经生长因子治疗周围神经的损伤已经得到充分的研究并被认可,但其能否通过血脑屏障发挥作用一直不能得到肯定结论,试图以脂质体包裹神经生长因子,并考察其与单纯神经生长因子的对比,证明其能通过血脑屏障,进入中枢神经系统.目的通过单光子发射计算机断层显像技术(single photon emission computerized tomography,SPECT)对比分析不同剂型的神经生长因子经静脉注射后在体内的靶向分布情况.设计以试验动物为研究对象的随机对照研究.单位一所医科大学附属医院.材料实验于2003-06/2004-05于南京森科医药公司,南京医科大学第一附属医院核医学科完成,选用健康新西兰兔3个月龄(19只),普通级,体质量(2.0±0.2)kg,南京安立默科技有限公司提供,随机分组.[99Tcm]-神经生长因子(南京森科医药公司帮助标记,标记率98.9%,放化纯度为99.7%);脂质体(沈阳药科大学提供);200 g/L乌拉坦注射液(南京医科大学试剂科提供).方法将[99Tcm]-神经生长因子用脂质体包裹后,按照以下条件处理将包裹含有1.48×10a Bq[99Tcm]-神经生长因子的脂质体A注射至新西兰兔体内,利用SPECT分析其在脑部分布的百分数.其他两组以相同放射剂量的[99Tcm]-神经生长因子,[99Tcm]-神经生长因子-普通脂质体B处理.主要观察指标静脉注射上述分组药物后,观察其在脑组织中的浓度及放射性计数占全身的百分比.结果自制注射用脂质体A组包裹的[99Tcm]-神经生长因子经SPECT显像,其在脑部的放射性计数较高,而[99Tcm]-神经生长因子组几乎全部从泌尿系统代谢、[99Tcm]-神经生长因子-普通脂质体B组基本被网状内皮系统吞噬后沉积于肝脏.结论此自制神经生长因子-脂质体A具有一定的脑组织靶向性,为携带药物透过血脑屏障奠定基础.     

荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡显像的实验研究

目的研究细胞凋亡显像剂99Tcm-HYNIC-Annexin Ⅴ的制备及其在荷瘤小鼠体内的生物分布特性和活体显像.方法采用双功能螯合剂HYNIC法锝[99Tcm]标记Annexin Ⅴ,经高效液相色谱仪分离纯化并检测标记产物.建立荷肿瘤小鼠模型,在20～25 g昆明种小白鼠右前腋下皮下接种S-180肉瘤,生长1周.荷瘤小鼠在环磷酰胺腹腔内给药化疗72 h后,尾静脉注射99Tcm-HYNIC-Annexin Ⅴ,分别于5 min、30 min、1 h、3 h、6 h后进行SPECT显像和体内生物分布测定.实验结果应用SPSS 12.0统计学软件进行统计学分析.结果 99Tcm-HYNIC-Annexin Ⅴ的标记率达到95%,放射性化学纯度为99%.荷瘤小鼠在环磷酰胺腹腔内给药化疗后72 h显像可见:注射99Tcm-HYNIC-Annexin Ⅴ后6 h肿瘤组织呈明显异常放射性浓聚灶.体内生物分布实验观察到,注射显像剂后6 h肿瘤组织的放射性摄取值(1.59±0.44)最高,与其他时相的肿瘤组织放射性摄取值比较P<0.05. 99Tcm-HYNIC-Annexin Ⅴ主要聚集在肾脏、肺脏和肝脏等,从肾脏排泄,其血流清除速度快,在注射后30 min,血液放射性摄取值(1.59±0.50)仅为5 min时(8.85±2.65)的20%(P<0.05).注射显像剂后6 h,肿瘤/肌肉放射性摄取率比值(3.73±1.42)高于肿瘤/血液放射性摄取率比值(2.80±0.54).结论 99Tcm-HYNIC-Annexin V有望成为一种富有应用前景的活体细胞凋亡分子探针.     

应用重组改良型人膜联蛋白检测动脉粥样硬化斑块的实验研究

目的：探讨99mTc标记重组改良型人膜联蛋白（H-AnnexinV）检测兔动脉粥样硬化病变的价值。方法：7只雄性大耳白兔随机分为模型组和正常对照组。模型组4只（其中1只用于模型对照研究）大白兔通过球囊损伤腹主动脉内膜，并饲喂含2%胆固醇、5%猪油的高脂饲料15周制备动脉粥样硬化模型。3只正常对照组大白兔饲喂普通饲料15周。15周后取3只模型组大白兔自耳缘静脉注射99mTc-H-AnnexinV 37~55.5MBq/kg（含500μg H-AnnexinV），进行活体及离体血管显像。正常对照组显像方法相同。对模型组兔降主动脉分段，测定各段质量和放射性计数，并进行病理学检查。剩余1只模型对照组兔静脉注射99mTcO4- 37~55.5MBq/kg。结果：3只模型组兔注射99mTc-H-AnnexinV后10分钟降主动脉可见放射性摄取，随着时间的延长，显像剂摄取增加，显像剂注射后2小时，模型组兔降主动脉显影最为清晰。正常对照组兔在注射显像剂后10分钟可见降主动脉放射性摄取，随着时间的延长，显像剂摄取减少，注射显像剂后2小时，降主动脉放射性摄取不明显。注射显像剂后2小时模型组靶/非靶（T/NT）比值（2.68±0.25）明显高于对照组（1.57±0.24，t=5.44，P＜0.01）。含AS斑块血管片段的放射性摄取为（63.33±14.11）cpm/mg，明显高于非斑块的血管片段（21.75±8.30）cpm/mg（t=9.53，P＜0.01）。1只模型对照组兔静脉注射后10分钟到2小时均未见明显主动脉影像。结论：99mTc- H-AnnexinV核素显像可成为一种无创检测动脉粥样硬化斑块的方法。     

全身骨显像检查对非放射工作护理人员的影响

目的:探讨全身骨显像检查对非放射工作护理人员的影响。方法:选取48例行全身骨显像检查的恶性肿瘤患者,在核医学科以常规标记制备99Tcm-MDP,每例患者静脉给药(740±37)MBq,分别于静脉注射后不同时间段,用手持放射性扫描仪测量距离上述每位患者0.5、1、2、4 m的放射性剂量水平。结果:注射99Tcm-MDP后不同时间、不同距离下的平均辐射剂量水平不同。患者接受放射性核素99Tcm-MDP注射后对周围的辐射剂量随时间和距离的延长迅速降低。结论:全身骨显像患者对非放射工作护理人员的辐射测量值在相对安全范围以内。     

SPECT检查中静脉注射放射性药物的重点环节及防护措施

单光子发射计算机断层显像（SPECT）检查是通过病人体内放射性标记药物发射的γ射线扫描成像[1],静脉注射放射性药物是 SPECT检查中最普遍的给药方式[2],因放射性药物的特性,如静脉穿刺失败或药液污染等情况会影响显像质量,增加操作者接触放射剂量,对周围环境造成放射污染,现将静脉注射放射性药物过程须重点关注的环节介绍如下。     

99Tc^m-HYNIC-Octreotide的标记及其在脑膜瘤诊断中的初步应用

目的：建立99Tcm标记HYNIC-Octreotide的最佳方法,评价该显像剂用于临床的可能性。方法：以SnCl2为还原剂,按间接法标记99Tc^m-HYNIC-Octreotide。观察标记物的体内、体外稳定性。对6只实验用大耳白兔、3名健康志愿者及3名后来经病理证实的脑膜瘤患者初步进行了生长抑素受体显像。结果：99Tc^m-HYNIC-Octreotide的标记率为97.8%±0.55%。99Tc^m-HYNIC-Octreotide的体内、体外稳定性：①静置稳定性：静置4h标记率仍达90%以上。②半胱氨酸置换试验：游离99Tcm随半胱氨酸的增加而缓慢上升,当半胱氨酸达200mmol/L时,99Tc^m-HYNIC-Octreotide分子中约23%的99Tc^m的被置换出。③血清结合试验：24h99Tcm-HYNIC-Octreotide与蛋白结合率为17.04%±0.01%。99Tc^m-HYNIC-Octreotide显像结果：①正常兔及正常人99Tcm-HYNIC-Octreotide体内分布特点：膀胱和肾脏最浓,其次是肝脏,鼻黏膜轻度浓聚,颅脑、双肺、肠道内未见明显核素浓聚。②3名脑膜瘤患者放射性核素明显浓聚,注射显像剂4h后肿瘤放射性计数与本底放射性计数的比值（T/NT）为5.36。结论：99Tc^m标记HYNIC-Octreotide方法可行,标记率和放化纯高,稳定性好。初步临床显像证明99Tc^m-HYNIC-Octreotide是一种具有潜力的诊断脑膜瘤的生长抑素受体显像剂。