1例人神经干细胞移植治疗新生儿重度缺氧缺血性脑病的术后护理

总结人神经干细胞移植治疗新生儿缺氧缺血性脑病的术后护理经验。1例出生75d 的重度缺氧缺血性脑病后遗症新生儿,智力、运动发育严重障碍,肌张力异常,核磁共振图像显示脑实质多发软化灶和萎缩。取孕11周人胚胎前脑细胞,经体外培养出人神经干细胞(neural stem cells,NSCs),并经患儿脑室穿刺注入。根据术后需持续48h 保持头低脚高体位及预防窒息发生等要求,制定护理目标及措施。移植28d 后,患儿肌张力显著改善,智力运动发育接近正常同龄水平。     

神经干细胞移植治疗研究进展

神经系统起源于胚胎神经管多能干细胞,而成人中枢神经系统内干细胞样前体细胞的发现为应用神经干细胞(NSCs)治疗各种神经系统疾病提供了前提条件.通过内源性NSCs增殖与迁移治疗各种神经元缺失疾病能力有限,而应用NSCs移植或有特定分化潜能的神经前体细胞移植治疗中枢神经系统损伤以及各种神经退行性疾病则可以促进患者神经功能恢复.目前,NSCs疗法所面临的主要问题是如何使NSCs定向分化替代特定功能的神经元,而NSCs疗法研究的热点是如何在分子水平调控NSCs的分化以及损伤区域NSCs的命运.     

人胚神经干细胞在大鼠脊髓内的分化研究

目的　人胚神经干细胞 (neuralstemcellsNSCs)经全反式维甲酸 (retinoicacid)预处理后移植入大鼠脊髓内 ,观察细胞的分化情况。方法　分离 10周左右流产人胚皮层组织中的神经干细胞 ,进行体外增殖 ,部分细胞在移植前 6d加入全反式维甲酸共培养。SD大鼠 3 0只 ,随机分为 2组 :实验组移植经维甲酸预处理后的NSCs ;对照组移植未经维甲酸预处理后的NSCs。移植后 5周取出脊髓 ,应用免疫组化技术检测Brd U标记的NSCs在大鼠脊髓内的生存和分化情况。结果　大鼠脊髓内可见大量Brd U阳性细胞 ,部分能够分裂增殖 ,向注射点远处迁移。实验组的NSCs能分化出NF、GFAP、Gal c阳性细胞 ;对照组的NSCs不能分化出NF阳性细胞。结论　人胚NSCs可在宿主脊髓内生存、分裂、迁移 ;经维甲酸预处理后的NSCs能分化成神经元和神经胶质细胞 ;人胚神经干细胞可作为 1种理想的移植材料 ,而具有重要临床应用价值     

间充质干细胞神经分化与移植研究进展

近一个世纪来神经移植的研究遇到了 2大障碍 ,一是成熟神经细胞不能再生的理论阻碍了神经再生的研究 ;二是神经细胞移植的组织来源 ,限制了实验及其应用。近年来干细胞研究的取得了重大进展 ,尤其是神经干细胞 (NSCs)及成体干细胞 ,使神经再生研究迅猛发展。NSCs是理想的神经移植材料 ,但因其部位深较 ,难以从活体采集、分离 ,而且使用胚胎或胎儿NSCs,也面临着伦理与法律的障碍。近来 ,越来越多的研究证实 ,哺乳类成年动物的骨髓间充质干细胞(MSCs)是多能干细胞 ,具有跨胚层分化的可塑性 ,在体内外能够分化为成骨细胞、成脂肪细胞、成…     

大鼠创伤性脑损伤后神经干细胞的增殖及移植后的修复作用

目的:基于神经干细胞的自我更新和多向分化的特点,探讨创伤性脑损伤(traumaticbraininjury,TBI)后神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)的增殖及其移植对脑损伤的修复作用。方法:实验于2004年在复旦大学附属华山医院神经外科动物实验室完成。采用Feeney氏法制备大鼠创伤性脑损伤模型,随机分为对照组、损伤组、PBS治疗组、NSCs移植治疗组,免疫组化检测大鼠损伤后海马NSCs的数量;用绿色荧光蛋白(GFP)标记的NSCs立体定向移植。神经损害严重程度评分和旋转爬杆试验对移植后大鼠的神经系统行为和运动功能进行评估,免疫组化染色观察NSCs的分化情况。结果:TBI后7d海马齿状回nestin阳性细胞明显增多,为(8.1±2.5)个,与正常动物组(2.5±1.3)个比较差异有非常显著性意义(F=40.91,P<0.01)。移植后部分GFP阳性细胞表达神经元特异性标记物β-tubilinIII,移植组大鼠神经系统行为学评分明显改善。结论:TBI后移植NSCs可以有效地促进损伤后大鼠神经行为功能的恢复,NSCs能够分化为神经元从而发挥对损伤后的大脑的修复作用。     

神经干细胞与NT-3基因修饰雪旺细胞联合移植促进全横断脊髓损伤大鼠功能修复的实验研究

目的：探讨神经干细胞(NSCs)与神经营养素-3(NT-3)基因修饰雪旺细胞(SCs)联合移植对全横断脊髓损伤大鼠的后肢运动及神经传导功能修复的作用。方法：将：NSCs与NT-3基因修饰SCs或未基因修饰SCs联合移植，或NSCs单独移植到大鼠全横断性脊髓损伤处，60d后进行爬网格测验和BBB评分检测运动功能。第67d，进行皮质运动诱发电位(CMEP)和皮质感觉诱发电位(CSEP）检测脊髓的神经传导功能。结果：脊髓损伤大鼠后肢的运动功能及CMEP和CSEP的修复程度依次为NSCs与NT-3基因修饰SCs联合移植组，NSCs与未基因修饰SCs联合移植组，NSCs单独移植组和实验对照组。结论：NSCs与NT-3基因修饰SCs联合移植能够促进脊髓损伤后大鼠的后肢运动及神经传导功能的修复。     

神经生长因子配合脐血源神经干细胞移植对脑瘫患儿运动功能的影响

本文运用脐血间质干细胞（UCB-MSCs）来源的NSCs治疗CP患儿，并使用神经生长因子（NGF）作为移植后处理因素，取得了良好的临床效果。总结如下。     

高压氧对大鼠脊髓损伤后移植神经干细胞增殖分化的影响

目的：探讨高压氧（HBO）对大鼠脊髓全横断损伤后移植的神经干细胞存活、增殖及分化的影响。方法：成年健康SD大鼠20只,随机分为神经干细胞移植组（NSCs组）和HBO联合神经干细胞移植组（HBO＋NSCs组）各10只。2组均采用脊髓全横断损伤模型,术后均给予NSCs移植治疗,HBO＋NSCs组在移植后辅以HBO治疗。治疗后检测移植在脊髓损伤处的神经干细胞存活、增殖及分化的情况。结果：术后第28d,HBO＋NSCs组移植的神经干细胞存活数量显著多于NSCs组（P〈0．05）。2组大鼠的脊髓损伤处及其相邻的组织均可观察到较多移植的神经干细胞分化为胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性染色细胞。HBO＋NSCs组中移植的神经干细胞分化为神经元特异性烯醇化酶（NSE）阳性染色细胞百分率显著高于NSCs组（P〈0．05）。结论：HBO能够促进大鼠脊髓损伤处移植的神经干细胞存活、增殖,并能促进这些细胞能分化为NSE阳性神经元。     

神经营养因子3联合神经干细胞移植治疗缺氧缺血性脑损伤的实验研究

目的观察神经营养因子3(NT-3)与神经干细胞(NSCs)联合移植对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠的治疗效果。方法 Wistar大鼠按随机数字表法分为正常组、单纯脑瘫组、神经干细胞移植组、NT-3联合NSCs移植组。取新生24 h的Wistnr大鼠脑皮质NSCs进行培养、鉴定。选出生7 d的Wistar大鼠制备HIBD动物模型。3 d后行损伤侧侧脑室移植。移植3周后进行神经电生理检测,后取脑组织进行HE染色。结果新生大鼠脑皮层可成功培养出NSCs,并表达NSCs的标志物神经巢蛋白(Nestin),NSCs可分化为神经元及星形胶质细胞。神经电生理:复合肌肉动作电位波幅脑瘫组3.844±1.217 mV,移植组5.218±1.976 mV,NT-3联合NSC组7.512±2.152 mV,差异有统计学意义(P<0.01)。潜伏期:脑瘫组5.729±0.755 ms,移植组5.197±0.709 ms,NT-3联合NSC组4.638±0.720 ms,差异有统计学意义(P<0.01)。HE:脑瘫组脑室旁正常组织结构破坏,可见多个不规则囊腔,神经干细胞移植组脑室旁正常组织结构有所恢复,囊变少见,NT-3移植组组织结构恢复更好。结论 NT-3联合神经干细胞移植是治疗脑瘫的有效办法。     

神经干细胞移植研究概况

神经干细胞 (neuralstemcells,NSCs)在神经系统损伤后具有巨大的再生潜能。NSCs可在多种哺乳动物的胎脑或成年动物和成人的脑组织中分离获得 ,也可从小鼠或人的胚胎干细胞中获得 ,甚至可由骨髓细胞等非神经系统细胞诱导产生。NSCs可在体外长期分化、增殖 ,并保持多向分化潜能。NSCs被移植入成年动物神经系统后 ,在神经损伤处可分化成神经细胞并恢复其功能 ,而在无神经细胞区域则分化成胶质细胞。目前NSCs移植已在临床研究治疗帕金森病、脑卒中和脊髓损伤的病例中获得成功。NSCs的研究进展 ,为治疗神经系统疾病 ,展示出光明的前景     

骨髓源神经干细胞重塑一氧化碳中毒大鼠脑白质

目的 探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchynal stem cells,BMSCs)来源的神经干样细胞(neural stem-iike cells derived from bone marrow mesenchymal stem cells,MS-NSCs)对急性重症一氧化碳中毒大鼠脑白质结构的影响.方法 40只200～250 g SD(sprague Dawley)大鼠随机分成正常对照组、中毒对照组、BMSCs治疗组、MS-NSCs治疗组(每组10只).先体外分离大鼠BMSCs进行MS-NSCs定向诱导分化,并作BrdU标记后经左颈内动脉移植入急性重度一氧化碳中毒复苏24 h的大鼠脑内,5周后病理学上评价脑白质结构的重塑.结果 5周后,细胞移植能够改善白质结构的有序性、致密性及脱髓鞘变化,同时在疏松白质内检测到BrdU阳性细胞,且在MS-NSCs移植组中此阳性细胞数更多(P＜0.05).结论 MS-NSCs能够重塑急性重症一氧化碳中毒大鼠的脑白质结构,而且可能是促进脑功能恢复的理想种子细胞.     

骨髓源神经干细胞移植改善一氧化碳中毒大鼠脑功能

目的 探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchynal stem cens,BMSCs)来源的神经干样细胞(neural stem-like cells,MS-NSCs)移植治疗对急性重症一氧化碳中毒大鼠脑功能的影响.方法 40只SD(Sprague Dawley)大鼠随机分成正常对照组(A)、中毒对照组(B)、BMSCs治疗组(C)、MS-NSCs治疗组(D).体外分离大鼠BMSCs,定向诱导为MS-NSCs,BrdU标记.建立中毒模型并复苏24 h后,将治疗细胞经左颈内动脉移植人中毒大鼠脑内,以神经功能严重度评分和Morris水迷宫试验评价脑功能的改善程度.结果 5周后神经功能严重度评分各组间差异无统计学意义,Morris水迷宫试验B组、C组、D组较A组差异具有统计学意义(P<0.01),C组、D组较B组差异具有统计学意义(P<0.05),D组较C组差异具有统计学意义(P<0.05).结论 MS-NSCs细胞移植能够促进认知记忆功能的恢复,且这种作用较BMSCs更明显,提示前者可能是更佳的种子细胞.     

自体干细胞原位移植治疗青中年缺血性脑卒中

背景：如能提高患者内源性干细胞水平,使之归巢到损伤部位,从而增强损伤后自我修复能力,这样既符合机体自身损伤的反应性修复机制,又可以避免异基因移植引起的免疫排斥反应。目的：通过观察粒细胞集落刺激因子动员自体干细胞原位移植治疗青中年急性缺血性脑卒中患者功能恢复及梗死面积变化,探讨原位移植治疗青中年缺血性脑卒中的安全性和有效性。方法：40例青中年大脑中动脉区急性缺血性脑卒中患者,随机分为原位移植组20例和对照组20例。原位移植组在发病7～10d内开始给予粒细胞集落刺激因子15μg/kg皮下注射连用5d,动员自体干细胞原位移植,其他治疗同对照组;对照组予以常规治疗。取发病10d内及发病3个月后CT片进行阿尔伯特CT评分（ASPCTS）及国立卫生研究院卒中评分（NIHSS）。结果与结论：治疗过程中患者未出现严重不良反应。随访3个月,原位移植组ASPCTS评分明显增加,NIHSS评分减小明显,与对照组比较差异有显著性意义（P〈0.05）。结果表明粒细胞集落刺激因子动员自体干细胞原位移植治疗青中年急性脑梗死安全可行,能显著减小脑梗死体积和促进神经功能恢复。     

早期开颅手术夹闭颅内前循环动脉瘤

目的探讨开颅手术夹闭颅内前循环动脉瘤破裂的方法和疗效。方法回顾分析2005年1月-2008年1月28例前循环动脉瘤破裂的早期外科手术治疗情况。分析其临床表现、手术入路和预后,用格拉斯哥术后评分量表对术后患者神经功能评分。结果 28例患者共30个动脉瘤,手术成功夹闭28个,包裹2个。术后3个月内,患者恢复良好15例（53.57%）,中度病残7例（25.00%）,重度病残5例（17.86%）,死亡1例（3.57%）。结论早期开颅手术夹闭动脉瘤能减少再出血率和术前死亡率,术后预后较好,是治疗前循环动脉瘤破裂较为理想的方法。     

多种来源造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血

背景：造血干细胞移植是年轻重型再生障碍性贫血患者首选方法,但在中国多数重型再生障碍性贫血患者无合适的供者,单倍体相合或非血缘造血干细胞移植国内外目前还处于探索阶段,联合间充质干细胞移植报道少见。目的：观察不同干细胞来源造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血的疗效。方法：10例（3～52岁）重型再生障碍性贫血患者,分别接受了亲缘HLA相合（2例）,单倍体相合（5例）,非血缘（3例）的外周血和/或骨髓造血干细胞移植,其中5例患者同时联合了间充质干细胞共移植。预处理方案主要为环磷酰胺、氟达拉滨和抗人胸腺球蛋白,以霉酚酸酯、环孢素A加短疗程的甲氨蝶呤预防移植物抗宿主病,单倍体相合移植的患者在此基础上加马利兰和CD25单克隆抗体;同基因的例5患者预处理方案为抗人胸腺球蛋白＋甲基泼尼龙。输注间充质干细胞的量为（0.27～1.85）×106/kg。接受和未接受间充质干细胞组的患者回输的造血干细胞有核细胞分别为（7.4～17.38）×108/kg和（6.09～13.68）×108/kg。结果与结论：除1例单倍体相合患者移植未成功,＋36d死于并发症外,余患者移植后染色体及DNA指纹检测等说明造血干细胞移植完全供者植入。移植后中性粒细胞达到0.5×109L-1,血小板计数≥20×109L-1中位时间分别为12d和13d;其中造血功能恢复快慢的趋势是同基因移植〉外周血或/和骨髓＋间充质干细胞移植〉单纯外周血或/和骨髓干细胞移植,而亲缘HLA全相合的52岁患者造血恢复最慢。非血缘移植例1、6患者发生了Ⅰ度急性移植物抗宿主病,单倍体相合移植的例2和例10患者发生了Ⅱ度急性移植物抗宿主病后出现了局限性的慢性移植物抗宿主病,余下患者移植后生活质量良好,无慢性移植物抗宿主病;除未接受间充质干细胞的例3患者移植后出现严重感染外,其余患者移植后再未出现严重的感染和出血。结果提示造血干细胞是安全,高效治疗重型再生障碍性贫血的方法,联合应用间充质造血干细胞者患者造血恢复快,移植并发症少。     

脂肪来源神经干细胞移植局灶性脑缺血模型大鼠的血管新生

背景：脂肪组织来源的神经干细胞移植可改善脑缺血大鼠神经功能,但其机制尚不明确。目的：观察人脂肪组织来源神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血后血管新生的影响。方法：体外培养脂肪基质细胞,诱导分化为神经干细胞。60只健康雄性SD大鼠分为4组：正常组6只,假手术组6只,缺血对照组24只,移植治疗组24只。后两组线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注模型,又分为缺血2h再灌注7,14,21,28d组,每个时点各6只。假手术组不闭塞大脑中动脉。造模成功后24h,移植治疗组经尾静脉移植人脂肪组织来源神经干细胞悬液,细胞浓度为2×109L-1;缺血对照组经尾静脉注射生理盐水。免疫组织化学法进行微血管密度计数,观察脑缺血区血管增生情况。结果与结论：免疫组织化学结果显示,与缺血对照组比较,移植治疗组缺血2h再灌注7,14,21,28d的微血管密度值均显著高于缺血对照组,差异有显著性意义（P〈0.05～0.01）。提示脂肪组织来源的神经干细胞移植可促进脑缺血区新生血管的形成。     

显微手术天幕缘切开治疗创伤性脑疝

目的探讨显微手术天幕缘切开,罂粟碱盐水冲洗在重型颅脑损伤颞叶钩回疝病人抢救中的应用。方法 2003 年2月-2005年5月对受治的32例幕上重型颅脑损伤合并颞叶钩回疝的病人,在开颅清除颅内血肿的基础上,在显微镜下行天幕缘切开,罂粟碱盐水冲洗。结果 GCS 3～5分20例,6～8分12例。27例患者得到随访。根据GCS预后评分,恢复良好17例,中度残废5例,重度残废2例,植物生存3例。结论显微镜下天幕缘切开可有效解除天幕对脑干,动眼神经,大脑后动脉等的机械压迫,减少颞叶牵拉和挫伤,防止Labbe氏静脉损伤;结合罂粟碱盐水冲洗易于清除环池中的蛛网膜下腔积血,缓解脑血管痉挛,降低病残率。     

颅内血肿穿刺碎吸清除术治疗急性重型脑出血的临床研究

目的:探讨应用颅内血肿穿刺碎吸清除术治疗急性重型脑出血在降低病死率,致残率、提高治愈率及患者生存质量方面的作用及安全性。方法:将1993年1月~2002年12月应用颅内血肿穿刺碎吸清除术治疗的急性重型脑出血32例作为治疗组,随机抽取同一时期我科锥颅抽取血肿治疗的急性重型脑出血33例作为对照组。观察两组患者的血肿清除(吸收)情况,治疗前后神经功能恢复情况及治疗的有效率、病死率、病残率。结果:治疗组血肿清除率、神经功能恢复情况、治疗的有效率、病死率、致残率与对照组比较均有显著差异(P<0.01)。结论:应用颅内血肿穿刺碎吸清除术治疗急性重型脑出血能有效地降低病死率、致残率,促进神经功能恢复,提高治愈率及患者的生存质量,治疗方法安全可靠。     

高血压脑出血术后继发脑梗塞7例临床分析

目的:探讨高血压脑出血(HICH)术后继发脑梗塞的原因和有效的预防措施.方法:回顾性分析2008年6月至2011年6月我科收治的HICH术后并发脑梗塞患者7例的临床资料.结果:6月后死亡和中残各2例,植物生存、重残及恢复良好各1例.结论:高血压脑出血继发脑梗塞由一种或多种因素相互作用所致,治疗措施不恰当可导致不良预后.     

Cerebral homeostasis disorder in patients with severe craniocerebral trauma during acute period

Liquor distension, disorders of the cerebral hemodynamics as well as vegetative disorders and changes of immune reactivity in patients after a severe craniocerebral trauma are discussed. The examination of patients during the initial 10 days after trauma pointed at the relation of a cerebral trauma type with liquor distension, cerebral perfusion pressure, changes of the vegetative balance and with disorders of the auto-immune status. The most profound changes were observed in a severe craniocerebral trauma involving a severe cerebral contusion and compression.