复合人工皮肤修复猪全层皮肤缺损

探讨复合人工皮肤在修复中国小型猪全层皮肤缺损中的作用。方法：16头中国实验用小型猪于背部正中分别切除全层皮肤至深筋膜的3个创面，3个创面以数字表法分成复合皮移植组(实验组)，刃厚皮移植组(对照组1)及全厚皮移植组(对照组2)，术后定期留取创面组织进行组织学检测。结果：人工复合皮肤具有表皮，真皮双层结构，在愈合过程中表皮细胞逐步增殖、分化、发育形成基底层、棘细胞层、颗粒层和角质层。结论：表皮细胞悬液与脱细胞真皮基质重组的复合皮由于含有真皮与表皮双层结构，其组织学形态与超微结构与天然皮肤极为相似；通过表皮细胞培养可扩大皮源，为大面积深度烧伤患者提供了皮源。利用组织工程技术构建人工复合皮肤，可用于皮肤缺损者的治疗，解决了自体供皮不足上映     

皮肤组织工程学研究中的新技术和新方法

皮肤组织工程学是一门新兴学科,应用皮肤组织工程学技术产生的皮肤替代物主要有人工表皮、人工真皮和人工复合皮.人工表皮主要利用角朊细胞构建细胞膜片,但存在着比较脆弱、容易破溃的缺点;人工真皮由人工支架和成纤维细胞构成,虽具有一定的弹性和韧度,但抗感染能力较差;人工复合皮包括了表皮和真皮成分,结构上同天然皮肤近似,基本上具有了正常皮肤的功能,初步临床应用显示了极好的生物特性.新技术和新方法(尤其是干细胞技术和基因转染技术)的应用,将为皮肤组织工程技术注入新的活力和希望.     

人工皮肤替代物的材料种类及其特征

目的:评价组织工程人工皮肤替代物各种生物材料的性能和应用,寻找适合人体的替代物.方法:以"组织工程,人工皮肤,支架材料"为中文关键词,"tissue engineering,Artificial skin,intravascular stent"为英文关键词,采用计算机检索1993-01/2009-10相关文章.纳入与有关生物材料与人工皮肤修复相关的文章;排除重复研究或Meta分析类文章.以26篇文献为主重点进行了讨论组织工程人工皮肤替代物及其性能.结果:组织工程人工皮肤是应用组织工程技术将体外培养的上皮细胞和成纤维细胞扩增后,接种于具有良好生物相容性的材料上,经体外培养,形成含有与正常皮肤相似的表皮和真皮结构的皮肤替代物.然后将其移植于皮肤创面处,以实现创伤的修复和重建.将两种或两种以上的材料复合在一起,或对生物材料表面进行各种各样的修饰,促进细胞与材料之间的黏附、提高细胞的生物活性、维持生物功能成为目前组织工程生物材料研究的热点.结论:目前还没有一种人工材料能完全符合组织工程的要求.进一步提高支架材料的微观渗透性和生物活性,促进毛细血管的长入;制备结构仿生支架材料及高活性复合支架材料是今后的研究方向.     

猪复方壳多糖组织工程皮肤替代物的构建

目的：采用组织工程方法，在鼠尾胶原中加入壳多糖及培养的贵州小型香猪成纤维细胞与角质形成细胞，进行猪复合壳多糖组织工程皮肤替代物的构建。 方法：实验于2001-09／2002-12在解放军第三军医大学大坪医院完成。①实验所需皮肤标本取自3月龄雌性贵州小型香猪4只，取新鲜全层皮肤于D—Hanks平衡盐液浸泡，将标本剪成0．3cm&;#215;2．0cm皮条，4℃消化14-16h后备用。②消化后的标本分离表皮和真皮，分别用于角质形成细胞和成纤维细胞的分离培养。以传代培养的猪角质形成细胞和成纤维细胞作为种子细胞，以加入壳多糖、糖胺聚糖等天然细胞外基质的鼠尾胶原作为真皮基质，于钢丝网上进行气液界面培养，苏木精-伊红染色观察培养物的结构。 结果：①角质形成细胞的培养情况：接种的猪角质形成细胞于培养第2天可见细胞贴壁生长，形成细胞集落，15d左右融合成片，呈“铺路石样”。②真皮成纤维细胞的培养情况：消化法接种的猪成纤维细胞培养两三天后即见细胞贴壁生长，10d左右基本融合，呈旋涡状生长。③猪真皮基质浸没培养的变化情况：刚制备的真皮基质呈红色，倒置显微镜下凝胶各层面均可见尚未恢复形态的成纤维细胞。3d后随着凝胶的收缩，人工真皮逐渐与培养板壁和底分离，透光度下降，不易见到凝胶中的细胞。真皮基质的收缩发生于第3天，第6-12天真皮基质的直径最大收缩到45％左右，以后逐渐减慢。④猪的复合皮肤替代物的培养情况：培养第3天在真皮基质上加入传代后的猪角质形成细胞，其上可见薄的角质形成细胞层。浸没培养6d后角质形成细胞层色素逐渐加深。气液界面培养14d后的人工皮肤有一定的弹性、韧性以及抗拉力和抗挤压力。⑤复方壳多糖组织工程皮肤的光镜观察结果：镜下表皮可明显区分基底层、棘层和角化不全的角质层，共有7-12层细胞。真、表皮连接有起伏。真皮中可见较多的成纤维细胞，真皮支架结构紧密。 结论：成功构建具有真、表皮结构的双层猪组织工程皮肤替代物。与正常猪皮肤的形态结构相似，真皮结构致密，表皮分化良好，为组织工程皮肤的临床应用奠定实验基础。     

几种生物敷料在临床烧伤中的应用评价

目的:针对近年来几种生物敷料用于临床烧伤创面的应用进行评价.方法:以计算机检索方法在检索中国期刊全文数据库中(CNKI:1980/2008)检索关于人工皮肤临床研究与实验研究的随机对照实验,检索词为"人工皮肤,生物敷料".检索后对每项研究的资料结果进行提取、分析.结果:共有6项实验100例烧伤患者临床实验研究符合纳入标准,真皮替代物在皮肤重建过程中具有重要作用,可增加创面愈合后的皮肤弹性、柔软性及机械耐磨性,减少瘢痕增生,控制痉挛,而且有些真皮替代物中存在的活性成纤维细胞可促进表皮生长分化,诱导基底膜形成.结论:组织工程全层皮肤具有可操作性和易于使用的特点.整个操作为无痛非侵入式,患者可以耐受,可以更快的治愈供皮区创面,明显缩短平均愈合时间.组织工程全层皮肤与创面无排斥反应,也无任何不良反应.但由于纳入试验少.证据的强度不足,其他有效性指标和安全性,有待更多证据加以评价.     

组织工程皮肤的最新研究

构建一种理想的组织工程皮肤，无论是对急性烧(创)伤患者，还是伤后要求皮肤修复重建的患者都有重大作用。但是，迄今为止，尚无一种持久、合适耐用的皮肤代用品。目前从组织工程学的观点来看，人工皮肤主要有3类：①培养的表皮膜。②真皮替代物。③具有表皮、真皮双层结构的复合皮肤替代物。前两类都有一定的局限性。理想的皮肤替代物应同时修复表皮和真皮组织，因为这两种成分不仅影响皮肤的功能和外形，而且具有相互影响的机制，促进彼此的分化。文章就临床上使用的各种组织工程皮肤的特性、使用情况、作用机制和目前存在的问题及其未来的发展方向进行展望。     

猪复方壳多糖组织工程皮肤替代物的构建

目的:采用组织工程方法,在鼠尾胶原中加入壳多糖及培养的贵州小型香猪成纤维细胞与角质形成细胞,进行猪复合壳多糖组织工程皮肤替代物的构建。方法:实验于2001-09/2002-12在解放军第三军医大学大坪医院完成。①实验所需皮肤标本取自3月龄雌性贵州小型香猪4只,取新鲜全层皮肤于D-Hanks平衡盐液浸泡,将标本剪成0.3cm×2.0cm皮条,4℃消化14～16h后备用。②消化后的标本分离表皮和真皮,分别用于角质形成细胞和成纤维细胞的分离培养。以传代培养的猪角质形成细胞和成纤维细胞作为种子细胞,以加入壳多糖、糖胺聚糖等天然细胞外基质的鼠尾胶原作为真皮基质,于钢丝网上进行气液界面培养,苏木精-伊红染色观察培养物的结构。结果:①角质形成细胞的培养情况:接种的猪角质形成细胞于培养第2天可见细胞贴壁生长,形成细胞集落,15d左右融合成片,呈“铺路石样”。②真皮成纤维细胞的培养情况:消化法接种的猪成纤维细胞培养两三天后即见细胞贴壁生长,10d左右基本融合,呈旋涡状生长。③猪真皮基质浸没培养的变化情况:刚制备的真皮基质呈红色,倒置显微镜下凝胶各层面均可见尚未恢复形态的成纤维细胞。3d后随着凝胶的收缩,人工真皮逐渐与培养板壁和底分离,透光度下降,不易见到凝胶中的细胞。真皮基质的收缩发生于第3天,第6～12天真皮基质的直径最大收缩到45%左右,以后逐渐减慢。④猪的复合皮肤替代物的培养情况:培养第3天在真皮基质上加入传代后的猪角质形成细胞,其上可见薄的角质形成细胞层。浸没培养6d后角质形成细胞层色素逐渐加深。气液界面培养14d后的人工皮肤有一定的弹性、韧性以及抗拉力和抗挤压力。⑤复方壳多糖组织工程皮肤的光镜观察结果:镜下表皮可明显区分基底层、棘层和角化不全的角质层,共有7～12层细胞。真、表皮连接有起伏,真皮中可见较多的成纤维细胞,真皮支架结构紧密。结论:成功构建具有真、表皮结构的双层猪组织工程皮肤替代物,与正常猪皮肤的形态结构相似,真皮结构致密,表皮分化良好,为组织工程皮肤的临床应用奠定实验基础。     

人去表皮真皮细胞活性及组织结构特征(英文)

背景:研究证实,去表皮的真皮可以作为真皮替代物,在其上接种角质形成细胞后形成表皮结构.但有关真皮替代物细胞生物活性、组织结构特点及基底膜成分分析的研究报道较少.目的:观察人去表皮真皮细胞活性及组织结构特征.方法:将健康成人皮瓣用56℃PBS溶液处理以去除表皮,用液氮连续冻融处理去除真皮中细胞成分,获得去表皮真皮.以组织块培养法观察去表皮真皮细胞活性.以苏木精染色检测去表皮真皮细胞核,以波形蛋白免疫组化检测去表皮真皮成纤维细胞成分.以PAS染色及Ⅳ型胶原免疫组化检测基底膜及其成分.以VG染色检测去表皮真皮胶原纤维,Weigert染色检测弹力纤维,VG与Weigert双染色检测胶原纤维及弹力纤维,透射及扫描电镜观察去表皮真皮超微结构.结果与结论;用组织块培养方法培养的去表皮真皮2周无细胞生长.苏木精-伊红染色显示去表皮真皮中无细胞核、波形蛋白免疫组化显示去表皮真皮中无波形蛋白表达.VG染色显示去表皮真皮胶原纤维染成玫瑰红色,Weigert染色显示去表皮真皮弹力纤维染成紫黑色,双染色进一步显示胶原纤维与弹力纤维均匀排列.去表皮真皮表面及附属器残留部位PAS反应强阳性,Ⅳ型胶原表达明显.透射及扫描电镜下观察到去表皮真皮中胶原,弹力纤维交错排列,间有孔隙,相互交织成网.去表皮真皮无活细胞成分,真皮基质表面及附属器管腔壁仍保留糖原、Ⅳ型胶原等基底膜成分,真皮基质中富含胶原及弹力纤维,是一种类似在体真皮的三维胶原基质.     

混合型皮肤替代物的构建及移植试验

目的构建含自体表皮细胞和异种表皮细胞的混合型皮肤替代物,并用于移植封闭全层皮肤缺损创面。方法以无细胞真皮基质为载体,将Balb/c小鼠的表皮细胞(自体表皮细胞)和人表皮细胞(异种表皮细胞)按1:1比例混合后种植于无细胞真皮基质表面,经体外培养后形成含表皮细胞层的皮肤替代物,然后移植于Balb/c小鼠全层皮肤缺损创面,观察移植效果。结果皮肤替代物移植于小鼠全层皮肤缺损创面后,可封闭创面,新生皮肤基底膜结构较完整,抗层粘连蛋白、Ⅳ型胶原染色阳性。移植后人表皮细胞随时间延长,数量逐渐减少并最终被小鼠自体表皮细胞替代。结论含自体表皮细胞和异种表皮细胞的混合型皮肤替代物可封闭全层皮肤缺损创面,可望节省自体皮源,缩短体外培养时间。     

复合人工皮肤修复猪全层皮肤缺损

目的:探讨复合人工皮肤在修复中国小型猪全层皮肤缺损中的作用。方法:16头中国实验用小型猪于背部正中分别切除全层皮肤至深筋膜的3个创面,3个创面以数字表法分成复合皮移植组(实验组),刃厚皮移植组(对照组1)及全厚皮移植组(对照组2),术后定期留取创面组织进行组织学检测。结果:人工复合皮肤具有表皮,真皮双层结构,在愈合过程中表皮细胞逐步增殖、分化、发育形成基底层、棘细胞层、颗粒层和角质层。结论:表皮细胞悬液与脱细胞真皮基质重组的复合皮由于含有真皮与表皮双层结构,其组织学形态与超微结构与天然皮肤极为相似;通过表皮细胞培养可扩大皮源,为大面积深度烧伤患者提供了皮源。利用组织工程技术构建人工复合皮肤,可用于皮肤缺损者的治疗,解决了自体供皮不足。     

The characteristics of interpretation of results of analysis of protein amount in urine of pregnant women

The adequacy of implementation of present proteinuria diagnostic thresholds under examination of pregnant women was examined. The analysis was applied to all urine samples of pregnant women from December 2009 to March 20010. The amount of protein in urine was concurrently evaluated by turbidimetric analysis with sulfosalicylic acid, colorimetric analysis with pyrogallol red, "dry chemistry" technology (the diagnostic strips). It is established that the mentioned techniques of analysis of protein in urine provide independent results. The results of colorimetric analysis are characterized by better precision and adequacy. However, in case of pregnant women the diagnostic threshold of protein concentration should be shifted from 0.120 to 0.150 g/l.     

超声评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响

目的 探讨超声在评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响的价值。方法 回顾性收集经病理学证实为头颈部肿瘤、放疗前后的颈动脉超声资料以及其他基线资料完整的患者93例,比较放疗前后放疗侧颈动脉和非放疗侧颈动脉粥样硬化斑块和溃疡斑块的总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积。结果 放疗前后颈动脉超声检查的平均间隔时间为（6.1±1.9）年;放疗前放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积与非放疗侧比较差异均无统计学意义（P均>0.05）;放疗后放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积均较非放疗侧加重,差异有统计学意义（P均<0.05）。结论 放疗可导致头颈部肿瘤患者颈动脉粥样硬化斑块的形成和进展,且斑块具有易损性特点。     

《中国内镜杂志》主编雷光华教授简介

雷光华男,1970年12月生,骨科学博士,一级主任医师,二级教授,博士生/后导师。国家"万人计划"领军人才,教育部"长江学者"特聘教授,科技部"中青年科技创新领军人才",国家卫生计生突出贡献中青年专家,享受国务院政府特殊津贴专家,国家临床重点专科骨科和运动医学学科带头人,全国青年岗位能手,湖南省"芙蓉学者"特聘教授,湖南省科技领军人才和骨科学科领军人才,湖南省普通高校学科带头人,湖南省首届"优秀科技工作者",中南大学"湘雅名医"。     

超声诊断主动脉窦瘤

本文报告31例主动脉窦瘤患者,全部用二维超声(2DE)和多普勒超声检查。其中手术治疗24例,超声符合22例,符合率为92％。误诊2例,误诊率为8％。故超声实际诊断主动脉窦瘤29例中右冠窦瘤18例(62％),无冠窦瘤7例(24％),二叶瓣型主动脉窦瘤4例(14％)。窦瘤破入/膨入右室和右房内的例数分别为16例和13例。本病主要的合并症为主动脉瓣关闭不全和室缺。通过分析我们认为二维加多普勒超声是诊断主动脉窦瘤最有价值的无创技术。