MECP2基因新发突变致男童Rett综合征1例

Rett综合征是一种主要由X性染色体上的基因突变所致的神经发育障碍性疾病,患儿多为女童,男童罕见。本文报告上海市第六人民医院儿科(以下简称“我科”)收治的新发基因突变致Rett综合征1例。患儿,男,8个月,因“喂养困难,发育迟缓8个月”就诊。患儿在其母孕35周时因“胎儿宫内窘迫”而剖宫产娩出后至我科治疗,住院期间患儿有喂奶呛咳所致呼吸暂停1次,调整喂养频次及奶量患儿体重增长,但口服奶量仍不理想。以“喂养困难”转至专科医院就诊,期间患儿出现新生儿肠炎,多次出现喂养过程中经皮氧下降,予禁食、补液、抗感染及口腔训练后,患儿奶量增加,家属签字出院。患儿就诊时抬头困难,不能独坐、爬行;可以手持玩具,但不能双手传递玩具;对声源有反应;可无意识说爸爸、妈妈,重复大人所说的简单音节;与大人有眼神交流;患儿有不自主左右摇头。体格检查示：四肢肌张力稍高,肌力正常,生理反射存在,病理反射未引出。出生后有促甲状腺激素升高,心脏超声检查示卵圆孔未闭。全基因组测序：甲基化CpG结合蛋白2基因c.317G>A(p.Arg106Gln)错义变异。患儿9月龄,因“重症肺炎”至专科医院就诊,经治疗患儿仍不能脱离气管...     

儿童自闭症与金属硫蛋白Ⅲ基因多态性相关性研究

目的研究金属硫蛋白Ⅲ(MT3)基因内含子区rs45570941多态性与儿童自闭症的关系,同时比较在正常儿童和自闭症患儿中基因型的分布情况和等位基因频率。方法收集71例正常对照儿童和72例诊断为自闭症儿童的外周血标本,提取DNA,运用聚合酶链反应-限制性片段多态性(PCR-RFLP)方法,分别对MT3基因单核苷酸多态性(SNP)进行分析。结果自闭症儿童组与对照组rs45570941多态性位点的等位基因和基因型的频数分布均符合Hardy-Weinberg平衡检验(χ2=2.96,υ=1,P>0.05;χ2=4.14,υ=1,P>0.05);自闭症儿童组与对照组MT3基因rs45570941多态性位点的基因型分布和等位基因频率的总体分布有统计学差异(χ2=13.569,P<0.05;χ2=6.89,P<0.05)。结论在本研究人群中,MT3的多态性位点rs45570941与自闭症的发生有一定的相关性,如果进一步加大样本量和挑选更多的SNP位点进行深入研究,对自闭症的病因将会有更多的发现。     

FTO基因多态性与儿童肥胖的关联研究

目的探讨FTO基因rs9939609多态性对儿童体重增加的影响。方法选取大庆地区390例儿童进行5年随访,入选时和第5年分别测定身高、体重,并检测FTO基因rs9939609多态性,以多因素分析探讨各基因型与儿童体重及体重指数(BMI)增加的关系。结果 (1)调整性别因素影响后,初访时各基因型组体重及BMI均无统计学差异。(2)5年后随访,AA基因型儿童体重明显高于TT基因型儿童[(41.32±7.30)kgvs.(36.30±8.77)kg,P<0.05],BMI亦如此[(19.72±0.92)kg/m2vs.(17.74±0.20)kg/m2,P<0.05]。从体重变化来看,AA基因型儿童5年后体重及BMI增加均明显高于TT基因型(P<0.05)。(3)调整性别及看电视时间影响因素后,AA基因型与BMI的变化仍独立相关。结论 FTO基因促进儿童时期(5岁以后)体重的增加,且不因看电视时间等环境因素影响而减弱。     

HOLE基因外显子2区SNP与先天性心脏病的关联研究

目的:研究HOLE基因外显子2区SNP与人类先天性心脏病(CHD)的相关性.方法:以病例组179例CHD患者和对照组183例门诊体检健康人为研究对象,酚-氯仿法提取外周血DNA,PCR扩增产物经变性丙烯酰胺电泳鉴定基因型.应用卡方检验分析组间基因型频率及等位基因频率差异.结果:(1)粤黔两地汉族人群中存在HOLE基因SNP m10569304的插入缺失(GCC/-)多态性,对应为等住基因A/B.(2)对照组和病例组的基因型频率及等位基因频率符合Hardy-Weinberg平衡,两组AA、AB和BB三种基因型频率分别为21.31%、54.09%、24.59%和16.75%、46.36%、36.87%,经卡方检验基因型分布差异有统计学意义(x2=6.51,P<0.05),与对照组相比,病例组中BB基因型频率升高,AA、AB基因型频率降低.(3)对照组与病例组A和B等位基因频率分别为48.36%,51.64%和39.94%,60.06%,病例组B等位基因频率显著高于对照组.分布差异有显著性(X2=5.20,P<0.05).结论:粤黔两地汉族人群中HOLE基因SNP rs10569304存在插入缺失(GCC/-)多态性,具有BB基因型的个体罹患CHD的危险度增高.     

汉族儿童TPMT基因全蛋白编码区SNP检测与分析

摘要：目的：分析汉族儿童巯嘌呤甲基转移酶（TPMT）基因的蛋白质编码区（CDS）突变,探讨其在急性白血病（AL）患儿中的单核苷酸多态性（SNP）。 方法：变性梯度凝胶电泳结合DNA测序检测103例AL患儿及111例对照组儿童的TPMT基因CDS碱基位点突变情况。 结果：汉族儿童TPMT基因筛查出2个蛋白编码区单核苷酸多态性（cSNPs）,分别为TPMT*3C（A719G）和*1S（C474T）。TPMT*3C AA、AG、GG基因型频率在AL患儿组中分别为95.1%、3.9%和1.0%,在对照组中分别为97.3%、2.7%和0,其G等位基因频率分别为2.9%和1.4%;TPMT*1S CC、CT、TT基因型频率在AL患儿组分别为5.8%、24.3%和69.9%,在对照组中分别为8.1%、28.8%和63.1%,其C等位基因频率分别为18.0%和22.5%。2个cSNPs基因型及等位基因频率在两组中分布差异无统计学意义（P＞0.05）。对照组筛查出C210T和TPMT*26（T622C）基因突变。 结论：汉族儿童存在TPMT*26突变基因型,且TPMT*3C、TPMT*1S可能均与儿童AL易感性无关。     

单核细胞趋化蛋白-1基因A-2518G多态性与急性冠脉综合征相关性研究

目的 探讨中国苏南地区汉族人群单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)基因启动子区A-2518G单核苷酸多态性与ACS发病的相关性.方法 采用病例-对照研究方法,选择临床确诊的ACS 484例(ACS组),其中急性心肌梗死(AMI) 290例,不稳定性心绞痛(UAP) 194例.经冠脉造影排除冠心病者346例为对照组,包括冠脉硬化症(CAS组)166例和冠脉无狭窄(冠脉正常组)180例.利用聚合酶链式反应-限制性酶切片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测MCP-1基因A-2518G多态性.结果 MCP-1基因A-2518G单核苷酸多态性在ACS组和对照组中均存在AA、AG和GG三种基因型.二组基因型分布符合Hardy- Weinberg平衡(P＞0.05),具有群体代表性.与对照组相比,ACS组中AA (15.32％vs.16.12％)、AG (53.47％ vs.51.86％)和GG(31.21％vs.32.02％)基因型和G(57.95％ vs.57.95％)等位基因频率差异均无统计学意义(P值分别为0.083、0.673、0.821和1.000).对性别、年龄、吸烟、糖尿病、TC和LDL等6个相关因素行Logistic回归分析显示,MCP-1基因A-2518G单核苷酸多态性与ACS的发病无相关性(P＞0.05).对男性ACS、女性ACS、AMI、UAP和早发ACS等5个亚组进行MCP-1基因A-2518G多态性分析,结果显示,男性和女性ACS分别与对照组相比、AMI和UAP分别与冠脉正常组相比以及早发ACS与年龄相匹配的对照组相比,AA、AG和GG基因型和G等位基因频率差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 在中国苏南地区汉族人群中,MCP-1基因存在A-2518G单核苷酸多态性,该多态性与ACS发病无显著相关性.     

RBP4多态性与2型糖尿病患者的相关性研究

目的 探讨视黄醛结合蛋白(RBP4)基因多态性在苏州地区汉族人群中的频率分布及其与2型糖尿病(T2DM)的相关性.方法 采用TaqMan探针基因分型技术结合琼脂糖凝胶电泳技术,检测384例T2DM患者和384例健康人RBP4的多态性,同时测定其空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平.结果 T2DM组和对照组RBP4-803,G>A; 5169,C>T; 6969,G>C 3个单核苷酸多态性(SNP)位点的基因型频率和等位基因频率分布的差异无统计学意义(P>0.05).经Logistic回归分析,校正年龄、性别、体质指数等因素影响后,各位点基因型相对风险分析未发现与T2DM发生有关的基因型,而且通过年龄、性别、高血压病史、TG、TC进行的分层分析,也未发现各基因型之间发生T2DM风险的差异性.单倍体表型分析也未发现与T2DM有关的单倍型.结论 RBP4 -803,G>A; 5169,C>T; 6969,G>C多态性与中国苏州地区T2DM的发生无关.     

MCP-1基因A-2518G多态性对中国苏南地区汉族人群急性心肌梗死易感性的影响

目的:探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)基因A-2518G多态性对中国苏南地区汉族人群急性心肌梗死(AMI)易感性的影响。方法:对330例AMI(AMI组)和经冠脉造影检查证实未见冠脉病变者165例(对照组)采用聚合酶链式反应-限制性酶切片段长度多态性技术(PCR-RFLP),行MCP-1基因A-2518G多态性检测。结果:与对照组相比,AMI组的AA(12.72%vs17.27%,P=0.239)、AG(56.36%vs48.48%,P=0.106)和GG(30.91%vs32.24%,P=0.480)基因型以及A(40.91%vs41.52%)和G(59.09%vs58.48%)等位基因频率(P=0.891)差异均无统计学意义。多因素Logistic回归分析显示,MCP-1基因A-2518G单核苷酸多态性与AMI的发病风险无相关性(均P>0.05)。进一步对AMI组中77例早发AMI亚组进行基因型分析,亦未得出阳性结果(P>0.05)。结论:在中国苏南地区汉族人群中,MCP-1基因A-2518G单核苷酸多态性可能与AMI的易感性无关。     

SNP array技术检测自闭症患儿的拷贝数变异

目的探讨单核苷酸多态性基因芯片(SNP array)技术在自闭症患儿遗传学诊断中的临床应用价值。方法用SNP array技术对45例核型分析未见异常的自闭症患儿进行遗传学检测。结果良性基因组拷贝数变异(CNVs)的检出率为11.1%(5/45)、致病性CNVs的检出率为15.6%(7/45),未检出临床意义不明的CNVs(VOUS)。7个致病性CNVs包括4个微缺失(3p14.2p14.1、3p26.3、16p13.12p13.11、Xp22.2p22.33)和3个微重复(3p26.3、15q11.2q13.3、16p13.11p12.3)。结论 SNP array技术可提高自闭症患儿致病性CNVs的检出率,在自闭症患儿的遗传学诊断中具有较高的临床应用价值。     

Molecular detection and quantification of pertussis and correlation with clinical outcomes in children

Pertussis is an under-recognized serious infection. Conventional cultures are insensitive and of limited utility after antibiotic exposure. We corroborated the utility of real-time polymerase chain reaction (PCR) as a diagnostic tool in pertussis and investigated its role as a prognostic tool by evaluating its benefit in the quantification of pertussis bacterial load. All pertussis-positive PCR tests (n = 104) submitted over 5 years were collected for retrospective study. PCR cycle threshold was compared to quantitative culture in 43. Compared to PCR, the sensitivity of culture was 41%. Our PCR assay reliably quantified bacterial load and was quantitatively reproducible. Higher bacterial load correlated with longer duration of hospitalization (P = 0.0003), and multivariate logistic regression models demonstrated this association to be independent. The study confirmed PCR as a superior diagnostic tool in pertussis. PCR quantification of bacterial load at initial diagnosis predicts later clinical disease severity, suggesting a potential benefit of PCR as a prognostic tool in pertussis.     

成人急性非淋巴细胞白血病M2型患者AML1/ETO融合基因mRNA表达及其临床意义

目的分析成人急性非淋巴细胞性白血病M2型患者AML1/ETO（AE）融合基因的表达,并探讨其与临床表现,疗效的关系以及在预后判断中的意义。方法采用巢式逆转录聚合酶链反应技术分析成人急性非淋巴细胞性白血M2患者AE融合基因mRNA表达,并比较其与临床表现、治疗缓解率的关系。通过随访,评价其在预后判断中的意义。结果在23例成人急性非淋巴细胞性白血M2患者中,12例可检测到AE融合基因mRNA表达,为所检测患者的52.2%（12/23）,其中,11例为M2a,1例为M2b。与AE融合基因mRNA表达阴性患者比较,AE融合基因mRNA表达阳性患者年纪较轻,外周血白细胞计数较低,临床上易出现发热,出血。经治疗后,AE融合基因mRNA表达阳性患者缓解率为75.0%,而AE融合基因mRNA表达阴性患者缓解率为36.4%。经8个月随访发现,1例AE融合基因mRNA表达阴性患者在缓解后第4个月复发并出现脑内转移而死亡,另1例在缓解后第7个月复发。而AE融合基因mRNA表达阳性患者在8个月的随访中无一例复发。结论在成人急性非淋巴细胞性白血病M2患者中50%以上表达AE融合基因mRNA,AE融合基因mRNA表达阳性患者更易出现发热,出血倾向,但治疗效果较好,预后良好。     

新型冠状病毒感染的临床表现及其实验室检测技术进展

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)属于冠状病毒属,是一种主要通过呼吸道传播的RNA病毒,具有极高传染性,被世界卫生组织列为对人类危害最严重的病毒之一。目前尚无批准上市的用于预防SARS-CoV-2的疫苗,该病毒导致的2019年新型冠状病毒肺炎(COVID-19)需要通过实验室检测才能明确。为了解SARS-CoV-2的研究进展,该文综述了该病毒的特征、感染的流行病学、实验室检测技术,以期为诊断和防控新型冠状病毒病提供参考。     

SNP基因芯片方法的建立及在MTHFR多态性检测中的初步应用

目的 建立单核苷酸多态性（SNP）的基因芯片检测法,并初步应用于结直肠癌患者MTHFR基因位点C677T的多态性检测,分析其位点突变与致病性的关系.方法 采用醛基修饰玻璃基片,阵列检测亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）C677T基因型,生物素标记显色.应用该芯片检测78例结直肠癌患者及40例健康对照组MTHFR基因C677T多态性,并分析MTHFR基因多态性与结直肠癌的相关性.结果 建立检测MTHFR基因SNP的基因芯片.采用基因芯片法检测病例组中MTHFR基因的C677T位点CC、CT、TT基因型分布频率分别为38.5%、53.8%、7.7%,健康对照组中C677T位点CC、CT、TT基因型分布频率分别为35.0%、62.5%、2.5%.结论 成功建立检测SNP的基因芯片法.MTHFR基因位点C677T的基因多态性与结肠癌易感性无明显关系.     

儿童孤独症临床分析及其与GRPR基因多态性的关系

目的:分析儿童孤独症接受康复治疗情况、社会因素及与遗传的关系。方法:对59例儿童孤独症进行了发现年龄、诊断年龄、接受康复治疗年龄、药物治疗史、ABC量表、社会适应量表、患儿家庭经济状况及胃泌素释放肽受体基因（GRPR）第二外显子多态性的测定。结果:儿童孤独症的发现年龄、确诊年龄及治疗年龄间差异有显著性（P<0.001）；儿童ABC行为量表的交往因子、运动因子与发现年龄有关（rs=-0.38,P<0.05;rs=-0.27,P<0.05）；GRPR第二外显子基因型TT、CC间和CC、CT间社会行为量表的粗分差异有显著性（P<0.01）。结论:儿童孤独症存在确诊和康复治疗不及时的现象；早发现与患儿的运动能力，特别是交往能力相关； GRPR基因第二外显子多态性与社会行为和适应能力有关。     

急性白血病患者WT1基因的表达及其与预后的关系

WT1基因是对遗传性肾胚胎肿瘤( Wilm s tumor)的分子遗传学进行研究时而发现的 ,研究表明 11p13的基因缺失与 Wilms肿瘤相关。1990年 Call等克隆了此相关基因的 c DNA并命名为Wilms瘤基因 1( WT1)〔1〕。WT1基因已被认为在肿瘤的发生中起一定的作用。近年的研究集中于 WT1基因在白血病发病中的意义 ,但其在急性白血病 ( AL)预后方面的作用研究尚不多见。我们就此进行探讨 ,报告如下。1　对象和方法1.1　研究对象 :患者组选择 1999年9月— 2 0 0 2年 7月收治的住院及门诊AL 者 ,79例中男 34例 ,女 45例 ;年龄4～ 6 9岁 ,平均 37.78岁…     

基于三引物荧光PCR-毛细管电泳法的FMR1基因突变检测技术建立及其在自闭症辅助诊断中的应用

目的 对自闭症患者FMR1基因5'非编码区CGG重复序列及重复数进行检测,探索检测脆性X综合征的新方法. 方法 应用三引物荧光PCR-毛细管电泳法(Qseq100TM全自动核酸分析系统检测)对111例自闭症患者进行筛查,检测其FMR1基因5'非编码区CGG序列,计算CGG重复数,并与ABI 3500Dx基因分析仪毛细管电泳测序法进行结果比较验证. 结果 111例临床检测为自闭症的样本中,有2例为FMR1前突变携带者,一例为中间型.与3500Dx毛细管电泳测序结果一致. 结论 三引物荧光PCR-毛细管电泳法能够用来检测FMR1基因5'非编码区CGG重复序列,在脆性X综合征发病机制及大规模携带者筛查方面都具有一定的应用价值.     

小儿肠套叠放射学分度与临床相关性的研究

目的回顾分析300例小儿肠套叠空气复位的临床与X线分度的价值。方法使用遥控式恒压空气灌肠仪对小儿肠套叠进行整复。根据套头位置进行分度,轻度:套头位于肝曲以下;中度:套头位于肝曲与脾曲之间;重度:套头位于脾曲至直肠。结果 300例均见典型X线表现,轻度185例,复位成功182例(98.3%),3例失败;中度101例,复位成功95例(94%),16例失败;14例为重度,复位成功8例(57.1%),失败6例。结论小儿肠套叠套头位置不同,放射学分度对临床的诊断和治疗及预后有很重要的价值。