氦氖激光对退变颞下颌关节BMP-2表达的影响

目的:探讨氦氖激光对退变颞下颌关节细胞外基质调节因子BMP-2表达的影响,明确氦氖激光干预颞下颌关节退变的作用机制,为临床运用氦氖激光治疗颞下颌关节骨关节病提供依据。方法:将骨骼发育成熟的健康成年雄性新西兰大白兔40只随机分为正常组、假模型组、模型组和治疗组,每组10只,组内又分为造模后第1d、11d两个取材时间点。建立颞下颌关节骨关节病动物模型并行CT检查证实造模成功后纳入。治疗组采用氦氖激光照射患侧颊车、上关、下关、听宫、翳风穴,5min/穴/d,共10d;假模型组仅作关节囊切开后即缝合组织。各组于不同时间点取出颞下颌关节组织,采用Western Blot方法检测BMP-2的表达水平。结果:Western Blot检测发现正常组及假模型组不同时间点之间BMP-2蛋白表达差异无统计学意义;模型组第11dBMP-2表达明显降低;氦氖激光干预10d后BMP-2表达较第1d及模型组明显增加(P0.05)。结论:氦氖激光治疗可上调退变颞下颌关节细胞外基质调节因子BMP-2蛋白表达,促进细胞外基质合成,从而防治颞下颌关节骨关节病。     

氦氖激光穴位照射对兔颞下颌骨关节病软骨细胞Bcl-2与Bax的影响

目的:通过研究氦氖激光对退变颞下颌关节细胞凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax表达的影响,明确氦氖激光对颞下颌关节退变的保护作用机制,为临床运用氦氖激光治疗颞下颌关节骨关节病提供依据。方法:将骨骼发育成熟的健康成年雄性新西兰大白兔随机分为正常组、假模型组、模型组和治疗组,每组10只,组内又分为造模成功后第1d、11d两个取材时间点。参照常嘉等的造模方法,建立颞下颌关节骨关节病动物模型并行CT检查证实造模成功后纳入。治疗组采用氦氖激光照射患侧颊车、上关、下关、听宫、翳风穴,5min/穴/天,共10d;假模型组仅作关节囊切开后即缝合组织。运用q PCR检测蛋白多糖4(PRG-4)及骨形态发生蛋白2(BMP-2)m RNA水平,Western Blot方法检测各组织Bcl-2、Bax的蛋白表达水平。结果:正常组及假模型组不同时间点之间软骨基质基因表达无明显差异,建立TMJOA模型后,基因表达降低,基质逐渐降解,氦氖激光治疗10天后,PRG-4及BMP-2表达有所上升;凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达在正常组及假模型组之间无显著性差异,造模后抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少,而促凋亡蛋白Bax增强;氦氖激光干预10天后Bcl-2的表达较前明显增强,而Bax的表达显著下降。结论:凋亡调节蛋白参与了氦氖激光穴位照射改善颞下颌关节软骨基质的合成与代谢。     

髁突软骨细胞研究概况

髁突软骨细胞的增殖、分化和凋亡与颞下颌关节疾病密切相关.髁突软骨细胞是髁突软骨的重要细胞成分,应用组织工程技术建立髁突软骨细胞库,可以生物性修复关节软骨的损伤.研究了解髁突软骨细胞的凋亡机制将会对颞下颌关节病的诊断、治疗提供科学依据.现就近几年有关髁突软骨细胞的研究进展综述如下.     

张应力刺激大鼠髁突软骨细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达(英文)

背景:研究表明软骨细胞外基质合成的变化反映了外力对于颞下颌关节的影响和机体对于外力的适应性。目的:观察周期性张应力对髁突软骨细胞主要细胞外基质合成的影响。方法:采用FX-5000T应力加载系统对第3代大鼠髁突软骨细胞分别施加0,1,6,12和24h的周期性张应力,应力刺激强度为10%1Hz。加力完成后收集加力细胞,提取总RNA反转录成cDNA,应用RT-PCR技术检测软骨细胞主要细胞外基质Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达变化情况。结果与结论:与对照组(0h组)相比,加力6h时Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖表达均显著增加(P<0.05);加力12h时Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖表达均开始下降;当加力至24h时二者表达量均显著降低(P<0.05)。结果表明:周期性张应力可以影响髁突软骨细胞主要细胞外基质的合成,随加力时间的延长基质合成逐渐增强;进一步延长加力时间,基质的合成受到明显抑制。     

RW-Splint治疗颞下颌骨关节病的临床观察

目的:探讨RW-Splint治疗颞下颌骨关节病患者的临床疗效.方法:选取17例颞下颌骨关节病患者,采用RW-Splint治疗至症状消除后,用锥束CT检查髁状突表面骨质改变情况,分析RW-Splint对颞下颌骨关节病患者症状和髁突改建的影响.结果:戴入RW-Splint后,颞下颌关节区疼痛症状缓解有效,髁状突表面骨皮质改建明显,关节间隙变化明显.结论:RW-Splint治疗颞下颌骨关节病,髁状突表面修复及患者疼痛症状改善.     

大鼠髁突软骨细胞培养及生物学特性研究

目的 探讨大鼠颞下颌关节髁突软骨细胞的培养方法,观察细胞的生物学特性。方法 分离3只Wistar大鼠髁突软骨,采用Ⅱ型胶原酶消化法联合组织块法获取髁突软骨干细胞,采用MTT法检测细胞生长曲线,采用甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学法和Ⅱ型胶原免疫荧光法鉴定细胞来源。结果 Ⅱ型胶原酶消化法联合组织块法消化髁突软骨组织18~20h可获得最大量细胞;体外培养软骨细胞主要呈多角形,第1~4代细胞具有稳定生物学特性,5代及5代以后逐渐出现老化细胞;MTT检测结果显示第3代细胞可最快达指数生长期;髁突软骨细胞经甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色及免疫荧光染色鉴定,结果均为阳性表达,细胞来源于软骨。结论 Ⅱ型胶原酶消化法联合组织块法可作为髁突软骨细胞获取方法;4代以内细胞具有稳定的生物学特性,可用于其他实验。     

基质金属蛋白酶和胶原在创伤关节软骨组织中的表达

背景:研究发现,基质金属蛋白酶和胶原参与关节软骨组织机体生理重建及病理破坏.目的:观察膝关节骨软骨缺损及表面软骨缺损动物模型关节软骨组织中胶原及基质金属蛋白酶的表达变化.方法:雌性SD大鼠48只随机分为3组:骨软骨缺损组在双膝关节制作骨软骨缺损模型,表面缺损组在双膝关节制作表面软骨缺损,对照组双膝关节制作关节囊切开.分别于术后4、8、12周取股骨髁标本,行苏木精-伊红染色,免疫组化检测Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶3的表达.结果与结论:骨软骨缺损组术后4周缺损中有少量新生组织生成,8及12周可见到纤维组织填充,修复组织细胞外基质Ⅰ型胶原免疫组化染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阴性,关节软骨组织中基质金属蛋白酶3表达增高.表面缺损组表面软骨缺损4及8周未见修复迹象,12周可见微量纤维组织填充,细胞外基质Ⅰ型胶原免疫组化染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阴性,术后表面缺损组关节软骨组织基质金属蛋白酶3表达增高.对照组关节软骨组织Ⅰ型胶原免疫组化染色阴性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性,基质金属蛋白酶3低表达,无形态学异常改变.说明机械性损伤可以导致关节软骨细胞外基质成分发生改变,丧失其原有的生物学特性而退变,基质金属蛋白酶3在损伤后的软骨组织中表达增高,使细胞外基质的降解增加,是导致关节软骨退变的重要因素.     

基质金属蛋白酶和胶原在创伤关节软骨组织中的表达

背景：研究发现,基质金属蛋白酶和胶原参与关节软骨组织机体生理重建及病理破坏。目的：观察膝关节骨软骨缺损及表面软骨缺损动物模型关节软骨组织中胶原及基质金属蛋白酶的表达变化。方法：雌性SD大鼠48只随机分为3组：骨软骨缺损组在双膝关节制作骨软骨缺损模型,表面缺损组在双膝关节制作表面软骨缺损,对照组双膝关节制作关节囊切开。分别于术后4、8、12周取股骨髁标本,行苏木精-伊红染色,免疫组化检测Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶3的表达。结果与结论：骨软骨缺损组术后4周缺损中有少量新生组织生成,8及12周可见到纤维组织填充,修复组织细胞外基质Ⅰ型胶原免疫组化染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阴性,关节软骨组织中基质金属蛋白酶3表达增高。表面缺损组表面软骨缺损4及8周未见修复迹象,12周可见微量纤维组织填充,细胞外基质Ⅰ型胶原免疫组化染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阴性,术后表面缺损组关节软骨组织基质金属蛋白酶3表达增高。对照组关节软骨组织Ⅰ型胶原免疫组化染色阴性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性,基质金属蛋白酶3低表达,无形态学异常改变。说明机械性损伤可以导致关节软骨细胞外基质成分发生改变,丧失其原有的生物学特性而退变,基质金属蛋白酶3在损伤后的软骨组织中表达增高,使细胞外基质的降解增加,是导致关节软骨退变的重要因素。     

不同处理方式治疗髁突囊内骨折继发颞下颌关节强直动物模型的建立

目的通过建立不同处理方式治疗小型猪髁突囊内骨折继发颞下颌关节强直动物模型,进一步探索创伤性颞下颌关节强直发生的机制。方法小型猪20只,随机分为4组,每组5只(10侧颞下颌关节),采用手术方法造成双侧髁突囊内骨折,切除外侧部分关节盘;分别采用自然愈合、关节囊内注射生理盐水、关节囊内注射地塞米松、微型钛板内固定4种处理方式治疗囊内骨折,每一种处理方式治疗10侧。分别于术后3月、术后6月,大体、CT检查及组织学观察比较四组颞下颌关节强直的发生率。结果自然愈合组9侧、生理盐水组4侧与地塞米松组3侧均可见关节结构消失,关节间隙变窄,髁突增生膨大;钛板固定组2侧髁突变形,关节间隙变小。结论生理盐水、地塞米松和钛板固定三种处理方式具有减少颞下颌关节强直发生的作用,至于哪种处理方式治疗髁状突囊内骨折更佳,则需要进一步研究证实。     

颞颌关节应力改变致髁状突适应性变化的实验研究

目的:通过手术造成犬颞颌关节应力失衡,探讨髁状突适应性变化。方法:选用16只成年犬,截除下颌升支前份骨及喙突,使一侧颞肌与下颌骨分离,在术后1,3,6个月通过X射线、光镜及扫描电镜等方法观察关节因其力学改变而引起的髁状突适应性变化。结果:光镜下显示髁状突纤维层增厚,排列紊乱,增殖层细胞增多。扫描电镜下未见病理性损害。结论:下颌升支前份骨及喙突截除术可引起术侧髁状突的进行性改建,不会引起颞颌关节的病理性损害。表明除了关节本身位置变化及咬合关系改变可引起髁状突的改建外,任何涉及整个关节结构的任何部分改变都能引起髁状突软骨的反应。提示颞颌关节结构完整性的破坏可减少关节适应能力和增加关节紊乱的可能性。     

Differential regulation of proteoglycan-4 expression by IL-1α and TGF-β1 in rat condylar chondrocytes

Proteoglycan 4 (PRG4) is a multifaceted glycoprotein that mediates boundary lubrication of articular cartilage and its dysregulation is associated with impaired lubrication and cartilage destruction in multiple synovial joints. However, the spatiotemporal expression of PRG4 and the associated regulatory networks remain largely unknown in the mandibular condylar cartilage that is responsible for homeostasis and functions of the temporomandibular joint. We here investigated the possible regulatory effects of the interleukin-1α (IL-1α) or/and transforming growth factor-β1 (TGF-β1) on the expression of PRG4 in primary chondrocytes that were isolated from the superficial layer of the condylar cartilage of the 20-day-old male Sprague-Dawley rats. Both IL-1α and TGF-β1 have been implicated in joint destruction and repair. Treatment of primary chondrocytes for 24 h with recombinant human (rh) IL-1α (10 ng/ml) resulted in pronounced reduction in the expression levels of PRG4 mRNA and protein, whereas stimulation with rhTGF-β1 (10 ng/ml) significantly increased the expression levels, as measured by RT-PCR and ELISA, respectively. Moreover, rhTGF-β1 was capable to antagonize the inhibitory effects on the PRG4 expression caused by rhIL-1α and robustly restored its abundance in the cultured condylar chondrocytes. Taken together, our data indicate that PRG4 is synthesized and secreted by condylar cartilage chondrocytes and its expression is differentially regulated by IL-1α and TGF-β1. The rhIL-1α-mediated PRG4 repression is reversible and potently antagonized by rhTGF-β1 in condylar chondrocytes. The observed up-regulation of PRG4 upon rhTGF-β1 treatment further supports the therapeutic application of rhTGF-β1 in the treatment of temporomandibular joint osteoarthritis.     

正颌治疗对颞下颌关节功能的影响

INTRODUCTIONTherapeuticeffectoforthognathicsurgeryisfavorableincorrectingcomplicatedfacedeformity，alteredfacefigure．However，therewasnouniversalopinionaboutitsimpaceonmorphologyandfunctionoftemporomandibularjoint（TMJ）．Someresearchersholdthatcor－rectingabnormaljawrelationisfavorableforTMJ，butothersthinkcorrectionmayresultdisorderofTMJ犤１，２犦．Inthisstudy，impactoforthognathicsurgeryonmorphologyandfunctionofTMJwasexam－inedwithX－ray．MATERIALSANDMETHODSMaterialsPatie…     

大鼠高强度运动后的软骨损伤及寡聚基质蛋白的表达

目的探讨高强度运动对大鼠关节软骨及大鼠膝关节液软骨寡聚基质蛋白(COMP)表达的影响。方法将20只SD大鼠随机分为对照组和高强度运动组各10只。高强度运动组进行8周高强度跑台运动。对照组不进行运动跑台。8周后取大鼠股骨髁病理学检查,采用酶联免疫吸附法检测大鼠关节液中COMP水平。结果高强度运动组大鼠膝关节出现关节软骨损伤表现,关节液中COMP的表达高于对照组(P0.05)。结论高强度运动导致的关节软骨损伤,创伤性关节炎与COMP水平有关。     

微支抗种植体及不同矫治力作用下髁突软骨中核心结合因子a1的表达

背景:近年来微支抗种植体以其操作简单、创伤小、支抗强等优点被正畸医生广泛应用于口腔正畸临床,但鲜见用于Ⅱ类颌间的牵引。目的:以微种植体为支抗,探讨不同矫治力促兔下颌前导后髁突软骨中核心结合因子a1蛋白的表达及与髁突改建的影响。方法:8周龄健康新西兰大耳白兔随机分为实验组和对照组,实验组根据矫治力的不同分为100g、200g、300g和400g组。实验组动物以微型螺钉种植体为支抗,对兔下颌进行Ⅱ类颌间牵引。实验后4周取材,检测髁突软骨中Cbfa1的表达。结果与结论:下颌持续牵引后,髁突后区各层的厚度明显高于髁突中前部。与对照组相比随矫治力的增加髁突各层厚度增加,髁突软骨中Cbfa1表达也明显增加,至200g时达到峰值,而后随矫治力的增加,髁突各层厚度逐渐变薄,髁突软骨中Cbfa1表达也逐渐降低(P<0.05),提示矫治力能影响髁突软骨中Cbfa1的表达,说明适宜的矫治力作用有利于髁突软骨的改建。     

兔关节软骨损伤生物标志物的蛋白质组学检测

背景:采用蛋白质组学的方法可以检测出关节、血液、尿液等体液中一些能反映关节软骨损伤程度的特异性标志物的水平。目的:进一步验证采用生物芯片技术发现兔关节软骨损伤生物标志物。方法:采用改良的Hulth方法建立兔关节软骨损伤模型,建模后自由活动,不固定伤肢。30min/d分2次驱赶,连续12周。以不做任何处理兔膝关节为正常对照。并在造模后0,4,8,12周时采取部分标本(血清、关节液),验证观察关节软骨的损伤程度;各个时间点的动物关节液、血清样本放入采用PBSⅡ-C型蛋白质芯片阅读机,采用CM10芯片检测。结果与结论:改良的Hulth造模方法建立膝关节软骨损伤模型,比较全面地反映了关节软骨损伤从早、中、晚、失代偿各期的变化。与正常对照组相比,血清学样品:模型组3475蛋白表达下调,7558,15475,33665蛋白表达上调;关节液样品:模型组7558,33278蛋白表达下调,3950,16055蛋白表达上调;质核比3475,7558,16884为血清学和关节液样本共有差异蛋白质谱波峰显著蛋白。结果提示样本中出现的部分差异蛋白质可能为关节软骨损伤的生物标志物。     

低强度He-Ne激光对软骨细胞增殖的影响

目的研究低强度HeNe激光对兔软骨细胞增殖和变异的影响。方法选取3周龄新西兰白兔分离培养软骨细胞,分别在浓度为10%,5%,2.5%的新生牛血清(newborncalfserum,NCS)及无血清4种培养媒介中培养。采用波长为632.8nm,功率为6.5mW的HeNe激光照射软骨细胞,每天分别照射2,8,16,30和45min,共6d。在培养至第13天时,用XTT法检测细胞的活性,了解细胞的增殖情况;用吖啶橙标记软骨细胞DNA,激光共聚焦显微镜下观察软骨细胞形态及DNA的表达。结果(1)XTT结果显示,在营养缺乏培养状态中(5%,2.5%NCS),照射时间为16,30和45min的照射组细胞数量明显增加,与无激光照射组的差异有统计学意义(P<0.01),其中最佳照射时间为30min,实际最佳照射能量密度为9.42J/cm2。(2)照射组软骨细胞形态与正常软骨细胞差异无统计学意义;DNA荧光信号较对照组强;未见显著的形态改变。结论低强度HeNe激光能促进兔软骨细胞的生长,使DNA表达明显增强。     

激光调控内源性神经干细胞的增殖分化及脑功能重建

背景: 大量研究表明增强脑内源性神经细胞的增殖能力和自我修复将成为治愈缺血缺氧性脑损伤有价值的方法之一.目的:观察氦氖激光对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤内源性神经干细胞增殖分化及脑功能重建的影响.方法:7 d龄健康Wistar新生大鼠,建立缺血缺氧性脑损伤模型后第2天开始,激光穴位照射组给予氦氖激光照射.穴位选取顶骨正中的"百会"穴,以及第7颈椎与第1胸椎间、背部正中的"大椎"穴.假手术组和模型组不给予激光照射.于第2疗程结束后,用Y-型迷宫检测各组大鼠的学习记忆能力.随后制备脑海马切片,分别进行巢蛋白和微管关联蛋白2免疫组织化学染色.结果与结论:①激光穴位照射组大鼠的学习和记忆能力明显高于模型组(P < 0.05),但与假手术组相比,无明显差异(P > 0.05).②大鼠内源性神经干细胞的表达:与假手术组比较,模型组、激光治疗组齿状回内巢蛋白免疫阳性细胞均明显增多(P < 0.05),且激光治疗组增多幅度大于模型组(P < 0.05).③神经元特有结构蛋白的表达:激光治疗组大脑皮质微管关联蛋白2表达相当广泛,强阳性染成棕褐色的树突呈条索样、流星样放射状分布,海马各区锥体神经元和齿状回颗粒细胞层神经元排列比较整齐,树突连续阳性染色呈树枝状交叉分布于分子层.假手术组与激光治疗组染色所见无明显差别.模型组微管关联蛋白2表达明显减弱.结果提示激光治疗能够促进缺血缺氧性脑损伤新生大鼠脑内源性神经干细胞增殖,诱导其向神经元方向分化,并达到学习记忆功能的重建.