对乙型肝炎表面抗原弱阳性结果进行确认试验的应用研究

目的评估抗体中和确认试验在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)低值弱阳性标本中的应用。方法将由微粒子酶免疫发光法(MEIA)检测的HBsAg结果(S/CO)在1.0~10.0之间的111份弱阳性血清标本进行抗体中和确认试验,并进行乙型肝炎病毒(HBV)酶联免疫吸附试验(ELISA),对比各试验结果间的差异。结果抗体中和确认试验阳性92例(82.9%),ELISA检测阳性47例(42.3%),2项试验检测结果间差异有统计学意义(P=0.033)。结论对HBsAg低值弱阳性标本,ELISA检测漏检率很高,敏感性和特异性均不佳;抗体中和确认试验可做为HBsAg弱阳性标本进一步确认的手段。     

胶体金免疫层析试验检测乙肝两对半时HBsAg假阴性结果的处置

目的胶体金免疫层析试验(GICA)检测乙肝两对半时,对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)结果疑似假阴性的标本分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)和时间分辨荧光分析法(TRFIA)定量试验进行HBsAg检测,并用抗体中和确认试验进行确认,以获得一个处理GICA检测HBsAg产生假阴性结果的可靠方法。方法 2014年1月至2015年2月用GICA检测乙肝两对半的标本3 078例,选取其中结果为单乙型肝炎核心抗体(抗-HBc),或单乙型肝炎e抗体(抗-HBe)为阳性,或抗-HBc和抗-HBe同为阳性,而HBsAg、乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)均为阴性的标本86例,分别用ELISA和TRFIA检测其HBsAg,对检测为阳性的标本进行抗体中和确认试验确认。结果 86例标本经抗体中和确认试验确认阳性的为35例;ELISA检出阳性标本28例,其中2例为假阳性;TRFIA检出阳性标本35例与抗体中和确认试验符合率100%。结论 GICA检测乙肝两对半时,对HBsAg结果疑似假阴性的标本可选用TRFIA进行复查确认。     

酶联免疫吸附试验乙型肝炎表面抗原弱阳性血液标本中3种检测方法的结果分析

目的分析酶联免疫吸附试验(ELISA)乙型肝炎表面抗原(HBsAg)弱阳性标本中3种检测方法[增加标本的离心时间和提高离心速度、时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)、抗体中和确认试验]的应用。方法选取2014年1月至2015年12月来该院检验科验血的200例检验报告作为血样获取目标,其中HBsAg弱阳性的血液标本112例,即作为该研究的血液标本;分别通过增加标本的离心时间和提高离心速度、TRFIA、抗体中和确认试验进行检测,继而对不同方法检出的结果进行分析比较,其中以经抗体中和确认试验检测出的结果作为金标准。结果ELISA检测过程中,与ELISA初测(3 000r/min离心8 min)阳性率(61.6%)相比,增加离心时间和提高离心速度(3 500r/min离心20min)后,ELISA检测阳性率(48.2%)明显偏低,差异有统计学意义(P0.05)。以抗体中和确认试验检测结果作为金标准,ELISA检测112例HBsAg弱阳性血液标本,其敏感度为57.3%(47/82),漏检35例,占比42.7%(35/82),另外误检7例,占比23.3%(7/30);TRFIA检测112例HBsAg弱阳性血液标本,其敏感度为93.9%(77/82),漏检率6.1%(5/82),错检率3.3%(1/30),并且TRFIA敏感度明显高于ELISA,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ELISA检测HBsAg可能出现假阳性结果,通过增加标本的离心时间和提高离心速度可有效减少假阳性例数;TRFIA敏感度较ELISA更高。     

低水平 HBsAg 标本的检测及其临床意义

目的：探讨低水平乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的检测方法及其临床意义。方法血清样本为上海科华公司生产的 HBsAg 酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒或罗氏 cobas E601分析仪免疫发光分析仪初筛为弱阳性的标本;用丽珠 HBsAg中和试剂盒（酶联免疫法）或罗氏 cobas E601进行确认试验,并结合相应样本的肝功能及 HBV-DNA 检测结果进行分析。结果经科华试剂盒初筛为弱阳性的53例样本中,丽珠 HBsAg 中和试剂盒检测为阳性37例、阴性16例;经电化学发光法检测为弱阳性的18例样本中,丽珠 HBsAg 中和试剂盒检测为阳性4例,阴性6例。结论不同检测系统检测低水平 HBsAg 的结果存在差异,低水平 HBsAg 的临床价值有待进一步研究。     

ELISA检测乙型肝炎表面抗原的范围和确认试验探讨

目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）测定乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阴性样本临界结果的复检范围和确认试验的弱阳性样本检测范围。方法血清样本用国产ELISA试剂测定HBsAg,阴性样本进行复检,复检结果阳性进行确认试验。确认试验应用雅培公司的AxSYM全自动酶免疫荧光分析系统和配套试剂。结果HBsAg阴性样本547例,其中510例吸光度（A）值i〉0．0735,复检结果阳性5例,确认试验结果亦为阳性;37例A值〈0．0735,复检结果均为阴性。HBsAg阳性样本332例,其中160例A值≥1．0,确认试验均为阳性;172例A值〈1．0的样本中有7例确认试验结果为阴性。结论应用国产ELISA试剂进行HBsAg的确认试验,应先确定阴性样本的复检范围和需做确认试验的弱阳性样本范围。     

乙型肝炎表面抗原ELISA检测假阴性样本的分析

目的 对酶联免疫吸附试验(ELISA)测定乙型肝炎袁面抗原(HBsAg)为假阴性的样本,以微粒子酶免发光法(MEIA)来检测并进行确认,提供一个处理ELISA检测HBsAg产生假阴性的方法.方法 选定武汉亚洲心脏病医院2007年8月～2008年10月ELISA测定乙型肝炎血清学标志物的样本3 831例,收集其中单乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性和/或乙型肝炎e抗体及抗-HBc同为阳性而HBsAg、乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎e抗原均为阴性的样本,符合条件的76例样本入选,所有入选的样本均用MEIA法进行HBsAg检测,并对检测为阳性的样本进行抗体中和确认试验确认.结果 76例样本中,经MEIA法检测HBsAg为阳性的样本49例,占64.5％;经抗体中和确认试验确认为阳性的样本3-3例,占43.4％.结论 ELISA检测HBsAg弱反应性样本的漏检率很高,需用更好的检测手段来确认.     

用于国产一步法HBsAg ELISA试剂及确认试验试剂的改进方法

目的延长酶反应时间以提高国产一步法酶联免疫吸附试验（ELISA）乙型肝炎表面抗原（HBsAg）试剂的敏感性和精密度。方法将酶反应时间自30 min延长至120 min,观察检测结果的敏感性和特异性的变化,及其对相关确认试剂确认试验的影响,并与Murex确认试剂检测结果进行比对。结果酶反应时间延长至120 min,HBsAg ELISA试验检测的Cut-off值不变,在检测Murex HBsAg检测结果呈阴性反应的样本时,其结果均为阴性。延长酶反应时间至120 min可以提高检测结果的吸光度（A）值,位于灰区的弱阳性样本的A值可提高1倍左右。常规ELISA结果S/CO值在0.5-1.0区段的22例阴性灰区样本中,在酶反应时间延长至120 min的国产确认试剂检测中有4例样本确认为阳性,该4例样本在Murex确认试验中亦为阳性;S/CO值在1.0-2.0区段的79例阳性灰区样本中,120 min的国产确认试验与Murex确认试验均为50例阳性,2种确认试验结果一致（χ^2=0.078,P〉0.05）。结论延长国产一步法HBsAg ELISA试剂的酶反应时间可以提高检测的敏感性并适用于相关的确认试验。     

乙型肝炎病毒表面抗原确认试验的临床应用

目的对珠海丽珠试剂公司研发的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）确认试剂盒（中和试验法）进行初步临床试验，评价其应用价值。方法血清样本来源于本院门诊患者（包括体检者），经上海科华公司生产的HBsAg酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒测定．结果呈阳性者。确认试验方法参照丽珠公司提供的说明书进行。结果133例样本中确认为阳性者99例（74．43％），其中有4例常规确认试验结果为“不确定”，经延长时间的确认试验，均确认为阳性。其余34例样本在确认试验中对照孔的结果为阴性，经科华试剂复测，结果亦均为阴性。此34例科华试剂初筛为阳性的样本，其吸光度（A）值均≤0．500。结论丽珠公司的HBsAg确认试剂盒适用于临床榆验。国产HBsAg ELISA试剂测定结果为弱阳性的样本应进行复检，以排除假阳性；如采用确认试验，则可保证真阳性样本的真实性。     

用中和试验评价四种ELISA试剂盒检测抗-HBe结果的准确性

目的用中和试验方法验证酶联免疫吸附试验（ELISA）竞争抑制法和中和竞争法检测血清乙型肝炎e抗体（抗-HBe）的性能。方法竞争抑制法选择A、B试剂,中和竞争法选择C、D试剂检测抗-HBe;4种试剂结果明显差异的标本,用中和试验确认抗-HBe。结果 4种试剂检测随机血清标本455份,其中195份（42.85%）抗-HBe结果有差异。4种试剂检测抗-HBe总阳性数279份（61.32%）,其中均阳性84份（30.11%）。经中和试验确认,A、B、C试剂假阴性率为35.0%～72.5%;假阳性率为31.4%～77.1%。D试剂假阳性率为37.1%,假阴性率为5.0%。结论 ELISA一步法检测抗-HBe,4种试剂均存在一定比例的假阳性或假阴性,D试剂准确性明显优于A、B、C试剂。中和试验对于确认抗-HBe结果的准确性简便而实用。     

献血者血液乙型肝炎病毒表面抗原确认试验

目的 对使用国产HBsAg酶联免疫吸附试验(ELISA)一步法试剂盒检测无偿献血者血液(包括机采血小板献血体检者)的可靠性进行评价.方法 对无偿献血者血液样品,使用国产的HBsAg酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒进行测定.结果 呈阳性反应者、3种试剂检测结果不一致的部分可疑结果者和3种试剂检测为阴性者,使用珠海丽珠试剂公司研发的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)确认试剂盒(中和试验法) 初步进行确认试验.确认试验方法参照丽珠公司提供的说明书进行.结果 132例样品中阳性反应或可疑阳性反应者123例被确认为阳性者106例,其中有17例可疑结果者常规确认试验结果为"阴性".经3种试剂再测,结果仍为可疑.9例0.074≤样品A值＜Cut off的样品和随机抽取的9例阴性样品常规确认试验结果仍为阴性.8例单一试剂呈阳性反应者常规确认为假阳性.结论 国产HBsAg ELISA试剂测定结果为阳性、弱阳性和可疑的样品应使用适当方法进行确认,排除假阳性,以保证结果准确.目前国产HBsAg酶联免疫吸附试验(ELISA)一步法试剂盒有较高的灵敏度,特异性尚待提高.     

Elecsys HBsAg确证试验在灰区及弱反应性标本检测中的应用

目的探讨ElecsysHBsAg确证试验在ELISA定性试验和ECLIA定量试验临界灰区及弱反应性标本检测中的临床应用价值。方法所有被检测血清标本均来自门诊和住院患者,对其中145例ELISA法检出的灰区及弱反应性标本分别进行E1ecsysHBsAg定量试验及确证试验,并对结果进行了比较分析。结果血清HBsAg经EUSA法检测OD／CUTOFF结果在0．85～O．99之间标本共35例,其中1例ElecsysHBsAg定量及确证试验阳性占2．9％（1／35）;OD／CUTOFF结果在1．0～1．99弱反应性标本共54例,ElecsysHBsAg定量试验有反应性14例,占25．9％（14／54）,ElecsysHBsAg确证试验阳性18例占33．3％（18／54）;OD／CUTOFF结果在2．0～4．99共31例,有17例ElecsysHBsAg定量及确证试验阳性占54．8％（17／31）;OD／CUTOFF结果在5．O～7．99共25例,有21例ElecsysHBsAg定量及确证试验阳性占84．0％（21／25）。通过对EuSA法与ECLIA法、ELISA法与ElecsysHBsAg确证试验检测HBsAg结果比较差异具有统计学意义（P〈O．01）。结论ELISA法检测HBsAg灰区及较低含量的弱反应性标本、可疑或乙肝感染模式不常见的标本需再次用敏感性更高的ECLIA等方法复检以防假阴性或假阳性出现,有条件的实验室可用Elect;ysHBsAg确证试验进一步确认。     

HBsAg阴性及弱反应性标本的检测及临床意义

目的探讨ELISA两步法、化学发光法、荧光定量PCR定量技术对HBsAg阴性及弱反应性标本的检测及其临床意义,为提高临床检测准确率提供借鉴。方法收集医院门诊和住院受检者经ELISA一步法检测的乙肝两对半4种模式标本(模式1:仅HBeAb阳性;模式2:仅HBcAb阳性;模式3:HBcAb阳性和HBeAb阳性;模式4:HBsAg均为弱反应性的标本),用ELISA两步法及化学发光法检测,再对经化学发光法检测HBsAg结果为阳性的标本用FQ-PCR检测乙肝病毒DNA载量。结果仅HBeAb阳性的标本,共2例,ELISA两步法结果显示HBsAg均为弱反应性,化学发光法结果为阴性;仅HBcAb阳性的标本121例,ELISA两步法结果示HBsAg呈弱反应性者为26例(占21.5%),化学发光法结果阳性8例(占16.7%);HBcAb阳性和HBeAb阳性的标本55例,ELISA两步法HBsAg结果呈弱反应性的为25例(占45.4%),化学发光法结果阳性14例(占25.5%),其中7例用常规PCR方法检测结果拷贝数均小于5.0*102;HBsAg为弱反应性的标本59例,ELISA两步法弱反应性的结果均在临界值附近,化学发光法结果均为阳性。结论对于HBsAg阴性及弱反应性的临床标本,最好采用化学发光法检测或者进行确证试验。     

电化学法确认低浓度乙肝表面抗原的初步应用

目的利用罗氏试剂公司研发的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)确认试剂对低浓度HBsAg标本进行确认试验,并做初步分析,以期对今后的检测工作有一定的指导价值。方法 168例Cutoff-指数(COI)在0.9～20.0血清样本来源于本院住院及门诊患者,经罗氏公司E170仪器对其检测并进行中和试验。结果 94例COI在0.9～5.0低含量HBsAg血清样本,经确认试验确认阳性率72.34%,阴性率26.60%,不确定率1.06%;受试者工作特征曲线(ROC)分析,当COI在4.18时,特异性可达到100%;乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)阳性组与阴性组的弱阳性组确认试验情况阳性率为45.71%和88.13%,两组比较,差异均有统计学意义(χ2=19.76,P<0.05)。结论如果条件允许,当HBsAg COI值0.9～5.0IU/L,尤其当同时抗-HBs阳性时应做确认试验。     

酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒表面抗原临界样本复检范围的探讨

目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）临界样本的复检范围。方法收集用ELISA初检HBsAg吸光度（A）值在0.07～2.00范围内的样本,用ELISA复检;初、复检结果不符和2次结果均在临界的样本,用微粒子酶免疫法（MEIA）进行复核,并用中和法做确认试验。统计分析结果,选择一个合适的样本复检范围。结果样本初检结果A值在0.070～0.104、0.105～0.300范围内,ELISA复检符合率分别为85.2%、56.9%;MEIA与ELISA复检结果的符合率分别为90.1%、93.9%。A值在0.301～0.500、0.501～1.000、1.001～1.500、1.501～2.000范围内,ELISA复检符合率依次为88.3%、93.8%、99.1%、99.2%,MEIA与ELISA复检结果的符合率为100%。确认试验和MEIA复检结果的符合率样本测定值（S）/阴性对照值（N）在1.50～1.99、2.00～5.00,分别为50.0%和92.7%,其他组均在97.1%以上。结论在操作规范化的实验室内,ELISA初检HBsAg复检范围宜选择样本A值在0.070～0.300范围内;大批量体检时,复检范围应放宽至0.070～0.500;乙肝标志物模式异常的样本也需复检。规定适宜的复检范围既能确保检测结果的准确性,又能避免人力和试剂等物品的浪费。     

电化学法确认低浓度乙肝表面抗原的应用研究

目的 利用罗氏试剂公司研发的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）确认试剂对低浓度HBsAg标本进行确认试验,并做初步分析,以期对今后的检测工作有一定的指导价值。方法160例Cutoff指数（C01）在0．9—20．0血清样本来源于本院住院及门诊患者,经罗氏公司e601仪器对其检测并进行中和试验。结果90例COI在0．9～5．0低含量HBsAg血清样本,经确认试验确认阳性率66．7％,阴性率32．2％,不确定率1．1％;受试者工作特征曲线（ROC）分析,当COI在4．2时,特异性可达到100％;乙型肝炎病毒表面抗体（抗一HBs）阳性组与阴性组的弱阳性组确认试验情况阳性率为53．3％和83．3％,两组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论如果条件允许,当HBsAg的COI值0．9～5．0IU／L,尤其当同时抗-HBs阳性时应做确认试验。     

住院患者输血前血清学4项检查结果分析及临床意义

目的探讨住院患者输血前检测4项指标在医院感染管理和控制中的临床意义,以便做好自我防护及预防交叉感染,同时避免医疗纠纷的发生。方法对本院2007~2010年3 237例住院输血前患者采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行血清学乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、人类免疫缺陷病毒(Ⅰ型、Ⅱ型)抗体(抗-HIV1/2)、丙型肝炎抗体(抗-HCV)、梅毒抗体(抗-TP)检测分析。结果检测样本总阳性数531例,总阳性率16.40%。其中检出HBsAg阳性362例、抗-HIV阳性13例、抗-HCV阳性50例、抗-TP阳性116例,经梅毒螺旋体血细胞凝集试验确证106例。不同性别的检测情况来看,男性抗-TP阳性率(4.16%)明显高于女性(2.52%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论对输血患者进行输血前血清学4项检测,明确患者的健康状况,可避免或减少因输血产生的有关血源性传播疾病的医疗纠纷,为医疗纠纷的处理提供法律依据,同时有利于医患双方的自我保护。