上海地区帕金森病基因与4种多巴胺递质代谢相关基因(英文)

目的:探讨4种多巴胺递质相关基因COMT,DBH,DAT1和MAOB的多态性与上海地区居民帕金森氏病的易感性的关系。方法:用聚合酶链式反应和限制性片段长度多态性(PCR/RFLP)技术检测4种多巴胺能递质代谢相关基因多态性,对144名原发性帕金森病病人和年龄相匹配的188名健康人进行相关性分析。结果:与健康人相比,帕金森病患者DBH基因型或等位基因的分布不同,两组之间的差异有统计学意义。结论:DBH多态性在中国汉族人帕金森氏病的易感性中可能起作用。     

帕金森病相关基因重组型14-3-3蛋白与多巴胺代谢

目的：制备并分析帕金森病相关基因重组型14-3-3蛋白对酪氨酸羟化酶活性的影响以及对多巴胺代谢的影响。方法：实验于2004-05／12在首都医科大学宣武医院北京老年医学研究所神经生物学研究室进行。取Balb／c雌性小鼠1只．麻醉下取大脑组织并提取总RNA；设计含适当酶切位点的聚合酶链反应引物，采用反转录一聚合酶链反应法从小鼠脑总RNA中分别克隆编码14-3．31和14-3-3ε的cDNA，并将其分别亚克隆至谷胱甘肽巯基转移酶融合表达载体pGEX-4T-1，转化大肠杆菌BL21，以异丙基-D-硫代半乳糖苷诱导．使其表达融合蛋白谷胱甘肽巯基转移酶-14331和谷胱甘肽巯基转移酶-1433ε。用凝血酶切断融合蛋白，再用谷胱甘肽-琼脂糖4B亲和层析纯化14．3．31和14．3．3ε。将制备的基因重组型14-3-3蛋白添加至酪氨酸羟化酶的反应体系，用高效液相色谱观察酪氩酸羟化酶的活性变化，结果：克隆的两个cDNA片段长度分别为744bp和768bp，编码247和255个氨基酸，与GeneBank中NM-018871和NM-009536展示的cDNA序列编码区结构一致。重组质粒pGEX-1433γ和pGEX-1433ε在原核细胞表达的融合蛋白质量占细菌可溶性蛋白质组分的5％，纯化的14．3．31和14-3-3ε在SDS-PAGE上表现为单一条带，表观分子质量分别为30ku和32ku。目的蛋白质不影响酪氨酸羟化酶活性，但使磷酸化修饰的酶活性增加约20％。结论：制备了两种基因重组型小鼠14-3-3蛋白，发现两种14-3-3蛋白γ和ε几乎不影响酪氨酸羟化酶活性，但是它们可使磷酸化修饰的酪氨酸羟化酶活性增高，提示14-3-3蛋白通过与磷酸化的酪氨酸羟化酶相互作用来参与多巴胺代谢。     

多巴胺系统基因和帕金森病的相关性

多巴胺代谢系统的一系列编码酶蛋白的基因,对于阐明帕金森病(Parkinson'sdisease,PD)的病因与该病的治疗有重大作用。儿茶酚胺氧位甲基转移酶(COMT)G/A多态已作为一种生物学标记广泛应用于PD的易患性研究。单胺氧化酶A基因及多巴胺转运体基因与PD的相关性各国结果也不一致,可能与存在地域或种族差异有关。单胺氧化酶B基因活性的变化可能是导致PD的潜在因素之一。多巴胺β羟化酶基因A2/A2多态与PD显著相关。多巴胺受体2基因的内含子2中(TG)n二核苷酸重复多态的等位基因3已经被国外证实与PD的发病风险有关。     

帕金森病相关基因重组型14-3-3蛋白与多巴胺代谢

目的:制备并分析帕金森病相关基因重组型14-3-3蛋白对酪氨酸羟化酶活性的影响以及对多巴胺代谢的影响。方法:实验于2004-05/12在首都医科大学宣武医院北京老年医学研究所神经生物学研究室进行。取Balb/c雌性小鼠1只,麻醉下摘取大脑组织并提取总RNA;设计含适当酶切位点的聚合酶链反应引物,采用反转录-聚合酶链反应法从小鼠脑总RNA中分别克隆编码14-3-3γ和14-3-3ε的cDNA,并将其分别亚克隆至谷胱甘肽巯基转移酶融合表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21,以异丙基-D-硫代半乳糖苷诱导,使其表达融合蛋白谷胱甘肽巯基转移酶-1433γ和谷胱甘肽巯基转移酶-1433ε。用凝血酶切断融合蛋白,再用谷胱甘肽-琼脂糖4B亲和层析纯化14-3-3γ和14-3-3ε。将制备的基因重组型14-3-3蛋白添加至酪氨酸羟化酶的反应体系,用高效液相色谱观察酪氨酸羟化酶的活性变化。结果:克隆的两个cDNA片段长度分别为744bp和768bp,编码247和255个氨基酸,与GeneBank中NM-018871和NM-009536展示的cDNA序列编码区结构一致。重组质粒pGEX-1433γ和pGEX-1433ε在原核细胞表达的融合蛋白质量占细菌可溶性蛋白质组分的5%,纯化的14-3-3γ和14-3-3ε在SDS-PAGE上表现为单一条带,表观分子质量分别为30ku和32ku。目的蛋白质不影响酪氨酸羟化酶活性,但使     

多巴胺系统基因和帕金森病的相关性

多巴胺代谢系统的一系列编码酶蛋白的基因，对于阐明帕金森病(Pakin son’s disease．PD)的病因与该病的治疗有重大作用。儿茶酚胺氧住甲基转移酶(COMT)G／A多态已作为一种生物学标记广泛应用于PD的易患性研究。单胺氧化酶A基因及多巴胺转运体基因与PD的相关性各国结果也不一致。可能与存在地域或种族差异有关。单胺氧化酶B基因活性的变化可能是导致PD的潜在因素之一。多巴胺B羟化酶基因A2／A2多态与PD显相关。多巴胺受体2基因的内含子2中(TG)n二核苷酸重复多态的等位基因3已经被国外证实与PD的发病风险有关。     

帕金森病非运动症状相关基因多态性研究进展

帕金森病是一种复杂的神经退行性疾病,其临床表现极其复杂,各种非运动症状的出现除了疾病本身进展因素参与,药物的不良反应也尤为重要.已有大量的临床研究表明,基因多态性可能影响个人对多巴胺的治疗反应和与药物相关的非运动并发症的易感性.本文提供了一个关于帕金森病非运动症状相关基因多态性的研究总结,并探讨潜在的实用性和局限性.     

Hohen-Yahr Ⅱ期帕金森病患者多巴胺转运体代谢与急性多巴胺能反应性的相关性研究

目的 研究帕金森病(PD)患者的多巴胺转运体代谢与多巴胺能反应性是否具有相关性.方法 选择13例Hohen-Yabr Ⅱ期PD患者,分别应用急性阶梯式左旋多巴/苄丝肼(50.0/12.5、100.0/25.0、150.0/37.5 mg)试验评价患者的急性多巴胺能反应性,应用甲酯基托品烷衍生物(11C-CFT)PET研究基底节区的多巴胺转运体代谢变化.分析服用左旋多巴后PD患者的统-PD评分量表运动分量表(UPDRS Ⅲ)评分改善率与基底节区多巴胺转运体示踪剂11C-CFT摄取强度的相关性.结果 13例PD患者首发症状肢体时侧的壳核后部11C-CFT摄取信号缺损,11例患者首发症状肢体同侧的壳核后部11C-CFT摄取信号部分缺损.首发症状肢体对侧的壳核后部11C-CFT摄取信号强度低于首发症状同侧,差异有统计学意义(P＜0.01).PD患者在左旋多巴/苄丝肼100.0/25.0 mg和150.0/37.5 mg剂量水平的UPDRS运动评分最大改善率与首发症状对侧壳核后部11C-CFT摄取信号强度的r值分别为0.513和0.572(P均＜0.01);与首发症状同侧壳核后部11C-CFT摄取信号强度的r值分别为0.452和0.478(P均＜0.05);与基底节其他感兴趣区11C-CFT摄取信号强度无相关性(P＞0.05).结论 Hohen-Yahr Ⅱ期PD多巴胺转运体代谢与多巴胺能反应性这两种生物学标记物具有相关性,有助深入了解PD的病理生理过程.     

急性应激障碍与多巴胺受体基因多态性的相关研究

目的：探讨多巴胺受体D2(dopamine receptor D2，DRD2)TaqⅠ多态性与急性应激障碍(acute stress disorder，ASD)遗传易患性的关系。方法：应用PCR—RFLP技术，对23例ASD患者的TaqⅠA多态性进行检测。对照组为41例经历过严重交通或其他意外事故的创伤幸存者。结果：对照组的A1等位基因频率(fA1)为24．4％，ASD组为43．5％，两者有显著性差异(x^2=4．998，P&;lt;0．05)；对照组的A1等位基因携带率(pA1)为43．9％，ASD组为73．9％，两者差异显著(x^2=5．355，P&;lt;0．05)。结论：DRD2 TaqⅠ多态性与急性应激障碍相关，A1等位基因的携带者可能对急性应激障碍易感。     

Hohen—YahrⅡ期帕金森病患者多巴胺转运体代谢与急性多巴胺能反应性的相关性研究

目的研究帕金森病（PD）患者的多巴胺转运体代谢与多巴胺能反应性是否具有相关性。方法选择13例Hohen—YahrⅡPD患者,分别应用急性阶梯式左旋多巴／苄丝肼（50．0／12．5、100．0／25．0、150．0／37．5mg）试验评价患者的急性多巴胺能反应性,应用甲酯基托品烷衍生物（11C．CFT）PET研究基底节区的多巴胺转运体代谢变化。分析服用左旋多巴后PD患者的统一PD评分量表运动分量表（UPDRSⅢ）评分改善率与基底节区多巴胺转运体示踪剂“C—CFF摄取强度的相关性。结果13例PD患者首发症状肢体对侧的壳核后部11C-CFT摄取信号缺损,11例患者首发症状肢体同侧的壳核后部11C—CFT摄取信号部分缺损。首发症状肢体对侧的壳核后部11C-CFT摄取信号强度低于首发症状同侧,差异有统计学意义（P〈0.01）。PD患者在左旋多巴／苄丝肼100．0／25．0mg和150．0／37．5mg剂量水平的UPDRS运动评分最大改善率与首发症状对侧壳核后部11C-CFT摄取信号强度的r值分别为0．513和0．572（P均〈0．01）;与首发症状同侧壳核后部11C-CFT摄取信号强度的r值分别为0．452和0．478（P均〈0．05）;与基底节其他感兴趣区11C-CFT摄取信号强度无相关性（P〉．0．05）。结论Hzhen—YahrⅡ期PD多巴胺转运俸代谢与多巴胺能反应性这两种生物学标记物具有相关性,有助深入了解PD的病理生理过程。     

帕金森病大鼠多巴胺合成酶基因的三重共转导研究

目的：探讨多巴胺合成酶基因的三重共转导能否进一步提高帕金森病大鼠纹状体多巴胺的生成。方法：以复合感染的方式,将分别构建编码酪氨酸羟化酶（TH）、芳香族氨基酸脱羧酶（AADC）和三磷酸鸟苷环水解酶I（GCH）基因的腺伴随病毒（AAV）载体,通过立体定向法注射入帕金森病大鼠损毁侧纹状体。用高效液相色谱法进行纹状体BH4和多巴胺含量的测定;采用免疫组化方法确定TH、AADC和GCH在纹状体内的表达。结果：三重目的基因共转导可使大鼠纹状体BH4和多巴胺合量的增加较TH和AADC二重基因转导进一步提高（P＜0．05）,组织学依据证明三种目的基因可在同一纹状体神经细胞内共同进行表达。结论：TH、AADC和GCH三重基因共表达这一方法对探寻更为有效的帕金森病基因治疗策略可能具有重要的意义。