Elecsys HBsAg COI灰区标本再分析探讨

目的探讨电化学发光免疫分析(ECLIA)法乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)cut off指数(COI)灰区标本再次进行确证分析的临床价值。方法被检血清标本均来自2014年1月至2015年3月该院就诊的门诊和住院患者,应用Elecsys HBsAg确证试验对213例ECLIA法检出HBsAg COI灰区标本进行再分析并对受检标本HBV血清标志物两对半(以下简称乙肝两对半)模式进行回顾性分析。结果 213份标本中ECLIA法检测HBsAg COI结果为0.80~0.99 31例,经Elecsys HBsAg确证试验阳性2例[6.45%(2/31)];HBsAg COI结果为1.0~1.99弱反应性标本93例,经Elecsys HBsAg确证试验阳性92例[98.92%(92/93)];HBsAg COI结果为2.0~6.99 89例,经Elecsys HBsAg确证试验均为阳性,阳性率为100.00%(89/89);213例ECLIA法检出HBsAg COI灰区标本经Elecsys HBsAg确证试验阳性183例,检出6种乙肝两对半模式,其中HBsAg、HBV e抗体(HBeAb)、HBV核心抗体(HBcAb)阳性模式155例,占大多数[72.77%(155/213)];经Elecsys HBsAg确证试验阴性30份标本中检出7种乙肝两对半模式,其中HBeAb、HBcAb阳性模式16例,检出率为7.51%(16/213)。结论 ECLIA法乙肝两对半定量检测HBsAg临界或较低水平的弱反应性标本、乙型肝炎感染模式不常见的标本时需经Elecsys HBsAg确证试验再分析以防止假阴性或假阳性结果的出现。     

乙肝/梅毒联合检测试纸条在献血前初筛的应用初探

目的探讨献血前应用HBsAg/梅毒联合检测试纸条进行血液筛查的优势,尽量减少不合格血液的采集,避免资源浪费。方法收集经酶免方法检测的乙肝表面抗原(HBsAg)阳性或梅毒抗体阳性的血浆标本共473例,再用HBsAg/梅毒联合检测试纸条进行检测。结果用倍比稀释的方法测得HBsAg/梅毒联合检测试纸条HBsAg项目的最低检出限为2IU/mL,梅毒抗体项目的最低检出限为0.25IU/mL;经HBsAg/梅毒联合检测试纸条检测:HBsAg试纸条初筛阴性、HBsAg酶免检测阳性的标本270例,检出HBsAg阳性80例,检出率为29.63%(80/270);梅毒抗体酶免检测阳性的标本203例,检出梅毒抗体阳性140例,检出率为60.87%(140/203),与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集实验(TPPA确证实验)的阳性检出率完全符合,符合率达100%。结论使用HBsAg/梅毒联合检测试纸条进行献血前初筛,可以筛出梅毒抗体阳性的献血者,还可以提高对HBsAg阳性献血者的筛选,既降低了阳性血液的采集,减少了资源浪费,又保证了血液安全。     

胶体金免疫层析试验检测乙肝两对半时HBsAg假阴性结果的处置

目的胶体金免疫层析试验(GICA)检测乙肝两对半时,对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)结果疑似假阴性的标本分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)和时间分辨荧光分析法(TRFIA)定量试验进行HBsAg检测,并用抗体中和确认试验进行确认,以获得一个处理GICA检测HBsAg产生假阴性结果的可靠方法。方法 2014年1月至2015年2月用GICA检测乙肝两对半的标本3 078例,选取其中结果为单乙型肝炎核心抗体(抗-HBc),或单乙型肝炎e抗体(抗-HBe)为阳性,或抗-HBc和抗-HBe同为阳性,而HBsAg、乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)均为阴性的标本86例,分别用ELISA和TRFIA检测其HBsAg,对检测为阳性的标本进行抗体中和确认试验确认。结果 86例标本经抗体中和确认试验确认阳性的为35例;ELISA检出阳性标本28例,其中2例为假阳性;TRFIA检出阳性标本35例与抗体中和确认试验符合率100%。结论 GICA检测乙肝两对半时,对HBsAg结果疑似假阴性的标本可选用TRFIA进行复查确认。     

血清HBsAg、抗-HBs双阳性结果的初步分析

目的 对临床检测中少见的HBsAg和抗-HBs双阳性结果 进行分析.方法 对ELISA法检测的HBsAg和抗-HBs双阳性的68份血标本进行化学发光微粒子免疫方法(CMIA)复检,仍为双阳性的标本定量检测其HBV-DNA.结果 经复检有45例(66.2%)仍然为双阳性,其中32例为HBsAg、抗-HBs、抗-Hbe、抗-HBc阳性,阳性率71.1%(32/45),13例HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc 阳性,阳性率28.9%(13/45),45例样本中有25例血清HBV-DNA检测阳性,阳性率为55.6%.结论 HBsAg和抗-HBs双阳性原因较多,操作或ELISA试剂是原因之一,抗-HBs阳性患者 HBV-DNA往往存在复制.     

酶联免疫吸附试验乙型肝炎表面抗原弱阳性血液标本中3种检测方法的结果分析

目的分析酶联免疫吸附试验(ELISA)乙型肝炎表面抗原(HBsAg)弱阳性标本中3种检测方法[增加标本的离心时间和提高离心速度、时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)、抗体中和确认试验]的应用。方法选取2014年1月至2015年12月来该院检验科验血的200例检验报告作为血样获取目标,其中HBsAg弱阳性的血液标本112例,即作为该研究的血液标本;分别通过增加标本的离心时间和提高离心速度、TRFIA、抗体中和确认试验进行检测,继而对不同方法检出的结果进行分析比较,其中以经抗体中和确认试验检测出的结果作为金标准。结果ELISA检测过程中,与ELISA初测(3 000r/min离心8 min)阳性率(61.6%)相比,增加离心时间和提高离心速度(3 500r/min离心20min)后,ELISA检测阳性率(48.2%)明显偏低,差异有统计学意义(P0.05)。以抗体中和确认试验检测结果作为金标准,ELISA检测112例HBsAg弱阳性血液标本,其敏感度为57.3%(47/82),漏检35例,占比42.7%(35/82),另外误检7例,占比23.3%(7/30);TRFIA检测112例HBsAg弱阳性血液标本,其敏感度为93.9%(77/82),漏检率6.1%(5/82),错检率3.3%(1/30),并且TRFIA敏感度明显高于ELISA,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ELISA检测HBsAg可能出现假阳性结果,通过增加标本的离心时间和提高离心速度可有效减少假阳性例数;TRFIA敏感度较ELISA更高。     

增强化学发光法检测手术及输血感染标志物的临床应用

目的对增强化学发光法检测感染性标志物进行临床应用评价。方法采用美国强生增强化学发光技术检测系统及配套试剂对乙肝表面抗原(HBsAg)、抗丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、抗人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)、抗梅毒螺旋体特异性抗体(抗-TP)进行初筛检测,阳性标本立即重新复查一次,仍为阳性者判断为初筛试验阳性。对于HBsAg、抗-HCV初筛阳性标本采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)进行确证;抗-HIV初筛阳性者送HIV确诊实验室进行确诊、抗-TP初筛阳性者采用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)进行确证。结果增强化学发光法检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的阳性检出率分别是5.83%、0.75%、0.05%、2.73%,阳性检出率均高于各检测项目的复检确认方法的阳性率。41123例术前检查患者血清标本中,应用增强化学发光法共筛查出2399例HBsAg阳性标本、308例抗-HCV阳性标本、19例抗-HIV阳性标本、1123例抗-TP阳性标本。筛查的阳性标本经各项目的复检确认方法进行复检确认后,共确认出2325例HBsAg阳性标本、299例抗-HCV阳性标本、17例抗-HIV为阳性标本、1054例抗-TP阳性标本。应用增强化学发光法检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的S/CO值分别在5.71、9.24、15.9、10.82以上时,经复检后各检测项目均呈现100%的阳性。结论增强化学发光法HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的检测特异性大于99%,检测阳性预测值完全能够满足临床诊疗需求,检测过程和工作效率都优于常规免疫标记技术,值得临床推广应用。     

直接化学发光免疫分析法作为传染四项快速检测方法的应用探讨

目的评价直接化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)作为消化性内镜前传染性指标:乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎抗体(抗-HCV)、梅毒螺旋体抗体(抗-TP)和人类免疫缺陷病毒抗体(抗HIV-1/2)四个项目快速检测方法的价值。方法对本院2015年4月13日~4月20日共561例急诊筛查传染性指标四项的住院门诊患者,同时用免疫层析法和直接化学发光免疫分析法平行检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎抗体(抗-HCV)、梅毒螺旋体抗体(抗-TP)和人类免疫缺陷病毒抗体(抗HIV-1/2),对上述两种方法检测出的阳性结果用ELISA方法复检,比较两种方法的检测结果。结果 561例标本免疫层析法检测阳性标本数HBsAg11例(1.96%),抗-HCV11例(1.96%),抗-TP19例(3.39%),抗-HIV-1/2 5例(0.89%),直接化学发光免疫分析法检测阳性标本数HBsAg11例(1.96%),抗-HCV4例(0.71%),抗-TP8例(1.43%),抗-HIV-1/2 3(0.53%)例。两种方法阳性标本经ELISA方法复检后阳性标本例数分别为:免疫层析法HBsAg11例(100%),抗-HCV2例(18.18%),抗-TP8例(42.11%),抗-HIV-1/2 0例(0),直接化学发光免疫分析法HBsAg11例(100%),抗-HCV2例(50%),抗-TP6例(100%),抗-HIV-1/2 0例(0)。结论在临床快速筛查HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV-1/2时,直接化学发光免疫分法较免疫层析法复检率低,复检后阳性率高,相对更为经济、高效、准确。     

HBsAg和抗-HBs双阳性模式分析及临床意义

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)同时阳性的感染模式,探讨此类模式的产生原因及其临床意义。方法应用时间分辨免疫荧光分析法定量检测10 939例血清标本,从中筛选出HBsAg和抗-HBs同时阳性的标本,进而分析其检测结果 ,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测的12000例血清标本得到的HBsAg和抗-HBs同时阳性的结果进行比较。结果定量检测10939例血清标本,其中HBsAg阳性3 338例,阳性率为30.5%,HBsAg和抗-HBs同时阳性者占0.8%(28/3 338);ELISA定性检测12 000例标本,HBsAg和抗-HBs同时阳性者占0.3%(12/12 000),统计学分析两种方法在检测HBsAg和抗-HBs同时阳性的结果 ,差异有统计学意义(P0.05)。该28例表现出4种类型HBV血清学指标的组合方式,以HBsAg、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性模式和HBsAg、乙型肝炎e抗体(抗-HBe)、抗-HBc阳性模式为主,分别有8例和17例;HBsAg、抗-HBs和抗-HBc阳性模式1例;其余2例仅HB-sAg和抗-HBs双阳性。结论 HBsAg和抗-HBs同时阳性虽然少见,但具有一定的临床意义,应当引起实验室和临床的注意。     

大连市血液中心血清学检测与核酸检测并行的效果观察

目的通过血清学检测和核酸检测并行的检测模式,全面合理评估血清学检测和核酸检测在降低输血相关感染风险中的相关性。方法对2010年12月2日～2011年7月7日共计30 561份献血者标本进行血清学检测(HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体、梅毒特异性抗体、谷丙转氨酶及血型),同时进行HBV、HCV、HIV的3联检核酸定性检测以及HBV DNA阳性标本测定血清学乙肝5项,即HBsAg,抗-HBs,抗-HBc(总),HBeAg和抗-HBe。统计各项检测的检出率;将血清学检测HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体酶免3项检测与核酸检测结果进行对比;分析HBV DNA阳性标本的血清学特点。结果 HBsAg、抗-HCV和HIV抗原/抗体3项检测处于灰区和灰区以下的不合格标本中无核酸检测阳性标本。单纯核酸阳性的检出率为0.07%,经鉴别,HBV DNA阳性17份,无HCVRNA和HIV RNA的检出。HBV DNA阳性标本的乙肝血清学以全阴模式居多。45份核酸酶免均不合格的标本中有29份获得鉴别,鉴别结果与酶免结果符合率为100%。核酸检测阴性而酶免检测双试剂阳性的标本有14份,HBsAg阳性6份,抗-HCV阳性8份,无HIV抗体/抗原阳性标本。结论核酸检测对于HBsAg(-)的HBV感染献血者的检出效果明显。核酸检测与血清学检测结果存在不一致,合理的解释和分析需要必要的献血者追踪和更进一步的实验室确证手段及完善的检测策略。     

对乙型肝炎表面抗原弱阳性结果进行确认试验的应用研究

目的评估抗体中和确认试验在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)低值弱阳性标本中的应用。方法将由微粒子酶免疫发光法(MEIA)检测的HBsAg结果(S/CO)在1.0~10.0之间的111份弱阳性血清标本进行抗体中和确认试验,并进行乙型肝炎病毒(HBV)酶联免疫吸附试验(ELISA),对比各试验结果间的差异。结果抗体中和确认试验阳性92例(82.9%),ELISA检测阳性47例(42.3%),2项试验检测结果间差异有统计学意义(P=0.033)。结论对HBsAg低值弱阳性标本,ELISA检测漏检率很高,敏感性和特异性均不佳;抗体中和确认试验可做为HBsAg弱阳性标本进一步确认的手段。