干细胞相关因子在大肠癌组织及SW620细胞株的表达

背景：肿瘤细胞有多种干细胞标记的表达,深入研究其表达规律有助于揭示肿瘤发病机制、完善肿瘤干细胞理论。目的：检测大肠癌实体组织中干细胞相关分子标记CD133、CD166、Oct4、Sox2、C-myc、Klf4、Bmi-1与癌旁组织的表达差异,以及CD133免疫磁珠分选阳性与阴性SW620细胞中上述基因的表达差异。方法：选临床病理诊断清楚的29例大肠癌组织标本提取RNA,RT-PCR检测CD133、CD166、Oct4、Sox2、C-myc、Klf4、Bmi-1在大肠癌组织与癌旁对照组织中的表达。CD133免疫磁珠分选SW620,提取CD133细胞与CD133阴性细胞RNA,RT-PCR检测分选后上述基因的表达差异。结果与结论：29例标本均诊断为低、中分化腺癌或黏液腺癌,干细胞相关分子标记癌组织与癌旁组织表达灰度相对值癌组织表达均高于癌旁组织（P〈0.05）。RT-PCR检测分选后CD133＋细胞CD133,CD166,Oct4,Sox2,C-myc,Klf4,Bmi-1表达,结果均高于CD133-细胞。提示,CD133、CD166、Oct4、Sox2、C-myc、Klf4、Bmi-1相关干细胞标记可作为大肠癌肿瘤干细胞标记并有望用于诊断检测。     

人脐带间充质干细胞表达胚胎干细胞相关转录因子◆

背景:Nanog、Oct4和Sox2通过调节胚胎干细胞的基因转录,对其多潜能性和自我更新的能力具有关键性的调控作用,脐带间充质干细胞中这些胚胎干细胞相关转录因子的表达情况如何还不太清楚。目的:研究脐带间充质干细胞中Nanog、Oct4和Sox2等这些胚胎干细胞相关转录因子的表达情况。方法:胶原酶和胰酶消化法培养脐带间充质干细胞;mTeSRTM1体系进行无滋养层培养人胚胎干细胞,定量PCR比较上述两种细胞中Nanog、Oct4和Sox2 mRNA表达量的差异;免疫荧光检测上述两种细胞中Nanog、Oct4和Sox2的表达情况。结果与结论:间充质干细胞表达胚胎干细胞标记Nanog、Oct4和Sox2,但Oct4主要表达在胞浆,且以Oct4B为主。脐带间充质干细胞Nanog、Oct4A和Sox2的表达量明显低于胚胎干细胞,其mRNA表达量分别为胚胎干细胞的20%,0.3%,10%左右。通过了解两种细胞Nanog、Oct4和Sox2的表达差异,可为优化脐带间充质干细胞重编程提供依据,也为进一步研究胚胎干细胞相关转录因子在成体干细胞表达起何种作用提供参考。     

大肠癌患者外周血细胞CD133的表达

背景:近期有报道称在肿瘤患者外周血中检测出了高于正常值的CD133阳性细胞.目的:观察CD133 mRNA和蛋白在大肠癌患者外周血中的表达并探讨其临床意义.方法:应用流式细胞技术与RT-PCR反应检测29例大肠癌患者和20例正常对照外周血中CD133 抗原与mRNA的表达.结果与结论:发生转移的大肠癌患者外周血中CD133阳性细胞比例显著高于正常对照及无转移的大肠癌患者(P < 0.01).正常健康人群和无转移大肠癌患者外周血中CD133mRNA表达为阴性,发生转移的部分大肠癌患者外周血中CD133mRNA表达阳性,阳性率为35.7%(5/14),在超过38个以上循环时表达为弱阳性.结果表明,无转移大肠癌患者外周血中CD133 mRNA和蛋白表达与正常对照无区别,发生转移的大肠癌患者外周血中CD133 mRNA和蛋白高于正常对照和未发生转移者.     

大肠癌患者外周血细胞CD133的表达

背景：近期有报道称在肿瘤患者外周血中检测出了高于正常值的CD133阳性细胞.目的：观察CD133 mRNA和蛋白在大肠癌患者外周血中的表达并探讨其临床意义.方法：应用流式细胞技术与RT-PCR反应检测29例大肠癌患者和20例正常对照外周血中CD133 抗原与mRNA的表达.结果与结论：发生转移的大肠癌患者外周血中CD133阳性细胞比例显著高于正常对照及无转移的大肠癌患者（P 〈 0.01）.正常健康人群和无转移大肠癌患者外周血中CD133mRNA表达为阴性,发生转移的部分大肠癌患者外周血中CD133mRNA表达阳性,阳性率为35.7%（5/14）,在超过38个以上循环时表达为弱阳性.结果表明,无转移大肠癌患者外周血中CD133 mRNA和蛋白表达与正常对照无区别,发生转移的大肠癌患者外周血中CD133 mRNA和蛋白高于正常对照和未发生转移者.     

干细胞转录因子Oct4及Sox2对宫颈癌细胞成瘤、迁移和浸润能力的影响

目的 探讨Oct4和Sox2对宫颈癌细胞(以下简称HeLa细胞)成瘤、迁移和浸润能力的影响.方法 复苏并培养HeLa细胞,分别构建Oct4及Sox2过表达质粒及空载质粒,采用脂质体方法转染至HeLa细胞,按转染质粒的不同分为4组(正常对照组、Oct4过表达组、Sox2过表达组和过表达空载组),铺至6孔板中,每组一个孔(...     

小鼠胚胎成纤维细胞重编程为多能干细胞

背景:目前胚胎干细胞研究面临伦理争议及来源困难等诸多问题,人们一直在寻找不需破坏胚胎或卵细胞的建立多潜能干细胞的方法。目的:构建小鼠诱导性多潜能干细胞系并对其进行鉴定。方法:利用反转录病毒将3个干细胞基因Oct4、Sox2、Klf4导入小鼠胚胎成纤维细胞中,将其诱导为多潜能干细胞。通过镜下观察、碱性磷酸酶染色、反转录PCR(RT-PCR)、免疫荧光实验及畸胎瘤形成实验等对诱导性多潜能干细胞形态、多能性基因表达情况、干细胞表面标记及全能性等进行鉴定分析。结果与结论:从小鼠胚胎成纤维细胞诱导而来的诱导性多潜能干细胞镜下观察呈典型的克隆状生长,圆形或椭圆形,与饲细胞分界清楚;RT-PCR、碱性磷酸酶染色及免疫荧光检测诱导性多潜能干细胞高表达胚胎干细胞相关基因及蛋白;种植在免疫缺陷鼠体内能够形成向内中外3个胚层分化的畸胎瘤,表明诱导性多潜能干细胞具有多潜能性。通过转导3种重编程因子可以将小鼠成纤维细胞诱导为类似胚胎干细胞的多潜能干细胞。     

CD44、CD133在肺癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨CD44和CD133在肺癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法:选取南昌大学第二附属医院胸外科2012年6～12月未接受过放疗、化疗且行肺癌根治术患者的新鲜肺癌组织标本40例,同时收集相应癌旁组织(距癌组织5cm的非癌组织),采用RT-PCR法检测40例肺癌组织及其癌旁组织中CD44、CD133的mRNA表达情况。结果:CD44基因阳性表达率分别为85.0%(34/40),60.0%(24/40);CD133基因阳性表达率分别为72.5%(29/40),30.0%(12/40)。CD44、CD133基因在肺癌组织中表达水平高于癌旁组织(χ2=6.270,P=0.012;χ2=14.459,P=0.000),鳞癌中表达高于腺癌。结论:CD44、CD133基因高表达可能是促进肺癌发生发展的因素之一。     

大肠癌干细胞基因 Bmi-1 表达与大肠肿瘤组织病理特征的关系简

背景：大肠癌干细胞基因Bmi-1（B-cel-specific moloney murineleukemia virus insertion site）在调节人端粒反转录酶的转录状态和活性情况,对细胞的衰老、癌变具有重要意义。 目的：观察大肠癌干细胞基因Bmi-1的表达及其与肿瘤组织病理学变化之间的关系。 方法：采用实时荧光定量PCR技术对50例大肠癌患者肿瘤组织中Bmi-1 mRNA的表达情况进行检测,采用苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色染色SP法测定患者肿瘤组织中Bmi-1蛋白的表达。结果与结论：大肠癌患者的性别、年龄、肿瘤直径对肿瘤组织中大肠癌干细胞Bmi-1 mRNA的表达差异无显著性意义。在不同性别、年龄、肿瘤直径和Duke分期的大肠癌患者肿瘤组织中大肠癌干细胞Bmi-1蛋白表达差异无显著性意义。肿瘤淋巴结转移和浸润深度超过浆膜层的大肠癌患者Bmi-1 mRNA和蛋白的表达明显高于无转移和浸润深度较低的患者（P＜0.05）。大肠癌Duke分期较高的患者体内大肠癌干细胞Bmi-1 mRNA的表达也较高（P＜0.05）。结果证实,大肠癌干细胞基因Bmi-1的表达与大肠癌的转移、浸润及Duke分期的病理特征密切相关。     

骨髓间质干细胞突变的致瘤肿瘤干细胞分离及培养

目的建立合适的骨髓间质干细胞突变的肿瘤细胞系F6(肿瘤干细胞)分离及体外长期培养方法并探讨其生物学特性。方法采用抗CD133-PE抗体经流式细胞仪分选F6肿瘤干细胞(F6 CSCs),研究不同培养体系对F6 CSCs体外生长的影响,探讨最适体外培养条件。结果一次分选获得F6 CSCs纯度达到80%。分选的F6 CSCs对Balb/c小鼠有体内致瘤能力,在含2%胎牛血清的L-DMEM营养液中可以长期稳定的培养,其CD133表面标志的表达维持在68.87%。结论低浓度胎牛血清的培养液能维持F6 CSCs的生长并保留其相应的生物学特性,这为肿瘤干细胞体外培养及研究提供了新的思路和方法。     

多种肿瘤干细胞标志物在食管鳞癌TE-1细胞系中的表达

目的:检测食管鳞癌TE-1细胞系中肿瘤干细胞标志物CD44、CD133、P75NTR、OCT-4的表达,探讨食管鳞癌的肿瘤干细胞标志物.方法:应用免疫荧光技术检测食管鳞癌TE-1细胞系中CD44、CD133、P75NTR、OCT-4的表达和定位.结果:在TE-1细胞中,CD44和CD133在所有细胞都表达且荧光定位在细胞的胞浆;P75NTR和OCT-4也在所有细胞表达,但在有些细胞荧光定位于胞核,在另外一些细胞荧光定位于胞浆.结论:在TE-1中可能存在肿瘤干细胞,但CD44、CD133、P75NTR、OCT-4不是特异的标志物.     

CD133、CD44和PSCA在肝癌组织中的表达及其意义

目的 研究CD133、CD44和PSCA在肝癌组织、癌旁肝组织和肝癌细胞系中表达的特异性.方法 采用免疫组化SP法检测CD133、CD44和PSCA在70例肝细胞癌(HCC)、50例肝内胆管细胞癌(ICC)组织及培养的HepG2细胞的表达.结果 CD133、CD44和PSCA在HCC组织中,阳性率分别为58.6％ (41/70)、61.4％ (43/70)和40％ (28/70);在ICC组织中的阳性率分别为56％ (28/50)、52％(26/50)和44％(22/50);统计学分析显示三者在HCC和ICC的阳性率差异不显著(x2=0.824,P＞0.05);但PSCA在ICC的阳性表达强度明显高于HCC(P＜0.05).CD133、CD44、PSCA阳性细胞在HCC、ICC和HepG2培养细胞中的分布均存在散在和成簇/片状两种形式,其中CD133以散在分布为主,而CD44和PSCA则多呈成簇/片状分布.在HCC和ICC癌的旁组织中,CD133、CD44和PSCA阳性表达率分别为51.4％(36/70)、47.1％(33/70)和32.9％(23/70)以及46％(23/50)、32％(16/50)和36％(18/50),比较3种蛋白在HCC和ICC的癌旁组织中的阳性率无明显差异(P＞0.05).CD133、CD44、PSCA在HCC、ICC及其癌旁组织中的阳性表达有明显的一致性.结论 CD133、CD44和PSCA可能均是肝癌干细胞的特异性表面标记物,其中CD133的特异性最强;而PSCA可能是ICC较为特异的癌干细胞表面标记物.     

CD133在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:观察CD133在胃癌组织中的表达,探讨其与临床病理参数的关系.方法:采用RT-PCR及免疫组织化学方法检测33例胃癌患者手术切除的胃癌组织及癌旁正常组织中CD133的表达.结果:CDl33 mRNA在原发胃癌组织及癌旁组织表达的相对灰度值分别为0.245±0.102与0.067±0.081,差异有统计学意义(P<0.01);胃癌组织中CD133 mRNA的表达在肿瘤直径大小、淋巴结有无转移和血管内皮生长因子-C阳性、阴性间差异有统计学意义(P<0.05),在性别,年龄、组织分化、浸润深度和TNM分期方面比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:CD133 mRNA的表达与胃癌发生及转移有相关性,对胃癌诊断及判断预后有一定意义.     

LncRNA Osilr9 coordinates promoter DNA demethylation and the intrachromosomal loop structure required for maintaining stem cell pluripotency

1. Download : Download high-res image (131KB)
2. Download : Download full-size image

     

Bmi-1在大肠癌组织中的表达及意义

目的:探讨Bmi-1基因的表迭与大肠癌病理学特征的相关性及其在大肠癌发生发展中可能的作用机制.方法:收集我院50例大肠癌组织标本,50例正常组织作为对照.利用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测标本中Bmi-1 mRNA的表达,同时利用免疫组化法检测Bmi-1和P16蛋白的表达,并结合大肠癌的临床病理学资料,分析Bmi-1基因的表达与大肠癌临床病理特征之间的关系.结果:Bmi-1 mRNA及蛋白在大肠癌组织中的表达明显高于正常组织(P＜0.05),免疫组化提示大肠癌组织高表达Bmi-1蛋白的同时伴有P16蛋白的低表达(P＜0.05).Bmi-1的表达与肿瘤体积大小、Dukes分期、淋巴结转移、远处转移和P16蛋白的表达水平密切相关(P＜0.05),而与患者性别、年龄、血清CEA、血清CA19-9、P53等无相关性(P＞0.05).结论:Bmi-1癌基因可能通过抑制P16蛋白的表达而促进大肠癌的发生发展,检测其表达可判断大肠癌的预后.     

基因OCT4、CD133在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的比较OCT4、CD133在非小细胞肺癌（NSCLC）组织、癌旁组织及正常肺组织中的表达水平,并探讨2者与临床特征之间的关系。方法随机选取NSCLC癌组织50例、癌旁组织及正常肺组织各20例,采用免疫组化法检测OCT4和CD133的表达情况,分析2者与NSCLC患者临床病理特征的关系。结果癌旁组织及正常肺组织OCT4、CD133蛋白的表达率均显著低于NSCLC癌组织。OCT4在低分化及未分化癌组织中的表达率高于高、中分化组织,OCT4和CD133在有远处转移的NSCLC癌组织中的表达率高于无远处转移组织。50例NSCLC癌组织中,OCT4与CD133共同阳性15例,共同阴性12例,2者之间有明显相关性（P=0．0218）。结论OCT4和CD133在正常细胞向恶性细胞转化的过程中可能扮演了重要角色,检测OCT4和CD133的表达可能有助于对肺癌的早期诊断,为肿瘤于细胞标记物的确定、分化以及对肿瘤干细胞的靶向治疗提供理论依据。     

肿瘤干细胞标志物CD133检测在胃癌诊断中的意义

目的 检测胃癌组织和癌旁组织中肿瘤干细胞标志物CD133的表达,探讨其与临床病理参数的相关性和在肿瘤诊断中的意义。 方法 收集36例胃癌患者手术切除的癌组织和对应的癌旁组织,用RT-PCR检测CD133的mRNA表达,用免疫组织化学技术检测CD133蛋白质的表达,分析CD133 mRNA在胃癌组织中的表达与临床病理参数的相关性。 结果 CD133 mRNA表达阳性率为胃癌组织66.7%（24/36）,癌旁组织为16.7%（6/36）,差异有统计学意义（P＜0.01）;胃癌组织中CD133表达阳性率与肿瘤分化状态相关,低、未分化组高于中、高分化组（P＜0.01),但与年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度、TNM分期和有无淋巴结转移无关。 结论 肿瘤干细胞标志物CD133的表达与胃癌的发生及分化状态相关,可作为胃癌诊断的一个新的分子标志物。     

结直肠肿瘤干细胞体外培养形态、标志物及转移动力学特征

目的：探讨结直肠肿瘤干细胞在体外分化过程中细胞形态、干细胞及转移相关标志物表达和转移侵袭能力的变化,为进一步研究结直肠肿瘤干细胞分化走向及转移侵袭能力改变提供实验依据。方法取来源于人结直肠癌的细胞系 HCT116,无血清培养分离出 CD133＋细胞,加血清诱导分化,相差显微镜下观察其形态变化;在未分化状态下无血清培养第7天和14天与血清诱导分化后收集细胞,利用流式细胞仪检测干细胞标志物 CD133＋其表达量,采用激光共聚焦、RT-PCR 和免疫荧光检测 CD133＋、N-cadherin 及 Vimentin 表面标记分子的表达,Tr-answell 小室检验 CD133＋细胞的转移侵袭能力。结果（1）细胞形态：无血清培养分离的 CD133＋细胞,在生长过程中聚集成规则的细胞球,血清诱导后即贴壁生长,贴壁形态与同来源细胞形态一致,且再次无血清悬浮培养后聚集成球稳定生长。（2）标志物变化：结直肠肿瘤干细胞未分化时 CD133＋、N-cadherin 及 Vimentin 表面标记分子均高表达,流式细胞仪检测未分化细胞 CD133第7天表达率为（20．4±0．52）％,第14天表达率为（78．5±2．80）％,分化后表达率为（0．50±0．17）％。（3）转移侵袭能力：CD133＋细胞穿过孔膜细胞数为104．67±14．64,显著高于血清诱导的分化细胞28．67±6．5（P ＜0．05）。结论细胞形态、标志物表达及转移能力的改变均表明高表达 CD133＋的 HCT116结直肠癌肿瘤干细胞可定向分化为同源的结直肠癌细胞,且 CD133＋细胞血清诱导分化后通过 MET而导致转移侵袭能力下调。     

基因OCT_4、CD_(133)在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的比较OCT4、CD133在非小细胞肺癌(NSCLC)组织、癌旁组织及正常肺组织中的表达水平,并探讨2者与临床特征之间的关系。方法随机选取NSCLC癌组织50例、癌旁组织及正常肺组织各20例,采用免疫组化法检测OCT4和CD133的表达情况,分析2者与NSCLC患者临床病理特征的关系。结果癌旁组织及正常肺组织OCT4、CD133蛋白的表达率均显著低于NSCLC癌组织。OCT4在低分化及未分化癌组织中的表达率高于高、中分化组织,OCT4和CD133在有远处转移的NSCLC癌组织中的表达率高于无远处转移组织。50例NSCLC癌组织中,OCT4与CD133共同阳性15例,共同阴性12例,2者之间有明显相关性(P=0.0218)。结论 OCT4和CD133在正常细胞向恶性细胞转化的过程中可能扮演了重要角色,检测OCT4和CD133的表达可能有助于对肺癌的早期诊断,为肿瘤干细胞标记物的确定、分化以及对肿瘤干细胞的靶向治疗提供理论依据。     

CD133在结直肠癌组织中的表达及其与患者预后关系的研究

目的探讨CD133作为一种癌症干细胞标志物在结直肠癌组织中的表达与结直肠癌临床病理特征的关系及与患者预后的关系。方法利用免疫组化的方法观察CD133在50例结直肠癌组织中的表达情况,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。结果 CD133在结直肠癌组织的表达明显高于正常黏膜组织(P0.05),其表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况及临床分期有关(P0.05)。Kaplan-Meier生存分析,CD133高表达组5年生存率为37.6%,CD133低表达组5年生存率为53.3%,两组间有明显差异(P0.05)。结论 CD133在结直肠癌组织中高表达并影响结直肠癌患者的预后,其表达水平越高预后越差。