耐力运动对大鼠葡萄糖运载体基因表达及转位的影响

目的　研究耐力运动对大鼠骨骼肌细胞葡萄糖运载体 4(glucosetransporter 4,GLUT4)基因表达及转位机制的影响。方法　将SD大鼠随机分为两组 :对照组和耐力运动组。耐力运动组大鼠进行 6周游泳训练。用Western印迹法检测大鼠骨骼肌细胞内膜和外膜的GLUT4蛋白含量 ,用Northern杂交法和斑点印迹法检测大鼠骨骼肌细胞内GLUT4mRNA含量。实验前后检测大鼠血清胰岛素和血糖浓度。结果　运动组大鼠经过 6周游泳训练后 ,与对照组大鼠相比 ,骨骼肌细胞内膜GLUT4含量增加 16.0 %(P <0 .0 1) ,细胞外膜GLUT4含量增加 71.9% (P <0 .0 1) ,骨骼肌细胞内GLUT4mRNA含量增加2 5 .6% (P <0 .0 1)。结论　耐力运动可增加骨骼肌细胞内GLUT4基因表达水平 ,促进骨骼肌细胞内的GLUT4从内膜向细胞外膜转位 ,从而提高骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取和利用。     

耐力运动对2型糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖运载体4基因表达的影响

目的：探讨耐力运动对糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖运载体4（glucose transporter 4，GLUT4）mRNA表达的影响。方法：32只雄性2型糖尿病OLETF大鼠和13只雄性对照LETO大鼠随机分为6组：A1组OLETF运动组、A2组OLETF运动＋胰岛素组、B1组OLETF非运动组、B2组OLETF非运动＋胰岛素组、C组LETO运动组、D组LETO非运动组。A1、A2、C组参照Ploug报道的大鼠游泳运动方法运动12周。A2、B2组经肝门静脉予胰岛素10U／Kg的注射，1min后处死取材。Real—time PCR方法测定GLUT4 mRNA。结果：GLUT4 mRNA表达在A1组比B1组升高3倍．A2组比A1组升高13倍，B2组比B1组升高20倍，差异均有显著性意义；A2组比B2组GLUT4 mRNA升高2倍，差异无显著性意义。结论：耐力运动可以促进GLUT4 mRNA的表达，耐力运动和胰岛素对糖尿病治疗具有协同作用，两者不能相互替代。     

耐力训练对糖尿病大鼠骨骼肌p38信号激酶的调节作用

目的:研究不同强度的耐力训练对糖尿病大鼠骨骼肌细胞丝裂素活化蛋白激酶p38活性的调节作用,为制订适宜的糖尿病运动疗法程序提供分子生物学依据。方法:雄性SD大鼠34只,尾静脉注射链脲霉素,建立糖尿病模型。然后随机分为低强度运动组(E1,n=6)、高强度运动组(E2,n=6)、低强度运动加胰岛素治疗组(EI1,n=6)、高强度运动加胰岛素治疗组(EI2,n=6)、非胰岛素治疗非运动组(C,n=5)和胰岛素治疗非运动组(CI,n=5)。耐力训练采用活动平板,胰岛素皮下注射,共8周。运用化学发光法测定p38活性。结果:训练8周前后,EI1组安静血糖下降46%(P<0.01),其余各组血糖无明显下降。单次运动前后E1组、EI1组、EI2组和CI组血糖均见明显下降,其中EI1组血糖降低尤为显著达83%(P<0.01)。骨骼肌p38活性在EI1组显著高于其余各组(P<0.05),E1组显著高于E2组、C组、CI组(P<0.05)。结论:低强度运动训练以及低强度运动训练加胰岛素治疗均能显著提高糖尿病大鼠骨骼肌细胞p38信号激酶,提示低强度运动训练加胰岛素治疗是内源性胰岛素缺乏性糖尿病的适宜治疗方案。     

耐力训练对STZ诱导糖尿病大鼠背根神经节内NF-κB活性的调节作用

目的研究不同强度耐力训练对糖尿病大鼠背根神经节(DRG)内的核转录因子NF-κB活性的调节作用,为临床糖尿病神经并发症的运动疗法提供分子生物学依据.方法雄性SD大鼠44只,随机分为糖尿病组(34只)和正常组(10只).其中糖尿病组大鼠经尾静脉注射链脲霉素,建立糖尿病模型,然后随机分为55%VO2max运动组(E1,n=6)、75%VO2max运动组(E2,n=6)、55%VO2max运动加胰岛素治疗组(EI1,n=6)、75%VO2max运动加胰岛素治疗组(EI2,n=6)、胰岛素治疗非运动组(DI,n=5)、非胰岛素治疗非运动组(D,n=5).另外10只正常血糖大鼠分为一次力竭运动组(EC,n=5)和非运动组(C,n=5).耐力训练采用活动平板,胰岛素采用隔日皮下注射,共8周.运用ELISA法测定背根神经节内NF-κB活性.结果D组DRG内NF-κB活性显著高于EC和C组(P＜0.01),也显著高于E1、E2、EI1组(P＜0.05)以及EI2和DI组(P＜0.01).结论糖尿病大鼠更易发生周围神经的氧化应激损伤;耐力训练可以有效地抑制糖尿病大鼠背根神经节NF-κB活性,干预糖尿病神经病变.     

白细胞介素6对2型糖尿病大鼠骨骼肌糖代谢的影响

目的：通过研究白细胞介素6（IL－6）对2型糖尿病（T2DM）大鼠骨骼肌葡萄糖转运体4（GLUT4）和糖原含量的影响，探讨其影响T2DM糖代谢的机制。方法：健康雄性SD大鼠随机分为4组：正常对照组（N组）10只，糖尿病IL-6抗原干预组（A组）10只，糖尿病IL－6抗体干预组（B组）8只，糖尿病对照组（C组）8只。测定血糖、血清胰岛素、血脂等指标；取股四头肌比色法测定肌糖原含量，免疫组化法测定骨骼肌GLUT4蛋白表达。结果：T2DM大鼠骨骼肌糖原含量和GLUT4蛋白表达较正常大鼠明显降低，IL-6抗体干预可以升高T2DM大鼠骨骼肌糖原含量和GLUT4蛋白表达。结论：T2DM大鼠骨骼肌GLUT4蛋白表达减少；IL－6抗体阻滞通过增加GLUT4蛋白表达促进骨骼肌对糖的利用。     

2型糖尿病大鼠GLUT4mRNA表达与胰岛素分泌关系的探讨

[目的]探讨2型糖尿病大鼠GLUT4mRNA表达与胰岛素分泌的关系，进一步阐明胰岛素抵抗发病机制。[方法]采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR），分析大鼠骨骼肌、心肌和脂肪组织中GLUT4mRNA表达，放射免疫方法测定血清胰岛素含量。[结果]2型糖尿病大鼠骨骼肌、心肌和脂肪组织中GLUT4mRNA表达比正常对照组相对应组织中的表达低，其基础胰岛素、口服葡萄糖后胰岛素水平比正常对照组显著降低。[结论]2型糖尿病大鼠胰岛素分泌量与组织中GLUT4mRNA表达具有一致性表型。     

运动对糖尿病大鼠骨骼肌细胞葡萄糖运载体4转位机制的影响

目的　研究运动对链脲佐菌素 (STZ)引起的糖尿病大鼠骨骼肌细胞葡萄糖运载体 4(Glucosetransporter 4,GLUT4)转位机制的影响。 方法　将实验大鼠分为 3组 :正常对照组、糖尿病组和糖尿病运动组。糖尿病运动组大鼠进行 6周游泳训练。实验到期分离各组大鼠大腿股四头肌 ,制备细胞内、外膜 ,以Western印迹法检测GLUT4蛋白含量 ,同时检测大鼠血清胰岛素和血糖浓度。结果　糖尿病大鼠骨骼肌细胞GLUT4蛋白含量明显减少 ,与正常对照组相比 ,细胞内膜GLUT4蛋白含量减少 2 4.1% (P <0 .0 1) ,细胞外膜减少 48.1% ,(P <0 .0 1)。糖尿病大鼠经过 6周运动训练 ,与糖尿病组大鼠相比 ,骨骼肌细胞内膜GLUT4蛋白含量无明显变化 ,而细胞外膜GLUT4蛋白含量增加 10 8.7% (P <0 .0 1) ,血糖由18.5± 1.9mmol/L降至 14 .0± 3 .3mmol/L(P <0 .0 1)。结论　糖尿病状态下骨骼肌细胞GLUT4蛋白含量明显减少 ,其中以细胞外膜GLUT4蛋白含量的减少更为显著 ,即在糖尿病状态下骨骼肌细胞GLUT4蛋白转位机制出现障碍 ,使肌细胞对葡萄糖的转运发生障碍 ,血糖升高。糖尿病大鼠经过运动训练可增加骨骼肌细胞GLUT4蛋白含量 ,并改善GLUT4蛋白转位机制 ,从而增加肌细胞对葡萄糖的转运和利用 ,降低血糖 ,改善糖尿病大鼠糖代谢紊乱的状况。     

2型糖尿病大鼠不同药物治疗后内皮脂肪酶的表达变化

目的:检测2型糖尿病大鼠血浆中内皮脂肪酶(endothelial lipase,EL)水平,以及经不同降糖药物治疗后EL水平变化.探讨EL与2型糖尿病的相关性,评价不同降糖药物对EL水平的影响.方法:成年雄性SD大鼠60只,随机抽取15只作为正常对照组(CTL组),另外45只采取高脂高糖饲料喂养+链脲佐菌素诱导的方法制备2型糖尿病大鼠模型,而后将成模大鼠39只随机分为3组:2型糖尿病组(n=13,DM组)、胰岛素治疗组(n=13,IDM组)和格列齐特治疗组(n=13,GDM组),分别于1、9和13周末测体重、空腹血糖、空腹胰岛素水平、胰岛素敏感指数、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、C-反应蛋白和EL.结果:13周末测各组血糖,DM组较CTL组、GDM组、IDM组升高(P＜0.05).其中IDM组、GDM组与CTL纽无明显差异(P＞0.05).13周末测各组血浆EL水平,DM组EL表达较CTL组和IDM组明显升高(P＜0.05),与GDM组无明显差异(P＞0.05).IDM组EL表达较DM组明显降低(P＜0.05),与CTL组无明显差异(P＞0.05).结论:2型糖尿病大鼠中EL表达明显增高,经胰岛素治疗和格列齐特治疗后EL的表达并不一致.胰岛素在降低血糖的同时降低EL水平,而格列齐特降低血糖并不降低EL水平.这种不一致可能是由于胰岛素与格列齐特对EL的调节作用不同引起的.     

胰岛素与硒联合作用糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素信号转导通路中PI3K和GLUT4蛋白的表达

背景:PI3K是骨骼肌中胰岛素信号转导途径级联反应中关键的蛋白分子之一,其表达异常可影响GLUT4的合成、分泌、移位等变化,从而使血糖升高.目的:通过检测胰岛素和硒联合应用对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素信号转导通路有关蛋白激酶(PI3K、GLUT4)表达的影响.方法:SD雄性大鼠随机分为正常组、糖尿病组、糖尿病+胰岛素组、糖尿病+亚硒酸钠组、糖尿病+胰岛素+亚硒酸钠组.除正常组外,其余4组大鼠腹腔注射链尿佐菌素50 mg/kg复制大鼠糖尿病模型.正常组和糖尿病自由进水和进食;糖尿病+胰岛索组按1 U/(kg·d)皮下注射胰岛素,糖尿病+亚硒酸钠组按180 μg/(kg·d)管饲亚硒酸钠,糖尿病+胰岛素+亚硒酸钠组两药联合用药持续4周;应用免疫印迹和免疫组织化学法检测各实验组骨骼肌胞浆中PI3K和胞膜上GLUT4蛋白表达.结果与结论:免疫组织化学方法所得结果与免疫印迹一致.胰岛索和硒联合应用能明显增加骨骼肌细胞胞浆中PI3K和胞膜上GLUT4蛋白的表达量,说明胰岛索和硒联合应用是通过PI3K途径和增加骨骼肌组织GLUT4蛋白的表达来增强胰岛素信号转导.     

耐力训练对STZ诱导糖尿病大鼠背根神经节内NF-资B活性的调节作用

目的:研究不同强度耐力训练对糖尿病大鼠背根神经节(DRG)内的核转录因子NF-资B活性的调节作用,为临床糖尿病神经并发症的运动疗法提供分子生物学依据。方法:雄性SD大鼠44只,随机分为糖尿病组(34只)和正常组(10只)。其中糖尿病组大鼠经尾静脉注射链脲霉素,建立糖尿病模型,然后随机分为55%VO2max运动组(E1,n=6)、75%VO2max运动组(E2,n=6)、55%VO2max运动加胰岛素治疗组(EI1,n=6)、75%VO2max运动加胰岛素治疗组(EI2,n=6)、胰岛素治疗非运动组(DI,n=5)、非胰岛素治疗非运动组(D,n=5)。另外10只正常血糖大鼠分为一次力竭运动组(EC,n=5)和非运动组(C,n=5)。耐力训练采用活动平板,胰岛素采用隔日皮下注射,共8周。运用ELISA法测定背根神经节内NF-资B活性。结果:D组DRG内NF-资B活性显著高于EC和C组(P<0.01),也显著高于E1、E2、EI1组(P<0.05)以及EI2和DI组(P<0.01)。结论:糖尿病大鼠更易发生周围神经的氧化应激损伤;耐力训练可以有效地抑制糖尿病大鼠背根神经节NF-资B活性,干预糖尿病神经病变。     

小鼠骨骼肌细胞蛋白激酶B底物160在有氧运动促进葡萄糖转运体4转运中的作用

目的:通过研究有氧运动对C57BL/6小鼠骨骼肌细胞蛋白激酶B(PKB/Akt)底物蛋白160(AS160)和葡萄糖转运体4(GLUT4)表达的影响,探讨AS160在调节细胞葡萄糖转运过程中的作用及有氧运动影响骨骼肌细胞葡萄糖代谢的生物学机制。方法:20只16周龄、雄性C57BL/6小鼠,随机分为安静组(NC,n=10)和运动组(NE,n=10);运动组进行为期6周、75%VO2max强度的有氧跑台训练。6周训练结束后24h,动物麻醉后取材。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨骼肌组织AS160、GLUT4基因表达;免疫印迹杂交(Western blot)和免疫荧光染色(IF)分别检测骨骼肌细胞AS160、pAS160-Thr642和GLUT4蛋白表达及定位。结果:与NC组相比,NE组小鼠骨骼肌细胞AS160 mRNA和蛋白表达差异无显著性,但pAS160-Thr642表达显著增加;NE组小鼠骨骼肌细胞GLUT4 mRNA和蛋白表达较NC组显著增加,GLUT4向细胞膜迁移明显增加。结论:有氧运动显著增强骨骼肌细胞pAS160-Thr642的活性,增强GLUT4表达及促进GLUT4向细胞膜转移,促进骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取和利用。     

小牛血清去蛋白注射液对2型糖尿病大鼠糖耐量及骨骼肌GLUT4mRNA表达的影响——附90例报告

目的：探讨小牛血清去蛋白注射液（deproteinized calf serum injection，DCSI）对2型糖尿病模型大鼠的糖耐量及骨骼肌的葡萄糖转运子4（glucose transporter4，GLUT4）mRNA表达的影响。方法：将90只3月龄健康远交系大鼠随机分为6组，每组15只。分别制作正常对照组（正常组）、糖尿病对照组（糖尿病组）、罗格列酮对照组（罗格列酮组）、DCSI高剂量组（高剂量组）、DCSI中等剂量组（中等剂量组）、DCSI低剂量组（低剂量组）等6组模型。在给药4周后行葡萄糖耐量试验，分别测定6组餐后0min、30min、1h、2h的血糖水平；次日处死小鼠，采用逆转录PCR法检测6组大鼠模型骨骼肌中GLUT4mRNA的相对表达量。结果：糖尿病组、低剂量组、中等剂量组、高剂量组、罗格列酮各时间段的血糖水平均高于正常组（均为P〈0．01）。低剂量组、中等剂量组、高剂量组和罗格列酮组的各时间段的血糖水平均明显低于糖尿病组（均为P〈0．01）。上述4组治疗组中，低剂量组、高剂量组餐后1h、餐后2h的血糖水平均高于罗格列酮组（均为P〈0．05），中等剂量组餐后1h、餐后2h的血糖水平与罗格列酮组比较差异则无统计学意义（均为P〉0．05）。另外，糖尿病组的骨骼肌GLUT4mRNA的相对表达量明显低于正常组。罗格列酮组、低剂量组、中等剂量组及高剂量组GLUT4mRNA的相对表达量明显高于糖尿病组。上述4组治疗组中，中等剂量组GLUT4mRNA的相对表达量最高，接近于正常组。结论：DCSI尤其是中等剂量的DCSI可改善2型糖尿病模型大鼠的糖耐量，使其骨骼肌的GLUT4mRNA表达量增加。     

2型糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白-4和磷脂酰肌醇-3-激酶与内脂素的关系

目的研究内脂素对糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白-4（GLUT4）和磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）表达的影响并探讨其机制。方法健康雄性Wistar大鼠随机分为普通饲料组（N组）、高脂饲料组（H组）、普通饲料糖尿病模型组（N＋S组）及高脂饲料糖尿病模型组（H＋S组）。糖尿病模型组大鼠腹腔注射链脲佐菌素造模。造模成功8周后,两组糖尿病大鼠再分别随机分出一组为V＋N＋S组和V＋H＋S组,腹腔注射内脂素重组蛋白。采用实时定量RT-PCR技术检测骨骼肌GLUT4 mRNA表达, Western blot 技术检测GLUT4和PI3K蛋白表达。结果 N＋S组与N组、H＋S组与H组大鼠骨骼肌GLUT4 mRNA,GLUT4和PI3K蛋白表达水平比较明显减低（P＜0.05）。 V＋N＋S组与N＋S组、V＋H＋S组与H＋S组比较均有所升高（P＜0.05）。结论内脂素可能通过增加PI3K的蛋白表达影响GLUT4的基因表达,导致其蛋白表达增加,从而降低血糖。     

饮食和运动干预对2型糖尿病大鼠心肌Bcl-2和Bax表达的影响

目的：探讨饮食和运动对2型糖尿病大鼠心肌Bcl-2和Bax表达的影响.方法：雄性SD大鼠30只,分成对照组（CRN）和模型组（DFM）.DFM组采用高糖高脂喂养加低剂量链脲佐菌素（35mg/kg）注射建立2型糖尿病模型.然后随机分成糖尿病高糖高脂饲料非运动组（DFN）、糖尿病常规饲料非运动组（DRN）、糖尿病常规饲料高强度运动组（DRH）、糖尿病常规饲料低强度运动组（DRL）.采用活动平板耐力运动8周.结果：DFM组空腹血糖、甘油三酯、胆固醇均较CRN组显著升高（P＜0.05）,血胰岛素水平两组间无显著差异.心肌Bcl-2基因表达和Bcl-2/Bax比值在糖尿病各组均较CRN组显著降低,其中饮食调整和运动各组均较DFN组显著升高（P＜0.05）,DRL组又明显高于DRH组（P＜0.01）.心肌Bax基因表达在糖尿病非运动各组显著高于CRN组,饮食调整和运动各组显著低于DFN组（P＜0.05）,饮食调整加运动各组又明显低于DRN组（P＜0.05）.结论：饮食调整和运动均能诱导糖尿病大鼠的心肌抗凋亡基因的表达,饮食调整加低强度耐力运动效果尤为显著;饮食加运动可以减少促凋亡基因的表达.     

运动对胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞葡萄糖转运蛋白-4的影响

目的研究运动对高糖高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响。方法将实验大鼠随机分为正常组、模型组和运动组,每组各10只。各组以基础饲料适应性喂养1周后,模型组和运动组改用高糖、高脂饲料喂养,第5周时运动组进行为期6周的游泳训练。各组于实验第1,5和11周检测大鼠的体重、血甘油三酯、血胆固醇、空腹血糖和血浆胰岛素水平,计算胰岛素敏感指数。采用Westernblot法检测大鼠脂肪细胞内、外膜GLUT4含量。结果模型组大鼠与正常组相比,脂肪细胞内、外膜GLUT4含量均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,经过6周游泳训练的运动组大鼠脂肪细胞内膜GLUT4含量无明显变化,而细胞外膜GLUT4含量显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论运动可提高胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞外膜GLUT4含量,促进葡萄糖的摄取和利用。