从奶牛粪便中检出肠出血性大肠杆菌O157:H7的实验报告

目的探索肠出血性大肠杆菌O157:H7在赣州市动物肠道的携带情况,为肠出血性大肠杆菌O157:H7的防制提供科学依据.方法同时采用EC肉汤增菌后直接划CMAC平板和EC肉汤增菌后,先用肠出血性大肠杆菌O157:H7病原体快诊金卡筛检,阳性管用免疫磁珠集菌,再划CMAC平板的二种方法进行病原分离培养效果比较.结果从奶牛粪便中检出一株肠出血性大肠杆菌O157:h7.病原体快诊金卡筛检加免疫磁珠集菌法进行病原分离培养优于直接分离培养法.结论赣州市存在肠出血性大肠杆菌O157:H7,奶牛是储存宿主之一,有关部门应重视防止肠出血性大肠杆菌O157:H7的感染及食物中毒的发生.     

从奶牛粪便中检出肠出血性大肠杆菌O157：H7的实验报告

目的探索肠出血性大肠杆菌O157:H7在赣州市动物肠道的携带情况,为肠出血性大肠杆菌O157:H7的防制提供科学依据。方法同时采用EC肉汤增菌后直接划CMAC平板和EC肉汤增菌后,先用肠出血性大肠杆菌O157:H7病原体快诊金卡筛检,阳性管用免疫磁珠集菌,再划CMAC平板的二种方法进行病原分离培养效果比较。结果从奶牛粪便中检出一株肠出血性大肠杆菌O157:h7。病原体快诊金卡筛检加免疫磁珠集菌法进行病原分离培养优于直接分离培养法。结论赣州市存在肠出血性大肠杆菌O157:H7,奶牛是储存宿主之一,有关部门应重视防止肠出血性大肠杆菌O157:H7的感染及食物中毒的发生。     

家畜、家禽肠出血性大肠杆菌O157∶H7的监测

大肠杆菌O157:H7是80年代初发现的肠道致病菌,大量调查结果证实禽、畜类动物是大肠杆菌O157:H7的贮存宿主,也是造成暴发流行的主要病因.为了解本市家畜、禽动物携带大肠杆菌O157:H7情况,我们于1999年5～10月开展了本市家畜、禽动物携带大肠杆菌O157:H7的调查,现将调查结果报告如下.     

来自腹泻合并急性肾衰病人疫区的99株E.coli O157∶H7的鉴定结果分析

目的调查研究河南省2000年3月17日-7月6日发生的腹泻合并急性肾衰病人的致病菌。方法采集病人、外环境、家畜和家禽标本620份,采用免疫磁珠集菌法、CHROMAGAR-O157∶H7显色培养基分离及营养肉汤增菌、rfbO157、rfbO111引物多重PCR扩增等方法进行病原菌的检测。结果分离出99份E.coli O157∶H7菌株,其中rfbO157、志贺氏样毒素2(stx2)、溶血素(hlyA)、肠上皮细胞纤毛消除素(eaeA)基因和vero细胞毒性试验均阳性的有56株,其它基因组合7株,36株无毒力基因。结论99株E.coli O157∶H7在CHROMAGAR-O157∶H7显色培养基生长形态、颜色,生化反应及毒力基因表现等方面出现多样化,对于今后在制定对该菌的诊断标准、传染源的控制及细菌毒力学等方面的研究提供了依据。     

应用免疫磁珠富集法河北省首次从食品中检出O157∶H7大肠杆菌

继我市用常规法在牛粪及腹泻病人粪便中检出O15 7∶H7出血性大肠杆菌后 ,今年我们又应用免疫磁珠富集技术 ,在河北省首次从食品中检出肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7。从 353份样品中分离出 2株O15 7∶H7大肠杆菌 ,检出率为 0.57% ,提示我市甚至我省存在着O15 7∶H7出血性大肠杆菌腹泻流行或暴发流行的危险     

应用免疫磁珠富集法河北省首次从食品中检出O157∶H7大肠杆菌

继我市用常规法在牛粪及腹泻病人粪便中检出O15 7∶H7出血性大肠杆菌后 ,今年我们又应用免疫磁珠富集技术 ,在河北省首次从食品中检出肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7。从 35 3份样品中分离出 2株O15 7∶H7大肠杆菌 ,检出率为 0 5 7% ,提示我市甚至我省存在着O15 7∶H7出血性大肠杆菌腹泻流行或暴发流行的危险     

2008-2010年浙江省衢州市动物粪便O157∶H7监测及其意义

目的 动态了解浙江省衢州市家禽、家畜肠出血性大肠埃希菌O157∶H7带菌情况和菌型分布特征,以制定相应的防制对策。 方法 6、7月肠道传染病高发季节,采集动物粪便标本,对O157∶H7菌株进行分离培养,并用PCR方法检测其毒力基因。 结果 共采集动物粪便标本914份,检出O157∶H7菌2株,总带菌率为0.22%,其中羊、牛各检出1株,带菌率分别为0.62%和0.71%。经PCR检测,其中1株携带stx2+ hly+ eaeA毒力因子,1株hly+eaeA阳性,stx1均为阴性。 结论 衢州市再次分离到带有毒力基因的肠出血性大肠埃希菌O157∶H7,对人群健康构成了威胁,应加强O157∶H7的综合监测。     

衢州市动物粪便O157:H7大肠杆菌的带菌调查分析

O157:H7大肠杆菌(E.coli O157:H7)是肠出血性大肠杆菌(EHEC)的主要血清型,能引起人类腹泻、出血性肠炎(HC)、并发溶血性尿毒综合症(HUS)、血栓形成性血小板减少性紫癜(TTP)等疾病.自1982年首次在美国发现引起出血性肠炎的暴发,我国也发现由O157:H7大肠杆菌引起的散发病例.近几年来,我国已陆续有10多个省份在食品、家畜家禽、腹泻病患者中检出该致病菌.为了解O157:H7大肠杆菌在本地区动物粪便中的带菌状况,2001年6月,我们采集了我市市区农贸市场和乡村农家的动物粪便共300份.对O157:H7大肠杆菌进行了带菌调查,结果报告如下.     

国产2种静注人免疫球蛋白大肠杆菌O157∶H7的IgG抗体谱比较研究

目的利用本研究室建立的抗体谱检测方法,考察比较我国2家血液制品企业市售静注人免疫球蛋白p H4(IVIG)的抗体谱情况。方法以大肠杆菌O157:H7总蛋白为抗原,利用蛋白质双向电泳技术结合蛋白免疫印迹法进行检测。结果经本实验获得了较高质量的IVIG制品Ig G抗体谱图,厂家A IVIG制品中含有针对大肠杆菌O157:H7的Ig G抗体202个,厂家B IVIG制品含有针对大肠杆菌O157:H7的Ig G抗体130个,且二者识别的抗原种类不完全相同。结论检测的2个厂家IVIG制品中均具有针对大肠杆菌O157:H7的广谱抗体,但2者抗体谱不一致,反映出2个厂家IVIG制品的独特性。     

浙江省衢州市柯城区检出带毒力基因的肠出血性大肠埃希菌O157∶H7

目的　了解浙江省衢州市柯城区肠出血性大肠埃希菌O157∶H7人的感染、食品污染以及动物和媒介昆虫带菌情况。方法　采集腹泻患者粪便、动物粪便以及各类食品、蝇类等标本，MEC肉汤增菌后，用特异性免疫磁珠集菌，以科玛嘉显色平板分离，纯化的菌株经生化鉴定、血清分型及毒力基因检测。结果　2007年采集动物粪便标本300份，共检出O157∶H7菌16株，总带菌率为5.33%，其中牛、羊、猪带菌率较高，分别为20.83%、12.70%和3.61%，腹泻患者、食品和媒介昆虫中均未检出。毒力基因检测所有分离株Istx/I2、hly、eaeA 3种毒力基因均呈阳性，而stx1均呈阴性。结论　衢州市柯城区部分动物中存在O157∶H7感染，且为产毒株，应加强O157∶H7的综合监测。     

昆明市首次检出肠出血性大肠杆菌O157∶H7

为了解昆明市是否存在肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7及流行情况 ,了解蔬菜、食物、水等的污染情况 ,2 0 0 1年 10月采集昆明市鸡、鸭、牛 3个养殖场、西式快餐店 2个和市区 9个农贸市场的鸡、鸭、牛粪 ,生牛奶 ,生、熟肉馅 ,生蔬菜 ,生、熟猪、牛肉 ,海产品 ,以及猪、鱼、鸡内脏等 14种共 15 5份样品。按照大肠杆菌O15 7∶H7的常规分离鉴定方法和分子生物学和血清学试验鉴定 ,结果共发现 19株大肠杆菌O15 7∶H7,并且 19株菌株均含有志贺样毒素VT2的致病基因。其中从蔬菜 (33份 )分离到 9株、鸡内脏 (9份 )分离到 3株、生猪肠 (17份 )和卤猪肉 (12份 )各分离到 2株 ,发干菜 (6份 )、鱼内脏 (6份 )、海产品 (6份 )各分离到 1株大肠杆菌O15 7∶H7。食品中检出阳性菌株数之多在全国尚属少见。特别是蔬菜 ,其检出O15 7∶H7大肠杆菌阳性数 ,占总检出数的 4 3 37% ,与国内其它地区有所不同。昆明市存在发生肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7感染暴发或流行的潜在危险.     

河北省肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染监测

为调查河北省既往是否曾发生肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7感染疑似病例 ,了解动物带菌和市售食品、饮水的污染情况。选取市级以上医院 ,查阅 1998年 1月 1日至 1999年 12月 31日的住院病案 ,对有腹泻史的急性肾功能衰竭患者填写个案调查表。采集各种动物粪便、市售食品和饮水标本 ,接种山梨醇 -麦康凯培养基 ,可疑菌落转种三糖铁培养基 ,之后进行生化鉴定和血清学鉴定。结果表明 ,全省共发现 41例肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7感染疑似病例 ,分布于 8个市 ,发病时间无严格季节性。男性 2 9例 ,女性 12例 ;年龄最小者 8天 ,最大者 78岁 ;农民所占比例最大 ,占 68.3%。全省采集十几种动物粪便标本共计 2 0 6 0份 ,从牛粪 (75 1份 )中分离到 2株O15 7∶H7;采集五类市售食品共 35 2 3份 ,从生猪肉 (36 6份 )中分离到 2株O15 7∶H7;采集的饮水标本未分离到O15 7∶H7。因此证实河北省存在发生肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7感染爆发或流行的潜在危险     

江苏省徐州市出血性大肠埃希菌O157∶H7 感染性腹泻的监测研究

目的 系统监测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7(O157∶H7)感染并发肾衰(HUS)、腹泻患者、宿主动物、蝇类、食品携带O157∶H7的状况,为预警监测体系建立提供参考依据。 方法 采集徐州市疫情暴发点和监测点腹泻患者粪便、蝇类和食品标本分离菌株。应用PCR技术检测志贺毒素基因stx。 结果 1999-2011年徐州市累计报告O157∶H7引起的感染性腹泻并发HUS 132例。腹泻患者带菌率1.2%、蝇类带菌率0.5%、食品带菌率1.0%、宿主动物带菌率3.1%。菌株带毒由stx1和stx2共存发展为以不带毒为主。 结论 江苏省徐州市O157∶H7感染自1999年、2000年暴发流行后,该市疫情一直稳定。腹泻患者带菌率、宿主动物带菌率、蝇类带菌率、食品带菌率及菌株带毒情况发生了改变。     

肠出血性大肠埃希菌O157 ∶ H7质粒 pO157 上毒力因子的研究进展

肠出血性大肠埃希菌O157 ∶ H7是一种重要的致病菌,可以引起不同程度人类疾病。目前已知的O157 ∶ H7的致病因子有3个,志贺毒素、粘附抹平效应毒力岛和特异性质粒pO157。其中pO157在致病过程中的作用并不十分清楚。本文结合近年来的研究进展,介绍了pO157上与细菌致病性有关的毒力因子。     

1999-2006年江苏省徐州市肠出血性大肠埃希菌O157:H7感染状况的流行病学研究

目的 探讨徐州市肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7(以下简称O157:H7)感染的流行特征,系统观察腹泻患者、宿主动物携带O157:H7的状况及其与发病的关系,为制定防制策略提供科学依据.方法 采用描述流行病学方法对徐州市近8年来O157:H7感染状况与流行特征进行分析.结果 1999-2006年徐州共累计报告O157:H7引起的感染性腹泻并发肾衰竭(HUS)131例,病死率87.79%.徐州市丰县、铜山县发病最多,占全市发病的77.10%.6～9月份为发病高峰,占发病的77.10%.年龄以60岁以上老人为主,占发病总数的74.81%,职业以农民为主,占91.60%.男女性别比例为1:1.34.腹泻患者、宿主动物带菌率连续性监测结果证实了其与O157:H7感染关系.不同年份O157:H7毒力基因发生了变化.结论 O157:H7感染自1999、2000年爆发流行后,徐州市疫情一直稳定.尽管疫情发生原因复杂,传播机制不清,但与腹泻患者带菌率、宿主动物带菌率及菌株毒力基因阳性率、毒力基因变迁有关.腹泻患者带菌率、宿主动物带菌率可作为爆发疫情预警监测指标.     

大肠杆菌O157∶H7抗菌药物敏感性研究

为了解E .ColiO15 7∶H7对抗菌药物的敏感性及其耐药谱的差异 ,我们选择了常见的 19种抗生素 ,对 1999年分离到的 89株O15 7∶H7进行药敏试验。结果显示O15 7∶H7对氨基甙类、头孢类、喹诺酮类、呋喃类的实验药物、多肽类的多粘菌素B以及氯霉素的敏感率高 ,基本在 90 %以上。在宿主动物中家禽类的菌株耐药率大于家畜类 ,家畜类宿主中猪的菌株耐药率大于牛、羊。无毒力基因菌株对抗生素的耐药率高于有毒力基因的菌株 (P <0 0 5 )。样本来源不同和基因型别不同的耐药结果均显示菌株对抗生素的耐药情况与其是否携带有毒力基因有关。     

Application of real-time PCR and RT-PCR assays for the detection and quantitation of VT 1 and VT 2 toxin genes in E. coli O157:H7

Real-time PCR assays, based on hybridisation probes and LightCycler technology, were developed for VT 1 and VT 2 genes and applied to the detection and quantitation of DNA and mRNA of Escherichia coli O157:H7. The qualitative consensus PCR assay for the detection of VT 1 and/or VT 2 genes had a detection limit of 100 fg of E. coli O157:H7 genomic DNA and did not detect DNA from 13 non-VTEC isolates. When E. coli O157:H7 was inoculated into minced beef, enriched and recovered by immunomagnetic separation, the real-time consensus PCR assay had a detection limit of log(10)3.5 ml(-1) E. coli O157:H7 cells. Nineteen E. coli O157:H7 isolates, derived from food, bovine samples and human faeces, were analysed and compared for mRNA expression of three genes, VT 1, VT 2 and gapA (housekeeping gene), using quantitative real-time PCR assays. While there was no statistically significant difference for the expression of the VT 1 (p=0.134) or VT 2 (p=0.52) mRNA in the E. coli O157:H7 isolates from food, bovine and human sources, three clinical isolates did show lower expression of VT 2 compared to other isolates in the study. The study indicates that the consensus qualitative real-time PCR assay for VT 1 and VT 2 is rapid and sensitive and that the quantitative assays reported here have the potential to be used as an alternative method to more conventional methods for studying VT 1 and VT 2 virulence gene expression in E. coli O157:H7 with potential application in other pathogenic E. coli species.