金雀异黄素抗肿瘤的研究进展

金雀异黄素是一种从大豆中提出的异黄酮类化合物，属植物雌激素，其抗肿瘤作用研究取得了很大进展。金雀异黄素具有抑制肿瘤细胞增殖及抑制癌基因表达等功效。本文就金雀异黄素抗肿瘤作用的进展进行综述。     

金雀异黄素对人肝癌细胞SMMC-7721抑制作用的研究

目的研究金雀异黄素对人肝癌细胞SMMC-7721生长的影响。方法应用MTT法、流式细胞术和透射电镜超微结构观察分析金雀异黄素对SMMC-7721细胞生长的作用，细胞周期及形态学的影响。结果金雀异黄素明显抑制人肝癌细胞SMMC-7721的生长，G2／M期细胞增加。透射电镜超微结构观察发现金雀异黄素使肿瘤细胞超微结构改变。结论金雀异黄素可通过改变细胞的周期和超微结构而抑制人肝癌细胞生长。     

金雀异黄素对淋巴瘤小鼠炎性易栓状态的体内干预及相关机制

目的:探讨金雀异黄素(Genistein, GEN)对淋巴瘤鼠体内肿瘤相关炎性及易栓状态的干预及其机制。方法:将40只5-6周龄Balb/c雌性小鼠予以鼠源性Pro B细胞淋巴瘤细胞株38B9构建淋巴瘤荷瘤鼠模型,并随机分为对照组、荷瘤未干预、GEN干预和环磷酰胺(Cyclophosphamide, CTX)干预共4组,每组10只。采用组织病理学评估成瘤情况,观察成瘤情况,取肿瘤组织行HE及免疫组化染色。采用ELISA和FCM法等分别检测GEN和CTX干预后血浆中炎性细胞因子分泌水平和血栓指标的变化。采用免疫组化法检测CD19在瘤体小鼠瘤组织中的表达。结果:小鼠荷瘤14 d后均成瘤,瘤体组织中淋巴瘤细胞呈弥散分布,荷瘤鼠瘤体组织的CD19表达为阳性。荷瘤鼠体内炎性指标IL-6、NETs及CLEC-2和血栓指标TF、FIB及D-D均明显高于荷瘤前(均P<0.05)。GEN及CTX干预后上述指标水平均低于未干预组。GEN干预组CLEC-2和D-D水平明显低于CTX干预组(P<0.05)。结论:荷瘤淋巴瘤小鼠体内存在肿瘤相关炎性及易栓状态。GEN通过干预肿瘤炎性因子达到的抗炎和抗...     

金雀异黄素对CIA大鼠炎症及细胞因子影响的研究

目的研究金雀异黄素(Gen)对类风湿关节炎(RA)动物模型CIA大鼠炎症及细胞因子的作用。方法采用Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型;通过Gen和/或MTX治疗后检测CIA大鼠关节炎指数(AI)评分和后肢容积,摄取大鼠关节X线片;观察大鼠关节病理学改变;Western Blot法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果 CIA大鼠造模成功;Gen治疗组、MTX治疗组及Gen+MTX治疗组大鼠炎症反应较模型对照组减轻,血清中IL-1β、TNF-α表达明显降低(P0.05),Gen+MTX治疗组的效果更佳。结论 Gen能够降低CIA大鼠炎症反应,减缓关节炎病情进展,可能是通过抑制IL-1β、TNF-α的表达而发挥抗炎作用。     

金雀异黄素对CIA大鼠炎症及细胞因子影响的研究

目的 研究金雀异黄素（Gen）对类风湿关节炎（RA）动物模型CIA大鼠炎症及细胞因子的作用.方法 采用Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型;通过Gen和/或MTX治疗后检测CIA大鼠关节炎指数（AI）评分和后肢容积,摄取大鼠关节X线片;观察大鼠关节病理学改变; Western Blot法检测血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达.结果 CIA大鼠造模成功; Gen治疗组、MTX治疗组及Gen＋MTX治疗组大鼠炎症反应较模型对照组减轻,血清中IL-1β、TNF-α表达明显降低（P〈0.05）, Gen＋MTX治疗组的效果更佳.结论 Gen能够降低CIA大鼠炎症反应,减缓关节炎病情进展,可能是通过抑制IL-1β、TNF-α的表达而发挥抗炎作用.     

金雀异黄素对氯化钴诱导的白血病K562细胞缺氧诱导因子-1α表达抑制作用的研究

为探讨金雀异黄素（genistein,gen）对氯化钴（CoCl2）诱导的人白血病细胞K562缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达的影响,本研究采用低氧模拟剂CoCl2模拟低氧环境。实验分为量-效关系组和时-效关系组,前者CoCl2取0、50、100及150μmol/L4个浓度点,培养72小时进行检测;后者则在CoCl2取100μmol/L浓度的基础上,选取0、24、48和72小时4个时间点进行检测。gen干预实验分为：①正常对照组;②CoCl2150μmol/L组;③CoCl2150μmol/L加gen50μmol/L组;④CoCl2150μmol/L加gen100μmol/L;组⑤CoCl2150μmol/L加gen200μmol/L组,培养72小时检测。采用RT-PCR及Western blot的方法分别检测HIF-1α mRNA及蛋白表达水平。结果发现：CoCl2诱导K562细胞HIF-1α蛋白的表达增加,并呈明显的浓度和时间依赖性关系（p〈0.01）;而对HIF-1α mRNA的表达无显著影响（p〉0.05）;gen呈明显浓度依赖性地抑制CoCl2诱导的K562细胞HIF-1α蛋白表达（p〈0.01）,对K562细胞HIF-1α mRNA表达无显著影响（p〉0.05）。结论：CoCl2呈浓度和时间依赖性诱导K562细胞HIF-1α蛋白的表达,无论常氧还是在CoCl2诱导下,HIF-1α mRNA呈组成型表达;gen可抑制CoCl2诱导的K562细胞HIF-1α的表达,这种抑制作用与mRNA水平无关,主要在蛋白水平。     

金雀异黄素抑制SGC7901细胞增殖、迁移和粘附的研究

目的探讨金雀异黄素(Gen)对人胃腺癌SGC7901细胞增殖、迁移以及与血管内皮细胞粘附的影响。方法利用细胞计数和MTT方法检测Gen对SGC7901细胞增殖的影响;利用细胞划痕实验检测Gen对SGC7901细胞迁移的影响;在单层脐静脉内皮细胞上加入SGC7901细胞,检测Gen对SGC7901细胞与血管内皮细胞粘附的影响;利用免疫荧光实验观察Gen对SGC7901细胞中E-cadherin、β-catenin和肌动蛋白(actin)的分布的影响;利用Western blotting检测Gen对SGC7901细胞中FAK、p-FAK、E-cadherin、β-catenin蛋白表达的影响。结果Gen可以抑制SGC7901细胞的增殖、迁移和粘附,影响SGC7901细胞中E-cadherin、β-catenin和actin的分布,下调p-FAK和E-cadherin的表达。结论Gen抑制SGC7901细胞的增殖、迁移和与血管内皮细胞粘附,可能是通过诱导细胞中E-cadherin、β-catenin和actin的重排、下调p-FAK和E-cadherin的表达等实现的。     

金雀异黄素抑制SGC7901细胞增殖、迁移和粘附的研究

目的 探讨金雀异黄素（Gen）对人胃腺癌SGC7901细胞增殖、迁移以及与血管内皮细胞粘附的影响。方法 利用细胞计数和MTT方法检测Gen对SGC7901细胞增殖的影响；利用细胞划痕实验检测Gen对SGC7901细胞迁移的影响；在单层脐静脉内皮细胞上加入SGC7901细胞，检测Gen对SGC7901细胞与血管内皮细胞粘附的影响；利用免疫荧光实验观察Gen对SGC7901细胞中E-cadherin、β-catenin和肌动蛋白（actin）的分布的影响；利用Westernblotting检测Gen对SGC7901细胞中FAK、p-AK、E-cadherin、β-catenin蛋白表达的影响。结果 Gen可以抑制SGC7901细胞的增殖、迁移和粘附，影响SGC7901细胞中E-cadherin、β-catenin和aetin的分布，下调p-FAK和E-cadherin的表达。结论 Gen抑制SGC7901细胞的增殖、迁移和与血管内皮细胞粘附，可能是通过诱导细胞中E—cadherin、β-catenin和actin的重排、下调p-FAK和E—cadherin的表达等实现的。     

金雀异黄素对去势大鼠的骨组织微损伤的影响

目的：观察金雀异黄素对去卵巢SD大鼠不同时期离体骨组织微损伤的影响及防治效果。方法：10月龄SD大鼠54只，随机分为3组各18只。将去卵巢的大鼠分为去卵巢组（A组）、金雀异黄素组（B组）各18只，另18只为对照组（C组）。B组术后每天给予金雀异黄素10μg／kg，共16周。于去卵巢后4、8和16周时处死3组大鼠各6只，对其第4离体椎骨进行疲劳损伤后观测椎骨变化。结果；疲劳损伤后每块骨组织磨片均可见微损伤，以微破裂最常见。3组之间椎体体积（V1）及微破裂平均长度（P4）比较差异均无显著性意义。骨小梁单位面积百分率在去卵巢4、8及16周时，A组低于B、C组（P〈0．05）；单位骨小梁面积百分率的微破裂长度与数目在16周时A组高于C组（P〈0．05），在各个时期B、C组各项指标比较差异均无显著性意义。结论：大鼠去卵巢后的8周内尚不表现出骨结构性能的下降，金雀异黄素早期应用可使骨结构性能提高，长期应用能防止骨量丢失并改善骨结构。单位骨小梁面积百分率的微破裂长度和数目可反映药物对骨质疏松的影响，可作为骨结构性能的评价指标。     

金雀异黄素刺激人成骨细胞分泌护骨素以及抑制IL-6生成

目的：探讨金雀异黄素对人成骨细胞（hOB）作用的分子机制。方法：采用细胞培养结合RT-PCR、Western blot技术观察金雀异黄素对护骨素（OPG）、破骨细胞分化因子（RANKL）、白介素-6（IL-6）等基因mRNA及蛋白质表达。结果：金雀异黄素下调hOB细胞RANKL、IL-6 mRNA及蛋白质的表达、上调OPG mRNA及蛋白质和hOB细胞ER-α mRNA及蛋白质的表达。结论：金雀异黄素可以对雌激素核受体的表达进行调控，该雌激素样效应是其抗骨质疏松作用的分子机制之一。     

酪氨酸磷酸酶抑制剂正矾酸钠对Raji淋巴瘤细胞增殖与凋亡的影响及机制探讨

为了探讨蛋白酪氨磷酸酶（PTPase)通路在淋巴瘤细胞增殖与凋亡中的作用及机制，应用细胞培养结合MTT检测，光镜及电镜形态学观察，DNA凝胶电泳，流式细胞术和RT-PCR研究了特异的酪氨酸磷酸酶抑制剂正矾酸钠（Na3VO4)对Burkitt淋巴瘤细胞系Raji的影响。结果：MTT检测及CFU-Raji培养显示Na3VO4对Raji细胞呈浓度依赖性抑制作用；倒置显微镜下原位观察发现随Na3VO4浓度增加，细胞体积明显缩小，核固缩，核染色质核膜下聚集，呈典型凋亡小体状；细胞胞体出芽，核染色质凝聚，核碎裂，电镜观察出现典型凋亡细胞；膜联蛋白染色显示Na3VO4诱导Raji细胞凋亡，线粒体跨膜电位下降，且在一定范围内呈浓度依赖性；DNA凝胶电泳出现DNA梯形条带；流式细胞术及RT-PCR示Na3VO4下调Bcl-2蛋白及mRNA的表达；细胞周期分析显示经Na3VO4处理的细胞出现G2-M期阻滞，细胞周期蛋白B1（cyclinB1)及mRNA的表达下调，结论：PTPase通路信号传导参与了Raji细胞增殖与凋亡过程的调节，加入其特异抑制剂Na3VO4可通过下调细胞周期蛋白B1的表达引起G2-M期阻滞抑制增殖，下调Bcl-2的表达及降低线粒体跨膜电位诱导Raji细胞凋亡。     

三氧化二砷阻滞人Burkitt淋巴瘤细胞增殖和细胞周期作用及其相关机制

本研究探讨As2O3 对人Burkitt淋巴瘤细胞增殖和细胞周期的影响及相关的分子机制,为As2O3临床应用于Burkitt淋巴瘤的治疗提供依据。以人Burkitt淋巴瘤Namalwa细胞株为模型,用不同浓度As2O3作用不同时间,以MTT法、流式细胞术、RQ—PCR和Western—blot分别检测As2O3对细胞增殖、增殖周期和凋亡发生及细胞周期重要调节基因CyclinE、CDK2和P2I表达的影响。结果表明：As2O3显著抑制Namalwa细胞的生长增殖,并显示明显的浓度和时间依赖性;As20,明显阻滞Namalwa细胞于G1期,并显示明显的量效关系;As2O3诱导Namalwa细胞凋亡,呈现明显的作用浓度和作用时间依赖性;As2O3明显下调Namalwa细胞CyclinE、CDK2基因的转录及蛋白表达,明显上调CDK抑制蛋白P2j基因的转录及蛋白表达,且呈现出浓度依赖性。结论：As2O3明显抑制人Burkitt淋巴瘤细胞株Namalwa的生长增殖,此作用与As2O3阻滞细胞周期于G1期及诱导细胞凋亡有关,而As2O3对细胞周期的阻滞与其下调细胞周期的重要驱动基因CyclinE和CDK2的表达、上调CDK抑制因子P2I基因的表达密切相关。     

骨髓间充质干细胞抑制淋巴瘤细胞增殖的实验研究

间充质干细胞（MSC）具有向肿瘤细胞定向迁移并且抑制肿瘤细胞的特性,然而其分子机理目前尚不清楚。本研究主要探讨B7-H4在骨髓MSC细胞株C3H10 T1/2（C3H10）体外对淋巴瘤细胞株EL-4增殖的影响。应用细胞免疫荧光法检测C3H10细胞中B7-H4的表达情况;利用脂质体转染法将绿色荧光素标记的FAM-siRNA转染C3H10细胞,通过荧光显微镜及流式细胞仪检测并评估siRNA的转染效率;利用RT-PCR方法测定不同浓度的siRNA-B7-H4干预C3H10细胞后B7-H4的mRNA表达水平;将单独培养的EL-4细胞作为对照组,B7-H4不同程度沉默后的C3H10细胞与EL-4细胞共培养作为实验组,48 h后通过倒置显微镜观察及CCK-8检测法比较EL-4细胞的增殖情况。结果表明：利用INTERFERinTM转染试剂转染C3H10的效率可达到72.43%,C3H10细胞中高表达B7-H4,利用siRNA技术使B7-H4表达下调可逆转C3H10对淋巴瘤细胞株EL-4增殖的抑制作用。结论：骨髓MSC细胞株C3H10可能通过表达B7-H4发挥对淋巴瘤细胞株EL-4增殖的抑制作用,这将为临床治疗淋巴瘤提供新靶点、新方向。     

2-甲氧基雌二醇上调Bax/BCL-2比例诱导淋巴瘤Raji细胞凋亡的研究

目的:研究2-甲氧基雌二醇(2-ME2)对淋巴瘤Raji细胞的作用及其作用机制.方法:用不同浓度2-ME2作用于淋巴瘤Raji细胞,CCK8法检测2-ME2对Raji细胞增殖的影响;流式细胞仪FITC/PI双标法检测细胞早期的凋亡;蛋白印迹法检测2-ME2对Raji细胞BCL-2、Bax、Caspase-3、C-myc...     

As2O3抑制人淋巴瘤Raji细胞增殖及VEGF表达

本研究探讨在As2O3作用下人淋巴瘤Raji细胞的增殖及VEGF mRNA表达的变化.采用改良MTT方法观察As2O3对Raji细胞的增殖抑制效应;采用半定量RT-PCR方法检测As2O3对Raji细胞VEGF121和VEGF165 mRNA表达的影响.结果表明As2O3对Raji细胞的作用表现时间、剂量依赖性的增殖抑制效应,建立回归方程为IR＝0.531dose+0.481time(P＜0.05).半定量RT-PCR方法检测显示,Raji细胞同时表达VEGF121和VEGF165两种剪切变异体,二者的表达水平相当(VEGF1211.17±0.14;VEGF1651.31±0.19,P＞0.05).VEGF121和VEGF165 mRNA表达量与As2O3作用时间呈负相关关系(rsv121=-0.547,P＜0.05;rsv165=-0.632,P＜0.05),且VEGF的各异构体对药物的反应具有差异性,VEGF165 mRNA表达下调早且有持续性.但在所选浓度组中未发现类似的相关关系(P＞0.05).结论As2O3既可抑制Raji细胞生长增殖,亦可通过下调VEGF mRNA表达而产生抗血管新生效应,且小剂量、长时程给药时结果亦然.     

染料木黄酮诱导人结肠癌SW480细胞凋亡及机制

目的 探讨染料木黄酮（GEN）诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的生物学效应及抗肿瘤机制。方法 通过MTT法检测GEN对该细胞系生长的影响；应用PI染色流式细胞术（FCM）分析GEN处理前后的细胞周期分布的变化；SP免疫组化法检测细胞内bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 GEN能抑制SW480细胞增殖，呈浓度依赖性。流式细胞仪示不同浓度GEN作用于SW480细胞，出现G2／M阻滞；SP免疫组化结果表明GEN处理细胞72h后，Bax蛋白表达升高，bcl-2蛋白表达下降。结论 GEN有诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用，其机制与bcl-2／Bax比值下降有关。     

藤黄酸对SKM-1细胞生长抑制作用及其机制

本研究探讨藤黄酸（GA）对骨髓增生异常综合征细胞SKM-1生长抑制和诱导细胞凋亡及其机制。采用MTr比色法检测GA对SKM-1细胞的增殖抑制作用,在光学显微镜下观察细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,RT-PCR检测SKM-1细胞baxmRNA和bcl-2mRNA表达情况。结果表明：GA能明显抑制SKM-1细胞增殖,具有时间和剂量依赖性,其48h的IC50值为0．37μg/ml;GA诱导SKM-1细胞凋亡,具有浓度依赖性,诱导SKM-l阻滞在G0／G1期;显微镜下可见典型的凋亡细胞形态特征;GA可明显下调SKM-1细胞bcl-2mRNA表达和上调baxmRNA表达。结论：GA能诱导SKM-1细胞凋亡,其机制可能与细胞G0／G1期阻滞及bcl-2／bax比率下调有关。     

氨茶碱对淋巴瘤细胞系增殖与凋亡的影响及机制探讨

为探讨磷酸二酯酶（phosphodiesterase，PDE）抑制剂在淋巴瘤细胞增殖与凋亡中的作用及机制，研究了非选择性PDE抑制剂氨茶碱（aminophylline，AM）对Burkitt淋巴瘤细胞系Raji的影响。采用MTT检测，光学显微术，电镜术及膜联蛋白V染色观察细胞增殖、细胞凋亡的形态学变化及凋亡率；用流式细胞术和RT-PCR技术检测细胞周期，周期蛋白B1和Bcl-2的表达及线粒体跨膜电位的变化。结果显示，氨茶碱对Raji细胞增殖呈浓度依赖性抑制作用；形态学观察发现随氨茶碱浓度增加，细胞体积明显缩小，核固缩，核染色质核膜下聚集，出现凋亡小体；细胞涂片显示，核染色质凝聚、核碎裂；电镜观察有典型凋亡细胞；膜联蛋白V染色显示氨茶碱诱导Raji细胞凋亡率增加，线粒体跨膜电位（Δφm）呈浓度依赖性下降；流式细胞术及RT-PCR显示氨茶碱下调Bcl-2蛋白及mR-NA的表达；细胞周期分析显示经氨茶碱处理的细胞出现S期阻滞、细胞周期蛋白B1表达下调。结论：氨茶碱可通过S期阻滞抑制细胞增殖、下调Bcl-2的表达及降低线粒体膜电位而诱导Raji细胞凋亡。