腹腔注射催吐剂后非呕吐动物大鼠脑内呕吐反应区Fos阳性神经元的表达

背景给予猫类呕吐动物不同的催吐剂,发现孤束核、外侧被盖到腹外侧区这一弓形区域有大量Fos阳性神经元表达.并认为最后区、孤束核到腹外侧网状结构这一弓型区域是主要催吐部位.非呕吐动物注射催吐剂后是否会有相应反应.目的观察腹腔注射催吐剂顺氯氨铂大鼠脑和脊髓内呕吐相关区域的Fos阳性神经元分布.设计以动物为观察对象,随机对照实验.单位河北师范大学生命科学学院的神经生理研究室和河北医科大学基础医学研究所生理室.材料实验于2003-03/08在河北师范大学生命科学学院神经生理研究室,河北医科大学基础研究院生理室完成.选择雄性SD大鼠12只,体质量220～250 g,清洁级.随机分为实验组6只,对照组6只.干预实验组腹腔注射催吐剂顺氯氨铂10 mg/kg,对照组注射等剂量的生理盐水后,于室温、安静、避光环境下观察大鼠的行为学变化.6 h后取大鼠脑组织,进行冷冻连续切片,用免疫组织化学染色方法观察大鼠脑干和前脑核团的Fos阳性神经元的分布,并进行阳性细胞记数.主要观察指标①注射催吐剂后大鼠的行为学观察.②大鼠脑内相关区域Fos阳性细胞数.结果12只大鼠均进入结果分析.①两组大鼠在注射后20 min内均为安静状态,蜷缩着趴卧,几乎无任何活动表现.注射后60 min,对照组大鼠恢复正常,进食或饮水;而实验组大鼠处于蜷缩的趴卧状态,偶尔抬头或摆头,呼吸频率快且不均匀.注射后2 h,实验组动物仍然腹部紧贴笼底趴卧,低头,鼻尖不规则晃动.5 h后,实验组动物开始站立活动,呼吸正常,但仍不摄食或饮水.②在脑干的孤束核、最后区、外侧臂旁核和下丘脑的室旁核、视上核、弓状核的Fos阳性神经元[(64.3±9.6),(83.4±15.0),(148.8±19.9),(80.2±11.8),(20.7±3.8),(86.6±10.8)]明显高于对照组[(56.2±6.3),(73.5±9.9),(136.9±17.8),(66.1±10.3),(17.3±3.4),(78.8±10.5)].结论催吐剂能使大鼠产生内脏不适,其中枢神经系统内可能存在着与呕吐动物相似的催吐区,但可能缺乏与呕吐相关的调节机制.催吐剂的刺激使大鼠脑内相关区域Fos阳性神经元数量增加,提示非呕吐动物大鼠脑内也存在类似与恶心相关的神经化学通路.     

大鼠局灶性脑梗死半影区Fos蛋白表达与地西泮的脑保护作用

目的：探讨地西泮对大鼠局灶性脑梗死半影区Fos蛋白表达的影响。方法：实验于2004-06／12在第四军医大学全军神经科学研究所实验室完成，SD雄性大鼠36只，使用光化学法制作脑梗死模型。术后动物随机分为2组：地西泮组和对照组。地西泮组脑梗死前24h开始腹腔注射地西泮注射液10mg／kg，每8小时1次，直至动物处死；对照组注射等体积生理盐水。两组动物术后按照存活时间6，12．24h分为地西泮及对照组6，12，24h 6个亚组，每个亚组6只，依不同时间灌流取材。在内氏染色的切片上计算最大脑梗死面积，用免疫组化法标记并计数各组大鼠最大脑梗死截面半影区内Fos阳性细胞数。结果：36只均进入结果分析，无缺失值。①梗死灶最大平均截面积：地西泮组6，12和24h组分别为(2．1&;#177;0．6)，(2．8&;#177;0．8)和(3．1&;#177;0．5)mm^2，对照组分别为(4．1&;#177;0．7)，(5.1&;#177;0．6)和(5．5&;#177;1.0)mm^2，地西泮组明显小于对照组(P&;lt;0.01)。②单位面积内Fos阳性细胞数：地西泮6，12和24h组也明显少于对照组[(56&;#177;21)，(85&;#177;32)，(36&;#177;18)；(112&;#177;31)，(167&;#177;36)，(75&;#177;28)，P&;lt;0.01]。③形态学观察：内氏染色在梗死区与周围正常脑组织间可见明显的有一定宽度的分界线，即为半影区，梗死中心内几乎未见细胞形态。免疫组化染色结果显示，地西泮组和对照组梗死中心内无Fos蛋白阳性细胞，但在半影区出现大量形态多样的Fos细胞，表现为大部分细胞胞核染色，染色的胞核大小不一；少量细胞胞浆亦着色。正常脑区内仅见很少量的Fos细胞，而在半影区内可见密集成团的Fos细胞。结论：在大鼠局灶性脑缺血损伤后，神经细胞修复防御系统完全被抑制时，地西泮抑制了脑缺血损伤后Fos蛋白的表达，抑制了细胞凋亡，从而起到脑保护作用。     

大鼠局灶性脑梗死半影区Fos蛋白表达与地西泮的脑保护作用

目的:探讨地西泮对大鼠局灶性脑梗死半影区Fos蛋白表达的影响。方法:实验于2004-06/12在第四军医大学全军神经科学研究所实验室完成,SD雄性大鼠36只,使用光化学法制作脑梗死模型。术后动物随机分为2组:地西泮组和对照组。地西泮组脑梗死前24h开始腹腔注射地西泮注射液10mg/kg,每8小时1次,直至动物处死;对照组注射等体积生理盐水。两组动物术后按照存活时间6,12,24h分为地西泮及对照组6,12,24h6个亚组,每个亚组6只,依不同时间灌流取材。在内氏染色的切片上计算最大脑梗死面积,用免疫组化法标记并计数各组大鼠最大脑梗死截面半影区内Fos阳性细胞数。结果:36只均进入结果分析,无缺失值。①梗死灶最大平均截面积:地西泮组6,12和24h组分别为(2.1±0.6),(2.8±0.8)和(3.1±0.5)mm2,对照组分别为(4.1±0.7),(5.1±0.6)和(5.5±1.0)mm2,地西泮组明显小于对照组(P<0.01)。②单位面积内Fos阳性细胞数:地西泮6,12和24h组也明显少于对照组[(56±21),(85±32),(36±18);(112±31),(167±36),(75±28),P<0.01]。③形态学观察:内氏染色在梗死区与周围正常脑组织间可见明显的有一定宽度的分界线,即为半影区,梗死中心内几乎未见细胞形态。免疫组化染色结果显示,地西泮组和对照组梗死中心内无Fos蛋白阳性细胞,但在半影区出现大量形态多样的Fos细胞,表现为大部分细胞胞核染色,染色的胞核大小不一;少量细胞胞浆亦着色。正常脑区内仅见很少量的Fos细胞,而在半影区内可见密集成团的Fos细胞。结论:在大鼠局灶性脑缺血损伤后,神经细胞修复防御系统完全被抑制时,地西泮抑制了脑缺血损伤后Fos蛋白的表达,抑制了细胞凋亡,从而起到脑保护作用。     

慢性脑低灌注状态缺血再灌注后大鼠海马P21和P53蛋白的表达

目的：通过建立大鼠慢性脑低灌注模型。观察慢性脑低灌注状态下正常脑灌注压恢复过程中P21和P53蛋白的表达情况。方法：实验于2003-12／2004-12在锦州医学院动物实验中心进行。取Ⅱ级Wistar雄性大鼠60只，随机分为对照组、模型不灌注组和模型再灌注组：每组动物按正常灌注压恢复后不同时间点分组(12，24，48，72h组)，每个时间点各5只。采用右侧颈外静脉-颈总动脉端侧吻合和对侧横窦引流静脉结扎的方法，建立慢性脑低灌注动物模型，术后90d阻断颈部动静脉分流造成模型组大鼠脑组织再灌注。各组在恢复正常灌注后12，24，48，72h取材，应用免疫组化和显微图像分析方法检测慢性脑低灌注状态下正常脑灌注压恢复过程中大鼠海马P21和P53蛋白的表达。结果：P21和P53蛋白在对照组大鼠脑组织中无表达．48h灰度值分别为155．34&;#177;1．18和172．91&;#177;1．37；在模型不灌注组中弱表达，48hP21和P53蛋白分别为125.12&;#177;3．56和112.10&;#177;4．46；在模型再灌注组大鼠脑组织中P21和P53蛋白于术后12h开始有表达，48h达高峰，分别为53．32&;#177;2．84和54．12&;#177;0．34，随后逐渐降低。结论：慢性脑低灌注状态下，正常脑灌注压恢复过程中可诱导P21和州P53蛋白的表达。     

人参银杏复方制剂对缺氧复氧后大鼠海马CA1区Fos表达的影响

目的:观察人参银杏复方制剂对缺氧24h复氧后不同时段Fos表达时程变化的影响,探讨人参银杏复方制剂抗缺氧复氧性脑损伤机制。方法:35只清洁级SD大鼠随机分为常氧对照组,缺氧复氧实验组和人参银杏复方制剂给药组。应用低压氧舱仿海拔8000m高空缺氧模型,采用Nissl染色、Fos免疫组化方法结合图像分析技术,观察预防性应用人参银杏复方制剂对缺氧24h复氧0,24,72h不同时段海马CA1区锥体细胞层神经元形态及Fos免疫反应阳性神经元的影响。结果:全脑缺氧24h复氧72h后,海马CA1区锥体细胞层神经元数量锐减,Fos免疫反应阳性神经元数量在缺氧24h复氧0h时为(9.3±3.8)个,较常氧对照组(16.6±4.8)个减少,差异有显著性意义(P<0.05),复氧24h时显著减少甚至消失为(2.0±1.8)个,复氧72h为(13.7±5.1)个,时接近常氧对照组水平差异无显著性意义(P>0.05)。预防性应用人参银杏复方制剂后缺氧24h复氧72h时海马CA1区锥体细胞层神经元数量未见明显减少,在缺氧24h复氧0,24,72h时段CA1区Fos免疫反应阳性神经元数量分别较缺氧复氧实验组相应时段增加,以复氧0h时增加最为显著,为(39.0±5.8)个,与常氧对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:人参银杏复方制剂对缺氧复氧后海马CA1区神经元具有保护作用,其保护作用可能与增加缺氧复氧后     

鞘内注射吗啡对坐骨神经慢性压迫性损伤大鼠腰段脊髓后角神经元中c-fos蛋白表达的影响

目的 坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)可以引起腰段脊髓后角中c-fos的表达.μ-阿片受体长期以来被认为与脊髓中的镇痛机制有关,而吗啡作为μ-阿片受体激动剂被应用于病理性疼痛的治疗中.本实验通过给坐骨神经CCI大鼠模型鞘内注射吗啡,观察其对脊髓后角中c-fos表达的影响.方法 23只Sprague-Dawley大鼠随机分为三组.其中B、C两组大鼠接受右侧坐骨神经外周结扎手术,而A组为假手术组.9 d后,A、C两组大鼠接受鞘内注射吗啡同时给B组大鼠鞘内注射生理盐水.注射后6 d,解剖三组大鼠并取出L3～L5节段的脊髓制成40μm的冰冻切片.标本在室温下进行荧光免疫染色后制成玻片.使用激光共焦点显微镜下观察各脊髓切片标本双侧c-fos的染色情况.结果 三组大鼠手术侧同侧的脊髓后角中c-fos阳性神经元较对侧明显增多.但是c组大鼠脊髓后角同侧的c-fos阳性神经元较B组少.结论 μ-阿片受体激动剂能明显减少CCI大鼠腰段脊髓后角中c-fos的表达.     

慢性脑低灌注状态缺血再灌注后大鼠海马P21和P53蛋白的表达

目的:通过建立大鼠慢性脑低灌注模型,观察慢性脑低灌注状态下正常脑灌注压恢复过程中P21和P53蛋白的表达情况。方法:实验于2003-12/2004-12在锦州医学院动物实验中心进行。取Ⅱ级Wistar雄性大鼠60只,随机分为对照组、模型不灌注组和模型再灌注组:每组动物按正常灌注压恢复后不同时间点分组(12,24,48,72h组),每个时间点各5只。采用右侧颈外静脉-颈总动脉端侧吻合和对侧横窦引流静脉结扎的方法,建立慢性脑低灌注动物模型,术后90d阻断颈部动静脉分流造成模型组大鼠脑组织再灌注。各组在恢复正常灌注后12,24,48,72h取材,应用免疫组化和显微图像分析方法检测慢性脑低灌注状态下正常脑灌注压恢复过程中大鼠海马P21和P53蛋白的表达。结果:P21和P53蛋白在对照组大鼠脑组织中无表达,48h灰度值分别为155.34±1.18和172.91±1.37;在模型不灌注组中弱表达,48hP21和P53蛋白分别为125.12±3.56和112.10±4.46;在模型再灌注组大鼠脑组织中P21和P53蛋白于术后12h开始有表达,48h达高峰,分别为53.32±2.84和54.12±0.34,随后逐渐降低。结论:慢性脑低灌注状态下,正常脑灌注压恢复过程中可诱导P21和P53蛋白的表达。     

大鼠亚低温脑复苏后神经元bcl-2和bax的表达

目的：观察亚低温脑复苏后大鼠神经元bcl-2、bax表达的变化。方法：建立心肺复苏模型，SD大鼠24只，随机分成假手术组、常温组、及低温1、2组，分别观察各组脑组织bcl-2、bax的表达。结果：和常温组相比，低温各组神经元bax的表达均明显下降（P〈0.05）；其中低温2组bax的表达下降更加明显（P〈0.05）。而bcl-2的表达无明显变化（P〉0.05）。结论：亚低温早期能通过抑制bax的表达，使bcl-2及bax比例趋于平衡，起到抑制神经元凋亡的作用。     

大鼠脑内注射凝血酶后水通道蛋白4的表达变化

目的：观察大鼠脑内注射凝血酶后水通道蛋白4表达及脑水肿的变化以及水通道蛋白4表达与血脑屏障通透性之间的关系，分析凝血酶对水通道蛋白4表达的影响。方法：实验于2005-01／1l在哈尔滨医科大学第一临床医学院中心实验室完成。取雄性Wistar大鼠90只应用数字表法随机分为6组（n=15），注凝血酶6，24，72h，5，7d组及假手术组：除假手术组外，各组大鼠脑右尾状核内注射凝血酶10U（50μL）。各组大鼠在相应时间点处死，假手术组在术后2h处死，分别进行注射点周围免疫组织化学染色和血脑屏障通透性、脑组织含水率的测定。应用伊文思蓝测定血脑屏障通透性，应用干湿重法测定脑含水率，免疫组织化学染色结果应用阳性细胞计数法评估。 结果：90只大鼠全部进入结果分析。①水通道蛋白4染色阳性细胞数：注凝血酶6h组即高于假手术组[（39．53&;#177;2．07），（18．40&;#177;1．24）个／视野，P〈0．011，注凝血酶24h组达到高峰，为（51．93&;#177;1．67）个／视野，随后下降，注凝血酶7d组仍高于假手术组[（21．60&;#177;1．45）个／视野，P〈0．01]。②脑组织含水率：注凝血酶6h组即高于假手术组（P〈0．01），注凝血酶24h组达到高峰，随后下降，注凝血酶7d组仍高于假手术组（P〈0．01）。③脑组织伊文思蓝含量：注凝血酶6h组即高于假手术组（P〈0．01），注凝血酶24h组达到高峰，随后下降，注凝血酶7d组仍高于假手术组（P〈0．01）。 结论：脑内注射凝血酶，可导致注射点周围水通道蛋白4表达的增加，其变化趋势与脑组织含水率、血脑屏障通透性的变化相一致。提示水通道蛋白4参与了大鼠脑内注射凝血酶后的脑水肿形成，其变化可能是凝血酶破坏了血脑屏障完整性的结果。     

创伤性脑损伤诱导大鼠脑内巨噬细胞亚群分化与脑外伤后神经元过度自噬和凋亡的关系研究

目的 探讨创伤性脑损伤后大鼠脑内巨噬细胞分化的亚群种类和创伤后神经元过度自噬和凋亡的关系.方法 选择45只雄性SD大鼠建立创伤性脑损伤(TBI)模型,然后根据随机数字表法分为Sham 组(假手术大鼠,右心室注射5 μL氯化钠溶液)、TBI组(TBI模型大鼠,右心室注射5 μL氯化钠溶液)和3 - MA组(TBI模型大鼠...