降钙素基因相关肽在痛觉调制过程中作用的研究进展

降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide，CGRP)是1982年Amara在研究甲状腺髓样癌的降钙素(Calcitonin，CT)基因表达时发现的一种生物活性多肽，由37个氨基酸组成。CGRP家族包括五个成员：CGRPα、CGRPβ、CT．胰淀粉样酶(Amylin)和肾上腺髓质素（adrenomedullin，ADM)。CGRP是迄今已知最强的内源性扩血管肽；CT主要参与钙代谢；Amylin位于胰腺8细胞，与Ⅱ型糖尿病有关；     

大鼠PAG内Nogo-A在痛觉调制过程中角色的探索

目的:用脑内核团微量注射和免疫组化等方法,观察大鼠中脑导水管周围灰质( periaqueductal gray,PAG)内“勿动蛋白”-A(Nogo-A)、P物质(substanceP,SP)和降钙素基因相关肽(calcitoningene-related peptide,CGRP)表达的变化,研究探讨Nogo-A在痛觉调制过程中的角色,以及它在大鼠PAG内与CGRP、SP和内源性阿片系统在痛觉调制过程中的相互作用.方法:选用雄性SD大鼠32只,随机等分为4组:空白对照组8只,分别向PAG内注射0.9％生理盐水1μl;模型对照组、吗啡组和纳洛酮组各8只,首先单侧后爪掌心皮下注射1％的福尔马林0.1 ml复制炎症痛敏大鼠模型,3d后分别向PAG内注射等量0.9％生理盐水、吗啡或纳洛酮各1 μl,60 min后取大鼠大脑PAG区脑组织,采用免疫组化法观测各组大鼠PAG内Nogo-A、SP和CGRP免疫反应阳性神经元的表达差异.结果:与空白对照组比较,模型对照组大鼠PAG内Nogo-A的表达量显著降低(P＜0.01),CGRP及SP显著增高(P＜0.01);与模型对照组比较,吗啡组大鼠PAG内Nogo-A的表达量显著增高(P＜0.01),CGRP及SP显著降低(P＜0.05),而纳洛酮组PAG内Nogo-A的表达量显著降低(P＜0.05),CGRP及SP显著增高(P＜0.05).结论:(1)炎症痛敏大鼠PAG内Nogo-A的表达量比正常降低,而CGRP及SP显著增高;(2)阿片肽可增加PAG内Nogo-A的表达,并降低CGRP及SP的表达.     

降钙素基因相关肽在面神经切断后SD大鼠面神经核中的表达变化

目的：研究降钙素基因相关肽（calcitonin gene—related peptide，CGRP）在面神经损伤后再生过程中面神经核中的表达变化。方法：健康SD大鼠36只分别于茎乳孔处行左侧面神经切断术，而右侧于相应部位仅行面神经游离术；随机均分为术后3、7、14、21、28、35d6组。分别于相应时间点取出含面神经核团脑干部分，用免疫组化及图像分析技术，观察大鼠两侧面神经核中CGRP表达的变化。结果：CGRP分布于正常SD大鼠面神经各亚核，损伤侧的面神经核中CGRP表达比对照侧增强（P〈0．05）；图像分析CGRP灰度值两侧比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：周围性面神经损伤导致CGRP在面神经核中的表达增加，提示CGRP在面神经再生修复过程中发挥调理作用。     

降钙素基因相关肽和内皮素在充血性心力衰竭中的作用

用同位素放射免疫法同时检测30例CHF患者的血浆CGRP和ET浓度，求出ET/CGRP比值，并与30例健康人对照。结果显示CHF组血浆CGRP和ET浓度较对照组明显增高（P＜0．05），且ET／CGRP比值较对照组升高更显著（P＜0.01）。本研究提示在CHF时血浆CGRP和ET浓度均增高，且ET／CGRP比值升高更明显，这对CHF的防治具有重要意义。     

降钙素基因相关肽与骨修复及骨重建

骨折的愈合过程是通过一系列复杂的因子来调节完成的，其中，降钙素基因相关肽已经被证实在骨代谢中发挥合成作用。有人发现在骨折局部含降钙素基因相关肽的神经纤维明显增加。降钙素基因相关肽是表达于骨组织的一种重要的感觉神经肽，虽然最初发现其主要作用是扩张血管，增加血流量，但是大量的动物实验结果表明，成骨细胞定向表达降钙素基因相关肽可以增加骨密度，刺激松质骨形成。尤其是降钙素基因相关肽受体在大鼠成骨细胞上的发现，为降钙素基因相关肽具有直接调节骨生长的作用提供了更有力的证据。降钙素基因相关肽也被证明是一种与炎症反应相关的神经肽，有文献报道，骨折时它可以诱发损伤局部炎症细胞浸润。虽然已经认识到降钙素基因相关肽在骨修复及骨重建中的重要作用，但其具体作用机制仍不明了。     

大鼠降钙素基因相关肽重组腺病毒的构建与鉴定

目的利用AdMaxTM腺病毒载体系统,构建大鼠降钙素基因相关肽（CGRP）基因重组腺病毒载体,包装重组腺病毒并鉴定。方法根据Genbank提供的大鼠CGRP序列信息（NM₀01033956.1）,合成序列全长,PCR方法扩增目的基因,将CGRP/His基因片段亚克隆至穿梭质粒pDC316,形成重组质粒pDC316-CGRP/His,挑选测序正确的质粒与骨架质粒pBHGloxdelE13cre共转染293A细胞,包装出重组腺病毒Ad-CGRP/His,利用PCR和Western鉴定基因的表达。结果 （1）成功构建pDC316-rCGRP/His重组质粒。（2）包装出表达rCGRP/His的重组腺病毒。结论成功构建携带大鼠CGRP基因的重组腺病毒载体,并获得表达rCGRP/His的重组腺病毒,为深入研究CGRP基因并开展相关的基因治疗研究奠定基础。     

大鼠坐骨神经损伤后降钙素基因相关肽在脊髓神经元及运动终板中的变化

目的：观察周围神经损伤后降钙素基因相关肽(Calciton ingen-related peptlde，CGRP)在脊髓神经元及运动终板中的变化，以探讨CGRP与运动终板退行性变的关系。方法：以切断坐骨神经的大鼠为模型，以免疫组化方法结合计算机图像分析技术检测CGRP在脊髓神经元及运动终板中的变化，并以镀银法作同期运动终板退行性变的观察。结果：神经损伤1周后CGRP即在脊髓前角运动神经元中升至最高，并持续4周，8周后恢复正常。在正常胫前肌中可见神经末梢及运动终板均被CGRP抗体清晰标记。神经损伤1周后，CGRP在神经末梢和运动终板中即完全消失。神经切断后镀银法显示运动终板在前2周无明显变化，3周运动终板开始部分染色模糊、浅淡，8周运动终板完全消失。结论：在运动终板退行性变的机制中，CGRP的缺乏可能是一个重要的因素。     

SNI模型大鼠脊髓背角N-甲基-D-天冬氨酸受体和降钙素基因相关肽的表达

【目的】观察坐骨神经分支选择结扎切断模型(Spared nerve injury model,SNI)痛阈及脊髓背角N-甲基-D-天冬氨受体(NMDAR)、降钙素基因相关肽(CGRP)表达的变化。【方法】健康雄性SD大鼠27只,体重220~280 g。随机分为3组(n=9)。对照组(C组);假手术组(sham组);坐骨神经分支选择结扎切断模型组(SNI组)。在模型制作前1 d和模型制作后14 d内,每组均进行疼痛行为学观察。所有组别均在模型制作后d2、d7、d14天观察行为学改变后分批取材(每批3只),用免疫组化法观察大鼠L5节段水平脊髓背角NMDAR和CGRP的表达。【结果】与C组和sham组比较,SNI组在SNI术后均出现机械性异常疼痛痛阈降低(P<0.01),但热刺激后爪退缩潜伏时间无统计学意义(P>0.05);同时SNI组大鼠脊髓背角NMDAR和CGRP免疫阳性产物数量和表达增加(P<0.01)。【结论】SNI模型大鼠出现典型的疼痛行为学特征时,其脊髓背角NMDAR和CGRP表达也明显增强,并且脊髓背角NMDAR和CGRP的变化趋势大体相同。     

降钙素基因相关肽和P物质在原发性三叉神经痛发作过程中的作用

目的:测定原发性三叉神经痛(primary trigeminal neuralgia, PTN)病人血液和脑脊液中降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)和P物质(substance P, SP)的含量,探讨CGRP和SP在PTN发作过程中的作用。方法:诊断为PTN的住院病人共50例。术前记录疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale, VAS),并抽取同侧颈外静脉血;行三叉神经节射频热凝术,术中穿刺如果有脑脊液,抽取0.5 ml;疼痛缓解后抽取颈外静脉血。结果:术前颈外静脉血CGRP、SP含量高于术后(P <0.01)。术中脑脊液CGRP、SP含量与术前颈外静脉内含量正相关(P<0.01)。结论:CGRP与SP可能参与了三叉神经痛疼痛发作过程。     

骨髓增生异常综合征血清降钙素和降钙素基因相关肽测定及其意义

目的寻找一个早期预测骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）向急性髓系白血病（ＡＭＬ）转化的指标。方法对ＭＤＳ患者４５例,ＡＭＬ患者４０例,对照组５０例,利用放射免疫法（ＲＩＡ）检测其血清中的人降钙素（ｈＣＴ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）水平,并对ＭＤＳＲＡ组、ＲＡＥＢ组中部分患者进行随访,观察其临床转归及与ｈＣＴ、ＣＧＲＰ血清水平的关系。结果ＭＤＳ各型及ＡＭＬ初发组患者ｈＣＴ、ＣＧＲＰ血清水平均有升高,与对照组相比差异均有显著性（Ｐ＜０．０１）,ＲＡＥＢ组高于ＲＡ组（Ｐ＜０．０５）,在ＲＡ向ＲＡＥＢ、ＲＡＥＢ向ＡＭＬ转化过程中ｈＣＴ、ＣＧＲＰ均逐渐升高。结论ｈＣＴ、ＣＧＲＰ血清水平检测可以作为早期预测ＭＤＳ向ＡＭＬ转化的指标     

高氧液对脑缺血大鼠内皮素及降钙素基因相关肽含量的影响

目的 :探讨高氧液对缺血大鼠脑细胞的保护作用。方法 :40只 Wistar大鼠 (雌雄各半 )随机分成高氧液组、对照组、模型组和假手术组 ,每组各 10只。阻断 3条动脉造成急性不完全性脑缺血 ,制备动物模型。制模成功后 ,高氧液组立即以 10 ml· kg- 1 · h- 1 的速率经尾静脉输入高氧液 ,对照组以同种方法输入等量生理盐水 ,模型组和假手术组不治疗。制模后 1小时各组动物经腹主静脉取血 ,然后立即断头取脑 ,测定内皮素 (ET)和降钙素基因相关肽 (CGRP)含量。结果 :高氧液可明显降低脑缺氧后 ET水平 ,而升高 CGRP水平 ,纠正 ET、CGRP失衡。结论 :高氧液对缺血大鼠脑细胞有明显保护作用。     

糖尿病患者视网膜病变与降钙素基因相关肽及内皮素的关系

目的：观察糖尿病患者视网膜病变与降钙素基因相关肽及内皮素的关系。方法：应用眼底血管荧光造影法、放封免疫计数法、微柱层析法等观察90例糖尿病患者（DM组、DM Ⅰ～Ⅲ组）及40例正常对照者的降钙素基因相关肽、内皮素指标，并进行统计分析。结果：DM组降钙素基因相关肽与正常组比较显著减少（P〉0．05），且降钙素基因相关肽随着糖尿病视网膜病变的加重而降低。DM Ⅰ组降钙素基因相关肽与正常组比较无统计学意义（P〉0．05），糖尿病Ⅲ组降钙素基因相关肽与正常组比较明显减少（P〈0．05）。各组降钙素基因相关肽与内皮素呈负相关关系。糖尿病各组内皮素水平均比对照组增高（P〈0．05）。结论：降钙素基因相关肽水平降低可能是糖尿病视网膜病变的致病作用因素之一，增殖期糖尿病视网膜病变可能与降钙素基因相关肽显著减少、内皮素明显增高密切相关。     

大鼠脑外伤后降钙素基因相关肽对股骨骨折愈合过程的影响

目的 研究大鼠股骨骨折合并脑外伤时骨痂组织中降钙素基因相关肽(CGRP)的表达及血清CGRP水平,探讨CGRP与骨折合并脑外伤时愈合加快的关系.方法 12周雄性Sprague-Dawley大鼠56只,随机数字法分为三组:骨折组24只,骨折合并脑外伤组24只,正常对照组8只.显露大鼠颅顶骨,开骨窗,应用自由落体方法建立脑外伤模型,将大鼠右股骨中段锯断造成骨折模型.分别于第7、14、21天各处死8只,取血清采用放射免疫法测血清中CGRP水平,取骨折标本拍X线片,骨折端上下5 mm组织行HE染色和sP法免疫组化染色.数据经SPSS 11.0软件包处理,采用成组t检验分析.结果 单纯骨折组伤后7 d、14 d、21 d血清CGRP[(91.58±28.67)ng/L,(102.46±27.95)ng/L,(86.54±24.13)ng/L]较正常对照组[(65.42±19.35)ng/L]升高.骨折合并脑外伤组伤后7 d血清CGRP[(165.49±43.28)ng/L]升高非常明显,与单纯骨折组相比差异有统计学意义(P＜0.01),14 d骨折合并脑外伤组血清CGRP[(104.72±31.36)ng/L]下降,21 d血清CGRP[(74.93±21.57)ng/L]降至正常,与单纯骨折组比较,14 d差异无统计学意义,21 d差异有统计学意义(P＜0.05).骨痂组织CGRP免疫组化染色7 d骨折合并脑外伤组平均积分吸光度[(0.496±0.108)]最高,与单纯骨折组[(0.348±0.076)]相比差异有统计学意义(P＜0.01),14 d和21 d两者相比差异无统计学意义.结论 CGRP可能是脑外伤后骨折愈合加速的因素之一.     

急性出血性脑血管病并发多脏器功能失常综合征患者血浆内皮素-1及降钙素基因相关肽水平的观察

目的：探讨血浆内皮素１（ＥＴ１）和降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）在急性出血性脑血管病（ＡＨＣＶＤ）并发多脏器功能失常综合征（ＭＯＤＳ）发病中的作用。方法：采用放射免疫法分别测定２１例ＡＨＣＶＤ合并ＭＯＤＳ患者（ＭＯＤＳ组）、２０例ＡＨＣＶＤ患者（ＡＨＣＶＤ组）及３０例正常人（正常对照组）血浆中ＥＴ１和ＣＧＲＰ水平。结果：ＭＯＤＳ组及ＡＨＣＶＤ组血浆ＥＴ１水平明显高于正常对照组（Ｐ均＜０．０１），ＭＯＤＳ组ＥＴ１水平又明显高于ＡＨＣＶＤ组（Ｐ＜０．０１）。ＡＨＣＶＤ组血浆ＣＧＲＰ水平高于正常对照组，但无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。而ＭＯＤＳ组血浆ＣＧＲＰ水平明显低于正常对照组，ＥＴ１／ＣＧＲＰ（Ｅ／Ｃ）比值明显高于ＡＨＣＶＤ组及正常对照组（Ｐ均＜０．０１）。结论：血浆ＥＴ１水平升高、ＣＧＲＰ水平降低、Ｅ／Ｃ比值严重失衡与ＭＯＤＳ的发生相关；检测血浆ＥＴ１和ＣＧＲＰ水平对评估ＡＨＣＶＤ患者预后有一定意义     

中药离子导入对颈性眩晕患者血浆降钙素基因相关肽的影响

目的 :观察颈性眩晕患者血浆降钙素基因相关肽 ( CGRP)的水平及单向中频电中药导入治疗后患者血浆 CGRP的改变。方法 :对 34例颈性眩晕患者采用单向中频电中药导入治疗 (导入组 ) ;另 34例口服复方丹参片和眩晕停药物治疗作为对照。治疗前后测定血浆 CGRP。结果 :治疗前 6 8例眩晕患者血浆 CGRP〔导入组( 36 .2 3± 2 2 .78) ng/L,服药组 ( 36 .72± 2 2 .85 ) ng/L〕均低于健康人组〔( 5 2 .2 6± 18.5 3) ng/L,P均 <0 .0 1〕,经单向中频电中药导入治疗后患者血浆 CGRP较治疗前明显升高〔导入组 ( 5 0 .12± 2 0 .6 2 ) ng/L,P<0 .0 5 ;服药组 ( 44 .5 2± 2 3.36 ) ng/L ,P>0 .0 5〕。结论 :CGRP参与了颈性眩晕的病理生理过程。     

失血性休克再灌注复苏后血浆降钙素基因相关肽的变化

探讨失血性休克再灌注复苏后血浆中降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）改变的意义，早期使用磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）阻断剂、抗氧化剂对ＣＧＲＰ的影响及其与ＰＬＡ２激活、氧自由基产生的关系。家兔失血性休克维持６０分钟后回输自体血液及平衡盐液，血浆中ＣＧＲＰ逐渐升高，复苏后６小时达顶点，同出血前比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）；ＰＬＡ２阻断剂氯喹及ＭＥ８１０１、抗氧化剂黄芪酮于失血后复苏前使用可明显抑制复苏后血浆中ＣＧＲＰ的增高；同时，复苏后家兔平均动脉压（ＭＡＰ）和血ｐＨ值逐渐下降，与ＣＧＲＰ变化没有明显相关（ｒ＝０．００４０和ｒ＝０．０４３５）；假手术造成血浆ＣＧＲＰ水平复苏后逐渐上升，同术前比较差异同样显著（Ｐ＜０．０５），但并不伴随ＭＡＰ和ｐＨ值的下降，氯喹、ＭＥ８１０１及黄芪酮纠正酸中毒、维持血压稳定的作用与抑制ＣＧＲＰ并无明显相关。结果提示：家兔失血性休克后再灌注复苏过程中血浆ＣＧＲＰ水平的上升可能不是ｐＨ值和ＭＡＰ下降的重要因素；ＰＬＡ２阻断剂和抗氧化剂并非通过抑制ＣＧＲＰ上升而产生抗酸中毒及稳定循环血压的作用     

乌拉地尔对高血压患者血浆降钙素基因相关肽与内皮素含量的影响

目的探讨新型降压药乌拉地尔（ＵＲＡ）对高血压患者血浆降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）和内皮素（ＥＴ）含量的影响。方法采用放射免疫方法测定１５例高血压患者ＵＲＡ治疗前后血浆ＣＧＲＰ和ＥＴ含量变化。结果高血压患者血浆ＣＧＲＰ明显低于正常对照组（Ｐ＜００１）。血浆ＥＴ及ＥＴ／ＣＧＲＰ明显高于正常对照组（Ｐ＜００１）。经静脉ＵＲＡ治疗后５ｍｉｎ,高血压患者血浆ＣＧＲＰ明显升高（Ｐ＜００１）,ＥＴ及ＥＴ／ＣＧＲＰ则明显降低（Ｐ＜００１）。结论ＣＧＲＰ与ＥＴ共同在高血压发病过程中起重要作用。ＵＲＡ可明显提高人体内ＣＧＲＰ水平,在降低血压的同时对ＥＴ有明显的拮抗效应。