ABO基因转录调控机制研究进展

ABO血型抗原不仅表达于红细胞表面,在多种组织的上皮细胞、内皮细胞中也有表达。在细胞发育、分化、成熟过程中ABO抗原表达状态发生一系列变化,在一些疾病,如血液系统疾病、恶性实体瘤的进程中,红细胞及组织中ABO抗原的表达水平也会发生改变。为弄清ABO抗原表达变化的调节机制,本文综述了ABO抗原表达相关的转录调控分子基础,包括ABO基因上游、下游和内含子中的转录调控元件及这些区域结合的转录因子的调控作用,以及与ABO基因转录相关的表观遗传调控机制,反义RNA的调控机制,为系统性的认识调控ABO基因转录的分子机制提供参考。     

ABO血型基因研究进展

自1900年人类红细胞ABO血型被发现后的105年中,已至少检测出29个血型系统、240种以上的血型抗原。ABO是临床上最为重要的血型系统,它的应用已从临床输血扩展至生物学、遗传学、法医学和人类学等许多方面。血型研究百年历史大致可分为3个阶段:从1900年到上一世纪1950年代,使用血     

ABO血型基因转录结构的研究及应用

目的 建立研究ABO血型系统基因转录结构的方法.方法 使用两套RNA逆转录-巢式PCR-序列测定的反应策略对中国人群6种常见ABO基因型的11个血液标本转录结构进行分析.应用所建立的方法对3例ABO血型正反定型不符的标本进行ABO基因转录结构的分析.结果 未能检测到O基因的转录结构;两套PCR策略均发现有2种转录结构,一种是完整的ABO基因编码区,另一种是缺失了整个第6外显子的ABO基因编码序列.一个变异的ABO等位基因在Bx表型个体被发现.结论 ABO基因转录结构的剪切方式是复杂的,不同剪切位点的ABO转录子被观察到.O等位基因的转录结构在RT-PCR分析未检测出来.O型基因转录结构这个特点的发现,可以应用于ABO基因单倍体序列测定中.     

ABO血型系统中Aw基因分子遗传背景的研究与分析

目的：研究一个含有Aw亚型中国汉族家系的ABO基因的遗传机制。方法：对1例血型血清学鉴定为Aw亚型的样本及有关家系，采用PCR-SSP扩增、DNA测序方法，以A101-致序列进行比对，对其ABO等位基因的第6外显子、第6内含子及第7外显子进行基因克隆和单倍体测序分析。结果：血清学为Aw型样本中ABO基因序列与ABO*A101相比有两个位点发生了突变(467C&;gt;T，543G&;gt;T)，文献中未见报道，为一个新的A等位基因，该样本的家系5人中，2人带有这个新变异的A等位基因。结论：543位突变倒致编码ABO糖基转移酶的156位氨基酸由脯氨酸(Pro)变为亮氨酸(Leu)，大大降低了酶活性；这个位点对转移酶的活性是至关重要的。     

ABO血型系统中Aw基因分子遗传背景的研究与分析

目的:研究一个含有Aw亚型中国汉族家系的ABO基因的遗传机制。方法:对1例血型血清学鉴定为Aw亚型的样本及有关家系,采用PCR-SSP扩增、DNA测序方法,以A101一致序列进行比对,对其ABO等位基因的第6外显子、第6内含子及第7外显子进行基因克隆和单倍体测序分析。结果:血清学为Aw型样本中ABO基因序列与ABO*A101相比有两个位点发生了突变467C>T,543G>T),文献中未见报道,为一个新的A等(位基因,该样本的家系5人中,2人带有这个新变异的A等位基因。结论:543位突变倒致编码ABO糖基转移酶的156位氨基酸由脯氨酸(Pro)变为亮氨酸Leu),大大降低了酶活性;这个位点对转移酶的活性(是至关重要的。     

ABO血型基因研究进展

<正>目前,ABO抗原基因结构与表达已经很明确,但近些年发现这些抗原基因及表达产物与疾病存在相关性,一些散在的基因变异以及遗传基因的分布特征也不断地被发现。研     

ABO血型不合同种异基因造血干细胞移植后血型转变1例

近年来 ,外周血造血干细胞越来越多的被用于白血病及癌症患者大剂量放化疗后造血功能和重建 ,由于 ABO血型系统由等位基因直接或间接产生的抗原组成 ,等位基因的变异形成可遗传 ,致使相应抗原数量增多或减少 ,如果移植成功 ,受者的红细胞血型就会逐渐转变为供者的血型 [1 ] 。笔者对 1例 ABO血型不合同种异基因造血干细胞移植术的患者进行了跟踪观察 ,根据其 ABO血型的变化为临床提供相应的治疗措施。材料与方法1　病例简介　患者 ,男 ,10岁 ,急性粒细胞白血病 ,术前用羟基脲和干扰素治疗 ,病情稳定。检查结果 :血型 A ,cc DE。WBC:13…     

ABO血型基因研究进展

自20世纪初，人类发现ABO血型以来，红细胞血型研究大致可以分为3个阶段：从1901年～1950年，使用血清学方法发现和检测各种血型抗原，阐明其遗传特点；1960年～1970年，研究血型抗原的生物化学本质；从1980年始，血型研究进入以分子生物学为基础的新时期，逐步集中于阐明血型抗原的成分、遗传多态性的分子基础、血型基因的     

ABO血型系统的基因分型

本文介绍了ＡＢＯ血型系统的分子基础及在此基础上对ＡＢＯ血型系统的基因分型的几种主要方法：ＰＣＲ－ＤＮＡ测序法、ＰＣＲ－限制性内切酶酶切法、ＰＣＲ－限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）、ＰＣＲ－序列特异性引物（ＳＳＰ）、ＰＣＲ－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）等。另外还介绍了基因分型技术在ＡＢＯ亚型研究中的应用。     

Blood Group ABO Genotyping in Paternity Testing

Background

The ABO blood groups result from DNA sequence variations, predominantly single nucleotide and insertion/deletion polymorphisms (SNPs and indels), in the ABO gene encoding a glycosyltransferase. The ABO blood groups A₁, A₂, B and O predominantly result from the wild type allele A1 and the major gene variants that are characterized by four diallelic markers (261G>del, 802G>A, 803G>C, 1061C>del). Here, we were interested to evaluate the impact of ABO genotyping compared to ABO phenotyping in paternity testing.

Methods

The major ABO alleles were determined by PCR amplification with sequence-specific primers (PCR-SSP) in a representative sample of 1,335 blood donors. The genotypes were compared to the ABO blood groups registered in the blood donor files. Then, the ABO phenotypes and genotypes were determined in 95 paternity trio cases that have been investigated by 12 short tandem repeat (STR) markers before. We compared statistical parameters (PL, paternity likelihood; PE, power of exclusion) of both blood grouping approaches.

Results

The prevalence of the major ABO alleles and genotypes corresponded to the expected occurrence of ABO blood groups in a Caucasian population. The low resolution genotyping of 4 diallelic markers revealed a correct genotype-phenotype correlation in 1,331 of 1,335 samples (99.7%). In 60 paternity trios with confirmed paternity of the alleged father based on STR analysis both PL and PE of the ABO genotype was significantly higher than of the ABO phenotype. In 12 of 35 exclusion cases (34.3%) the ABO genotype also excluded the alleged father, whereas the ABO phenotype excluded the alleged father only in 7 cases (20%).

Conclusion

In paternity testing ABO genotyping is superior to ABO phenotyping with regard to PL and PE, however, ABO genotyping is not sufficient for valid paternity testing. Due to the much lower mutation rate compared to STR markers, blood group SNPs in addition to anonymous SNPs could be considered for future kinship analysis and genetic identity testing.     

1000例精神分裂症患者ABO血型临床分布

为探讨血型与精神分裂症及血型之间的关系和分布情况,对符合精神分裂症诊断的1000例病人作常规血型测定,并与正常群体血型分布进行比较。结果,精神分裂症亚型与ABO的血型分布无明显关系(P>0.05),与正常群体血型分布频率也无明显差异(P>0.05)。提示,精神分裂症患者的疾病与ABO血型分布没有密切关系。     

微柱凝胶法检测ABO疑难血型的临床应用及方法学探讨

目的探讨微柱凝胶法（MGT）检测ABO疑难血型的敏感性及影响因素。方法应用（MGT）法检测38600例患者的ABO血型,同时用试管法进行复查对照,对正反定结果不一致的血标本,增加离心或37~C孵育时间去除血清中的纤维蛋白和冷凝集素,对血型抗原明显减弱或抗体效价降低者,采用增加定型血清或被检血清的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15—30min,然后采用（MGT）法检测。结果MGT法检测ABO血型抗原明显减弱或抗体效价降低者的敏感性高于试管法。MGT法检测ABO血型,对正反定结果不一致者35例,其中患者血浆含纤维蛋白9例、血清蛋白异常增高4例、高效价冷凝集素5例、血型抗原明显减弱8例、抗体效价降低9例。结论纤维蛋白、高效价冷凝集素、血型抗原减弱或抗体效价降低均可干扰ABO血型鉴定结果。增加离心或37℃孵育时间去除定型血清或患者血浆剂量血清中的纤维蛋白和冷凝集素,增加定型血清或患者血浆的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15—30分钟,然后采用MGT法检测,可提高ABO血型鉴定的准确性和输血安全。     

微柱凝胶法检测ABO疑难血型的临床应用

目的 探讨微柱凝胶法(MGT)检测ABO疑难血型的敏感性及影响因素.方法 应用(MGT)法检测38 600例患者的ABO血型,同时用试管法进行复查对照,对正反定结果不一致的血标本,增加离心或37℃孵育时间去除血清中的纤维蛋白和冷凝集素,对血型抗原明显减弱或抗体效价降低者,采用增加定型血清或被检血清的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15-30 min,然后采用(MGT)法检测.结果 MGT法检测ABO血型抗原明显减弱或抗体效价降低者的敏感性高于试管法.MGT法检测ABO血型,对正反定结果不一致者35例,其中患者血浆含纤维蛋白9例、血清蛋白异常增高4例、高效价冷凝集素5例、血型抗原明显减弱8例、抗体效价降低9例.结论 纤维蛋白、高效价冷凝集素、血型抗原减弱或抗体效价降低均可干扰ABO血型鉴定结果.增加离心或37℃孵育时间去除定型血清或患者血浆剂量血清中的纤维蛋白和冷凝集素,增加定型血清或患者血浆的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15-30分钟,然后采用MGT法检测,可提高ABO血型鉴定的准确性和输血安全.     

新生儿脐血ABO血型正反定型及交叉配血实验结果分析

目的探讨婴幼儿ABO正反定型的符合情况及交叉配血试验在婴幼儿输血时的局限性。方法选2010名新生儿的脐血标本,用微柱凝胶血型卡进行正定型,用试管法和纸片法做反定型,用微柱凝胶技术选择异型血与脐血进行交叉配血。结果正定型为A型700份标本中,499份检出抗B,但有39例反应弱,201例未检出抗B,抗B检出率为71.28%(499/700)。正定型为B型的510例标本中,373例检出抗A,但有23例反应弱,137例未检出抗A,抗A检出率为73.13%(373/510)。正定型为O型的800例标本中,只有571例同时检出了抗A和抗B,检出率为71.37%(571/800),131例未检出抗A、抗B,占16.38%(131/800),另有53例仅检出抗A,45例仅检出抗B。选用反定型完全没有凝集的新生儿A、B型的血清各40例分别进行相反血型交叉配血试验,即A(B)型血清 B(A)型红细胞,在这80例的配血结果中:盐水配血法全部阴性,聚凝胺配血法有2例弱阳性,微柱凝胶技术配血法发现有8例弱阳性。结论新生儿ABO血型鉴定中大部分已正反定型相符,在新生儿常规血型检查时反定型的价值不可忽视。微柱凝胶抗人球蛋白技术能有效地发现微弱的血型抗体,是一种较为敏感、安全的方法。     

vWF基因A1381T多态性和ABO血型对血浆vWF水平的影响

本研究旨在探讨VWF基因A1381T多态性和ABO血型对血浆VWF水平的影响。采用酶联免疫吸附法测定120名（男女各60例）19—33岁健康志愿者血浆vWF：Ag水平,采用PCR限制性酶切片段长度分析vWF基因A1381T单核苷酸多态性,测序验证。实验数据根据志愿者性别、血型或／和基因型进行分组,采用t检验、方差分析等统计学处理。结果表明：志愿者0血型与非0血型相比,血浆vWF水平明显降低（P〈0．001）;vWF基因A1381 T多态性AA基因型与AG、GG型相比,血浆vWF水平明显降低（P=0．003和0．019）;而在男性、女性之间血浆vWF水平没有统计学意义（t=1．039,P=0．301）;在O血型中,A1381T的AG基因型血浆vWF水平与AA、GG基因型有显著性差异（t=2．321,P=0．028）;而在非O血型中,A1381T的AG基因型血浆vWF水平与AA基因型有显著性差异（p=0．032）。结论：血浆vWF的表达水平随ABO血型和vWF基因多态性不同而有明显的不同。O血型和vWF基因A1381T多态性的AA型血浆vWF水平明显低于其他血型或基因型,这些结果对了解出血性及血栓性疾病易感性具有明确的参考意义。     

A Novel Variant B Allele of the ABO Blood Group Gene Associated with Lack of B Antigen Expression

SUMMARY: BACKGROUND: The gene locus for the ABO blood group system encodes a glycosyltransferase. Alterations in the DNA sequence are associated with the blood groups and the expression levels of antigens on red blood cells. A number of ABO alleles have been described as the molecular basis of weak A or B antigens. PATIENTS AND METHODS: Here, we describe a novel variant B allele in a blood donor with discrepant results in routine forward (group A) and reverse (very weak anti-B isoagglutinins) ABO blood grouping. RESULTS: Determination of the ABO genotype using polymerase chain reaction-sequence-specific primers (PCR-SSP) indicated blood group A(2)B. Sequencing of the ABO gene exons 6 and 7 showed for 1 allele a G insertion into the GGGGGG sequence at position 811-816 of exon 7. The 816insG mutation (designated ABO*Bw20) led to a frame shift of the coding sequence and subsequent alteration of the protein sequence. The location of the mutation on a B allele was proven by PCR-SSP. Screening for the novel mutation in 211 blood donors with regular ABO phenotypes indicated that *Bw20 is a rare variant. CONCLUSIONS: The low levels of anti-B isoagglutinins associated with this novel variant indicate that residual undetectable amounts of B antigen may be present on red blood cells. The serological and molecular analysis of members of the blood donor's family further proved the phenotype-genotype correlation of the *Bw20 allele with antigen O and individually variable levels of anti-B isoagglutinins. The characterization of novel alleles associated with ABO subgroups may ensure the correct determination of blood groups in which serological methods are combined with molecular genetic approaches.     

新生儿脐血AB0血型鉴定结果质量控制方法探讨

本研究探讨一种新生儿脐带血ABO血型鉴定的质量控制方法。采用血型血清学试验对脐血标本作ABO血型鉴定,对不能定出结果的疑难血型采用聚合酶链反应-序列特异性引物（Sequence Specific Primer PCR,PCR—SSP）作进一步确认。结果表明：在76120例脐血AB0血型正定型鉴定中,检出78例ABO血型弱抗原反应和难以判定血型结果的疑难标本（1％。）,经复查排除了弱凝集反应30例。检测260例脐血ABO血型反定型,相符血型148例（56．92％）,不相符血型112例（43．08％）。PCR—SSP基因分型检测58例中45例血清学表型结果与基因分型结果一致,3例表型结果与基因定型结果不相符,10例正反定型不相符标本,基因分型结果与正定型完全一致。结论：采用红细胞抗原（正定型）方法结合DNA基因分型技术检测新生儿脐带血抗原反应弱、抗体效价低的ABO血型质控效果好,是一种高效、灵敏的质量控制方法,适用于新生儿脐血AB0疑难血型的鉴定。     

PCR-SSP法检测Rh阴性无偿献血者Duffy血型的基因分型研究

目的调查Rh阴性无偿献血者Duffy血型的基因分型情况。方法用分子生物学技术(PCR-SSP)进行DNA水平的检测,并以Rh阳性无偿献血者作为对照。结果Rh阴性无偿献血者Duffy血型的基因频率为Fya=0.9252,Fyb=0.0747;而Rh阳性无偿献血者的基因频率为Fya=0.95,Fyb=0.05。无Fy(a-b-)个体。结论Rh阴性无偿献血者Duffy血型的基因分型结果显示和Rh阳性无偿献血者无明显差异。     

24万献血者ABO、Rh血型调查分析

采用血型血清学方法调查24万汉族无偿献血者ABO、Rh血型的分布特点。结果242952名献血者中,A、B、O、AB各型人数分别为74285(30.58%)、68079(28.03%)、76542(31.50%)、24046(9.90%);Rh(D)阴性809人,Rh(D)阴性者中各表型占比顺次为ccdee>Ccdee>CcdEe>CcdEe>CCdee>ccdEE>CCdEe>CCdEE、CcdEE。