葛根素对去卵巢大鼠骨密度和骨代谢生化指标的影响

目的:研究葛根素对去卵巢大鼠骨密度和骨代谢生化指标的影响,探讨葛根素对雌激素缺乏引起的骨质疏松的治疗作用。方法:3月龄SD大鼠32只,随机分为单纯卵巢摘除组,假手术组,雌激素治疗组和葛根素治疗组,手术后7d,雌激素组给予苯甲酸雌二醇,200μg/kg皮下注射,每周两次;葛根素组给予葛根素注射液50mg/kgl皮下注射,1次/d;单纯卵巢摘除组与假手术组每日皮下注射与葛根素组和雌激素组同等体积的生理盐水,10周后测量大鼠骨密度、子宫系数、血尿中骨代谢生化指标。结果:与单纯卵巢摘除组相比,葛根素组大鼠骨密度(g/cm2)明显升高(0.112±0.002和0.106±0.004,t=-3.851,P<0.05),血碱性磷酸酶犤(1.26±0.14)和(2.14±0.63)mkat犦、尿钙/尿肌酐(0.209±0.069和0.237±0.050)、尿脱氧吡啶啉/尿肌酐下降(6.517±1.374和9.592±3.507),差异有显著性意义(t=3.858,-3.823,2.309,P均<0.05),血雌二醇升高犤(6.188±4.350)和(3.385±3.811)ng/L,t=3.858P<0.05犦;与雌二醇组相比,葛根素组子宫系数(g/kg)明显降低,差异有显著性意义(1.053±0.735和4.265±1.446,t=5.610,P<0.01)。结论:葛根素具有与雌激素类似的减少骨吸收,促骨形成,增加骨密度的作用,而在刺激子宫组织增生的副作用方面又远较雌激素为轻。     

脉冲电磁场对去势大鼠骨代谢的影响

目的：探讨脉冲电磁场对去势大鼠骨代谢的影响。方法：3月龄SD雌性大鼠50只(体质量200～230g)，随机分为正常对照组、去势对照组、脉冲电磁场组、雌激素组、脉冲电磁场+雌激素组(每组10只)。正常对照组做腹腔开关手术，其余4组做双侧卵巢切除手术。术后3个月双能X线骨密度仪证实骨质疏松模型造模成功，随后对正常对照组和去势对照组大鼠腹部皮下注射生理盐水0．2mL／kg,每2周1次；脉冲电磁场组大鼠选用强度为50Gs、频率为15Hz的脉冲电磁场行全身磁疗(以脊柱为中心)，2h／d，1次／d；雌激素组腹部皮下注射苯甲酸雌二醇0.5mg／kg，1次／2周；脉冲电磁场+雌激素组腹部皮下注射苯甲酸雌二醇0．5mg／kg，每2周1次，同时进行磁疗。各组均于治疗后12周及处死前3d行口饲四环素。于24周末在全麻下将全部大鼠处死，行骨密度、生物力学及组织学切片和骨形态学检查。结果：治疗前后，正常对照组及去势对照组大鼠L2-L4的骨密度无明显变化，而治疗后脉冲电磁场组、雌激素组和脉冲电磁场+雌激素组的BMD(g／cm^2)(分别为：0．142&;#177;0．069，0．145&;#177;0．004，0．144&;#177;0．007)较治疗前(分别为：0．097&;#177;0．010，0．094&;#177;0．010，0．094&;#177;0．010)显著增加(P&;lt;0．05)(t=-17．37，-24．38，-28．52)；治疗后同期各组骨密度比较，大小排序为：正常对照组&;gt;雌激素组&;gt;脉冲电磁场+雌激素组&;gt;脉冲电磁场组&;gt;去势对照组(P&;lt;0．05)；生物力学检测显示：上述各组的最大载荷(N)分别为280．75&;#177;36．3l，107．5l&;#177;24．69，231．44&;#177;37．76，201．32&;#177;30．99和234．54&;#177;16．29，其中各处理组要明显高于去势对照组，且脉冲电磁场组及脉冲电磁场+雌激素组又要高于雌激素组(F=45．4l，P&;lt;0．05)；相应地，各处理组的弹性模量亦高于去势对照组，但仍较正常对照组低(F=34．94)；形态学检查显示各处理组均可见明显的四环素双标记线，而正常对照组、去势对照组不明显；骨组织切片三维重建显示各处理组骨松质的空间结构明显优于去势对照组，但较正常对照组仍略差。结论：脉冲电磁场能对去势大鼠骨代谢产生明显的影响。     

雌激素对去卵巢大鼠血清瘦素的影响

目的：探讨雌激素对去卵巢大鼠血清瘦素水平的影响。方法：40只健康雌性未交配6个月龄SD大鼠用去卵巢手术制作动物模型，分为4组：假手术组、雌激素一组、雌激素二组、手术组；去卵巢手术后1周开始雌激素一组皮下注射雌激素20μg／(kg&;#183;d)，共12周，雌激素二组在处死前2d开始皮下注射雌激素40μg／(kg&;#183;d)。动物处死前测量体质量，并留取血清标本，进行血清瘦素水平分柝。结果：血清瘦素水平(μg／L)手术组(8．82&;#177;0.98)和雌激素二组(17．03&;#177;2．70)较假手术组(14.50&;#177;1．71)和雌激素一组(9．66&;#177;1．27)明显增高(t=9．014，811，P均&;lt;0．01)，雌激素二组较手术组明显升高(t=2．494，P&;lt;0.05)，假手术组和雌激素一组之间无明显差异(t=8.11，P&;gt;0.05)。体质量(g)手术组(317&;#177;22)和雌激素二组(369&;#177;77)，假手术组(374&;#177;33)和雌激素一组(309&;#177;31)差异无显著性意义t=0．795，0．439，P均&;gt;0.05)结论：雌激素可以促进去卵巢大鼠瘦素的分泌，卵巢切除术后大鼠血清瘦素水平较假手术组明显升高，可能是体质量增加的结果。     

硝酸镓对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用

目的：应用硝酸镓进行预防性处理。观察硝酸镓对去卵巢引起的大鼠骨质疏松的预防作用。方法：通过去除大鼠卵巢建立骨质疏松模型。将8月龄雌性SD大鼠(体质量220—270g)单纯随机分为对照组(14只)、去卵巢组(13只)、单纯预防组(13只)和去卵巢预防组(17只)。去卵巢组和去卵巢预防组切除双侧卵巢。对照组和单纯预防组行假手术。对照组和去卵巢组腹腔注射生理盐水1mL／kg；去卵巢预防组和单纯预防组腹腔注射硝酸镓2mL／kg,均为3次／周。12周后收集24h尿液,取血和双侧股骨。测定血、尿、骨镓含量及骨钙含量、骨密度、骨强度。结果：12周后，单纯预防组和去卵巢预防组骨镓含量(μg／g)显著高于对照组和去卵巢组(6．82&;#177;0．67，7．56&;#177;0．53,0．48&;#177;0．11,0．26&;#177;0．15；t=-29．72—22．64,P&;lt;0．01)；去卵巢预防组骨钙含量(17．5&;#177;4．0)mg／g、骨密度(0．55&;#177;0．06)g／cm^2、最大负荷(9．7&;#177;0．6)N、最大形变(1．64&;#177;0．16)mm均显著高于去卵巢组(t=-2．26，2．62，3．01，3．56，P&;lt;0．05)，与对照组无显著性差异。结论：硝酸镓对去卵巢引起的大鼠骨质疏松有一定程度的预防作用。     

低频脉冲电磁场与雌激素联合应用治疗绝经后骨质疏松症

目的 通过低脉冲电磁场与雌激素联合应用，探讨绝经后骨质疏松症的有效治疗方法。方法 选择45例绝经后骨质疏松患者随机分为雌激素治疗、联合治疗、低频脉冲电磁场治疗3组，治疗前后分别测定骨密度(BMD)、性激素。结果 联合治疗组BMD治疗后(0．741&;#177;0．095)g／cm^2与治疗前(0．698&;#177;0．087)g／cm^2比差异有非常显著性意义(t＝9．842，P＜0．01)；雌激素治疗组BMD为(0．690&;#177;0．108)g/cm^2，低频脉冲电磁场组BMD为(0．712&;#177;0．101)g/cm^2，与治疗前的(0．681&;#177;0．098)，(0．682&;#177;0．102)g／cm^2比差异有显著性意义(t＝-4．721和-6．274，P均＜0．05)。结论 联合应用雌激素和低频脉冲电磁场能延缓骨丢失，增加骨量，使骨密度上升。     

雌激素对去卵巢大鼠成骨细胞膜型基质金属蛋白酶-1基因表达的影响

目的：通过观察雌激素对去卵巢骨质疏松模型大鼠成骨细胞膜型基质金属蛋白酶(membrane-type matrix metaUoproteinase-1，MT1-MMP)基因的表达，探讨雌激素防治骨质疏松症的机制。方法：选用7个月龄雌性SD大鼠36只，对去卵巢大鼠、对照假手术大鼠与17β-雌二醇(E2)治疗组大鼠进行骨密度检测。股骨远端行原位杂交检测骨组织MT1-MMP mRNA表达，免疫组化检测骨组织MT1-MMP蛋白质表达。结果：与对照组[(L3=0．156&;#177;0．010)g／cm^2]相比，去卵巢大鼠骨密度[(L3=0．139&;#177;0．009)g／cm^2]减少，予E2治疗后骨密度[(L3=0．168&;#177;0．010)g／cm^2]增加(t=0．03～0．04，P&;lt;0．05)。与对照组相比，去卵巢大鼠成骨细胞MT1-MMP mRNA与蛋白质表达下调，而予E2治疗后成骨细胞MT1-MMP mRNA与蛋白质表达增加。结论：雌激素可促进成骨细胞MT1-MMP基因表达，此可能为雌激素防治骨质疏松症的重要机制之一。     

一氧化氮介导雌激素的骨形成增加作用

背景：雌激素的具体骨保护机制目前尚不清楚，一氧化氮可能在雌激素促进骨形成增加中起到一定的作用。目的：探讨雌激素治疗对卵巢切除大鼠血浆硝酸盐／亚硝酸盐水平的影响。设计：随机对照的试验。单位：上海市杨浦区中心医院骨科和同济医院大学附属协和医院骨科。材料：实验在同济医科大学动物实验中心完成，选用3个月龄清洁级健康雌性SD大鼠36只，体质量220～245g，由同济医科大学动物实验中心提供。干预：12只SD大鼠完整切除双侧卵巢，设为卵巢切除组；另12只暴露双侧卵巢而不予以切除，设为对照组；雌激素治疗组12只切除双侧卵巢后即刻及后每隔2周皮下注射苯甲酸雌二醇125μg。主要观察指标：通过免疫组织化学染色方法检测一氧化氮合成酶在骨组织中的表达，双能X射线测定骨矿密度值，图象分析系统进行骨形态学计量学测量，光密度法测定血浆硝酸盐／亚硝酸盐水平。结果：卵巢切除导致血浆硝酸盐／亚硝酸盐水平及骨矿密度值、小梁骨体积等骨形态学计量学参数显著下降。手术后6周，对照组和卵巢切除组平均血浆硝酸盐／亚硝酸盐水平分别为(22．4&;#177;1.7)，(16．2&;#177;3．7)μmol／L；骨矿密度值分别是(0．245&;#177;0．030)g／cm^2和(0．189&;#177;0．030)g／cm^2；小梁骨体积分别为(31．97&;#177;3．50)％和(17．14&;#177;4．20)％，两组之间差异均有显著性意义(P&;lt;0．01)。雌激素治疗抑制了卵巢切除导致的这些变化，雌激素治疗组平均血浆硝酸盐／亚硝酸盐水平为(21．9&;#177;3．5)μmol／L，骨矿密度值为(0．234&;#177;0．020)g／cm^2。，小梁骨体积为(26．53&;#177;1．63)％，与卵巢切除组比较，均有显著性升高(P&;lt;0．01)；与对照组比较，差异均无显著性意义(P&;gt;0．05)。一氧化氮合成酶免疫活性信号在成骨细胞内测得，雌激素治疗组一氧化氮合成酶信号较卵巢切除组也显著性增强(P&;lt;0．01)。结论：雌激素通过诱导一氧化氮的产生而刺激骨形成，一氧化氮是雌激素诱导骨形成增加的介导剂。     

葛根素体外影响小鼠胚胎长骨雌激素受体β表达的作用

目的：以体外培养小鼠胚胎长骨为靶器官，观察葛根素对骺板雌激素受体亚型雌激素受体β分布及含量的影响，并与内源雌激素比较，分析葛根素对骨可能的作用机制。方法：实验于2003-05／2004-05在中国人民武装警察部队医学院药物化学教研室药物活性筛选室进行。以小鼠胚胎长骨为靶器官，以雌二醇1&;#215;10^-6mol／L处理为阳性对照组，同时设空白对照组、葛根素干预组分为1&;#215;10^-6，1&;#215;10^-5，1&;#215;10^-4mol／L 3个浓度组。①小鼠怀孕16d时取出胚胎，剔除雌性胎鼠前肢肌肉和软组织，剥离出尺骨，做为实验靶器官置于BGJb培养基中，葛根素和雌二醇作用48h后，测量长骨总长和骨干长。每组培养长骨8根，重复3次。②长骨固定、脱钙后作石蜡切片，进行免疫组织化学染色，光镜下观察阳性细胞定位，图像分析系统下测定免疫反应阳性细胞数和阳性细胞面积。结果：雌性胎鼠长骨全部进入结果分析，无脱失。①长骨经葛根素和经雌二醇处理48h后，葛根素1&;#215;10^-4，1&;#215;10^-5mol／L组及阳性对照组骨总长及骨干长与空白对照组相比，差异有非常显著性意义[（3．97&;#177;0．12），（1．51&;#177;0．07）；（3．79&;#177;0．06），（1．40&;#177;0．03）；（4．05&;#177;0．1），（1．62&;#177;0．05）；（3．43&;#177;0．05，1．2&;#177;0．04）mm；P〈0．01]，葛根素10^-6mol／L组仅骨总长与空白对照组相比差异有显著性意义[（3．56&;#177;0．06）mm，P〈0．05]；葛根素1&;#215;10^-6mol／L的作用与阳性对照组差异无统计学意义（P〉0．05），1&;#215;10^-5，1&;#215;10^-6moL／L组作用弱于阳性对照组（P〈0．01）。②空白对照组骺板静止区和肥大区雌激素受体β蛋白几乎不表达，仅增殖区有较弱表达。经葛根素和1&;#215;10^-6mol／L雌二醇作用后，增殖区表达明显增强，肥大区和静止区软骨细胞也都出现雌激素受体β蛋白的阳性表达。葛根素1&;#215;10^-6，1&;#215;10^-5，1&;#215;10^-4mol／L组阳性细胞数和阳性细胞面积均小于阳性对照组[29．8&;#177;2．9，43．5&;#177;5．1，63．3&;#177;5．8．833&;#177;6．9，（819．78&;#177;164．53）．（1175．76&;#177;188．73），（1585．15&;#177;198．93），（2036．12&;#177;384．23）μm^2，P〈0．01～0．05]，作用明显弱于雌二醇，并表现出剂量依赖的趋势。结论：葛根素在体外可促进软骨内成骨。同雌激素一样，葛根素也能够上调骺板雌激素受体β的表达。提示葛根素对软骨内成骨的促进作用可能与其上调雌激素受体β在骺板的表达有关。     

槐甙胶囊防治绝经后骨质疏松症的疗效观察

目的：观察槐甙胶囊防治妇女绝经后骨质疏松疗效。方法：22例腰椎(L1，L2，L3，L4)骨密度低于一个标准差以下的绝经后患者入选，每日口服槐甙胶囊60mg，连续3个月。治疗前后检查腰椎和前臂骨密度；血清雌二醇、睾酮、尿促卵泡素(follicle stimulating hormone，FSH)、骨钙素、血浆Ⅰ型胶原羧基前体肽(procollagen type I C-terminal peptide，PICP)、尿脱氧吡啶酚(deoxypyridinoline，Dpyr)；观察治疗前后腰背静息痛和运动痛。结果：槐甙胶囊治疗前后绝经后患者腰椎骨密度差异有显著性意义：[(0．769&;#177;0．206)，(0．816&;#177;0．212)g／cm^2，t=-2．855，P=0．009；L3：(0．915&;#177;0．188)，(0．958&;#177;0．205)g／cm^2=-2．137，P=0．044；L2-4:(0．889&;#177;0．197)，(0．92&;#177;0．204)g／cm^2，t=-2．256，P=0．035]；睾酮[(0．283&;#177;0．131)，(0．236&;#177;0．133)ng／mL]和FSH[(52．988&;#177;23．113)mIU／mL，(44．225&;#177;18．144)mIU／m1]均有显著下降(t=2．9864，P=0．007；t=2．624，P=0．016)；骨吸收指标尿Dpyr显著下降(t=3．856，P=0．001)；治疗后患者的腰背静息痛和运动通有显著性意义(静息痛：t=9．566，P=0．001；运动痛：t=6．797，P=0．001)。结论：槐甙胶囊有改善绝经后患者腰椎骨密度和抑制骨吸收的作用，能明显减轻患者的腰背疼痛。     

大豆异黄酮对去卵巢大鼠骨矿物质含量及骨密度的影响

目的：探讨大豆异黄酮对去卵巢大鼠股骨的骨矿物质含量及骨密度的影响。方法：实验选用4月龄雌性wistar大鼠70只，按体质量随机分为7组，除对照组外，其他大鼠腹腔手术去除双侧卵巢，建立骨质疏松模型，分别给予不同剂量(高、中、低剂量)的大豆异黄酮，同时设立假手术组、去卵巢对照组和雌激素对照组。实验结束后，取大鼠股骨进行骨重量、骨矿物质含量及骨密度的测定，并作X线片。结果：各组大鼠的股骨长度和重量无显著性差异；去卵巢对照组大鼠股骨中钙和磷的含量[(143．60&;#177;8．80)，(87．94&;#177;7．46)mg／g]与正常对照组[(174．88&;#177;20．01)，(107．97&;#177;9．46)mg／g]相比显著降低(t=14．69，21．07，P&;lt;0．05)；大豆异黄酮剂量组和雌激素组骨钙、骨磷含量与对照组接近。X线片和骨密度测定发现大鼠去除卵巢后，股骨的骨量尤其是股骨干骺端的骨量明显丢失，骨密度显著下降，给予大豆异黄酮和雌激素后骨量丢失得到抑制，骨密度变化不大。结论：大豆异黄酮具有抑制骨量丢失、预防骨质疏松的作用。