博来霉素性肺纤维化大鼠NADPH氧化酶介导的细胞外基质重构机制研究

目的探讨博来霉素性肺纤维化大鼠NADPH氧化酶介导的细胞外基质重构机制。方法 40只SD大鼠随机分为4组:对照组、模型组、乙酰香草素低剂量和高剂量组。一次性气管注入博来霉素复制大鼠肺纤维化模型,乙酰香草低剂量组灌胃乙酰香草素1μmol/L,高剂量组灌胃乙酰香草素10μmol/L治疗,对照组大鼠给予等剂量的生理盐水。分析各组大鼠肺组织羟脯氨酸及丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,Western Blotting法分析各组大鼠肺组织NADPH氧化酶亚基及细胞外基质重构相关酶系的表达。结果模型组大鼠肺组织羟脯氨酸及MDA水平明显增高,SOD水平明显降低;模型组大鼠肺组织NADPH氧化酶亚基p22phox及p47phox表达明显增强,且MMP2/9及TIMP1/2的表达也明显增强。低剂量和高剂量的乙酰香草素均可以明显改善上述指标的异常(P0.05,P0.01),且具有剂量依从性效果。结论乙酰香草素通过抑制NADPH氧化酶的过度激活及细胞外基质重构改善博来霉素性肺纤维化损伤。     

乳酸杆菌和双歧杆菌粗制代谢产物对小鼠溃疡性结肠炎的影响

【目的】了解乳酸杆菌和双歧杆菌粗制代谢产物对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的防治作用。【方法】采用右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)建立小鼠UC模型,分别予乳酸杆菌粗制代谢产物和双歧杆菌粗制代谢产物灌肠,生理盐水(NS)和柳氮磺胺吡啶(SASP)灌肠对照,并设立空白对照组和DSS模型组对照,计算小鼠死亡率、疾病活动指数(DAI)、组织学损伤评分和组织学病理改变以及结肠黏膜IL-10免疫组化情况。【结果】①乳杆组和双歧组小鼠结肠黏膜组织病理学改变轻微,其死亡率、DAI评分、组织学损伤评分均低,与DSS模型组和NS组对照差异均有统计学意义(P<0.05)。②乳杆组和双歧组IL-10免疫组化表达均较高,与空白对照组、DSS模型组和NS组对照差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】①乳酸杆菌和双歧杆菌粗制代谢产物均对小鼠溃疡性结肠炎起主要的防治作用。②乳酸杆菌和双歧杆菌粗制代谢产物的某些成分通过促进IL-10表达而发挥防治作用的。     

瘦素预处理对心肌缺血-再灌注损伤小鼠血清MPO MDA SOD水平变化的影响

目的 监测小鼠心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)过程中血清髓过氧化物酶(MPO)、血清丙二醛(MDA)、心肌超氧化物歧化酶(SOD)水平的变化,以及瘦素(Leptin)预处理对它们的影响.方法 20只雄性C57BL/6小鼠,随机分为四组:假手术组(sham 组);MIRI组;MIRI瘦素预处理组(Leptin+MIRI组):小鼠于MIRI手术前30 min予腹腔注射重组瘦素(recombinant mouse leptin);MIRI术后瘦素处理组(MIRI+Leptin组):小鼠于MIRI手术后30 min予腹腔注射重组瘦素.在MIRI手术后6 h,分别从四组小鼠收获标本,测定小鼠血清MPO、MDA及心肌SOD水平.结果 与假手术组比较,MIRI瘦素预处理组血清MPO水平显著升高(P<0.01);与MIRI组比较,MIRI瘦素预处理组血清MPO水平显著降低(P<0.01).与假手术组比较,MIRI瘦素预处理组血清MDA水平显著升高(P<0.01),心肌SOD水平显著降低(P<0.01);与MIRI组比较,MIRI瘦素预处理组血清MDA水平显著降低(P<0.01),心肌SOD水平显著升高(P<0.01).结论 瘦素预处理能够减轻脂质过氧化和自由基损伤,减少炎性细胞因子的表达,进而达到减轻心肌损伤的作用.     

随意跑轮运动对糖尿病大鼠心肌NADPH氧化酶及心脏重塑的影响

目的 观察随意跑轮运动对糖尿病大鼠心肌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶调节亚基p47phox及p67phox表达的影响,初步探讨运动训练抑制糖尿病心脏氧化应激及心脏重塑的可能机制。 方法 采用随机数字表法将40只SD大鼠分为正常对照组、模型组及运动组,后2组采用链脲佐菌素进行糖尿病造模。于造模成功1周后正常对照组及模型组大鼠均置于鼠笼内安静饲养,运动组大鼠给予8周（5 d/周）随意跑轮运动。于末次训练结束48 h后取静脉血测定血糖含量,利用超声心动图检测心脏结构及功能,采用Masson染色进行心肌组织病理学观察并检测心肌纤维化指数,将心肌组织匀浆后测定丙二醛（MDA）及活性氧（ROS）含量,采用Western blot技术检测心脏NADPH氧化酶p47phox及p67phox亚基蛋白表达量。 结果 与正常对照组比较,模型组血糖含量升高（P<0.05）,左心室收缩末期直径（LVESD）和左心室舒张末期直径（LVEDD）增加（P<0.05）,左心室射血分数（LVEF）下降（P<0.05）,心肌纤维化指数增加（P<0.05）,MDA及ROS含量升高（P<0.05）,p47phox及p67phox亚基蛋白表达量上调（P<0.05）;与模型组比较,运动组血糖含量降低（P<0.05）,LVESD及LVEDD下降（P<0.05）,LVEF升高（P<0.05）,心肌纤维化指数降低（P<0.05）,MDA及ROS含量下降（P<0.05）,p47phox及p67phox亚基蛋白表达量下调（P<0.05）。 结论 随意跑轮运动能通过抑制NADPH氧化酶调节亚基p47phox及p67phox表达,减轻糖尿病大鼠心脏氧化应激反应,进而抑制心脏重塑并增强心功能。     

NADPH氧化酶在败血症心功能损害中的作用及机制

目的探讨NADPH氧化酶在败血症心功能损害中的作用及机制。方法将C57/BL6小鼠随机分为对照组(Control)、败血症组(Sepsis)、治疗组(DPI),每组8只。建立败血症模型,给予NADPH氧化酶抑制剂DPI,采用Langendorff离体心脏灌流,测定心肌收缩力(dF/dt max)、心率(HR)和心脏做功(HW),观察小鼠心功能变化;并进一步检测小鼠心肌组织中肿瘤坏死因子TNF-α及中性粒细胞标志物髓过氧化物酶(MPO)水平,观察小鼠心肌炎症因子表达及炎症浸润情况。结果败血症组小鼠dF/dt max明显低于对照组(P0.05);而给予NAD-PH氧化酶抑制剂治疗的败血症小鼠dF/dt max虽低于对照组,但比败血症组有明显改善(P0.05);TNF-α检测结果发现,败血症组与治疗组中TNF-α水平均高于对照组(P0.05);治疗组MPO水平虽高于对照组,但较败血症组有明显改善(P0.05)。结论败血症可诱导心肌组织产生并释放TNF-α,从而激活NADPH氧化酶,并通过活性氧族(ROS)等激活一系列信号通路,诱导炎性细胞的浸润及心肌细胞的凋亡、坏死,最终导致心功能下降。     

黄芩素对2型糖尿病大鼠肾组织氧化应激的影响及其作用机制

目的:探讨黄芩素(baicalein,BAI)对2型糖尿病大鼠肾组织氧化应激的影响及机制.方法:对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的2型糖尿病大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量组[黄芩素(80 mg/(kg·d)]和高剂量组[黄芩素(160mg/(ks·d)],治疗12周后检测各组大鼠尿白蛋白排泄率(UAER)、血糖(BG)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、内生肌酐清除率(Ccr)等变化;测定肾组织中丙二醛(MDA)的含量及谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性.应用RT-PCR方法检测P22phox mRNA及P47phoxmRNA的表达.结果:两治疗组较模型组尿白蛋白、尿素氮水平和肾脏肥大指数明显改善.与对照组比较,模型组大鼠的MDA含量显著增加(P<0.01),SOD、GSH-Px、CAT活性显著降低(P<0.01);两治疗组糖尿病大鼠肾组织中MDA含量明显降低,SOD、CAT、GSH-Px活性显著增强.P22phox mRNA及P47phox mRNA的相对含量在模型组分别为(0.370±0.028)、(1.005±0.116)明显高于对照组(0.098±0.029)、(0.340±0.055),(P<0.01);低剂量组较模型组显著降低,分别为(0.275±0.029)、(0.740±0.088)(P<0.01).高剂量组降低更明显,分别为(0.193±0.013)、(0.660±0.083)(P<0.01).两治疗组之间各指标无明显差异.结论:BAI对2型糖尿病大鼠肾组织具有明显的保护作用,其机制可能是通过下调P22phox mRNA及P47phox mRNA的表达,提高肾组织中SOD、GSH-Px、CAT活性,降低MDA含量,从而减轻自由基对糖尿病大鼠肾组织的氧化损伤,延缓糖尿病及其并发症的发生发展.     

罗格列酮降低氧化应激的作用:促进和动员内皮祖细胞参与了吗?

背景:过氧化物酶增殖物激活受体γ激动剂可动员骨髓内内皮祖细胞至外周血中.然而,其动员内皮祖细胞的确切机制还不是很清楚.有实验证明,过氧化物酶增殖物激活受体γ受体激动剂可降低糖尿病小鼠的氧化应激反应.目的:明确过氧化物酶增殖物激活受体γ激动剂罗格列酮在体内是否通过降低氧化应激动员内皮祖细胞.方法;将24只雄性新西兰大白兔以数字表法随机分为3组:正常组、对照组和罗格列酮组,每组8只.对照组和罗格列酮组予高脂饮食2周后行颈动脉球囊损伤术,罗格列酮组术后第1天灌胃给予罗格列酮1 mg/(kg·d),4周;对照组灌胃给予生理盐水.正常组仅切开颈部皮肤,给予正常饲料.术后4周以流式细胞仪测定CD34和KDR双阳性内皮祖细胞数量,Greiss法测定一氧化氮浓度,比色法检测超氧阴离子,RT-PCR法测量一氧化氮合酶及NADPH p22phox mRNA表达.结果与结论:24只兔均进入结果分析.与对照组比较,罗格列酮组兔内皮祖细胞数量、血清一氧化氮水平、清除超氧阴离子能力、一氧化氮合酶mRNA表达均明显升高(P<0.05),但仍低于正常组(P<0.05).罗格列酮组兔NADPHp22phox mRNA表达明显低于对照组(P<0.05),与正常组接近(P>0.05).3组血糖及血脂差异无显著性意义.在不依赖于降脂和降糖作用下,罗格列酮可能通过在转录水平降低NADPH氧化酶和增加一氧化氮合酶表达,从而降低氧化应激在体内动员内皮祖细胞.     

阿托伐他汀抑制高糖诱导的人脐静脉内皮细胞的氧化应激反应

目的探讨阿托伐他汀(Atv)对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响及保护作用、可能作用机制。方法 HUVECs低糖培养贴壁后分为对照A组;持续性高糖B0组、持续性高糖+不同浓度药物(0.1、1.0、10.0μmol/L Atv)B1~B3组;波动性高糖C组。高糖干预、药物培养24 h后检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及一氧化氮(NO)含量;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶NOX4和NOX2/gp91phox亚基的表达。所有计量数据采用均数±标准差(sx?)表示,SPSS 17.0软件处理分析。结果 (1)与对照组相比,高糖各组细胞增殖均降低(CCK-8 D450值:B0组0.74±0.085 vs.A组1.20±0.045,P<0.01;C组0.56±0.083 vs.A组1.20±0.045,P<0.01),阿托伐他汀可改善高糖对HUVECs增殖的抑制作用,呈浓度依赖性。(2)与对照组比较,高糖组NO含量及SOD活性明显降低、NOX4 m RNA及NOX2/gp91phox m RNA的表达升高,细胞凋亡率显著增高。波动性高糖组变化趋势更明显[早期凋亡率:B0组(23.48±0.73)%vs.C组(27.33±0.89)%,P<0.01]。(3)阿托伐他汀可明显升高持续性高糖诱导的SOD活性及NO的释放,减少细胞凋亡,抑制NOX4 m RNA及NOX2/gp91phox m RNA表达的增加幅度,具有明显的浓度依赖性。结论持续性高糖与波动性高糖对内皮细胞均有损伤作用,其损伤作用可能是通过氧化应激作用来实现的,波动性高糖较持续性高糖对内皮细胞的损伤作用更大。不同浓度的Atv对持续性高糖诱导的内皮细胞损伤有保护作用,呈浓度依赖性。     

糖尿病大鼠心肌病的NADPH氧化酶介导内质网应激机制研究及DPI的改善作用

目的本研究探讨糖尿病心肌病的NADPH氧化酶介导内质网应激机制研究及二甲苯基碘(DPI)的改善作用。方法 SD大鼠随机分为三组:对照组、糖尿病组和DPI治疗组(n=8)。腹腔注射链脲佐菌素(65 mg/kg)复制糖尿病心肌病模型,Western Blotting分析大鼠左心室NADPH氧化酶亚基及内质网应激蛋白的表达变化。结果糖尿病组大鼠左心室±dp/dtmax明显增高,p22phox、p47phox及PERK、CHOP表达明显增强,而DPI干预组上述表达异常得到显著的恢复。结论 NADPH氧化酶介导的内质网应激是糖尿病心肌病发病的重要机制,DPI具有显著改善糖尿病心肌病的作用。     

溃疡性结肠炎患者肠道双歧杆菌、肠球菌及真杆菌失调及血清TLR4、MPO表达与疾病活动度的关系

目的 探讨溃疡性结肠炎(UC)患者肠道菌群失调及血清Toll样受体4(TLR4)、髓过氧化物酶(MPO)的表达与疾病活动度的关系。方法 选择2020年11月至2023年1月中国人民武装警察部队河南省总队医院收治的240例UC患者为研究对象，根据疾病的严重程度分为临床缓解组、轻度组、中度组及重度组，每组60例，同时纳入60例健康体检者作为健康对照组。比较各组间肠道菌群，血清TLR4、MPO水平，并进行Pearson相关分析。结果 与健康对照组比较，重度组肠道双歧杆菌、真杆菌含量减少(P<0.05),但肠球菌属含量无明显变化。临床缓解组双歧杆菌、真杆菌含量高于重度组(P<0.05),但仍低于健康对照组(P<0.05),肠球菌属含量与健康对照组比较，差异未见统计学意义(P>0.05)。与健康对照组比较，轻度组、中度组以及重度组血清TLR4、MPO水平表达逐渐增加，其中重度组表达量明显升高(P<0.05)。与健康对照组比较，重度组免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)以及免疫球蛋白G(IgG)表达量减少(P<0.05),临床缓解组IgA、IgM以及I...