哮喘患者循环型M2受体自身抗体检测及其意义

目的检测哮喘急性发作患者M2受体的自身抗体,探讨M2受体自身抗体在哮喘发病中的作用。方法以细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原,应用酶联免疫吸附测定技术,检测75例受试者血清中M2受体的自身抗体;哮喘组为40例不同程度的急性发作患者,轻度12例、中度12例、重度16例;正常组为35例正常人作对照。结果①哮喘组M2受体的自身抗体阳性率和抗体滴度为47．5％、1：75,明显高于正常组的5．7％、1：20;②重度哮喘组M2受体的自身抗体阳性率和抗体滴度为75．0％、1：100,明显高于轻度哮喘组（25．0％、1：40）和中度哮喘组（33．3％、1;56）;③哮喘组M2受体自身抗体阳性组肺功能和临床症状与阴性组比较差异有统计学意义。结论M2受体的自身抗体不仅存在于哮喘患者的血清中,而且抗体滴度也明显高于正常组,提示M2受体自身抗体可能是哮喘发病机制的一个重要环节。     

抗M型磷脂酶A2受体抗体在特发性膜性肾病治疗中的临床意义

目的探讨抗M型磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体在特发性膜性肾病(IMN)治疗中的临床意义。方法纳入2013年4月至2014年6月间在南通大学附属医院住院并行肾活检的61例初治肾脏病患者,采用间接免疫荧光法检测血清抗PLA2R抗体的表达,并收集相关临床资料进行分析。结果 61例患者中,19例IMN患者血清抗PLA2R抗体阳性率为89.5%(17/19),42例非IMN患者血清抗PLA2R抗体阳性率为7.14%(3/42)。17例抗PLA2R抗体呈阳性的IMN患者的抗体滴度为1 000±680,高于抗PLA2R抗体阳性非IMN患者的抗体滴度(P0.05);就诊时IMN患者抗PLA2R抗体滴度与病程、尿蛋白量、血清白蛋白、血肌酐或内生肌酐清除率以及胆固醇水平无相关性(P0.05)。共14例IMN患者随访观察6个月,治疗早期抗PLA2R抗体降低幅度较尿蛋白更明显,同一时间点完全缓解者抗PLA2R抗体滴度阴性,治疗无效者抗体滴度最高;与高滴度组相比,低滴度组达到部分缓解的时间短[(1.16±0.41)个月vs(2.85±1.86)个月,P0.05];相同用药方案治疗1个月后发现抗PLA2R抗体滴度与疗效呈负相关。结论间接免疫荧光法检测血清抗PLA2R抗体在IMN中具有较高的阳性率。抗PLA2R抗体低滴度患者较早达到缓解,抗体持续高滴度提示可能需要更换治疗方案。抗PLA2R抗体对IMN的临床诊断、鉴别诊断以及判断IMN病情活动、制定治疗方案具有重要的临床意义和指导价值。     

心脏β1和M2受体自身抗体与心力衰竭相关性的研究

目的：检测不同心脏病所致的心力衰竭（CHF）患者心脏β1和M2受体的自身抗体,探讨心功能发生病理变化时,这两种自身抗体的产生与疾病发生、发展的相关性。方法：以细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原,应用酶联免疫吸附测定（ELISA）技术,随机检测265例受试者血清中心脏β1和M2受体的自身抗体。结果：CHF组β1受体自身抗体的阳性率为45.7%（86/188）,明显高于对照组的10.4%（8/77）（P〈0.01）;CHF组M2受体自身抗体的阳性率为49.5%（93/188）,明显高于对照组的11.7%（9/77）（P〈0.01）;心功能Ⅱ～Ⅲ级（NYHA心功能分级）的患者自身抗体的阳性率及抗体滴度明显高于Ⅳ级;CHF组β1受体自身抗体阳性血清中高达56.1%的患者同时具有M2受体的自身抗体。结论：心脏β1和M2受体自身抗体存在于多种心脏病所致心力衰竭患者的血清中,可能与心力衰竭时心肌结构变化和功能下降有关;β1和M2受体的双抗体阳性可能是自身免疫反应的多重性表现,提示免疫学机制参与心力衰竭和/或心肌重构的病理生理过程,参与的程度在疾病的早、中期大于晚期。     

心脏β1受体自身抗体的检测

目的 为拓展心脏病的临床监测手段,研究一种理想的特异性心脏β１受体自身抗体的检测方法。方法 以合成的人心脏β１受体细胞外第二环功能表位肽段为特异性抗原,建立了一种链霉亲合素－酶联免疫吸附测定技术,检测了１２２例３种心脏病患者和１００名健康人血清中抗β１受体的自身抗体。结果 阴性参考血清的批内变异系数（ＣＶ）和日间ＣＶ分别为０．０２４和０．０６３;阳性参考血清则分别为０．０５６和０．１１８。用标准抗     

心脏β2，α1及AT1受体自身抗体与原发性高血压的相关性

目的 研究受体与自身抗体在高血压发病中的作用机制，探讨抗G-蛋白偶联家族中β2，α1及AT1受体的自身抗体在原发性高血压病程进展中的分布情况。方法 应用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术，以细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原。检测50例高血压心脏病、40例单纯高血压和40例正常人血清中抗G-蛋白偶联家族中β2，α1和AT1受体的自身抗体。结果 高血压心脏病患者血清中抗G-蛋白偶联型β2，α1和AT1受体自身抗体的阳性率明显高于单纯高血压和正常对照组(χ^2=3．85—13．5，p&;lt;0．05)；高血压心脏病自身抗体阳性的平均几何抗体滴度与单纯性高血压比较无明显差异(t=1．41—1．88，P&;gt;0．05)。但两组阳性抗体的平均几何滴度均明显高于正常对照组(t=2．5l-6．61,P&;lt;0．05)；高血压心脏病抗β2受体自身抗体阳性患者，其中81％的患者同时具有α1受体的自身抗体；76％的患者同时具有AT1受体的自身抗体；52％的患者存在上述3种受体的自身抗体。结论 抗G-蛋白偶联型β2，α1及AT1受体的自身抗体参与原发性高血压的病理生理过程，可能与心肌和血管重构有关。通过检测抗0蛋白偶联家族中与心血管疾病相关的自身抗体，可能对预测高血压病程及心肌和血管病变程度有一定的参考价值，也可能为临床选择联合降压治疗提供参考依据.     

M型磷脂酶A2受体及其抗体在特发性膜性肾病诊治中的作用

M型磷脂酶A2受体(M Type phospholipase A2 receptor, PLA2R)作为特发性膜性肾病(Idiopathic membranous nephropathy, IMN)的一种特异度自身抗体已被广泛证实,为IMN发病机制的研究开辟了新的思路。大量的临床资料表明,PLA2R及其抗体在膜性肾病的发病过程中起重要作用,且与疾病的活动性、严重程度及预后相关,甚至可以预测疾病复发,指导治疗时机的选择。本文对PLA2R及其抗体在IMN诊断和治疗过程中的应用价值进行综述。     

心脏β1受体自身抗体的检测

目的　为拓展心脏病的临床监测手段,研究一种理想的特异性心脏β１ 受体自身抗体的检测方法。方法　以合成的人心脏β１ 受体细胞外第二环功能表位肽段为特异性抗原,建立了一种链霉亲合素酶联免疫吸附测定技术,检测了１２２ 例３ 种心脏病患者和１００ 名健康人血清中抗β１ 受体的自身抗体。结果　阴性参考血清的批内变异系数（ ＣＶ） 和日间ＣＶ 分别为０－０２４ 和０－０６３ ;阳性参考血清则分别为０－０５６ 和０－１１８ 。用标准抗原吸收后,吸光度Ａ 值降低了３ 倍。扩张型心肌病、高血压性心脏病、以及风湿性心脏病患者血清中,抗β１ 受体自身抗体的阳性率分别为４７ ％ （２５／５３） 、５２ ％ （１６／３１） 和４５ ％ （１７／３８） ,均明显高于健康人血清的阳性率８ ％ （８／１００） 。结论　该方法稳定性、特异性良好,为临床检测β１ 受体自身抗体提供了一种实际可用的、快速的检测方法。     

心脏β2,α1及AT1受体自身抗体与原发性高血压的相关性

目的研究受体与自身抗体在高血压发病中的作用机制,探讨抗 G 蛋白偶联家族中β 2,α 1及 AT1受体的自身抗体在原发性高血压病程进展中的分布情况.方法应用酶联免疫吸附测定 (ELISA) 技术,以细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原,检测 50例高血压心脏病、 40例单纯高血压和 40例正常人血清中抗 G 蛋白偶联家族中β 2、α 1和 AT1受体的自身抗体.结果高血压心脏病患者血清中抗 G 蛋白偶联型β 2、α 1和 AT1受体自身抗体的阳性率明显高于单纯高血压和正常对照组 (χ 2=3.85～ 13.5,P< 0.05); 高血压心脏病自身抗体阳性的平均几何抗体滴度与单纯性高血压比较无明显差异 (t=1.41～ 1.88,P >0.05),但两组阳性抗体的平均几何滴度均明显高于正常对照组 (t=2.51～ 6.61,P< 0.05); 高血压心脏病抗β 2受体自身抗体阳性患者,其中 81%的患者同时具有α 1受体的自身抗体; 76%的患者同时具有 AT1受体的自身抗体; 52%的患者存在上述 3种受体的自身抗体.结论抗 G 蛋白偶联型β 2,α 1和 AT1受体的自身抗体参与原发性高血压的病理生理过程,可能与心肌和血管重构有关.通过检测抗 G 蛋白偶联家族中与心血管疾病相关的自身抗体,可能对预测高血压病程及心肌和血管病变程度有一定的参考价值,也可能为临床选择联合降压治疗提供参考依据.     

血清M2-AAb、β1-ARAb水平与肥厚型心肌病患者左心功能的相关性研究

目的探讨肥厚型心肌病患者血清中M_2乙酰胆碱能受体自身抗体(M_2-AAb)、β_1肾上腺素能受体自身抗体(β_1-ARAb)水平与肥厚型心肌病患者左心功能的相关性。方法选取2017年1月至2019年3月于该院心血管内科住院接受治疗的126例肥厚型心肌病患者为肥厚型心肌病组,选取同期的107例体检健康者作为对照组。采用ELISA法检测肥厚型心肌病患者血清中M_2-AAb、β_1-ARAb水平;采用多普勒心脏超声检测左心功能各指标水平;分析肥厚型心肌病患者血清中M_2-AAb、β_1-ARAb水平的相关性;分析肥厚型心肌病患者血清中M_2-AAb、β_1-ARAb水平与左心功能指标的相关性。结果肥厚型心肌病组血清中M_2-AAb、β_1-ARAb水平明显高于对照组(P0.05);两组左心室射血分数(LVEF)比较,差异无统计学意义(P0.05)。肥厚型心肌病组左室舒张末期内径(LVD)、二尖瓣舒张早期血流速度峰值(E)/二尖瓣瓣环组织多普勒速度(E′)、左室舒张末期左心房容积(LAV)、左房容积指数(LAVI)明显高于对照组(P0.05),E/二尖瓣舒张晚期血流速度峰值(A)低于对照组(P0.05)。肥厚型心肌病患者血清中M_2-AAb、β_1-ARAb水平呈正相关;肥厚型心肌病患者血清中M_2-AAb、β_1-ARAb水平与LVD、E/E′、LAV、LAVI均呈正相关(P0.05),与E/A呈负相关(P0.05)。结论血清M_2-AAb、β_1-ARAb水平与肥厚型心肌病患者左心功能指标具有一定相关性。血清M_2-AAb、β_1-ARAb水平联合左心功能检测在肥厚型心肌病的早期诊断及病程评估中具有较高的应用价值。     

不明原因肝功能异常者的自身抗体和线粒体M2筛查

收集301例不明原因肝功能异常患者血清,分别进行自身抗体和线粒体M2检测分析。结果 301份不明原因肝功能异常患者血清中自身抗体的检出率为3.0%;线粒体M2的检出率为16.6%。不明原因肝功能异常者应进行自身免疫病的筛查。     

卡维地洛对兔心房肌细胞动作电位及离子通道的影响

目的实验研究卡维地洛影响兔心房肌细胞电生理的效果。方法兔心房肌单个细胞的制备采用酶解法,动作电位和离子通道电流的记录应用全细胞膜片钳技术。结果 1长期应用卡维地洛显著延长复极90%的动作电位时程(APD90),APD90从82±10 ms延长至116±14 ms;2卡维地洛对心房肌细胞L-型钙电流(ICa-L)没有影响;3卡维地洛可显著减小心房肌细胞的瞬时外向钾电流(Ito),Ito从13.87±1.26 pA/pF减小到8.62±0.91 pA/pF。结论卡维地洛可减小Ito并明显延长APD90,为β阻断剂的抗心律失常效应提供了证据。     

房颤中心房钾离子通道重构机制及相关药物的研究进展

心房颤动(简称房颤)是临床上最常见的持续性快速心律失常之一,可以引起心房内血栓、脑栓塞等严重并发症,是我国70岁以上老年人发病率较高、致死率较高的一种疾病。房颤的发生机制较为复杂,大量研究表明,心脏离子钾通道重构在房颤的发生和持续存在中发挥极其重要的作用。作用靶点位于钾离子通道的药物已应用于心房颤动,虽有一定的疗效但仍存在效果欠佳,并发症较多等缺点,现阶段关于心房钾离子通道重构及新型钾离子通道药物已经成为房颤研究中的热点之一。     

快速心房起搏对家兔心房肌L型钙离子通道的影响及氯沙坦干预的研究

目的 探讨以人工心脏起搏的方法制备家兔急性心房纤颤(atrial fibrillation,AF)模型时心房发生电重构的机制和干预方法.方法 家兔45只随机分为生理盐水(NS)组、生理盐水起搏(NSP)组、氯沙坦起搏(LP)组.观测每组基础状态、快速心房起搏时心房有效不应期(AERP)及心房肌L-型钙通道的电流密度(ICa-L),并进行统计学处理.结果 [1]快速起搏时NSP组较NS组各个基础周长下的AERP均显著下降(P＜0.01);NSP组快速起搏6小时和8小时与NS组AERP的差距随着基础周长的下降而减少.[2]而快速起搏8小时后LP组AERP的下降较NSP组显著减轻(P＜0.01);LP组快速起搏后与NS组AERP的差距随着基础周长的下降未见减少趋势.[3]NSP组较NS组心房肌ICa-L降低;LP组较NS组和NSP组心房肌ICa-L差异无统计学意义(P＞0.05);而LP组较NSP组心房肌ICa-L的标准差显著降低(P＜0.05).结论 快速心房起搏可引起AERP缩短及AERP频率适应性不良为特征的心房肌电重构.氯沙坦可以抑制这种电重构及心房肌ICa-L离散度增加,从而降低AF的发生.     

用重组丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位检测M2抗体及其临床意义

目的用重组表达的丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位(PDC-E2)检测M2抗体,以利于原发性胆汁性肝硬化(PBC)的早期诊断。方法采用重组表达的PDC-E2建立了免疫印迹法(IBT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)。检测40例PBC患者血清的M2抗体,以其他肝病患者、自身免疫病患者、健康体检者作对照。结果40例PBC患者血清中检测出抗PDC-E2抗体阳性37例,阴性3例,阳性率为92.5%,而疾病对照组和健康体检者血清中该抗体检测均为阴性。结论用重组表达的人PDC-E2检测抗体有较好的敏感性和特异性,有助于PBC的临床诊断。     

某些有机磷杀虫剂影响乙酰胆碱M2受体磷酸化的实验研究

目的研究有机磷类杀虫剂(OPs)对G蛋白结合受体激酶-2(GRK-2)介导的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体(mAChR2)磷酸化的影响,进一步揭示OPs可能存在的其他作用途径。方法将纯化的大鼠脑mAChR2,GRK-2,同位素磷32标记的三磷酸腺苷([γ-P32]ATP)与不同浓度的对氧磷(PO)、氧毒死蜱(CPO)和毒死蜱(CPF)共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳,凝胶片干燥后放射性自显影检测mAChR2磷酸化结果。将干燥凝胶片中放射性标记的磷酸化mAChR2蛋白带剪下,同位素液体闪烁计数器计数。结果CPO抑制大鼠脑mAChR2的磷酸化,其IC50为70?mol/L;CPF也抑制mAChR2的磷酸化,而PO与对硫磷(PT)不抑制mAChR2的磷酸化。CPO和CPF并不抑制同样由GRK2介导的β2肾上腺素受体(β2-AR)的磷酸化。结论CPO和CPF选择性地抑制GRK-2介导的mAChR2磷酸化,而PO和PT无此效应。说明某些有机磷类杀虫剂可能存在其它作用靶分子。     

钠离子通道1.8对急性心肌梗死后心房颤动发生的调控作用

目的 探讨阻断心脏神经节丛（ganglionated plexi, GP）的电压门控钠离子通道1.8(NaV1.8)对急性心肌梗死后心房颤动发生的影响。方法 将12只雄性比格犬随机分为A-803467组（NaV1.8阻断剂, n=6）及对照组（DMSO,n=6）。构建急性心肌梗死模型后，A-803467组于4个主要GP表面多点注射A-803467(1μmol/0.5 mL)，对照组注射DMSO(1μmol/0.5 mL)。记录用药前及用药后30 min、60 min及90 min，两组犬的窦性心率、心房有效不应期、心房易损窗口及心房颤动持续时长的变化情况；记录用药后10 min高频电刺激（20 Hz, 0.1 ms,方波）右前GP引起的窦性心率变化情况。结果 与对照组相比，A-803467可提高窦性心率，显著缩短心房有效不应期，增宽心房易损窗口，延长心房颤动时长。此外，A-803467可抑制高频电刺激右前GP导致的窦性心率减慢。结论 阻断GP的NaV1.8可提高急性心肌梗死后心房颤动的诱发性。NaV1.8可调控急性心肌梗死后心房颤动的发生，其作用机制可能与调控心脏GP的功能有关。     

卡配因参与风心病房颤患者心房纤维化过程

目的检测Calpain I、Calpain II、caspase-12在风湿性心脏病心房颤动患者心房组织中的表达,探讨其在心房纤维化发展中的作用及其对房颤发生、维持的作用。为临床慢性房颤患者心房纤维化及心房结构重构的防治提供新的靶点。方法取32例风湿性心脏病行外科换瓣手术患者左心房组织,分为A组：永久性房颤组（Permanent AF组）16例,B组：阵发性或持续性房颤组（Paroxysmal or persistent AF组）10例,C组：窦性心律组（Sinus rhythm组）6例。采用免疫组化法测Calpain I、Calpain II、caspase-12在左心房组织中的表达并计算其灰度值,心肌胶原染色采用VG染色,光镜下观察组织纤维化程度,并计算胶原容积积分（CVF）。结果风湿性心脏病心房颤动患者calpain I、calpain II、caspase-12在左心房组织表达明显增多（P〈0.05）,calpain I、calpain II与CVF呈正相关。结论 calpain I、calpain II通过促进心肌细胞凋亡促进了风湿性心脏病心房颤动心房纤维化过程。     

炎性细胞因子及氧化应激对心房纤颤的影响

目的:探讨炎性细胞因子及氧化应激对房颤发生的影响。方法:入选125例孤立性房颤患者与60例对照者。采用酶联免疫吸附测定血清白细胞介素(IL-6,IL-8,IL-10)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白(MCP-1),用气相色谱与质量光谱学法检测尿液异前列腺素(F2-IsoPs)。结果:与对照组比较,房颤患者血清IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、MCP-1浓度均增高(均P<0.05),而尿F2-IsoPs无明显统计学意义(P=0.602)。在阵发性、持续性和永久性三种房颤中,血清TNF-α、IL-10浓度逐级增加(均P<0.05)。结论:炎症与心房纤颤的发生密切相关。     

Predictive role of CHADS2 and CHA2DS2-VASc scores on stroke and thromboembolism in patients without atrial fibrillation: a meta-analysis

Objective: CHA₂DS₂-VASc is the extension of the CHADS₂ score developed by Birmingham 2009. This risk stratification schema is often used in clinical setting when considering additional risk factors for developing stroke in AF patients. However, its role in the non-AF population is unknown. This study was designed to evaluate the accuracy of the CHADS₂ and the CHA₂DS₂-VASc scoring systems.

Methods: Studies designed for CHADS₂ and CHA₂DS₂-VASc score in stratifying the risks for stroke development in non-AF patients were included.

Results: Among the 114 studies identified, six trials were chosen finally and included for meta-analysis. The pooled diagnostic odds ratio (DOR) for CHADS₂ and CHA₂DS₂-VASc was 2.86 (95% CI =1.83–4.28) and 2.80 (95% CI =1.83–4.28), respectively. CHA₂DS₂-VASc score was of better sensitivity than CHADS₂ score (0.920 vs. 0.768). However, both scores were showed to have inherent heterogeneity and poor specificity.

Conclusions: Though having good diagnostic accuracy, the clinical application of the CHADS₂ and CHA₂DS₂-VASc scores in predicting risk of stroke development in non-AF patients still needs further validation.

• Key message

• The overall diagnostic accuracy of CHADS₂ and CHA₂DS₂-VASc in stroke-risk stratification was good in patients with non-atrial fibrillation.

     

慢性房颤犬心房肌肾素血管紧张素系统激活的影响及卡托普利的干预作用

目的探讨慢性房颤实验犬心房肌肾素血管紧张素系统(RAS)的影响及卡托普利的干预作用。方法健康杂种犬26只,随机分为三组：对照组(n=6),起搏组(n=11),治疗组(n=9)。起搏组和治疗组安置埋藏式高频率心脏起搏器(400次/min),快速起搏犬右心耳8周,治疗组于起搏前3 d至起搏后第8周每日口服卡托普利50 mg,每天两次。起搏8周后,两组分别处死动物,于左右心房、心耳及房间隔取材,测定心房组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量及心房肌细胞内Ca~(2 )浓度。对照组未安置起搏器,与起搏、治疗组同步行相应检查。结果起搏8周后,起搏组、治疗组和对照组测得心房组织AngⅡ含量分别为(29．83±5．73)pg/ml,(13．23±3．15)pg/ml,(11．38±2．14)pg/ml。与对照组比较,起搏组AngⅡ含量明显增高(P＜0．01),而治疗组与对照组比较,差异无显著性(P＞0．05)。三组测得心房肌细胞内Ca~(2 )浓度分别为(35．32±4．88)μg/mg,(25．44±4．19)μg/mg,(24．06±3．51)μg/mg。与对照组比较,起搏组明显升高(P＜0．01),而治疗组没有(P＞0．05)。结论长期快速起搏实验犬心房组织AngⅡ含量增高、心房肌细胞内钙超载。卡托普利可阻滞慢性房颤实验犬心房组织RAS激活,阻止细胞内钙超载,从而消除房颤形成的基质。