人参皂甙Re抗大鼠急性缺血-再灌流心肌细胞凋亡及相关基因蛋白表达

目的　观察人参皂甙Re抗急性缺血再灌流心肌细胞凋亡及Bcl 2、Bax、Bad和Fas基因蛋白表达 ,探讨人参皂甙Re抑制心肌细胞凋亡的可能机制。方法　结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支 ,建立大鼠缺血 再灌流动物模型 ;采用透射电镜、缺口末端标记法检测心肌凋亡细胞 ,利用光学显微镜进行细胞计数 ;免疫组织化学检测Bcl 2、Bax、Bad和Fas基因蛋白的表达 ,并利用图像分析系统测量平均光密度值进行定量分析。结果　①假手术组未发现心肌凋亡细胞。缺血 再灌流组心肌凋亡细胞数为 (13 4 4 5± 4 5 61)个 /视野 ,Re治疗组 (90 66± 19 2 2 )个 /视野 ,两组间差异有显著性意义 (P <0 0 1)。②免疫组织化学检测发现缺血 再灌流组及Re治疗组Bcl 2、Bax、Bad和Fas基因蛋白的表达较假手术组明显增加 (P <0 0 5 ) ,Re治疗组Bcl 2的表达与缺血 再灌流组比较差异无显著性意义 (P >0 0 5 ) ,而Bax、Bad、Fas的表达明显下降 (P <0 0 5 ) ,人参皂甙Re治疗组Bcl 2 /Bad、Bcl 2 /Bad、Bcl 2 /Fas比值均较假手术组与缺血 再灌流组明显增大。结论　人参皂甙Re治疗可以抑制急性缺血再灌流诱导的心肌细胞凋亡 ,其作用机制可能是抑制了促凋亡基因Bax、Bad、Fas的表达 ,从而使Bcl 2 /Bax、Bcl 2 /Bad、Bcl 2 /Fas比值增大。     

人参皂甙Rb1与Re抗大鼠实验性缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因蛋白表达

目的　观察人参皂甙Rb1和Re对缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl 2、Bax、Bad、Fas基因蛋白表达的影响 ,探讨人参皂甙Rb1和Re抑制心肌细胞凋亡的可能机制。方法　结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支(LAD) ,建立大鼠缺血再灌注动物模型 ;采用透射电镜、缺口末端标记法检测心肌凋亡细胞 ,利用光学显微镜进行细胞计数 ;免疫组织化学检测Bcl 2、Bax、Bad、Fas基因蛋白表达 ,并利用图象分析系统测量平均光密度值进行定量分析。结果　①假手术组未发现心肌凋亡细胞 ;缺血再灌注组心肌凋亡细胞数为 13 4.45± 45 .61个 /视野 ,Rb1治疗组为 5 1.65± 13 .71个 /视野 ,Re治疗组为 90 .66± 19.2 2个 /视野 ,3组间有显著差异 (P <0 .0 1) ;②缺血再灌注组、Rb1治疗组及Re治疗组Bcl 2、Bax、Bad、Fas基因的表达均较假手术组明显增加 (P <0 .0 5 ) ,Rb1治疗组和Re治疗组Bcl 2的表达与缺血再灌注组比较无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,而Bax、Bad、Fas的表达明显下降 (P <0 .0 5 ) ,Rb1抑制Bax基因蛋白表达的效应较Re更为明显 (P <0 .0 5 )。Rb1治疗组和Re治疗组Bcl 2 /Bad、Bcl 2 /Bad以及Bcl 2 /Fas比值均较假手术组及缺血再灌注组明显增加 ,Rb1治疗组Bcl 2 /Bax比值较Re治疗组增大。结论　心肌缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡 ,人参     

母牛分枝杆菌菌苗对哮喘豚鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡及Fas蛋白表达的影响

目的 :研究母牛分枝杆菌菌苗对哮喘豚鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡及 Fas蛋白表达的影响。方法 :30只豚鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及母牛分枝杆菌菌苗组 ,用 TUNEL法检测肺组织嗜酸粒细胞凋亡 ,免疫组化法检测肺组织 Fas蛋白的表达。结果 :母牛分枝杆菌菌苗组豚鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡指数 (2 3.8± 5 .4 ) %显著高于哮喘组 (4.6±0 .7) % (P<0 .0 1) ;肺组织 Fas表达 (OD值 ) (0 .2 0 2± 0 .0 13)显著高于哮喘组 (0 .0 5 1± 0 .0 2 5 ) (P<0 .0 1)。结论 :母牛分枝杆菌菌苗通过上调 Fas蛋白在哮喘豚鼠肺组织的表达而诱导肺组织嗜酸粒细胞凋亡     

流式细胞术定量检测胃癌、癌旁组织中凋亡调控基因的表达

目的　研究胃癌、癌旁组织中线粒体膜蛋白 (Apo2 .7) ,Fas和细胞凋亡关键性调控基因Bcl 2蛋白及相互关系 ,进一步探讨胃癌发病可能的分子机制。方法　胃癌患者 45例 ,术中取胃癌组织 ,癌旁组织各 1块 ,用流式细胞仪定量检测Apo2 .7及Fas、Bcl 2基因蛋白的表达。结果　胃癌组织的Apo2 .7表达 (1 2 .89± 3 .57) %显著低于癌旁组织(1 9.2 8± 6 .1 6) % (P <0 0 1 ) ,而Bcl 2蛋白在胃癌组织中的表达 (1 5 .96± 5 .0 8) %显著高于癌旁组织 (1 0 46± 2 .94) %(P <0 0 0 1 ) ,Fas蛋白在两者中差异无显著性 (P >0 0 5) ;Apo2 .7表达与分化、浸润程度有关 (P <0 0 5) ,Fas表达与浸润程度、TNM分期有关 (P <0 0 5) ;Fas与Bcl 2、Fas与Apo2 .7表达之间均无显著相关性 (P >0 0 5) ,而Apo2 .7与Bcl 2表达之间存在显著相关性 (P <0 0 5)。结论　在胃癌的发生发展过程中 ,细胞凋亡调控异常起着重要作用 ;Fas、Bcl 2及Apo2 .7基因发挥了既独立又协同的作用     

热休克预处理对肠上皮细胞缺氧-再给氧损伤的保护作用及其机制

目的 :观察热休克预处理对肠上皮细胞 (IEC 6 )缺氧再给氧损伤的影响 ,并探讨热休克蛋白 70(HSP70 )的细胞保护作用。方法 :体外培养 IEC 6细胞 ,分为正常对照组、单纯缺氧再给氧组及热休克预处理组 ,观察缺氧再给氧后各组细胞 HSP70及 Bcl 2表达及细胞活力、乳酸脱氢酶 (L DH)漏出情况 ;用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果 :热休克预处理可诱导 HSP70产生 (P <0 .0 1) ,显著增加缺氧再给氧处理后IEC 6细胞活力 (P<0 .0 5 ) ,使 L DH漏出减少 (P<0 .0 5 ) ,凋亡相关基因 Bcl 2表达明显增加 (P<0 .0 1) ,细胞凋亡率明显降低 (P<0 .0 1)。结论 :热休克预处理可能通过诱导 HSP70表达来减轻肠上皮细胞缺氧再给氧损伤 ;增加细胞 Bcl 2基因表达并抑制肠上皮细胞缺氧再给氧后细胞凋亡可能是其保护作用机制之一。     

多囊卵巢综合征卵巢小卵泡上凋亡调控蛋白Bax、Bcl-2及Fas、FasL的表达

目的 :探讨凋亡调节蛋白Fas、FasL及Bax、Bcl 2在多囊卵巢综合征患者的卵泡选择、发育的作用。方法 :2 0例多囊卵巢综合征 (PCOS)患者及 8名正常人 12 0个小卵泡按直径分为 4组 ,采用免疫组织化学方法及灰度值的定量测定 ,用SPSS软件统计 ,定量分析凋亡调节蛋白Fas、FasL及Bax、Bcl 2在PCOS各级卵泡中的表达。结果 :PCOS组各级窦前卵泡组间Bax蛋白表达差异有显著性 ,随着卵泡直径的增加Bax表达明显增多 ,但直径 >12 0 μm的卵泡Bax表达减少。Bcl 2蛋白表达相对稳定 ;PCOS组直径在 60～ 12 0 μm的卵泡Bcl 2表达显著高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,而Fas、FasL在各级窦前卵泡中的表达中没有差异 ,但到窦卵泡期 ,Fas、FasL的表达减弱 ,但两组差异无显著性。结论 :正常人及PCOS卵巢组织各级窦前卵泡和窦卵泡均表达Bcl 2、bax及Fas表达 ,随着卵泡的增大 ,Bcl 2的表达增加 ,当卵泡直径 >12 0 μm时 ,细胞凋亡减弱 ,卵泡的增长加速。PCOS患者卵巢中各级窦前卵泡凋亡蛋白Bcl 2、bax及Fas、FasL的表达是正常的     

诊断超声照射后人早孕绒毛Fas/FasL蛋白表达的研究

目的 :检测诊断超声辐照与人早孕绒毛 Fas/ Fas L蛋白表达的关系。方法 :对拟进行人工流产的 2 4例早孕 (4 5～ 6 0 d)妇女随机分为 4组 :对照组为空白照射组、10 min组、2 0 min组和 30 min组。应用 Hp85 0 0彩色多普勒超声诊断仪 ,经腹对孕囊进行不同时间的持续照射 ,照射后 2 4h取材。用免疫组织化学技术检测上述各组绒毛滋养层细胞 Fas/ Fas L 蛋白表达情况。结果 :超声照射后 10 min组绒毛滋养层细胞 Fas/ Fas L蛋白表达率与对照组无差别 (P>0 .0 5 ) ;2 0 min组和 30 min组滋养层细胞表达率明显增加 ,显著大于对照组和 10 min组 (P<0 .0 0 1)。结论 :诊断超声持续照射早孕孕囊组织 >10 min可引起绒毛滋养层细胞 Fas/ Fas L 蛋白表达率增加 ,从而诱导滋养层细胞凋亡增加     

miR-497下调MFN2缓解异丙基肾上腺素诱导的心肌损伤

目的探讨microRNA-497(miR-497)对异丙基肾上腺素诱导的心肌损伤的作用及机制。方法 30只雄性C57BL/6小鼠随机分为三组:对照组(每日背部皮下注射与模型组同剂量的生理盐水,持续10 d),模型组[每日背部皮下注射5 mg/kg的异丙基肾上腺素(ISO),持续10 d]及激动剂组(在注射ISO的同时给予心肌内注射100μl 10nmol的miR-497-5p激动剂),每组各10只。检测三组小鼠心功能[心率(HR)、左室收缩内压(LVESP)、左室舒张内压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(±dp/dtmax)及心输出量(CO)]、心肌损伤[心肌肌钙蛋白T(c Tn-T)、心肌肌钙蛋白I(c Tn-I)、N-端脑利钠肽前体(NT-pro BNP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及肌红蛋白(Mb)]等指标及心肌中线粒体融合蛋白2(MFN2)、Caspase-3、Fas、Bcl-2及Bax等的表达。结果模型组中LVESP、±dp/dtmax及CO的水平显著低于对照组(P 0. 05),LVEDP、Tn T、Tn I、NT-pro BNP、CK-MB及Mb水平高于对照组(P 0. 05)。而激动剂组的HR、LVESP、±dp/dtmax及CO的水平显著高于模型组(P 0. 05),LVEDP、TnT、TnI、NT-proBNP、CK-MB及Mb水平低于模型组(P 0. 05)。模型组中MFN2、Caspase-3、Fas及Bax的mRNA和蛋白的表达显著高于对照组(P 0. 05),Bcl-2的表达低于对照组(P 0. 05)。而激动剂组中MFN2、Caspase-3、Fas及Bax的表达显著低于模型组(P0. 05),Bcl-2的表达高于模型组(P 0. 05)。结论 miR-497可改善异丙基肾上腺素诱导的小鼠心肌损伤,其机制与抑制MFN2表达并阻止心肌细胞凋亡有关。     

雌激素对脑缺血时Bcl-2蛋白表达影响及神经保护作用的研究

目的 :研究雌激素对缺血性脑损害的神经保护作用是否与 Bcl 2蛋白的表达有关。方法 :采用大鼠大脑中动脉闭塞制成局灶性脑缺血模型。在缺血 2小时、再灌注 2 2小时后立即断头取脑 ,应用 TTC染色和免疫组织化学方法 ,观察脑梗死体积及 Bcl 2蛋白的表达。结果 :(1)雌激素用药组较手术对照组脑梗死体积显著缩小 (P<0 .0 5 ) ;(2 ) Bcl 2蛋白的表达较手术对照组明显增强 (P<0 .0 5 )。结论 :雌激素上调大鼠脑缺血时Bcl 2的表达很可能是其具有神经保护作用的机制之一。     

牛磺酸对大鼠缺血心肌缺血再损伤的保护作用

目的：探讨大鼠心肌缺血损伤与凋亡蛋白Bcl—2和Bax的关系及牛磺酸的影响。方法：选择健康SD大鼠30只，随机分为假结扎组、结扎组和牛磺酸保护组，每组10只。结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型。检测3组心肌线粒体中超氧化物歧化酶(supevoxide dismutase，SOD)、Ca^2+-ATP酶活性和丙二醛含量，用免疫组化法检测心肌中的Bct-2和Bax蛋白。结果：结扎冠状动脉左前降支可致心肌线粒体丙二醛含量升高[假结扎组：(4．89&;#177;0．54)μmol／g；结扎组：(9．85&;#177;0．68)μmol／g]，SOD和Ca^2+-ATP酶活性下降[假结扎组：(8．63&;#177;0．35)μmol／(g&;#183;s)，(13．97&;#177;1．97)mmol／(g&;#183;s)；结扎组：(6．73&;#177;0．39)μmol／(g&;#183;s)，(8．54&;#177;2．28)mmol／(g&;#183;s)]。缺血心肌Bax蛋白表达呈显著升高(t=3．931，P&;lt;0．01)，牛磺酸能明显减少缺血心肌线粒体丙二醛的生成[牛磺酸保护组：(5．46&;#177;0．72)μmol／g]，降低心肌BAT蛋白的表达，增加Bcl—2蛋白的表达(t=3．716，P&;lt;0．01)。结论：结扎大鼠冠状动脉左前降支所致心肌缺血损伤与Bcl—2和Bax蛋白的表达有关，牛磺酸对缺血心肌Bcl—2和Bax蛋白的表达有较好的调控作用。     

葛根素对家兔心肌缺血-再灌注损伤的保护作用

目的:探讨葛根素抗心肌缺血-再灌注损伤的机制.方法:采用结扎冠状动脉左室支方法制备兔心肌缺血-再灌注损伤模型,用四道生理记录仪测定动物的血流动力学及左室功能变化.将40只家兔随机分组.10只作为空白对照组;10只作为假手术对照组;余20只制模,其中10只为模型组,另10只则在结扎左室支前20 min o40 min20 min(LPO)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性;实验完毕后取缺血-再灌注损伤区心肌组织0.5 g,分别测定组织匀浆中LPO含量、SOD活性及GSH-Px/LPO.结果:与模型组比较,葛根素保护组动物左室内压峰值(LVSP)、左室内压上升最大速率(LV dp/dt max)和左室内压下降最大速率(LV-dp/at max)均显著升高(P<0.05或P<0.01);血清中LPO含量明显降低(P<0.05),而GSH-Px/LPO升高非常明显(P<0.01);缺血一再灌注损伤区心肌组织中LPO含量显著降低,SOD活性和GSH-Px/LPO<0.05).结论:葛根素可通过提高对自由基的清除及拮抗脂质过氧化反应而起到保护缺血-再灌注损伤心肌的作用.     

依达拉奉对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的：观察依达拉奉对心肌缺血／再灌注后心肌细胞凋亡的影响。方法：选择30只健康SD大鼠，采用结扎冠状动脉左前降支后再通的方法复制心肌缺血再灌注的动物模型，随机分为假手术组（n=10）、缺血／再灌注（I／R）组（n=10）和药物（依达拉秦）组（n=10）。检测各组3h后心肌组织的超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量。并用免疫组化法测定局部凋亡相关因子Bcl-2、Fas的表达，比较各组间差异。结果：与假手术组比较，I／R组中反映氧化损伤程度的MDA明显升高（P〈0．01），抗氧化酶SOD则明显减少（P〈0．01），Fas含量升高（P〈0、01），Bcl-2含量明显减少（P〈0、01）；药物组较I／R组MDA含量明显减少（P〈0．01），SOD活性显著增加（P〈0．01），Fas含量明显降低（P〈0，05），Bcl-2含量明显增加（P〈0．01）。结论：依达拉奉具有抗心肌缺血再灌注损伤作用，其机制可能是通过调节Bcl-2和Fas介导的细胞凋亡而实现     

急性脑损伤后血儿茶酚胺与血糖浓度变化及其意义

测定４８例急性重型脑外伤患者伤后７天内血儿茶酚胺（ＣＡ）及伤后６小时内血糖含量，并与３５例正常人血ＣＡ含量值作对照。结果表明：外伤组血ＣＡ含量显著高于对照组；伤后７天内血去甲肾上腺素（ＮＥ）、肾上腺素（Ｅ）含量及其变化与格拉斯哥昏迷评分（ＧＣＳ）和预后均密切相关；入院时病情越重，ＧＣＳ评分越低，血ＮＥ、Ｅ含量越高；死亡组患者血ＮＥ、Ｅ含量明显高于存活组（Ｐ均＜０．０５），其与伤后２４小时内血ＮＥ、Ｅ含量分别显著正相关（ｒ＝０．５７４，Ｐ＜０．０５和ｒ＝０．４１０，Ｐ＜０．０５），而与ＧＣＳ和预后分别显著负相关（ｒ＝０．７８１，Ｐ＜０．０１和ｒ＝０．７０８，Ｐ＜０．０１）。     

肺表面活性物质在急性油酸性肺损伤时的变化

目的：探讨肺表面活性物质（ＰＳ）系统在急性油酸（ＯＡ）性肺损伤时变化的作用机制。方法：３６只新西兰白兔经麻醉、气管切开插管后给予机械通气。动物随机分成２组（每组１８只）,即油酸致急性肺损伤组（ＯＡ组）和生理盐水对照组（ＮＳ组）。观察１、２和４小时（各时间点动物均为６只）,监测静态胸肺总顺应性（ＴＲＣ）、肺功能残气量（ＦＲＣ）、动脉血氧分压（ＰａＯ２）和血清肺表面活性物质蛋白Ａ（ＳＰ－Ａ）浓度,测定     

中西药联合防治急性心肌梗死溶栓再灌注心律失常的临床研究

目的：探讨早期应用中药针剂葛根素和脉安定防治急性心肌梗死（AMI）再灌注心律失常的效果。方法：对102例AMI患者随机分为中西药治疗组和西药治疗对照组,每组51例。中药治疗组采用针剂葛根素和脉安定静滴,对照组用极化液静滴;溶栓和其它治疗2组相同,均采用常规方法。结果：中西药治疗组心律失常较对照组显著减少（P＜0．01）。综合评价中西药治疗组总有效率为96．1％,对照组为82．4％,2组有显著差异（P＜0．01）。结论：葛根素和脉安定对AMI再灌注心律失常有明显的防治效果。     

葛根素治疗急性心肌梗死的疗效观察

目的观察葛根素注射液治疗急性心肌梗死患者的临床疗效及对其血清高敏c反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-6（IL-6）水平的影响。方法48例急性心肌梗死患者随机分为两组,对照组用常规药物治疗,治疗组在常规治疗的基础上加用葛根素注射液。血清hs-CRP采用免疫比浊法测定,IL-6采用酶联免疫吸附测定法测定。结果治疗组疗效明显优于对照组（P〈0．05）。两组患者血清hs-CRP、IL-6浓度较治疗前均明显降低（P〈0．01）,治疗组下降更明显,组间有显著性差异（P〈0．05）。结论葛根素注射液可明显改善急性心肌梗死患者临床疗效,显著降低急性心肌梗死患者血清hs-CRP、IL-6水平,提示葛根素注射液对急性心肌梗死的治疗作用与减轻炎症反应有关。     

左旋四氢巴马汀在大鼠急性脑缺血再灌注时对Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的　观察左旋四氢巴马汀 (L tetrahydropalmatine ,L THP)在脑缺血再灌注时对凋亡相关基因Bcl 2、Bax蛋白表达的影响。方法　建立大鼠急性全脑缺血再灌注模型 ,采用免疫组织化学法、原位末端标记法 ,分别检测假手术组 (S组 )、缺血再灌注组 (Ⅰ组 )、L THP治疗组 (T组 )海马CA1区Bcl 2、Bax蛋白表达水平及凋亡细胞数。结果　 (1)脑缺血再灌注时 ,海马CA1区Bcl 2蛋白的表达显著增加 (P<0 0 1) ,但随时间的延长 ,增加幅度逐渐减小 ;而T组Bcl 2蛋白表达于相应的时间点则明显大于I组 (P<0 0 1)。 (2 )I组各时间点Bax蛋白表达均大于S组 (P <0 0 1) ,且随时间延长增加幅度逐渐增大 ;而T组Bax蛋白表达在相应时间点则下降 (P <0 0 1)。 (3)T组的神经细胞凋亡数与Bcl 2 /Bax蛋白阳性细胞数比值的关系为负相关 :r=- 0 94 173,P <0 0 0 1。 (4)神经细胞凋亡数随再灌注时间延长而增加 ,L THP可减少细胞凋亡数。结论　在脑缺血再灌注细胞凋亡过程中 ,L THP可通过上调Bcl 2蛋白表达 ,下调Bax蛋白表达 ,减少神经元凋亡 ,对脑缺血损伤起保护作用     

重组人红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的保护作用

目的 观察大鼠脊髓损伤(SCI)后损伤段脊髓神经细胞凋亡机制和相关因子的表达,以及重组人红细胞生成素(rHu-EPO)对其的影响。方法 30只SD大鼠分为4组,建立SCI模型,观察rHu EPO对大鼠神经功能的影响;免疫组化法检测损伤脊髓神经细胞凋亡因子(Bcl 2、Bax、Fas)的表达;TUNEL标记凋亡细胞;比较各组间差别。结果 治疗组的神经功能较损伤组提高(P<0.05);损伤组的凋亡阳性细胞多于治疗组;治疗组Bcl 2阳性表达细胞多于损伤组(P<0.05)。结论 凋亡是 SCI后神经细胞死亡的一种重要方式;rHu-EPO能抑制脊髓神经细胞凋亡,对损伤脊髓的神经功能有保护作用。