被动凝集法与间接免疫荧光法在肺炎支原体感染早期诊断中应用研究

目的:探讨被动凝集法与间接免疫荧光法应用于肺炎支原体感染早期诊断的价值,为临床提供参考依据。方法:选取我院2015年1月~2016年6月所收治的1 218例高度疑似肺炎支原体感染患者,均给予被动凝集法和间接免疫荧光法进行临床检测,比较两种检测方法 MP-Ig M阳性率。结果:1 218例患者中,采用被动凝集法阳性例数为476例(39.08%),而采用间接免疫荧光法阳性例数为304例(24.96%),差异具有统计学意义(P<0.01);两种方法联合检测阳性符合率为79.93%(243/304),阴性符合率为74.51%(681/914),总符合率为75.86%(924/1 218);间接免疫荧光法304例阳性例数中,被动凝集法有61例阴性例数,间接免疫荧光法914例阴性例数中,被动凝集法有233例阳性例数;两种检测方法联合检测阳性率为44.09%。结论:被动凝集法检测Ig M灵敏度更高,可作为早期诊断有力依据;但两种检测方法联合检测阳性率更高,值得临床深入研究并推广应用。     

胶体金免疫层析法检测SARS-CoV-2血清抗体的临床价值探讨

目的通过对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)免疫球蛋白(Ig)M和总抗体(即IgM/IgG)的检测,探讨应用胶体金免疫层析法(GICA法)在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)诊断中的应用价值。方法收集76例患者共计83份血清,其中32例为SARS-CoV-2核酸阳性患者(确诊组),44例为SARS-CoV-2核酸阴性患者(对照组)。确诊组中7例患者为两次时间点采集标本。采用GICA法检测SARS-CoV-2 IgM和总抗体。结果GICA法检测SARS-CoV-2 IgM的灵敏度50.00%(16/32),特异度90.91%(40/44),符合率73.68%(56/76),阳性预测值80.00%(16/20)、阴性预测值71.43%(40/56);SARS-CoV-2总抗体检测的灵敏度68.75%(22/32)、特异度97.73%(43/44)、符合率85.53%(65/76)、阳性预测值95.65%(22/23)、阴性预测值81.13%(43/53)。GICA法检测SARS-CoV-2 IgM和总抗体的特异度均大于90%,符合率均大于70%,满足临床需求。结论GICA法检测SARS-CoV-2 IgM和总抗体,标本采集易标准化,报告时间快,灵敏度不高,但特异度较高,有辅助诊断的价值。     

快速培养法与实时荧光定量聚合酶链反应检测肺炎支原体的对照研究

目的探讨快速培养法和实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)的异同。方法对2011年1～12月住院的218例疑似肺炎支原体肺炎患儿采集咽拭子,同时用快速培养法和实时FQ-PCR法检测MP。结果快速培养法与实时FQ-PCR法诊断肺炎支原体肺炎的灵敏度、阳性预测值、假阴性率及诊断符合率差异无统计学意义(P>0.05);实时FQ-PCR法诊断肺炎支原体肺炎的特异度明显高于快速培养法,假阳性率明显低于快速培养法,差异有统计学意义(P<0.05)。二者联合检测的灵敏度、阴性预测值及诊断符合率分别为93.8%、90.7%和90.8%,均高于快速培养法和实时FQ-PCR法(P<0.05);假阴性率为6.2%,明显低于快速培养法和实时FQ-PCR法(P<0.05);联合检测的特异度为86.7%,明显高于快速培养法(P<0.05)。结论两种方法的敏感度差别不大,而实时FQ-PCR法的特异性优于快速培养法。应用这两种不同方法学原理的检测方法组合检测,取长补短,在提高肺炎支原体感染检出率的同时,还可以互相佐证,减少实验误差,提高检测的准确性。     

酶联免疫吸附法和间接免疫荧光法检测抗dsDNA抗体方法的比较

目的 比较酶联免疫吸附法(ELISA)和间接免疫荧光法(IIF)检测抗dsDNA抗体的检出情况及符合率.方法 用酶联免疫吸附法和间接免疫荧光法同时检测286份临床疑为系统性红斑狼疮(SLE)的病人血清.结果 286份样本中ELISA法检出31例抗dsDNA抗体阳性,255例抗dsDNA抗体阴性,而在ELISA法检出31例抗dsDNA抗体阳性中IIF法检测仅有13例阳性,阳性符合率仅为41.94%.ELISA法检出的255例抗dsDNA抗体阴性标本中IIF法检测有255例阴性,阴性符合率100%.ELISA法和IIF法检测抗dsDNA抗体的阳性检出率有显著性差异.结论 ELISA法和IIF法检测抗dsDNA抗体的阳性检出率差异有统计学显著性意义(P＜0.05),ELISA法检测抗dsDNA抗体简便、快速、设备要求不高,可以用于大批量的抗dsDNA筛查,但因为特异性不高,假阳性较多,因此有条件的实验室最好采用IIF法对阳性结果进行复检确认.     

肺炎支原体快速培养法与抗原量子点免疫层析法快速检测技术在支原体肺炎诊断中的应用

目的探究肺炎支原体抗原量子点免疫层析法快速检测技术对支原体肺炎(MP)的诊断效果。方法研究对象为2015年6月至2016年6月收入的80例支原体肺炎病人,分别采用肺炎支原体抗原量子点免疫层析法快速检测技术与肺炎支原体快速培养法进行检测。比较两种检测方法的阳性率、特异性、敏感度。结果抗原量子点免疫层析法灵敏度(91.25%)、特异度(96.25%)显著高于快速培养法的灵敏度(81.25%)、特异度(72.50%)(χ2=4.206、30.549,P<0.05)。抗原量子点免疫层析法阳性率(97.50%)与快速培养法阳性率(92.50%)比较差异无统计学意义(χ2=2.632,P>0.05)。结论抗原量子点免疫层析法在灵敏度及特异度更具优势,且检测时间短。     

不同方法检测肺炎支原体的比较

目的研究不同方法检测肺炎支原体的灵敏度和特异性。方法采集199例肺炎患者的血清和咽拭子,分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量PCR技术检测肺炎支原体IgM抗体和DNA。结果 199例肺炎患者按照支原体肺炎诊断标准,61例确诊为支原体肺炎,ELISA法和PCR法检测的灵敏度分别为86.9%和96.7%,特异性分别为78.3%和97.1%。结论 PCR法检测的灵敏度和特异性均高于ELISA法。     

支原体抗体检测临床应用研究

目的探讨支原体抗体检测在肺炎中的临床应用价值。方法收集2009年3月至2011年2月该院儿科初诊患儿408例,患儿均有下呼吸道感染。另选59例体检健康儿童作为对照组。采集两组人群的静脉血分离血清,4℃冰箱保存,2～5d内测定,以SERODIA-MYCOⅡ凝集试验法和ELISA法同时检测支原体抗体。结果对照组59例两种方法测试结果均为阴性。被动凝集法支原体抗体检出阴性率为16.9%;ELISA法支原体抗体检出阳性率为18.1%。被动凝集法与ELISA法两组间比较差异无统计学意义(χ2=0.093,P>0.05)。结论 ELISA法和被动凝集法检测肺炎支原体抗体(MP-IgM)均可作为早期诊断肺炎支原体感染的指标之一。被动凝集法用于检测肺炎支原体感染,具有灵敏度高、特异性强的优点。但ELISA法更适合大批量标本的检测,适于基层医院推广应用。     

肺炎支原体抗体检测方法间差异结果的意义探讨

目的通过酶联免疫吸附(ELISA)法抗体分型检测探讨被动凝集法(PA)和间接免疫荧光法(IFA)检测肺炎支原体出现的不一致结果的意义,提高实验室对肺炎支原体的检测及结果解释能力。方法通过ELISA法对PA法和IFA法检测结果中出现的不一致的样本进行分型检测(IgG和IgM),对所测结果结合临床资料进行对比研究。结果 IFA和ELISA在检测MP-IgM上存在的方法学差异有统计学意义(182例标本经配对卡方检验得P0.05,Kappa=0.294);PA法和ELISA在不区分抗体分型的情况下两者的阳性检出率差异无统计学意义(P0.05,Kappa=0.497);IFA阳性、PA为阴性的组和PA为阳性、IFA为阳性或阴性的两组间类风湿因子(RF)检出差异存在统计学意义(P0.01),RF可能是造成IFA法假阳性的一个原因。结论被动凝集法和IFA法联合检测均为阳性一致结果的个体和临床治疗符合率极高,但当两者不一致时需结合多方面因素分析,尤其是当PA为阴性而IFA为阳性的时候。在实验室方面建议将IFA检测结果分阳性、弱阳性、阴性发出报告,而临床医生处理这种结果需要结合动态监测PA结果做出正确诊断。     

两种血清学检测方法在婴、幼儿肺炎支原体感染早期诊断中的应用研究

目的 比较和分析肺炎支原体抗体的两种血清学检测方法,探讨其在婴、幼儿肺炎支原体感染早期诊断中的临床意义.方法 收集急性呼吸道感染患儿3 365例,根据不同年龄将其分为0～〈1岁组（n=1 267）、1～〈3岁组（n=1 709）、3～〈6岁组（n=257）、6～〈13岁组（n=132）.采用被动颗粒凝集法（PPA）及间接免疫荧光法（IFA）检测肺炎支原体抗体MP-IgM,对IFA和PPA检测结果不一致的患儿进行双份血清MP-IgM抗体效价检测.结果 0～〈1岁和1～〈3岁组患儿IFA检测的MP-IgM阳性率高于PPA检测（P＜0.01）,3～〈6岁组和6～〈13岁组患儿采用两种方法检测的MP-IgM阳性率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）.两种检测方法的阳性符合率为95.53%（1 113/1 165）,阴性符合率为89.45%（1 968/2 200）,总符合率为91.56%（3 081/3 365）.28例患儿双份血清MP-IgM抗体效价检测中,24例患儿的肺炎支原体抗体升高4倍.结论 IFA和PPA联合检测可有效提高肺炎支原体感染早期诊断的敏感性和特异性.     

两种不同方法检测血清肺炎支原体抗体结果比较

目的 探讨被动凝集法和酶联免疫吸附法(ELISA)在支原体肺炎诊断中的价值及临床意义.方法 采用被动凝集法和ELISA对1 633例疑似肺炎支原体(MP)感染患儿进行血清MP IgM检测.结果 1 633例血清标本中,被动凝集法检测阳性率为17.4%(285/1 633),ELISA检测阳性率为21.0%(343/1 633),2种方法阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.05).285例被动凝集法检测阳性标本ELISA检测均为阳性;1 348例被动凝集法检测阴性标本中,有58例ELISA检测为阳性,被动凝集法漏检率为3.55%(58/1 633).结论 被动凝集法用于支原体肺炎疑似患者的初筛,当抗体效价小于1∶160,但临床症状支持阳性诊断时,需进行ELISA检测以提高检出率,从而避免漏诊.     

肺炎支原体合并传染性单核细胞增多综合征11例分析

对2007年1月～2008年2月收治的肺炎支原体合并传染性单核细胞增多综合征11例患者,回顾性分析其发病机制、临床特征、实验室检测结果、治疗方法及效果.肺炎支原体合并传染性单核细胞增多综合征无性别差异,以学龄前儿童多见,ELISA法检测肺炎支原体IgM抗体呈强阳性,经过随访支原体IgM抗体逐渐下降,支原体IgG抗体逐渐上升,MP-1gG恢复期比急性期抗体滴度≥4倍以上.EB病毒IgM抗体、巨细胞病毒IgM抗体、弓形虫IgM抗体、腺病毒lgM抗体均为阴性.治疗时首选阿奇霉素,再结合该病所致的多器官损害的特点给以丹参、维牛素C、强力宁等药物治疗.早期使用适当的抗牛素可以减轻症状,缩短病程至7～10d.联合检测肺炎支原体、EB抗体、巨细胞病毒抗体及异型淋巴细胞可以提高传染性单核细胞增多综合征的临床诊断符合率.     

结核感染T细胞酶联免疫斑点试验与结核抗体试验在诊断骨关节结核中的临床应用价值

目的 探讨与分析结核感染T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)与结核抗体试验在诊断骨关节结核中的临床应用价值。方法 选取2012年1月～2014年12月在无锡锡山人民医院接受诊治的324例疑似骨关节结核病患者为研究对象,采取随机方法将入选者分为T-SPOT.TB试验组和结核抗体试验组,每组162人,T-SPOT.TB试验组患者采取结核感染T细胞酶联免疫斑点试验,结核抗体试验组则采取结核抗体试验,对比分析两组诊断方式的灵敏度与特异度。结果 T-SPOT.TB试验组的灵敏度和特异度分别为93.43%和84.00%,结核抗体试验组的灵敏度和特异度分别为40.44%和53.85%,组间相比差异有统计学显著性意义(χ²=184.62,P＜0.05; χ²=7.86,P＜0.05)。T-SPOT.TB试验组的假阳性率、假阴性率分别为16.00%和6.57%,结核抗体试验组的假阳性率、假阴性率分别为26.92%和59.56%,组间相比差异有统计学显著性意义(χ²=7.86,156.18,均P＜0.05)。此外, T-SPOT.TB试验组的阳性预测值和阴性预测值分别为96.97%和70.00%,结核抗体试验组的阳性预测值和阴性预测值分别为88.71%和14.74%,组间相比差异有统计学显著性意义(χ²=20.27,73.06,均P＜0.01)。结论 与结核抗体试验相比,结核感染T细胞酶联免疫斑点试验在诊断骨关节结核时具有灵敏度高、特异度高等特点,值得推广使用。     

新型ELISA检测戊型肝炎病毒IgM抗体的敏感度与特异度评价

目的 评估基于戊型肝炎病毒（HEV）主要免疫表位多肽及其截短多肽的新型ELISA检测抗HEV IgM的敏感度与特异度.方法 根据抗HEV抗体与主要免疫表位多肽的高反应性以及与截短多肽的不反应性,分别以两种多肽为包被抗原,建立新型ELISA法,检测2007-2012年收集的612例可疑HEV感染者血清抗HEV IgM,并与万泰HEV IgM抗体诊断试剂盒检测结果比较,结果不一致血清用免疫印迹法（Western blotting）确认,χ^2检验比较两种试剂灵敏度和特异度.结果 抗HEV IgM检测中,新型ELISA阳性326例,阴性286例;万泰试剂阳性370例,阴性242例;两种试剂同时阳性320例,同时阴性236例.在万泰试剂阳性而新型ELISA阴性的50例中,Western blotting证实阳性21例,阴性29例;在万泰试剂阴性而新型ELISA阳性的6例中,Western blotting显示阳性与阴性各3例.以两种试剂同时阳性或Western blotting阳性为标准,万泰试剂与新型ELISA灵敏度分别为99.1％（95％ CI：0.972-0.998）和93.8％（95％ CI：0.907-0.961）,差异有统计学意义（χ^2=13.988,P＜0.001）;特异度分别为89.2％（95％ CI：0.847-0.925）和98.9％（95％ CI：0.965-0.997）,差异有统计学意义（χ^2=22.466,P＜0.001）.结论 与万泰试剂相比,新型ELISA检测抗HEV IgM敏感度略低,但特异度较好,可减少抗HEV IgM检测中的假阳性.     

IFA和ELISA在肿瘤患者血清SARS-CoV抗体测定中的对比分析

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光法(IFA)检测严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoY)&体在SARS病原中诊断中的特异性及其在肿瘤患者血清中的假阳性问题。方法 应用ELISA和IFA检测了111例正常对照和40例肿瘤患者血清中SARS-CoV抗体的阳性率。结果在111例正常对照和40例肿瘤患者中,IgM抗体均阴性,IgG抗体在正常对照中的阳性率为3.6%(4/111),在肿瘤患者中的阳性率17.5％(7/40),IgC抗体诊断SARS的特异性为96.4％,两种抗体同时阳性诊断SARS的特异性为100％。经IFA检测,上述SARS-CoV抗体阳性者均为阴性。结论 IFA诊断SARS的特异性为100％,ELISA诊断SARS存在一定的假阳性。应用ELISA测定SARS-CoV抗体时,应同时测定两种抗体以降低诊断的假阳性率,提高诊断的特异性。     

免疫印迹法在抗dsDNA抗体检测中的应用

目的 评价免疫印迹法检测抗dsDNA抗体的敏感性和特异性.方法 用免疫印迹法分别与酶联免疫吸附法(ELISA)和间接免疫荧光法(IIF)检测样本进行比对,来验证免疫印迹检测抗dsDNA抗体的敏感性和特异性.选用抗dsDNA抗体阳性样本30 份,抗核抗体(ANA-IIF)阳性样本30份,阴性样本76份,对检测结果进行统计学分析.结果 用免疫印迹法检测抗dsDNA抗体,结果与ELISA 法和IIF法符合率高,敏感度达96.7%特异度达98.7 %.结论 用免疫印迹法检测抗dsDNA抗体 可获得很好的敏感度和特异度,且试剂盒操作简单方便,结果判读容易,适合基层检验人员操作,值得在临床推广,作为常规初筛实验.     

酶联免疫吸附试验与化学发光法检测TORCH抗体的方法学对比研究

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)与化学发光法(CLIA)分别检测TORCH抗体的价值。方法将2017年2月至2019年7月在该院进行孕前或孕期的致畸五项(TORCH抗体)检查的632例孕妇纳入研究,采集静脉血标本进行ELISA、CLIA检测,并采用病原体培养分离鉴定结果作为金标准,以此对比两种检查方法的阳性率、灵敏度、特异度、准确性、阳性预测值以及阴性预测值。结果经检测,ELISA检测的TOX、RV、CMV、HSVⅠ及HSVⅡ抗体的阳性率均显著低于使用CLIA检测的阳性率,差异均有统计学意义(P<0.05);CLIA检测TORCH抗体的灵敏度(98.46%)及阴性预测值(99.59%)显著高于ELISA检测结果(60.00%,90.55%),差异均有统计学意义(P<0.05);CLIA检测的特异度(96.41%)、准确性(96.84%)及阳性预测值(87.67%)与ELISA检测(99.20%,91.14%,95.12%)比较,差异均无统计学无意义(P>0.05)。结论ELISA与CLIA在检测TORCH抗体的准确性、特异度及阳性预测值上差异并不明显,均可作为临床诊断的有效手段,而在检测的阳性率、灵敏度以及阴性预测值上CLIA更胜一筹。     

血清肺炎支原体抗体ELISA与金标法检测结果比较

目的探讨分析两种常用血清学方法检测肺炎支原体抗体(MP-IgM)的临床效果。方法采用金标法(GICA)和ELISA对1 098例疑似肺炎支原体感染的患儿进行血清MP-IgM检测,并检测结果进行对比分析。结果 1 098例中采用金标法检测阴性908例、阳性190例,阳性率为17.30%(190/1 098);采用酶联免疫吸附试验检测阴性850例,阳性248例,阳性率为22.59%(248/1 098),两种方法的阳性率差异有统计学意义(P<0.05);以酶联免疫吸附试验法为标准,金标法存在假阴性58例,假阴性率(阳性漏检率)为5.23%(58/1 098)。结论两种方法检测患儿血清肺炎支原体抗体互有优缺点,金标法操作简单,报告结果快速,但存在一定的假阴性(阳性漏检),可作为初筛试验;酶联免疫吸附试验法灵敏度、特异性高,但操作相对繁琐复杂,费时费力,可作为金标法阴性但同时又支持临床阳性诊断患儿的复检项目。     

抗双链DNA抗体和抗核小体抗体定性检测对系统性红斑狼疮的诊断价值

目的:评价免疫印迹法抗双链DNA(ds-DNA)抗体、抗核小体抗体(ANuA)及绿蝇短膜虫间接免疫荧光法抗dsDNA抗体检测在系统性红斑狼疮(SLE)中的诊断价值。方法:分别运用免疫印迹法、绿蝇短膜虫间接免疫荧光法及ELISA法检测166例SLE疾病活动期(包括初发和复发)患者血清中抗ds-DNA抗体、ANuA的水平。以酶联免疫吸附法(ELISA)检测结果为标准,评价抗ds-DNA抗体和ANuA定性检测对SLE的诊断价值。结果:免疫印迹法检测抗ds-DNA抗体及ANuA诊断SLE的阳性符合率分别为73.33%、66.28%,绿蝇短膜虫间接免疫荧光法检测抗ds-DNA抗体诊断SLE的阳性符合率为68.57%;随着抗ds-DNA抗体和ANuA滴度的减小,其免疫印迹法或间接免疫荧光法检测阳性符合率均降低(P0.05)。结论:抗ds-DNA抗体、ANuA定性检测诊断SLE的阳性率均不理想,建议在ELISA检测抗ds-DNA抗体和ANuA诊断SLE的基础上采用。     

3种梅毒血清学检测方法的应用评价

目的评价ELISA法、快速血浆反应素试验(RPR)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)3种方法在梅毒检测中的应用价值。方法应用ELISA、RPR和TPPA 3种方法对175例梅毒患者和120例非梅毒患者进行检测,比较3种检测方法的灵敏度、特异度、假阴性率和假阳性率。结果 RPR法、ELISA法及TPPA法的灵敏度分别为74.28%、100.00%和100.00%;特异度分别为78.33%、96.66%和100.00%。ELISA法和TPPA法检测梅毒的灵敏度和特异度均高于RPR法,差异均有统计学意义(P<0.05)。RPR法的假阴性率和假阳性率分别为25.71%和21.66%,均高于ELISA法和TPPA法。结论 RPR法不适于梅毒抗体的筛查试验,ELISA法可替代RPR法作为梅毒检测的筛查试验,TPPA法可作为ELISA法阳性的确证试验。     

联合检测3种自身抗体在类风湿关节炎中的应用

目的 探讨类风湿因子（RF）、抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体及抗角蛋白抗体（AKA）联合检测在类风湿关节炎（RA）中的临床意义.方法 用速率散射比浊法检测RF,ELISA法检测抗-CCP抗体,间接免疫荧光染色法检测AKA,并对3种抗体进行比较分析.结果 185例RA患者RF、抗-CCP、AKA阳性率分别为74.6%、68.1%、45.9%;138例非RA组患者RF、抗-CCP、AKA阳性率分别为14.5%、3.6%、1.4%;RF、抗-CCP、AKA对RA诊断的特异度分别为85.5%、96.4%、98.6%;三者联合时敏感度89.2%,特异度99.3%.抗-CCP和AKA抗体在RF阴性的RA患者中分别有42.6%和14.9%的阳性率.结论 联合检测RF、抗-CCP及AKA抗体可提高对RA诊断的敏感度和特异度,有助于早期RA的诊断.