蛋白质组学在检验医学中的应用前景

蛋白质是生命活动的体现者和直接的执行者，功能基因经转录、翻译、修饰等形成功能蛋白质，研究表明，机体内功能基因与蛋白质并非一一对应．说明基因转录mRNA到蛋白质表达过程极其复杂．一个基因并不只表达一种相应的蛋白质。可能会有几种，甚至几十种，其表达是基因、环境、机体生理状态相互作用的结果．故执行生命活动的蛋白质具多样性、动态性。蛋白质特有的活动规律．如蛋白质的修饰、加工、转运、定位、代谢以及蛋白质之间或与其他生物大分子的相互作用等均无法从基因水平研究获知．使得沟通基因、蛋白质和疾病发生之间的蛋白质组成为当前生命科学的研究热点之一．也必将给检验医学带来巨大变革。     

骨髓基质细胞作为人骨形态发生蛋白-2基因受体细胞的可行性研究

目的:通过检测hBMP-2基因在受体细胞中瞬时表达水平,探讨骨髓基质细胞作为hBMP-2基因受体细胞的可行性。方法:应用脂质体介导的方法将携带hBMP-2基因的重组载体PcDNA3-hBMP-2导入体外培养的骨髓基质细胞中,分别应用原位技术和酶联免疫吸附方法检测目的基因在受体细胞内mRNA和蛋白质的存在与表达状况。结果:在mRNA水平,可检测到hBMP-2基因在阳性细胞进行了转录;在蛋白质水平,从细胞的培养基中可检测到hBMP-2蛋白质。结论:骨髓基质细胞可以作为hBMP-2基因的受体细胞,基因表达可分泌hBMP-2蛋白质。     

正常乳腺组织和浸润性乳腺癌组织中淋巴增强因子-1(LEF-1)转录因子的蛋白质表达水平的分析

目的通过实验对正常乳腺组织和浸润性乳腺癌组织中淋巴增强因子-1(LEF-1)转录因子的蛋白质表达水平进行分析,观察其差异。方法对从手术获得的新鲜乳腺组织做冰冻切片,经HE染色分析鉴定出正常乳腺组织和乳腺浸润癌组织。用显微切割方法获取目标组织,再采用蛋白质免疫印迹法(Westen blot)检测正常乳腺组织和乳腺浸润癌组织中LEF-1转录因子的蛋白质表达差异。结果乳腺浸润癌组织中的LEF-1转录因子的蛋白质表达水平高于正常乳腺组织中的LEF-1转录因子的蛋白质表达水平。结论LEF-1转录因子的表达与乳腺癌的浸润相关,正常乳腺组织和乳腺浸润癌组织中的LEF-1转录因子的蛋白质表达水平的分析是研究LEF-1转录因子的调控作用机理的基础。     

miRNAs在乳腺癌侵袭与转移中作用的研究进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,并常于后期侵袭转移,它的转移涉及诸多因素,并有多种基因及其蛋白质产物参与该过程发生.近年相关研究发现,miRNA能够在转录水平调节基因的表达,进而影响乳腺癌细胞的侵袭和转移,因此对影响乳腺癌侵袭和转移的miRNA的研究成为乳腺癌的研究热点[1].     

蛋白质组学在泌尿系肿瘤应用中的研究进展

随着人类基因组全序列草图的完成，从基因水平向蛋白质水平的深化，已成为生命科学研究的迫切需要和新的任务。蛋白质组学的建立为研究蛋白质水平的生命活动开辟了更为广阔的前景，提供了新型有效的研究手段。从蛋白质整体水平上研究肿瘤的发生与转移，寻找与肿瘤发生及转移相关的新的蛋白质、肿瘤特异性的标志物及肿瘤药物治疗的靶标，对肿瘤的诊治将起到重要作用。本文阐述的是关于蛋白质组学在泌尿系肿瘤应用中的研究进展。     

实时定量RT-PCR技术测定初治白血病患者常见融合基因转录子水平及其标准化的探讨

目的 了解白血病常见融合基因M—bcr—abl（表达产物为P210^bcr-abl）、m—bcr—abl（表达产物为P190^bcr-abl）、TEL—AML1、AML1-ETO、PML—RARα、CBFβ-MYH11在初治白血病患者中的表达水平。方法 采用基于TaqMan探针的实时定量RT—PCR（RQ—PCR）技术检测195例白血病患者骨髓细胞融合基因转录子水平，其中M—bcr—abl^＋慢性粒细胞白血病慢性期（CML—CP）50例、M—bcr—abl^＋急性淋巴细胞白血病（ALL）10例、m—bcr—abl^＋ALL19例、TEL—AML1^＋ALL11例、AML1-ETO^＋急性髓系白血病（AML）30例、PML—RARα急性早幼粒细胞白血病（APL）58例、CBFβ-MYH11^＋AML患者17例，并检测13例M—bcr-abl^＋CML-CP患者的外周血细胞融合基因转录子水平。以abl作为内参基因，融合基因转录子水平以融合基因转录子拷贝数／abl基因转录子拷贝数×100％表示。结果CML—CP患者骨髓及外周血M-bcr—abl转录子水平相似（中位值分别为30％和35％，P〉0.05）、ALL患者M—bcr—abl及m-bcr-abl转录子水平相似（中位值分别为64％和54％，P〉0．05），ALL患者M—bet—abl转录子水平明显高于CML—CP患者（P〈0．001）。ALL患者TEL—AML1转录子中位水平为228％。表达特异性融合基因的AML患者中，AML1-ETO转录子水平明显高于CBFβ-MYH11及PML—RARα（中位值分别为388％，145％和47％，P值均〈0．001），CBFβ-MYH11转录子明显高于PML—RARα（P〈0．001）。L型、V型及S型PML—RARα转录子中位水平分别为45％、44％及55％，L型明显低于S型（P=0．04）。结论 不同类型融合基因转录子在初治白血病患者中的水平不同，并有个体差异。初治患者融合基因转录子水平的测定不仅为检测微量残留病、评价疗效提供基准值，而且是不同实验室间数据比较、实现标准化的基础。     

NF-κB及其在恶性血液病中的作用

核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)是体内重要的转录因子,是一类能与多种基因启动子或增强子部位κB序列(GGGACTTTCC)发生特异性结合并促进其转录的蛋白质.     

蛋白质组学在检验医学中的应用前景

蛋白质是生命活动的体现者和直接的执行者,功能基因经转录、翻译、修饰等形成功能蛋白质,研究表明,机体内功能基因与蛋白质并非一一对应,说明基因转录mRNA到蛋白质表达过程极其复杂,一个基因并不只表达一种相应的蛋白质,可能会有几种,甚至几十种,其表达是基因、环境、机体生理状态相互作用的结果,故执行生命活动的蛋白质具多样性、动态性.蛋白质特有的活动规律,如蛋白质的修饰、加工、转运、定位、代谢以及蛋白质之间或与其他生物大分子的相互作用等均无法从基因水平研究获知,使得沟通基因、蛋白质和疾病发生之间的蛋白质组成为当前生命科学的研究热点之一,也必将给检验医学带来巨大变革[1,2].     

谷氨酰半胱氨酸合成酶调节机制研究进展

谷氨酰半胱氨酸合成酶是由重链和轻链构成的异二聚体 ,催化并调节谷胱甘肽生物合成。其活性可在基因转录水平、翻译后水平等各个不同环节调节 ,但主要在基因转录水平