流式微球技术检测血小板特异性抗体的研究进展

血小板特异性抗体的产生是引起特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)病人血小板减少及巨核细胞成熟障碍的重要原因,其诊断缺乏特异性的临床表现,主要依靠血小板特异性抗体的检测。单克隆抗体特异性血小板抗原固定术(MAIPA)是检测血小板特异性抗体的"金标准",具有高特异性、低敏感性等特点,但由于操作繁琐、耗时等原因未在临床实验室推广使用。近年来,基于流式细胞术检测血小板特异性抗体的技术研究报道,其敏感性高于MAIPA,解决了部分操作及耗时的问题,并具有利用微球编码进行联立血小板抗体检测等优点。本文就近年来该检测方法的研究进展作一综述。     

ELISA实验常见问题分析及对策

酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是检测生物分子抗原和抗体的常用方法,其操作简单、灵敏度高、特异性好,广泛用于临床检验、医学实验、药物毒物检测等领域.虽然优质的试剂、先进仪器是保证ELISA结果准确的基本条件,但由于大部分试验操作步骤都是由实验者人工操作完成,人为误差较大.     

浅析全自动酶联免疫分析系统的发展趋势

酶联免疫吸附试验(ELISA)就是用一种抗原或抗体吸附到载体上,最后通过一定的方式使酶标记抗体或抗原与之结合或被阻止与之结合,然后通过显色来检测目标抗体或抗原是否存在的试验。由于ELISA成本低、操作较简便、灵敏度和特异性很高,因此已经成为现代检验医学基本的、常规的检测技术。     

化学发光免疫测定方法的研究进展

化学发光免疫测定方法(Chemiluminescence immuno—assay，CLIA)重复性好、操作简便、快速、无放射性危害，临床很有价值。特异性阴断试验证明CLIA技术检测血清中抗原或抗体特异性强。敏感性试验结果表明CLIA方法检测血清中抗原或抗体的最低限度为0．05ng/ml，明显高于ELISA法和RIA法。     

液体芯片技术定量测定人体血清CEA、AFP、NSE和tPSA

目的 应用液体芯片技术,联合定量测定人体血清癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）和前列腺特异性抗原（tPSA）,并对其临床应用进行评价.方法 制备交联微球以及生物素标记抗体,利用双抗体夹心法对60个血清样本进行测定,并将其结果与化学发光免疫分析法（CLIA）作比较.结果 同时检测CEA、AFP、tPSA、NSE的线性范围分别为0.078～200 ng/mL、0.030～30.3 ng/mL、0.007～7.5 ng/mL、0.146～75 ng/mL;最低检测限为26.0 pg/mL、19.7 pg/mL、4.9 pg/mL、73.2 pg/mL;批内精密度CV〈9.0%,批间精密度CV〈13.2%;检测结果与CLIA测值的相关系数r分别为0.986、0.979、0.964、0.958（P〈0.001）.结论 液体芯片技术是一种具有极大优势的新型检测技术.该技术打破传统测定技术每次只能测定一个指标的限制,并且具有高通量、高灵敏度、检测时间短、样本用量少等特点.     

伤寒检测方法探讨及结果分析

目的 建立适当的实验室检测方法 体系,提高伤寒早期诊断率,为临床提供合理的分析治疗方案.方法 对50例临床上疑似伤寒的患者分别用肥达试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测伤寒抗原抗体、血培养等3种方法 进行敏感度、特异性、诊断效率、阴性预测值、阳性预测值、治愈率的检测.结果 3种方法 的阳性率:肥达试验44%,ELISA检测伤寒抗原抗体69.6%,血培养45.2%.结论 ELISA检测伤寒抗原抗体阳性率高,特异性和敏感性好,操作简便快速,适合早期诊断,同时结合血培养和药敏试验以便临床合理选用抗生素治疗.以多种方法 联合应用检测可提高结果 的准确性,从而提高检测率.     

免疫学检验中的酶免疫技术

20世纪中期，以放射免疫技术为代表的标记免疫技术相继问世，它将某种可微量或超微量测定的物质(如放射性核素、荧光素、酶、化学发光剂等)标记于抗原(抗体)上制成标记物，加入到抗原抗体的反应体系中与相应的抗体(抗原)反应，以检测标记物的有无及含量间接反映被测物的存在与多少。这些将标记技术与抗原抗体反应结合起来的免疫学检测技术以其敏感性高、准确性好、操作简便、     

血清抗ENA抗体的检测及临床应用

血清抗ENA抗体的检测是一种操作简便,灵敏度高,特异性强的实验项目,是目前临床诊断治疗自身免疫性疾病的重要参考指标。尤其抗ENA抗体中的部分抗体与相应疾病的活动性和临床表现进程相关。1何谓ENA以及抗ENA抗体ENA是可提取核抗原的总称,ENA抗原可用盐水或磷酸盐缓冲液从细胞核中提取。ENA为酸性蛋白抗原,是由许多小分子的RNA与各自对应的特异蛋白组成的核糖核蛋白颗粒。ENA抗原中主要包括Sm,RNP,SSA,SSB,Jo-1,Scl-70抗原,这些抗原除有各自的抗原特异性之外,尚可因与蛋白质组成后的分子量大小各不相同而在电泳后被分成不同分子量的条带。不同的自身免疫性疾病可产生不同的抗ENA抗体,根据ENA抗原分子量及抗原特性不同,可用不同的免疫方法对这些自身抗体进行检测[1]。2检测方法检测抗ENA抗体谱的方法较多,早期常用的有双向免疫扩散,对流免疫电泳,这两种方法灵敏度和特异性较低。目前常用的检测方法是斑点酶免疫和免疫印迹枝术,其中免疫印迹技术操作简便,特异性强,是目前各临床实验室广泛采用的检测方法。3抗ENA抗体检测的临床应用3.1抗Sm抗体抗Sm抗体仅发现于SLE患者血清中,是SLE的血清标志抗体,已...     

压电免疫传感器用于抗丙型肝炎病毒抗体检测的实验研究

目的 研制一种用于检测抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体的压电免疫传感器.方法 采用聚乙烯亚胺黏附、戊二醛交联的方法,选用(HCV)人工合成多肽抗原作为生物敏感材料,研制成一种新型的抗HCV抗体压电免疫传感器,将其用于临床血样的检测,探索了传感器的组装条件,考察了传感器的响应特性.结果 HBsAg对抗HCV抗体检测干扰较小,且抗HCV抗体阳性血清的响应值与阴性血清的噪声值之比大于4.结论 该方法选择性好,易于操作,能快速有效地检测抗HCV抗体.     

双抗原夹心酶联免疫技术检测丙型肝炎病毒抗体

1993年3月，国家卫生部下发文件要求对献血员进行抗HCV抗体的检测，随后有10几家检测HCV抗体的ELISA试剂上市，并进行批批检定，但全是间接ELISA法。由于间接法技术自身的缺陷及各生产厂家的产品存在一定的质量问题，导致了一些误诊和漏检。为此，应从根本上解决试剂本身的质量问题，建立双抗原夹心ELISA技术检测抗HCV抗体可大大提高检测试剂的特异性和敏感性。目前双抗原夹心法大多用于检测抗HIV和Tp抗体。此类试剂的敏感性和特异性均优于标记抗人免疫球蛋白的间接法。而丙型肝炎病毒抗体的检测仍采用间接ELISA技术，目前已有快速金标试剂采用双抗原夹心法原理，通过免疫层析检测抗HCV抗体。但灵敏度较低，不能用于献血员的筛选。我们通过对基因工程抗原进行改造，以适应标记辣根过氧化物酶，建立双抗原夹心ELISA法检测抗HCV抗体。