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1.
VEGF对SCI细胞凋亡的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨血管内皮生长因子对脊髓损伤细胞凋亡的影响及保护机制。方法采用Allen的Weight drop-ping(WD)法挫伤大鼠T10节段脊髓,于术后2 h4、h8、h、1 d3、d、7 d经蛛网膜下隙导管各注入VEGF溶液(5μl/100 g),并与生理盐水组和正常对照组作对照。采用原位末端标记法(TUNEL法)标记脱氧核糖核酸(DNA)片段,检测脊髓损伤前后发生凋亡的脊髓细胞。结果正常组大鼠脊髓中未见凋亡细胞。生理盐水组于伤后4h开始出现凋亡细胞。VEGF组与生理盐水组相比较,凋亡细胞明显减少(P<0.01)。结论VEGF可抑制脊髓损伤后细胞的凋亡,从而保护损伤的脊髓组织。  相似文献   

2.
目的探讨大鼠脊髓损伤后应用碱性成纤维细胞生长因子(basicfibrob-1ast growthfactor,bFGF)对脊髓损伤区细胞凋亡的影响.方法利用Allen氏WD(Weight drop,WD)技术,以10 g×2.5 cm致伤力造成SD大白鼠T8脊髓损伤模型,并于损伤平面以下蛛网膜下腔置细塑料导管.bFGF治疗组(A组)分别于术后即刻,1,2,4,8,12,24,及48 h经导管注入bFGF溶液20μL(含bFGF100u),以后每周经导管注入20 μL bFGF;对照组(B组)则在同时间注入等量生理盐水.损伤后1,3,7,14,28 d对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测(TUNEL),采用计算机图像分析技术进行定量分析并计算凋亡指数(AI),AI=凋亡细胞核数/总细胞核数计算.结果A,B两组中均发现凋亡细胞,A组损伤后不同时间段神经细胞凋亡指数分别为(4.57±0.43),(5 38±1.16),(3.43±0.65),(3.38±0.58),(2.63±0.43);B组分别为(7.36±0.68),(13.96±2.74),(9.26±1.03),(7.25±0.73),(5.79±0.57).B组细胞凋亡率大于A组结论bFGF能抑制脊髓损伤后脊髓损伤区的细胞凋亡.  相似文献   

3.
目的探讨血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)对脊髓损伤后脊髓神经元凋亡和c-fos基因的影响及保护机制。方法将85只同龄Wistar大鼠,采用Allens的weightdropping(WD)法挫伤大鼠T11节段脊髓,于术后0,15min,1,2,4,8,12,24h经蛛网膜下腔导管各注入VEGF溶液15μL(含VEGF20μg),并与生理盐水组和正常对照组作对照。采用原位末端标记法(TUNEL法)检测脊髓损伤前后发生凋亡的脊髓神经元。采用免疫组化和原位杂交方法检测脊髓损伤前后c-fos基因的变化。结果正常组脊髓前角中未发现凋亡细胞,生理盐水组于伤后2h始出现凋亡神经元。VEGF组与生理盐水组相比较,凋亡神经元明显减少(P<0.01,t=24.25)。c-fos基因表达在正常脊髓组织中呈弱阳性,在生理盐水组中表达明显增加,VEGF组c-fos基因表达比生理盐水组明显减少(P<0.01,t=12.03)。结论脊髓损伤后脊髓神经元凋亡增多和c-fos基因表达显著增多,VEGF能抑制脊髓损伤后脊髓神经元凋亡和c-fos基因表达,从而保护损伤的神经组织。  相似文献   

4.
刘支革  林佳俊  王锋  陈敏 《中国临床康复》2004,8(5):966-967,T004
目的:探讨大鼠脊髓损伤后应用碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor bFGF)对脊髓损伤区细胞凋亡的影响。方法:利用Allen氏WD(Weight drop,WD)技术,以10g&;#215;2.5cm致伤力造成SD大白鼠Ts脊髓损伤模型,并于损伤平面以下蛛网膜下腔置细塑料导管。bFGF治疗组(A组)分别于术后即刻,1,2,4,8,12,24,及48h经导管注入bFGF溶液20μL(含bFGF100u),以后每周经导管注,20μL bFGF:对照组(B组)则在同时间注入等量生理盐水:损伤后1,3.7,14,28d对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测(TuNEL),采用计算机图像分析技术进行定量分析并计算凋亡指数(AI),AI=凋亡细胞核数,总细胞核数计算:结果:A,B两组中均发现凋亡细胞,A组损伤后不同时间段神经细胞凋亡指数分别为(4.57&;#177;0.43),15.38&;#177;1.16),(3.43&;#177;0.65).(3.38&;#177;058).(2.63&;#177;0.43);B组分别为(7.36&;#177;0.68),(13.96&;#177;2.74),(9.26&;#177;1.03),(7.25&;#177;0.73),(5.79&;#177;0.57).B组细胞凋亡率大于A组结论:bFGF能抑制脊髓损伤后脊髓损伤区的细胞凋亡。  相似文献   

5.
[目的]应用大剂量甲基强的松龙(MP)对脊髓损伤进行干预治疗,探讨其对脊髓神经细胞中内源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)变化的影响。[方法]40只wister大鼠分为三组:未损伤未给药组(A),损伤后注射生理盐水组(B),损伤后注射MP组(C)。利用Allen氏重物坠击法(weight drop,WD)技术,以2.5g×10cm致伤力造成T8脊髓损伤模型,C组分别于术后即刻经尾静脉按首次剂量30mg/kg注射MP,以后按5.4 mg/(kg·h),共23h.分4次静推;B组在同时间点注入等量生理盐水。术后于2d、5d、12d、28d取A、B、C各组损伤部位脊髓组织作bFGF的免疫组化检测。[结果]在各个时间点上,大剂量MP可以显著地提高bFGF的表达。[结论]大剂量MP可能通过提高损伤脊髓组织中bFGF的表达,来发挥受损脊髓神经细胞的营养作用。  相似文献   

6.
〖目的〗应用大剂量甲基强的松龙(MP)对脊髓损伤进行干预治疗,探讨其对脊髓神经细胞中内源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)变化的影响.〖方法〗40只wister大鼠分为三组未损伤未给药组(A),损伤后注射生理盐水组(B),损伤后注射MP组(C).利用Allen氏重物坠击法(weight drop,WD)技术,以2.5g×10cm致伤力造成T8脊髓损伤模型,C组分别于术后即刻经尾静脉按首次剂量30 mg/kg注射MP,以后按5.4 mg/(kg@h),共23 h,分4次静推;B组在同时间点注入等量生理盐水.术后于2 d、5 d、12 d、28 d取A、B、C各组损伤部位脊髓组织作bFGF的免疫组化检测.〖结果〗在各个时间点上,大剂量MP可以显著地提高bFGF的表达.〖结论〗大剂量MP可能通过提高损伤脊髓组织中bFGF的表达,来发挥受损脊髓神经细胞的营养作用.  相似文献   

7.
目的 研究Neuritin蛋白对大鼠急性脊髓损伤(SCI)后神经中丝蛋白(NF200)与生长相关蛋白43(GAP-43)表达的调节.方法 用改良Allens WD法致伤大鼠T10节段脊髓.实验组经蛛网膜下腔置管局部连续给药Neuritin蛋白(6 μg/d)7 d,对照组给予等量HIS蛋白.术后3、7、14、28、42 d给予免疫组织化学染色观察损伤段脊髓NF200、GAP-43的表达.结果 损伤后7、14、28、42 d,实验组NF200与GAP-43的累加积分光密度值(integrated option density, IOD SUM)明显高于对照组(P<0.05).其中,NF200伤后7 d仅有个别细胞阳性,28 d时最为明显;GAP-43在脊髓损伤后表达上调,伤后14 d最为明显,之后逐渐下降.结论 急性脊髓损伤后,Neuritin蛋白体内给药可上调NF200与GAP-43的表达.  相似文献   

8.
目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对脊髓损伤后脊髓神经元凋亡和c-fos基因的影响及保护机制。方法:将85只同龄Wistar大鼠,采用Auens的weight dropping(WD)法挫伤大鼠T11节段脊髓,于术后0,15min,1,2,4,8,12,24h经蛛网膜下腔导管各注入VEGF溶液15μL(含VEGF20μg),并与生理盐水组和正常对照组作对照。采用原位末端标记法(TUNEL法)检测脊髓损伤前后发生凋亡的脊髓神经元。采用免疫组化和原位杂交方法检测脊髓损伤前后c-fos基因的变化。结果:正常组脊髓前角中未发现凋亡细胞,生理盐水组于伤后2h始出现凋亡神经元。VEGF组与生理盐水组相比较,凋亡神经元明显减少(P&;lt;0.01,t=24.25)。c-fos基因表达在正常脊髓组织中呈弱阳性,在生理盐水组中表达明显增加,VEGF组c-fos基因表达比生理盐水组明显减少(P&;lt;0.01,t=12.03)。结论:脊髓损伤后脊髓神经元凋亡增多和c-fos基因表达显著增多,VEGF能抑制脊髓损伤后脊髓神经元凋亡和c-fos基因表达,从而保护损伤的神经组织。  相似文献   

9.
目的研究高压氧(HBO)治疗对脊髓损伤(SCI)组织中神经生长相关蛋白(GAP-43)表达水平的影响。方法用Allen氏WD法制作鼠脊髓损伤模型。55只成年Wistar鼠随机分为正常组、SCI对照组和HBO治疗组。治疗组于术后每天HBO治疗1次,对照组无特殊治疗:各组分别于术后1d、4d、7d、10d、14d各随机取鼠5只,取损伤脊髓组织,Western blot法检测GAP-43表达水平。结果GAP-43在正常成年鼠脊髓中少量表达,SCI后表达增加且HBO治疗组较对照组表达更为显著:术后1周时SCI对照组GAP-43表达达到高峰,2周时降至接近初始水平,但HBO治疗组GAP-43表达仍维持高水平。结论HBO可增强损伤脊髓组织GAP-43表达。  相似文献   

10.
磁刺激对脊髓损伤组织c-fos基因表达的影响   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的 观察磁刺激对损伤脊髓组织中c -fos基因表达的影响。方法 用Allen氏WD法制造大鼠T8脊髓损伤的动物模型。 38只Wistar大鼠随机分为正常组 ( 6只 )、脊髓损伤治疗组 ( 16只 )和对照组 ( 16只 )。治疗组于术后 15min、1h、2h和 4h分别予以磁刺激 ( 0 .5Hz ,70 %最大输出强度 ) ,对照组无特殊处理。治疗组、对照组分别于术后 15min、1h、2h和 4h各取 4只动物处死 ,取损伤段脊髓组织 ,作石蜡切片 ,用地高辛标记的c -fos基因探针进行原位杂交 ,测定c -fosmRNA在损伤脊髓组织中的表达 ,用免疫组织化学方法检测fos蛋白的表达。结果 fos蛋白OD值在正常组为 3.78± 0 .72 ,在对照组明显增多 (最高达 16 .49± 1.3) ,而治疗组在各时段均低于对照组 (P <0 .0 1) ,c -fos基因表达在正常脊髓组织中呈弱阳性 ,在对照组中表达明显增加 ,治疗组c -fos基因表达的数目少于对照组 (P <0 .0 1)。结论 应用磁刺激能抑制脊髓损伤后c -fos基因的表达 ,这可能是磁刺激保护神经元并减轻脊髓继发性损伤的机理之一。  相似文献   

11.
脊髓损伤后组织基因表达谱的变化   总被引:8,自引:4,他引:4  
目的通过基因芯片全面了解组织损伤后基因表达变化情况,研究脊髓损伤后组织基因表达谱的变化。方法健康成年SD大鼠9只,体质量300~400g,雌雄不拘,随机数字法分为无损伤组及损伤2、48h组,每组3只。以打击法制成大鼠脊髓闭合性损伤的动物模型,利用表达谱基因芯片技术,检测正常及伤后2,48h脊髓组织基因表达谱,寻找伤后发生显著差异性表达的基因。结果有45条基因在脊髓损伤后2h发生了显著差异性表达,其中22条表达升高,23条表达下降;183条基因在伤后48h发生显著变化,包括61条表达升高,122条表达下降。结论脊髓损伤后不同时期,多条基因发生了表达变化,提示继发性脊髓损伤是一个多因素参与的过程。  相似文献   

12.
目的探讨联合应用免疫抑制剂他克莫司(FK506)和FTY720对大鼠急性脊髓损伤的神经保护作用。方法采用Allen′s打击法制备大鼠脊髓损伤模型,84只大鼠分成4组:FK506+FTY720联合治疗组(A组)、FK506治疗组(B组),脊髓损伤组(C组)和正常对照组(D组)。A组通过尾静脉注射0.3 mg/kg FK506,并予鼻饲0.3 mg/kg FTY720,B组通过尾静脉注射0.5 mg/kg FK506,C组注射生理盐水。伤后6 h、24 h和48 h取伤段脊髓行HE染色分析和Tunel凋亡分析;伤后第1、3和7天行体感诱发电位(SEP)检测;伤后第1、3、7和14天行BBB评分和斜板试验评分。结果联合治疗组和FK506治疗组伤后各个时间取材点的脊髓损伤出血坏死区均轻于损伤组,在第6、24和48小时时间点脊髓Tunel神经细胞凋亡检测明显轻于损伤组,有显著差异性(P<0.05),但2组之间比较无显著差异性(P>0.05)。联合治疗组和FK506治疗组伤后各时间点SEP、BBB评分和斜板试验评分均优于损伤组,有显著性差异(P<0.05),但是2组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠急性脊髓损伤早期联合应用FK506和FTY720具有良好的保护神经功能和促进神经功能恢复的作用。  相似文献   

13.
背景脊髓损伤继发损伤机制是多种病理、生理、生化机制综合作用的结果.各国学者对脊髓损伤的早期治疗,抑制或阻止脊髓损伤继发损害的方面作了较多探索.目的探讨丹参对脊髓伤区水、钙含量的影响,分析丹参对脊髓的保护作用.设计随机分组实验研究.地点和对象实验在武汉大学人民医院骨科完成,对象为日本大耳白兔35只,雌雄不拘,均购自武汉大学医学院实验中心.干预按抽签法随机分成3组正常组5只,仅做L1椎板咬除而脊髓无损伤,对照组15只,治疗组15只.采用改良Allen氏法制作兔脊髓损伤模型.术后治疗组兔静注丹参注射液,对照组兔静注等量生理盐水.主要观察指标3组兔术后2,12,24h测量脊髓损伤段水、钙含量.结果脊髓损伤后,伤区水、钙含量增高,伤后12 h对照组水、钙含量分别为(77.34±2.16)%,(30.83±8.76)μmol/g,治疗组水、钙含量分别为(68.42±3.01)%,(19.32±2.79)μmol/g.丹参治疗后2,12,24 h水、钙含量均较对照组降低,趋近正常值.结论丹参可减轻脊髓伤区水、钙储留,对脊髓起保护作用.  相似文献   

14.
李宽新  李锋 《实用医学杂志》2011,27(18):3295-3297
目的:探讨大鼠急性脊髓完全性损伤后血脊膜屏障(blood-spinal cord barrier,BSCB)通透性的变化。方法:本研究选用wistar大鼠48只,制作Allen氏脊髓打击模型(打击当量300gcf),随机分为对照组(n=6)和脊髓损伤组(n=42),后者又根据伤后不同时间点分为2、8、24、48、72h以及1、2周组,每组6只,再分为A组和B组,每组各3只。A组从大鼠股静脉注射2%的伊文思蓝(Evens blue,EB),通过荧光显微镜下观察;B组用干湿重法测定脊髓水肿变化情况。结果:随着脊髓损伤时间的延长,脊髓组织EB蓝染的范围逐渐增大,荧光光斑数量增加,强度增强,24~48h达高峰,与脊髓组织内水肿时间一致,72h后水肿逐渐减轻,其内开始出现坏死灶,1~2周可见明显大小不等的囊腔形成,未见EB蓝染。结论:脊髓损伤后BSCB的通透性增高,并在24~48h达高峰,72h后逐渐下降,1周后BSCB通透性明显减小。  相似文献   

15.
目的:探讨孕酮对大鼠脊髓损伤后早期细胞凋亡的影响。方法:60只雄性SD大鼠随机分成假手术组、损伤组、孕酮组,采用改良的Allen’s撞击法制作脊髓损伤模型。孕酮组在造模成功后1、6、24、487、2 h腹腔注射16 mg/kg孕酮。术后6、24、48、75 h取材,采用HE染色观察脊髓形态学的变化,免疫组织化学法检测Caspase-3的表达,原位末端标记法(TUNEL染色)检测细胞凋亡。结果:假手术组大鼠脊髓形态正常,偶见凋亡细胞及Caspase-3阳性细胞;与损伤组相比,孕酮组术后各时间点的凋亡指数下降,Caspase-3阳性细胞数显著减少,差异有统计学意义。结论:抑制脊髓损伤后的细胞凋亡可能是孕酮的神经保护作用机制之一。  相似文献   

16.
17.
目的:研究脊髓损伤(SCI)后的不同时间点尾静脉移植大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠SCI的修复作用。方法:SD大鼠24只,制备大鼠SCI模型,随机分为3组各8只:对照组于SCI后尾静脉注射生理盐水;24 h移植组和于7 d移植组分别于SCI后24 h、7 d尾静脉注射BMSCs缓冲液(2×106/m L)1 m L。在SCI后各时间点分别进行Basso Beattie Bresnahan(BBB)运动学评分,于第42天处死动物,HE染色观察SCI处空洞面积的改变情况。结果:7 d移植组大鼠SCI后14、21、28、35、42 d的BBB评分明显高于24 h移植组和对照组,差异有统计学意义(P0.05)。HE染色显示各组SCI部位形成脊髓空洞,7 d移植组大鼠的脊髓空洞明显小于24 h移植组和对照组。结论:BMSCs可在体外培养、扩增,能通过尾静脉注射的方式迁移到SCI部位,促进SCI大鼠的神经功能恢复;移植的最佳时间在损伤后7 d左右。  相似文献   

18.
目的观察大鼠损伤脊髓中NG2胶质细胞的活化。方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为两组(n=15):手术组用改良Allen`s打击法制作脊髓损伤模型;假手术组只切除椎板,不损伤脊髓。在术后3 d、7 d、30 d,用免疫组化方法检测NG2细胞活化。结果相比较假手术组,手术组脊髓损伤后NG2细胞活化明显,细胞增殖活化在术后3 d升高,7 d达高峰,持续至30 d(P<0.05)。结论大鼠脊髓损伤后NG2大量活化增殖,参与了胶质瘢痕形成,对脊髓损伤后脊髓功能的恢复产生一定影响。  相似文献   

19.
自体骨髓干细胞动员移植与手术移植治疗脊髓损伤的比较   总被引:1,自引:0,他引:1  
背景:研究表明,骨髓干细胞可在损伤脊髓中存活、向损伤部位迁移并向神经元和星形胶质细胞分化,促进损伤脊髓功能的恢复,是治疗脊髓损伤的一条有效途径.自体骨髓干细胞动员移植与手术移植治疗脊髓损伤均具有更广阔的临床应用前景,但两者的疗效与治疗机制是否存在区别还不清楚.目的:比较自体骨髓干细胞动员移植与手术移植治疗脊髓损伤的效果,并以定性定量化指标评价.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-06/2008-04在河南省人民医院完成.材料:10周龄SD大鼠90只,雌雄各半,体质量(240±10)g,用于制备脊髓损伤模型.方法:动物造模前注射5-溴2-脱氧尿嘧啶核苷50 mg/(kg·d)×3 d后抽取自体骨髓,体外分离自体骨髓干细胞;NYU Imlpactor制作脊髓损伤模型.90只模型大鼠按随机数字表法分为3组,每组30只.动员移植组:应用重组粒细胞刺激因子皮下注射,20 mg/(kg·d)×7 d:手术移植组为损伤局部移植0.3 mL(1×10~(10)L~(-1))骨髓间充质干细胞;对照组:脊髓损伤后给予相同体积(0.3 mL)的生理盐水.各组均从术前3 d开始,连续10 d腹腔注射5-溴2-脱氧尿嘧啶核苷50 mg/(kg·d).主要观察指标:采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分检测伤后3 d,1,2,4,8周大鼠后肢的运动功能;伤后1,2,4.8周通过体感诱发电位和运动诱发电位检测脊髓上、下行神经传导通路,判断脊髓损伤和恢复程度;病理和免疫组织化学观察脊髓损伤组织细胞结构变化及5-溴2-脱氧尿嘧啶核苷、胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶分布表达.结果:①脊髓损伤后1,2,4,8周动员移植组和手术移植组BBB评分均较对照组升高(P<0.01);动员移植组和手术移植组相比,差异均无显著性意义(P>0.05).②脊髓损伤1,2,4,8周后,与对照组相比,动员移植组和手术移植组体感诱发电位和运动诱发电位潜伏期均降低(P<0.05~0.01),波幅均增高(P<0.05~0.01);动员移植组和手术移植组各时间点相比,差异均无显著性意义(P>0.05).③组织病理学显示动员移植组和手术移植组较对照组有更少的空洞、坏死及胶质纤维酸性蛋白瘢痕组织,较多的5-溴2-脱氧尿嘧啶核苷阳性细胞和特异性烯醇化酶阳性细胞.结论:自体骨髓干细胞动员移植和手术移植两种方法均能明显减轻脊髓损伤的程度,促进损伤后脊髓功能的恢复,两者对比,前者更为方便、无创,实用性强.  相似文献   

20.
目的探讨积雪草苷(asiaticoside,AS)对急性脊髓损伤(spinalcordinjury,SCI)大鼠神经元的保护作用及对诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)表达的影响。方法成年sD大鼠以Allen’s打击法制备脊髓损伤模型。分别给予不同剂量As治疗,术后24h、72h、7d、14d、28d采用BassoBeasttieandBresnahan(BBB)评分评价大鼠双后肢神经功能恢复情况,并通过HE和尼氏染色观察损伤脊髓组织病理变化,同步检测损伤部位脊髓的丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)值、iNOS蛋白表达及其活度值。结果与脊髓损伤模型组相比,低、中、高三剂量(15、30和45mg/kg)AS给药组在脊髓损伤后各时间点BBB评分分值明显提高(P〈0.05),HE染色镜检脊髓组织病理损伤明显减轻,神经元尼氏体表达明显(P〈0.05),MDA生成显著减少(P〈0.05),SOD活性提高(P〈0.05)。各剂量AS均可下调SCI大鼠第7天受损脊髓组织iNOS蛋白表达和iNOS酶活度值。结论AS可减轻大鼠脊髓组织的损伤,保护脊髓神经元,此作用可能与抑制iNOS蛋白表达有关。  相似文献   

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