大鼠中等程度创伤性脑损伤后神经细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达与活性的时效关系

目的:观察大鼠中等程度创伤性颅脑损伤后神经细胞凋亡及凋亡执行因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达和活性的时间动态演变,并探讨三者之间的时效关系。方法:实验于2004-04/10在解放军第三军医大学创伤、烧伤、复合伤国家重点实验室完成。选择健康SD大鼠48只,随机分为假致伤组8只和损伤组40只,损伤组根据处死时间分为2,12,24,48,72h共5个时相点,每个时相点8只大鼠。损伤组制备中等程度创伤性脑损伤模型,假致伤组仅作颅骨钻孔而不致伤,术后24h处死。观察中度脑损伤后2h～3d伤侧大脑皮质、海马神经细胞凋亡情况采用原位末端标记技术;观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达和活性的变化采用免疫组织化学及免疫荧光技术。结果:48只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠中度脑损伤后不同时间点大脑皮质、海马神经细胞凋亡情况:创伤性脑损伤后2h在伤侧皮质和海马区即可见有少量凋亡细胞,并呈逐渐增多趋势,主要分布在伤侧皮质、皮质下白质、海马等区域,12～24h凋亡细胞增多,48～72h达到凋亡高峰,明显高于假致伤组。②各组大鼠中度脑损伤后不同时间点半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达:脑损伤后2h在损伤灶及其周围皮质即有少量的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞,脑损伤后24～48h阳性细胞数量明显增加。脑挫伤后72h半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞数有所下降。假致伤组脑组织偶见半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞。③各组大鼠中度脑损伤后不同时间点半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性变化:脑损伤后损伤灶及附近皮质神经细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性2h开始升高,伤后48h达高峰,损伤侧海马区域神经细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性2h开始升高,24h达高峰,而后开始下降。结论:大鼠创伤性脑损伤后损伤区周围皮质和损伤侧海马神经细胞凋亡数量的变化与伤后时程有关。伤后细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性增加可能是导致细胞凋亡的因素。     

丰富环境对缺血缺氧脑损伤新生大鼠海马脑源性神经营养因子表达及细胞凋亡的影响

目的:探讨丰富环境对缺血缺氧脑损伤(HIBD)新生大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)表达及细胞凋亡的影响。方法:采用随机数字表法将36只7日龄新生大鼠分为假手术组、模型组及丰富环境组,各组又分为术后7d、28d两个亚组(n=6)。采用Rice-Vannucci经典方法建立新生大鼠HIBD模型。模型组及假手术组不予任何干预,丰富环境组予以早期抚触及丰富环境刺激治疗。术后7d、28d采用水迷宫检测方法评估大鼠学习记忆能力,免疫组化法检测大鼠海马CA1区BDNF的表达,TUNEL法检测海马CA1区细胞凋亡。结果:术后7d、28d,与模型组比较,丰富环境组逃避潜伏期均缩短(P0.05),穿越平台次数增多(P0.05),BDNF表达升高(P0.05),TUNEL阳性细胞数降低(P0.05)。结论:丰富环境能改善HIBD新生大鼠学习记忆能力,其机制可能与上调海马区BDNF的表达及抑制细胞凋亡有关。     

MDL28170对缺氧缺血新生鼠大脑神经细胞凋亡的影响

目的:探讨卡配因抑制剂-3(MDL28170)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)神经细胞凋亡的影响。方法:建立新生SD大鼠HIBD模型,治疗组于缺养缺血后即刻、2 h、4 h腹腔内注射MDL28170,对照组及手术组同时予生理盐水。缺氧缺血后24 h用免疫组化方法观察大脑皮质及海马CA1区Caspase-3蛋白表达、TUNEL法检测细胞凋亡,观察组织病理改变并计算海马神经元死亡数,透射电镜观察细胞超微结构。结果:缺氧缺血后24 h缺血侧大脑皮质及海马CA1区Caspase-3和TUNEL阳性细胞数较对照组明显增加,透射电镜证实有凋亡细胞;MDL28170可减少阳性细胞数量,抑制神经元死亡,差异有显著性(P<0.05)。结论:MDL28170可通过抑制神经凋亡而对新生大鼠HIBD具有一定保护作用。     

经颅直流电刺激对脑外伤昏迷大鼠意识及脑源性生长因子表达的影响

目的:探讨经颅直流电刺激(tDCS)对脑外伤昏迷大鼠的促醒作用及其可能机制。方法:成年SD大鼠54只,随机分为3组,每组18只,分别是空白组、脑外伤(TBI)昏迷组及tDCS组。TBI和tDCS组制作脑外伤昏迷模型,前者进行假tDCS治疗,后者用tDCS治疗。各组处理后在6h、12h、24h点评定大鼠意识水平,对比治疗前后意识水平变化,处死大鼠,获取前额叶和海马,应用Western Blot法测定大鼠组织中脑源性生长因子(BDNF)的表达。结果:空白组18只、TBI组6只、tDCS组11只出现翻正反射,TBI组大鼠前额叶与海马BDNF表达较空白组升高,在12h点,tDCS组大鼠前额叶BDNF表达较TBI组升高,差异有显著性意义(P0.05),在6h点,tDCS组大鼠海马BDNF表达较TBI组升高,差异有显著性意义(P0.05)。结论:tDCS可促TBI昏迷大鼠觉醒,其机制可能与上调前额叶及海马BDNF表达有关。     

大鼠中等程度创伤性脑损伤后神经细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达与活性的时效关系

目的：观察大鼠中等程度创伤性颅脑损伤后神经细胞凋亡及凋亡执行因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达和活性的时间动态演变，并探讨三者之间的时效关系。方法：实验于2004-04／10在解放军第三军医大学创伤、烧伤、复合伤国家重点实验室完成。选择健康SD大鼠48只，随机分为假致伤组8只和损伤组40只，损伤组根据处死时间分为2，12，24，48，72h共5个时相点，每个时相点8只大鼠。损伤组制备中等程度创伤性脑损伤模型，假致伤组仅作颅骨钻孔而不致伤，术后24h处死。观察中度脑损伤后2h-3d伤侧大脑皮质、海马神经细胞凋亡情况采用原位末端标记技术；观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达和活性的变化采用免疫组织化学及免疫荧光技术。结果：48只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠中度脑损伤后不同时间点大脑皮质、海马神经细胞凋亡情况：创伤性脑损伤后2h在伤侧皮质和海马区即可见有少量凋亡细胞，并呈逐渐增多趋势，主要分布在伤侧皮质、皮质下白质、海马等区域，12-24h凋亡细胞增多，48-72h达到凋亡高峰，明显高于假致伤组。②各组大鼠中度脑损伤后不同时间点半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达：脑损伤后2h在损伤灶及其周围皮质即有少量的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞，脑损伤后24-48h阳性细胞数量明显增加。脑挫伤后72h半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞数有所下降。假致伤组脑组织偶见半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞。③各组大鼠中度脑损伤后不同时间点半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性变化：脑损伤后损伤灶及附近皮质神经细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性2h开始升高，伤后48h达高峰，损伤侧海马区域神经细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性2h开始升高，24h达高峰，而后开始下降。结论：大鼠创伤性脑损伤后损伤区周围皮质和损伤侧海马神经细胞凋亡数量的变化与伤后时程有关。伤后细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性增加可能是导致细胞凋亡的因素。     

高血糖对创伤性脑损伤后皮质SMAC和XIAP表达的影响

目的探讨大鼠创伤性脑损伤(TBI)后高血糖对皮质第二个线粒体衍生的半胱氨酸蛋白酶激动剂(SMAC)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响。方法将成年雄性SD大鼠随机分成正常对照组、TBI组、胰岛素治疗组,测定各组各时间点伤前伤后血糖,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定损伤周围SMAC和XIAP基因表达,免疫组织化学法测定各组伤后损伤皮质SMAC及XIAP蛋白表达量,末端标记原位细胞凋亡检测法(TUNEL法)测定各组伤后皮层凋亡细胞数。结果 TBI组伤后血糖升高,伤侧皮层XIAP表达减少,SMAC表达及凋亡细胞数明显增加;胰岛素治疗组伤后血糖变化不明显(P0.05),XIAP表达明显高于TBI组(P0.05),SMAC表达和细胞凋亡数明显少于TBI组(P0.05)。结论 TBI后高血糖可增加伤后脑细胞凋亡,其机制可能与其抑制TBI后XIAP的表达,增加SMAC的表达有关。     

小分子RNA干扰鞘氨醇激酶1表达对APP/PS1小鼠海马细胞凋亡的影响

目的:观察腺病毒介导的鞘氨醇激酶1(sphk1)低表达对AD小鼠海马细胞凋亡的影响。方法:构建siRNA-Sphk1腺病毒载体,立体定位法将携带siRNA-Sphk1的腺病毒载体(siRNA-Sphk1组)或等量生理盐水(saline组)注射至APP/PS1双转基因AD模型鼠海马齿状回;30 d后,荧光显微镜下观察各组小鼠海马绿色荧光蛋白的表达,westen blot法观察海马Sphk1及caspase-3蛋白的表达,Tunel法观察海马齿状回细胞凋亡的情况。结果:siRNA-Sphk1组海马齿状回可见绿色荧光的表达,saline组无绿色荧光表达;siRNA-Sphk1组海马Sphk1蛋白的表达较saline组下降(P<0.05),caspase-3蛋白较saline组的表达升高(P<0.05);siRNA-sphk1组小鼠海马组织的细胞凋亡率较saline组和阴性对照组升高(P<0.05)。结论:成功构建siRNA-sphk1的重组腺病毒,移植后,可抑制AD小鼠海马Sphk1蛋白的表达,促进海马齿状回细胞的凋亡。     

丰富环境对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马神经元凋亡及脑源性神经营养因子/酪氨酸蛋白激酶受体信号通路的影响

目的探讨丰富环境对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠海马神经元凋亡及脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体(TrkB)信号通路的影响。方法将48只7日龄Wistar大鼠幼仔,随机分成假手术组、模型组和丰富环境组,每组再分为14 d和28 d两个亚组,每个亚组8只。采用Rice方法制作缺氧缺血性脑损伤模型。模型组和假手术组不进行处理,丰富环境组在造模24 h后应用丰富环境进行刺激。造模后14 d和28 d,采用TUNEL法和双重免疫荧光染色法检测海马区神经元凋亡水平;采用免疫组化染色法检测海马区BDNF、TrkB蛋白表达情况。结果造模后14 d、28 d,与假手术组比较,模型组海马区TUNEL阳性细胞数、双标记阳性细胞数以及海马BDNF和TrkB阳性细胞数显著增加(t 27.214, P 0.001),丰富环境组TUNEL阳性细胞数、双标记阳性细胞数显著少于模型组(t 12.687, P 0.001),丰富环境组造模后28 d海马BDNF和TrkB阳性细胞数显著高于模型组(t 137.998, P 0.001)。结论丰富环境刺激可以降低缺血缺氧性脑损伤新生大鼠海马神经元凋亡,上调BDNF、TrkB蛋白表达。     

重组腺病毒r-caspase3的靶向性实验研究

目的:观察构建靶向性反向半胱氨酸蛋白酶3(r-caspase3)重组腺病毒对AFP表达阳性肝癌细胞凋亡诱导的效果和特异性.方法:采用AFP表达强阳性细胞HepG2、表达弱阳性细胞7721、正常肝细胞L-02以及AFP表达阴性乳腺癌细胞 MDA-MB-231,分别感染构建之重组腺病毒Ad-r-caspase3、Ad-E(AFP)P(ALB)/r-caspase3及Ad-P(ALB)/r-caspase3,SRB染色测定O.D值,计算细胞死亡率和IC50;流式细胞术检测细胞凋亡指数.结果:HepG2、7721细胞对各腺病毒敏感程度为Ad-E(AFP)P(ALB)/r-caspase3>Ad-PALB/r-caspase3>Ad-r-caspase3;流式细胞术检测结果显示重组腺病毒Ad-E(AFP)P(ALB)/r-caspase3具有极强的凋亡选择性,AFP表达越强,凋亡指数越高.结论:靶向性 Ad-E(AFP)-P(ALB)/r-caspase3重组腺病毒具有肝细胞性肝癌凋亡选择性,同AFP表达呈正相关.     

腺病毒介导的线粒体融合素基因-2诱导大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞凋亡

目的研究腺病毒介导的线粒体融合素基因2(mitofusin2gene,Mfn2)对大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)凋亡的影响。方法建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,用携带大鼠Mfn2基因(rMfn2)的重组腺病毒Adv rMfn2GFP和含有绿色荧光蛋白基因的对照腺病毒Adv GFP分别感染球囊损伤动脉段,以磷酸缓冲液(PBS)作为未感染对照组,假手术组作为正常对照组,采用免疫组织化学方法检测外源基因表达水平;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞;Image Pro图像分析系统进行血管定量组织形态学分析。结果病毒感染后5d,免疫组织化学证实Adv rMfn2GFP组Mfn2蛋白表达水平明显;TUNEL染色显示,Adv rMfn2GFP组的VSMCs凋亡率明显高于PBS组和Adv GFP组,假手术组未见TUNEL阳性VSMCs(n=10,P<0.01);感染后21d,Adv rMfn2GFP组的血管内膜面积及内膜中膜面积比明显低于对照组(n=10,P<0.01)。结论高表达Mfn2基因可诱导大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞凋亡。     

重型颅脑损伤术后顽固性脑蕈的临床分析

目的 探讨重型颅脑损伤术后顽固性脑蕈的形成原因及有效治疗措施。方法 对32例病人进行回顾性分析，总结其形成原因、有效治疗措施。结果 脑水肿、脑积水、颅内感染是重型颅脑损伤术后形成顽固性脑蕈的主要原因，有效运用脱水药物和各种措施降低颅内压、预防感染、保证创口I期愈合是治疗顽固性脑蕈的有效措施。结论 针对不同情况采取相应措施治疗重型颅脑损伤术后顽固性脑蕈，取得较好疗效。     

Rehabilitation after traumatic brain injury in adults

Purpose: Traumatic brain injury (TBI) stands as a major public health problem and one of the most important challenges for neurological rehabilitation. This review discusses advances that have occurred in the past 10 years in rehabilitation after severe TBI in adults.

Method: First, theoretical concepts, goals of rehabilitation and organization of resources are reviewed. Then specific questions that arise in the rehabilitation of severe TBI patients are considered.

Results: Three phases are distinguished in post-traumatic evolution. Acute rehabilitation takes place during coma and arousal states. Specific aims are to prevent orthopaedic and visceral complications, and to provide sensory stimulations with the hope of accelerating arousal. Secondly subacute (generally inpatient) rehabilitation is designed to facilitate and accelerate recovery of impairments, and to compensate for disabilities. Motility, cognition, behaviour, personality and affect should be simultaneously addressed in an holistic approach. Physical as well as psychological independence and self-awareness are the major goals to emphasize. A third, post-acute rehabilitation phase includes outpatient therapy for achieving physical, domestic and social independence, reduction of handicaps and re-entry into the community.

Conclusions: Problems with returning home, obtaining financial independence, driving, returning to work, participating in social relationships and leisure activities, and the importance of psychosocial adjustment and self-acceptance, are outlined. Questions about economic aspects and rehabilitation in the future are addressed.     

探究亚低温脑保护对创伤性颅脑损伤的治疗效果

目的探究亚低温脑保护对创伤性颅脑损伤的治疗效果。方法选取重庆市红十字会医院神经外科收治的创伤性颅脑损伤患者86例,分为两组,其中对照组37例,术后给予患者脱水剂、脑保护剂等常规治疗;试验组49例,在常规治疗的基础上加用亚低温脑保护治疗。比较治疗前后患者血压、水肿带等情况。结果治疗后两组患者的血压、水肿带均有所改善,与对照组相比,试验组的血压、水肿带改善明显,差异有统计学意义(P0.05)。结论亚低温脑保护能降低创伤性颅脑损伤患者的血压,减少患者水肿带,值得临床推广应用。     

脑立体定向技术永久性植入放射性粒子治疗脑胶质瘤

目的 报告14例脑胶质瘤在脑立体定向仪引导下永久性放射性植入粒子后的临床及影像学变化。探讨^125Ⅰ粒子对脑胶质瘤治疗作用及生物学特点。方法2002年10月～2004年10月，利用MICK200-TPV放射性粒子植入系统，对14例脑胶质瘤患者在脑立体定向仪引导下直接植入^125Ⅰ粒子，植入粒子5—14颗，每颗粒子活度0．3～0．4mCi，病灶周边剂量60～90Gy。6例植入粒子后补充外放疗35～40Gy。结果全组14例获得6～24个月的随访，中位12个月。治疗后1个月CT或MRI复查14例残余病灶缩小，与周围组织分界清楚；治疗后12个月CT或MRI显示11例粒子聚集，病灶明显缩小或消失；治疗后临床症状和体征均得到缓解，7例治疗后1-2个月临床症状和体征消失。结论 在脑立体定向仪引导下直接植入^125Ⅰ粒子治疗脑胶质瘤，能够对肿瘤及肿瘤周边可浸润范围提供较高的治疗剂量，达到控制和治愈肿瘤的目的。     

再发脑肿胀对颅脑损伤术后患者肢体功能恢复影响的临床分析

目的：观察颅脑损伤术后患者再发脑肿胀的发生率及其对患者功能恢复的影响，加强对脑肿胀的预防和治疗。方法：收集2000年1月-2005年1月在我科住院的颅脑损伤术后患者310例，根据患者临床症状，头颅CT（或MRI）检查及临床治疗情况，确诊再发脑肿胀患者16例，计算再发脑肿胀的发生率：选择同期住院的颅脑损伤术后末发生脑肿胀患者并排除其他影响因素的病例150例作为对照组。比较两组患者的平均住院日和平均住院费用：评估两组患者康复治疗前后的Fugl-Meyer评分和Barthel指数。结果：颅脑损伤术后患者再发脑肿胀发生率为5.2％；再发脑肿胀组的患者平均住院日和平均住院费用均较对照组明显增加，两者间差异有显著性意义（P〈0．01）；两组患者康复治疗前Fugl-Meyer评分和Barthel指数比较差异均无显著性意义（P〉0．05），出院时脑肿胀组Fugl-Meyer评分和Barthel指数均低于对照组，两者间差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：颅脑损伤术后患者再发脑肿胀会不同程度影响患者的功能恢复．应及时发现和治疗，减少其对功能恢复的影响。     

急性颅脑损伤并外伤性脑梗死18例临床分析

目的 探讨急性颅脑损伤后外伤性脑梗死发病原因、临床特点及治疗结果。方法 对18例急性颅脑损伤后外伤性脑梗死患者，根据梗死面积决定采取保守治疗或手术治疗。结果 出现脑梗死的病人根据梗死面积及颅内压情况决定采取保守治疗或手术治疗。按格拉斯哥预后评分（GOS）判断预后的标准，恢复良好3例，中残6例，重残4例，死亡5例。结论 急性颅脑损伤病人随时可能并发外伤性脑梗死，病死率较高，应该早期预防，早期发现及早期治疗以提高疗效。     

大鼠弥漫性脑损伤后脑组织内一氧化氮的时程变化

目的：探讨一氧化氮（nitric oxide,NO)在大鼠弥漫性脑损伤中所起的病理生理作用。方法：在Marmarou创建的大鼠弥漫性脑损伤模型基础上,取不同时点大鼠脑组织、匀浆后测量NO,观察外伤后NO的时程变化,结果：大鼠弥漫性脑损伤后,NO水平即刻升高（P＜0．01）,于外伤后12hNO水平有所下降,但仍高于正常对照组（P＜0．05）,24h,48hNO水平再次升高,与12h相比有明显差异（P＜0．05）,形成脑组织内NO表达的二次高峰。结论：外伤后即刻便有NO水平的升高。同大多数脑缺血模型研究相似,NO在弥漫性脑损伤动物脑组织中亦有中晚期（外伤后24h,48h）的升高,其产生的NO可能参与脑外伤后期的继发病理改变。外伤后不同时程的NO可能参与不同的病理生理过程。     

The use of aesthetic knowledge in the management of brain injury patients.

A patient's recovery from a brain injury (BI) is unpredictable and requires flexible nursing strategies for each stage of recovery. Empirical knowledge provides a framework for delivering nursing care based on scientific principles. Aesthetic knowledge, including intuition, provides a further opportunity to know and understand BI patients and their responses as they progress along the trajectory of recovery. Incorporating both empirical and aesthetic knowledge into the nursing plan of care for this population affords on opportunity for nurses to help patients and their families negotiate the course of recovery with greater success.     

脑胶质瘤与脑脓肿的CT鉴别

目的 探讨易混淆的脑胶质瘤与脑脓肿的CT表现及鉴别诊断。方法 分析20例脑胶质瘤(星形细胞瘤)和20例脑脓肿的CT表现。 结果 两者病灶均呈环状强化 ,胶质瘤的环状强化壁厚簿不匀 ,都在近脑中线侧较厚 ;可见壁结节 ,在环内侧及壁结节内有斑状及毛细血管纹状强化 ,这一征象具有特征 ;脑脓肿环状强化壁完整 ,厚簿均一 ,在环状强化边缘部位和相邻层面出现小结节性强化灶 ,这一征象有鉴别意义。 结论 只要掌握脑胶质瘤与脑脓肿两者的CT特征 ,诊断率高。     

脑干听觉诱发电位对重型颅脑损伤植物状态评估的价值

目的研究脑干听觉诱发电位 (BAEP)对重型颅脑损伤植物状态患者脑干功能的评估以及对预后判断的价值。方法对 30例重型颅脑损伤植物状态患者在综合康复治疗前及治疗 1个月后行BAEP检查及格拉斯哥昏迷量表 (GCS)评分。 6个月后进行随访 ,行格拉斯哥预后量表 (GOS)评分并复查BAEP。分析BAEP分级与GCS评分、GOS评分的关系以及清醒前后BAEP变化的特点。结果康复治疗前BAEP异常率为 93.3% ( 2 8/30例 ) ,康复治疗 1个月后BAEP异常率为 86 .7% ( 2 6 /30例 ) ,其中Ⅳ级减少 5例 ( 16 .7% ) ,而Ⅰ级增加 2例 ( 6 .7% )。BAEP分级越高 ,则预后越差。有 12例 ( 4 0 % )患者意识恢复 ,意识改善后BAEP的主要变化是Ⅴ波的出现 ,其次是各波分化的改善和潜伏期的缩短。结论BAEP检测可评估重型颅脑损伤植物状态患者脑干功能并为预后判断提供依据。Ⅴ波的出现提示脑干功能的恢复 ,是意识改善的脑电生理学指标