某院多重耐药鲍曼不动杆菌菌株亲缘性分析

目的了解新疆地区鲍曼不动杆菌（A.baumannii,ABA）β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶编码基因、氯己定-磺胺耐药基因存在状况。方法对20株ABA菌进行了9种β-内酰胺酶基因、3种氨基糖苷类修饰酶基因和氯己定-磺胺耐药基因检测。以耐药基因为分子标记作检测结果的样本聚类分析,分析菌株亲缘性。结果 20株ABA菌中blaTEM阳性13株（65%）、blaADC阳性12株（60%）、blaSHV阳性1株（5%）,其余β-内酰胺酶基因均阴性;20株ABA菌中氨基糖苷类修饰酶基因aac（3）-Ⅰ阳性12株（60%）、aac（6′）-Ⅰ阳性13株（65%）、ant（3″）-Ⅰ阳性14株（70%）;14株检出qacE△1-sul1基因（70%）。以耐药基因为分子标记作检测结果的样本聚类分析显示,其中9株为克隆传播。结论该20株菌β内酰胺类、氨基糖苷类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶密切相关,并存在克隆传播。     

产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌相关耐药基因研究

目的了解常州地区肺炎克雷伯菌耐药状况及β-内酰胺类耐药基因。方法用琼脂稀释法检测氨苄西林、哌拉西林、哌拉西林-他唑巴坦、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南和亚胺培南对肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度(MIC)。采用聚合酶链反应(PCR)检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌16种相关耐药基因,并用DNA测序仪测序。结果120株肺炎克雷伯菌ESBLs阳性率为44.2%(53株)。从53株肺炎克雷伯菌中检出TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-9群、OXA-1群、LEN、OKP和DHA 8种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为75.5%、22.6%、18.9%、7.5%、11.3%、5.7%、3.8%和41.5%,其中2株菌同时检出6种β-内酰胺酶基因。基因测序证实为TEM-1、TEM-11、SHV-13、SHV-28、CTX-M-22、CTX-M-55、OXA-1和OKP-6等。结论本地区肺炎克雷伯菌已携带多种β-内酰胺酶耐药基因,是其对β-内酰胺类抗菌药物耐药的重要原因之一。     

广州地区多重耐药铜绿假单胞菌相关耐药基因的研究

目的探讨广州地区临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌相关耐药基因。方法采用纸片扩散法进行药敏试验,聚合酶链反应(PCR)对多重耐药铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶相关基因和氨基糖苷类修饰酶基因检测,并对耐药基因进行测序。结果38株铜绿假单胞菌对多黏菌素B耐药率是0%,对其余抗菌药物耐药率均>50%,氨基糖苷类修饰酶基因ant(2″)-Ⅰ、ant(3″)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ和aac(3)-Ⅱ基因阳性率分别为21.1%、39.5%、28.9%、31.6%和21.1%,未检出aac(3)-Ⅰ基因;β-内酰胺酶基因OXA-10、TEM-1、DHA-1、PER-1和IMP-1基因阳性率分别为42.1%、18.4%、10.5%、7.9%和31.6%,未检出CTX-M-9基因和VIM基因;另外OprD2基因缺失率达60.5%。结论广州地区多重耐药的铜绿假单胞菌携带多种β-内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶基因,应引起高度重视。     

广州地区多重耐药铜绿假单胞菌相关耐药基因的研究

目的探讨广州地区临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌相关耐药基因。方法采用纸片扩散法进行药敏试验,聚合酶链反应（PCR）对多重耐药铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶相关基因和氨基糖苷类修饰酶基因检测,并对耐药基因进行测序。结果38株铜绿假单胞菌对多黏菌素B耐药率是0%,对其余抗菌药物耐药率均〉50%,氨基糖苷类修饰酶基因ant（2″）-Ⅰ、ant（3″）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ和aac（3）-Ⅱ基因阳性率分别为21.1%、39.5%、28.9%、31.6%和21.1%,未检出aac（3）-Ⅰ基因;β-内酰胺酶基因OXA-10、TEM-1、DHA-1、PER-1和IMP-1基因阳性率分别为42.1%、18.4%、10.5%、7.9%和31.6%,未检出CTX-M-9基因和VIM基因;另外OprD2基因缺失率达60.5%。结论广州地区多重耐药的铜绿假单胞菌携带多种β-内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶基因,应引起高度重视。     

多重耐药的铜绿假单胞菌Ⅰ类整合子与其多重耐药基因的相关性分析

目的 调查本院多重耐药铜绿假单胞菌耐药基因的存在状况,Ⅰ类整合子的分布情况以及其与多重耐药基因相关性分析.方法 采用K-B法测定临床分离的铜绿假单胞菌对15种药物的耐药性,筛选出35株多重耐药菌株,采用聚合酶链反应(PCR)检测β-内酰胺酶编码基因、OPrD2基因、氨基糖苷类修饰基因和Ⅰ类整合子基因.结果 35株多重耐药铜绿假单胞菌中β-内酰胺酶编码基因CTX-M-1、TEM、SHV的检出率分别为51.4%、31.4%、14.0%;OPrD2基因的阳性率为28.6%;氨基糖苷类修饰基因aac(6′)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ、ant(3″)-Ⅰ和ant(3″)-Ⅱ的阳性率分别为20%、2.86%、14.3%和17.1%;Ⅰ类整合子阳性的菌株中,CTX-M-1、TEM、SHV、aac(6′)-Ⅱ和ant(3″)-Ⅰ的检出率为45.4%、9.1%、27.3%、36.4%和27.3%,未检出aac(6″)-Ⅰ和ant(2″)-Ⅰ基因.结论 本院多重耐药铜绿假单胞菌存在多种耐药基因,常见的有β-内酰胺酶编码基因、OPrD2基因和氨基糖苷类基因.Ⅰ类整合子广泛存在于多重耐药的铜绿假单胞菌中,并携带多种耐药基因参与形成铜绿假单胞菌的多重耐药.     

云浮地区多重耐药铜绿假单胞菌相关耐药基因的研究

目的研究云浮地区临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌相关耐药基因。方法采用K-B法进行药敏实验,聚合酶链反应（PCR）对多重耐药铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶相关基因和氨基糖苷类修饰酶（AMEs）基因检测,并进行测序。结果 25株铜绿假单胞菌未发现对多黏菌素B耐药,其余抗生素耐药率均大于50%,氨基糖苷类修饰酶基因ant（2″）-Ⅰ、ant（3″）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ和aac（3）-Ⅱ基因阳性率分别为20%、32%、24%、28%和24%,未检出aac（3）-Ⅰ基因;β-内酰胺酶基因OXA-10、TEM-1、SHV、DHA-1、PER和IMP-9基因阳性率分别为32%、12%、8%、12%、12%和12%,未检出CTX-M-9基因和VIM基因;另外OprD2基因缺失率达60%。结论本地区多重耐药的铜绿假单胞菌携带多种β-内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶基因,应引起高度重视。     

54株肺炎克雷伯菌氨基糖苷类抗生素耐药基因分析

目的了解临床分离的54株肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素的耐药谱,分析氨基糖苷乙酰转移酶基因的分布规律及其与氨基糖苷类抗生素耐药的相关性,为临床抗感染治疗提供依据。方法采用MIC法测定临床分离的54株肺炎克雷伯菌对7种氨基糖苷类抗生素的耐药谱,应用Whonet5.4软件统计耐药率,通过聚合酶链反应进行氨基糖苷乙酰转移酶基因研究。结果 54株肺炎克雷伯菌对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、卡那霉素、链霉素、大观霉素和奈替米星的耐药率分别为14.8%、77.8%、59.3%、68.5%、66.7%、61.1%、22.2%;测试菌株中存在aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ、aac(3)-Ⅳ、aac(3)-Ⅰ4种耐药基因,aac(3)-Ⅱ和aac(6′)-Ⅰ是主要的产酶基因,检出率分别为78.5%和65.0%。结论产生氨基糖苷类钝化酶是临床分离的肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素主要的耐药机制,临床分离菌的耐药表型和钝化酶基因关系较为复杂,可能与耐药菌中存在多钟耐药基因有关,临床实验室应加强检测,指导临床合理使用抗菌药物。     

多重耐药绿脓假单胞菌β内酰胺类氨基糖苷类耐药相关基因研究

目的明确广州地区临床分离的耐药绿脓假单胞菌各种β内酰胺酶编码基因、外膜通道蛋白oprD2基因、氨基糖苷类修饰酶基因存在状况。方法采用MicroScan微生物鉴定系统微量肉汤法测定临床分离的18株绿脓假单胞菌对12种抗菌药物的敏感性，采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析β内酰胺酶基因型、氨基糖苷类修饰酶基因型及外膜通道蛋白oprD2基因。结果该18株菌呈现多重耐药，对氨基糖苷类抗生素的耐药率在50．0％-72．2％之间，对其他抗绿脓假单胞菌药物耐药率在16．7％-83．3％之间；14株（77．8％）检出氨基糖苷类修饰酶基因，aac（6），-Ⅱ、aac（3）-Ⅱ、ant（3”）．Ⅰ、aac（60＇）Ⅰ、ant（2”）-Ⅰ、aac（3）-Ⅰ、aac（3）-Ⅲ、aph（3’）-Ⅵ和aac（3）-Ⅳ基因的阳性率分别为50．0％、38．9％、38．9％、33．3％、27．8％、11．1％、5．6％、5．6％和0；13株（72．2％）检出β内酰胺酶编码基因，TEM、DHA、IMP和OXA基因阳性率分别为55．6％、27．8％、22．2％和11．1％，SHV、PER、VER、GES和VIM基因阴性，3株外膜通道蛋白oprD2基因缺失。结论广州地区临床分离的绿脓假单胞菌多重耐药严重，氨基糖苷类修饰酶基因和β内酰胺酶编码基因携带率很高。     

尿路感染患者大肠埃希菌连续分离株耐药性与耐药基因检测

目的 了解尿路感染患者大肠埃希菌连续分离株耐药性与耐药基因.方法 采用PCR检测38株多重耐药大肠埃希菌株耐药基因和整合子、转座子.结果 38株产ESBLs菌株中,β-内酰胺酶基因CTX-M阳性26株(68.4%)、TEM-bla阳性25株(65.8%)、SHV-bla阳性5株(13.2%),TEM同时CTX-M阳性15株(39.5%),TEM和SHV同时阳性2株(5.3%),SHV和CTX-M-同时阳性1株(2.6%),TEM和SHV及CTX-M-同时阳性1株(2.6%),其余基因均阴性.氨基糖苷类修饰酶基因,总检出率73.4%,其中aac(3)-Ⅱ 9株(23.7%)、aac(3)-Ⅱ+aac(6')-Ib-10株(26.3%)、aac(3)-Ⅱ+ant(3")-Ⅰ 3株(7.9%)、aae(3)-Ⅱ+ant(2")-Ⅰ 1株(2.6%)、aac(3)-Ⅱ+aac(6')-Ib+ant(3')-Ⅰ 1株(2.6%)、aae(6')-Ib4株(10.5%).奎诺酮类耐药基因qnrA阳性16株(42.1%)、qhrB阳性21株(55.3%)、qnrS阳性1株(2.6%).结论 多重耐药大肠埃希菌β内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、奎诺酮类耐药基因携带率高.     

24株耐药移动克雷伯菌β-内酰胺酶编码基因研究

目的：研究移动克雷伯菌临床分离株β-内酰胺酶编码基因。方法采用VITEK2-compact分析系统的药敏卡AST-GN13及纸片扩散法（K-B法）测定抗菌药物的敏感性,聚合酶链反应检测24株耐药移动克雷伯菌A～D四类26种β-内酰胺酶编码基因检测。结果24株耐药移动克雷伯菌对碳青霉烯类药物有较高的敏感性,但对第四、第三、第二代β-内酰胺类药物的敏感性呈梯度下降。 A类β-内酰胺酶编码基因检出TEM、SHV、CTX-M-1,阳性率分别为100%、12.50%、8.33%。B～D三类β-内酰胺酶编码基因没有检出。转座子之转座酶与TEM型β-内酰胺酶基因编码基因（tnp-TEM）连锁检测阳性4株,阳性率16.70%。结论 TEM＋CTX-M-1群与TEM＋SHV双重阳性可能会加重对β-内酰胺类药物的耐药程度,tnp-TEM连锁检测阳性提示TEM基因可高表达而加重对β-内酰胺类药物的耐药程度。