铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶的研究进展

产金属酶（MBL）是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制之一。MBL基因可位于细菌质粒或染色体上,并以基因盒的形式由整合子携带,从而导致耐药性在细菌间水平或垂直传播,给临床抗菌治疗带来极大的困难。现对MBL的演变、分类、分子生物学特点等方面的研究进展作一综述。     

铜绿假单胞菌β-内酰胺类药敏表型及耐药基因的研究

目的了解该院铜绿假单胞菌对β-内酰胺类制剂的耐药情况以及相关耐药基因的携带现况。方法自临床分离的119株铜绿假单胞菌均采用PCR检测耐药基因(TEM、SHV、CTX-M、DHA-1、OXA、CARB、VEB-1、PER-1、GES-2、AmpC、VIM-1、VIM-2、IMP-1、SPM、OprD和IntⅠ)并对检出的耐药基因进行DNA测序。结果 119株铜绿假单胞菌中TEM阳性103株(86.6%),AmpC阳性77株(64.7%),IntⅠ阳性54株(45.4%),OprD缺失54株(45.4%),VIM-2阳性19株(16.0%),CARB阳性14株(11.8%),SHV阳性2株(1.7%),OXA阳性2株(1.7%),DHA-1阳性1株(0.8%),其余基因均为阴性。结论该院铜绿假单胞菌TEM、AmpC、IntⅠ、VIM-2等耐药基因的携带率及OprD缺失均较高,多重耐药严重。     

铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶研究进展

铜绿假单胞菌是医院感染最常见的致病菌之一。金属β-内酰胺酶在铜绿假单胞菌中广。泛流行,给临床抗感染治疗带来了更多困难。现对铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶的流行病学特征、性质、分类、分子生物学特征以及实验室检测方法进行综述。     

多药耐药铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶及相关基因检测

目的了解分离到的多药耐药铜绿假单胞菌（MRPA）产金属β-内胺酶（MBLs）情况及基因类型,为进一步的流行病学研究提供依据。方法随机抽取2007年7月至2009年5月18株临床标本中分离出的经VITEK-32全自动细菌鉴定仪鉴定的铜绿假单胞菌（PA）,用GNS132进行药敏实验,部分药物用纸片扩散法（K-B法）补充测定;用改良三维试验法对细菌产MBLs进行验证;用PCR法检测IPM、VIM、SPM、GIM、SIM五种MBLs基因。结果药敏试验结果显示18株PA中9株对亚胺培南（IMP）耐药;三维试验显示有5株PA产MBLs;PCR扩增VIM基因阳性的有4株,GIM基因阳性的1株,VIM和GIM两种基因阳性1株,其他均未检测到相应基因。结论川北医学院附属医院分离到的MRPA,产MBLs是亚胺培南耐药的重要机制,且携带的MBLs基因类型具有多样性。     

铜绿假单胞菌产IMP型金属β-内酰胺酶的研究进展

IMP型金属酶是我国临床检出率最高的金属酶，产金属酶（MBL）是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制之一。MBL基因可位于细菌质粒或染色体上，并可以基因盒的形式由整合子携带，从而导致耐药性在细菌问水平或垂直传播，给临床抗菌治疗带来极大的困难。现对IMP型金属酶的演变、分类、分子生物学特点等方面的研究进展作一综述。     

铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的研究进展

铜绿假单胞菌中金属β-内酰胺酶可分为4种:IMP、VIM、SPM以及GIM,而各型又有若干亚型。金属β-内酰胺酶基因位于细菌染色体或质粒上,并以基因盒的形式存在于整合子中。整合子属于可移动基因元件,借助整合子的移动,基因盒可在不同细菌间传递,导致耐药性在不同细菌间水平传播,给临床抗菌治疗带来严峻的挑战。     

铜绿假单胞菌β-内酰胺酶和膜孔蛋白基因研究

目的了解多重耐药铜绿假单胞菌中β-内酰胺酶基因及膜孔蛋白基因存在状况，为临床合理使用抗菌药物提供理论依据。方法收集本院临床分离的铜绿假单胞菌共30株，采用纸片扩散法进行药敏试验；用聚合酶链反应（PCR）及序列分析方法，分析20种β-内酰胺酶基因（TEM、SHV、OXA-1群、OXA-2群、OXA—10群、PER、GES、VEB、CARB、IMI、VIM、SPM、GIM、SIM、DHA）和膜孔蛋白基因（OprD2）。结果30株多重耐药铜绿假单胞菌中TEM基因阳性28株，阳性率93．3％。CARB基因阳性1株，阳性率3．3％；膜孔蛋白编码基因OprD2缺失29株，阳性率96．7％。未检出其他β-内酰胺酶基因。结论烟台地区铜绿假单胞菌β-内酰胺酶基因（TEM）和膜孔蛋白编码基因OprD2缺失株检出率均在90％以上。     

铜绿假单胞菌质粒介导的AmpC β-内酰胺酶耐药性检测

目的 研究铜绿假单胞菌质粒介导的AmpC β-内酰胺酶的耐药性，检测产AmpC酶株的耐药表型，为临床抗生素的合理使用提供实验室依据。方法 收集108株临床分离鉴定的铜绿假单胞菌，采用Kirby-Bauer药敏纸片法和头孢西丁三维试验（cefoxitin three dimensional test）方法检测出产AmpC酶阳性菌株，检测AmpC酶阳性菌株对12种抗生素的耐药表型。结果 在所收集临床分离的108株铜绿假单胞菌中，产AmpC酶铜绿假单胞菌28株，产AmpC酶菌株对多种抗生素耐药。结论 铜绿假单胞菌对多种抗生素耐药，产AmpC酶是铜绿假单胞菌对多种抗生素产生耐药的重要机制。     

产超广谱β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性探讨

目的研究临床分离铜绿假单胞菌(PA)持续高产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率及其对耐药性的影响。方法用双纸片增效试验进行ESBLs检测,使用χ2检验比较PA产ES-BLs菌株与未产ESBLs菌株在耐药性之间的差别。结果对109株PA进行检测,其中22株产ES-BLs,检出率为20.2%。产ESBLsPA组与未产ESBLsPA组均对泰能、多粘菌素E敏感,对复方新诺明高度耐药(P>0.05);对替卡西林、替卡西林+棒酸、哌拉西林、哌拉西林+他唑巴坦、环丙沙星等在内的8种抗生素,产ESBLsPA组耐药率明显高于未产ESBLsPA组(P<0.05或P<0.01)。结论产ESBLsPA对常用抗生素呈现出更强的耐药性,并且部分产ESBLsPA菌株还常常联合其他酶造成混合耐药,使PA多重耐药状况更加严重。微生物工作者应加强PA产酶情况的监测。     

2006～2010年铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的 了解铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药情况和变化趋势.方法 收集2006 年1月至2010年12月临床分离的715株铜绿假单胞菌采用纸片扩散法进行药敏试验;采用双纸片协同法检测金属β-内酰胺酶.结果 铜绿假单胞菌主要标本来源为痰(67.1%)和分泌物(16.6%),其对阿米卡星的耐药率最低为10.5%,亚胺培南、美罗培南的耐药性从2006年的3.41%和2.27%分别上升至2010年的26.4%和18.2%;到2010年头孢哌酮、氨曲南、哌拉西林、庆大霉素的耐药率达50%以上;对复方新诺明连续5年耐药率均高达80%以上,头孢他啶、头孢吡肟的总耐药率分别为20.4%和17.5%;对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率低于哌拉西林/他唑巴坦,分别为15.9%和27.1%,其余抗菌药物的耐药率约在30%~50%.金属β-内酰胺酶检出率为5%.结论 铜绿假单胞菌耐药性总体呈上升趋势,应加强监测,指导临床合理使用抗菌药物,控制医院耐药菌感染的流行.     

铜绿假单胞菌临床感染分布及耐药特征分析

目的 分析沧州市人民医院铜绿假单胞菌临床分离株的临床分布情况及其对临床常用抗菌药物的敏感性,为临床抗感染治疗提供依据.方法 药敏试验采用纸片扩散法,数据统计采用WHONET 5.4统计软件处理.结果 132株铜绿假单胞菌中,来源于痰液标本113株(占85.6%),伤口分泌物标本7株(占5.3%),尿液标本6株(占4.5%).科室分布主要见于神经外科34株(占25.8%),呼吸内科28株(占21.2%),重症医学科25株(占18.9%).药敏试验结果显示铜绿假单胞菌对庆大霉素和妥布霉素耐药率最高,达75.8%;对美罗培南耐药率最低,为13.6%;对氨曲南和亚胺培南耐药率分别为15.2%和16.7%;对哌拉西林、头孢哌酮、头孢噻肟、左氧氟沙星、环丙沙星、奈替米星和诺氟沙星耐药率均在40%以上.132株铜绿假单胞菌中发现2株泛耐药菌株,占1.5%.结论 本院临床分离到的铜绿假单胞菌主要分离自痰液标本,以神经外科、呼吸内科和重症医学科等科室为主,耐药性严重,存在泛耐药株,在预防医院感染和临床抗感染工作中需给予足够的重视.     

烟台地区产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性分析及基因型检测

目的研究烟台地区产金属伊内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性,基因型及菌株的同源性,为监控产酶菌株的流行及指导临床合理选择抗生素提供依据。方法EDTA纸片复合法和E—test法分别筛选产金属β-内酰胺酶菌株,PCR扩增耐药基因imp、vim、spm和gim,用MIC法测定产金属G内酰胺酶菌株对8种常用抗菌药物的敏感度,用肠杆菌科基因间重复一致序列为引物的聚合酶链反应（ERICPCR方法）确定菌株之间的同源性。结果42株耐亚胺培南和头胞他啶铜绿假单胞菌EDTA纸片复合法筛选出18株金属酶菌株、E—test法15株、PCR法12株;PCR法检测到imp阳性菌株4株,vim阳性菌株8株;产金属β-内酰胺酶菌株呈多重耐药,且PCR法阳性产金属酶菌株呈现为高水平耐药;ERIC—PCR结果显示,18株产金属伊内酰胺酶菌株呈现7种基因模型,其中10株为同一基因模型。结论经济简便快捷的EDTA纸片复合法可作为首选方法来对产金属酶铜绿假单胞菌进行筛选,烟台地区临床分离的铜绿假单胞菌所产金属β-内酰胺酶基因型以vim型为主,阿米卡星、环丙沙星具有较好的抗菌活性,某医院在一定时期曾出现爆发流行。     

中国湖南省铜绿假单胞菌中两个新型OXA型超广谱β内酰胺酶耐药基因的检测

A型ESBLs耐药基因,分别命名为blaOXA-128和blaOXA-129,已经注册到GenBank数据库,GenBank号分别为EU573214和573215.结论 中南大学湘雅医院已经存在携带OXA型超广谱酶铜绿假单胞菌感染发现了铜绿假单胞菌携带的两个新的OXA型ESBLs耐药基因.     

广州地区泛耐药铜绿假单胞菌的分子流行病学调查

目的 调查广州地区4家医院2005年3月至2007年3月泛耐药铜绿假单胞菌株之间的同源性,了解是否有该耐药株暴发流行.方法 用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对134株泛耐药铜绿假单胞菌株进行分型,明确其是否为同一菌株的克隆.结果 134株铜绿假单胞菌PFGE图谱分为56型,其中主要流行型A型有45株,主要在医院A的中心ICU传播流行.其余3家医院也存在各自的流行株,即B、C、D医院的流行株分别为B型、C型、D型,占各医院的总分离株数的22.6%(7/31)、33.3%(6/18)、31.6%(6/19).克隆株Q型同时存在于B医院与D医院,B医院和C医院分别有1株菌与A医院的A型同源性在80%以上,其余菌株在各医院问无同源性.对A医院ICU环境、纤维支气管镜、呼吸机管道采样,未发现A型克隆株存在;但有6例携带A型克隆株的患者在调查时间里多次入住ICU的情况.耐药机制分析,42株A克隆产IMP-9金属β内酰胺酶,B、C、D克隆不产金属酶.结论 在2年的调杏中,广州地区4家大型医院均存在不同规模的泛耐药铜绿假单胞菌株克隆株传播,虽然未发现优势克隆株在4家医院大规模传播,但部分医院间已有共同的克隆株存在.加强对铜绿假单胞菌定植患者的监控可能是控制克隆株继续传播的关键.     

某医院下呼吸道标本分离铜绿假单胞菌耐药性分析

目的了解临床下呼吸道标本分离铜绿假单胞菌对13种抗菌药物的耐药性、以及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头胞菌素酶（AmpC酶）及金属β-内酰胺酶情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法选择该院2007-2012年480株下呼吸道标本中分离出的铜绿假单胞菌,菌株鉴定采用法国梅里埃API鉴定系统进行。药敏试验按K-B纸片琼脂扩散法操作并判断结果。采用三维试验法检测铜绿假单胞菌中的ESBLs和AmpC酶,双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶。结果从480株铜绿假单胞菌中检出产ESBLs、AmpC及金属β-内酰胺酶189株,总检出率39.4%。铜绿假单胞菌对妥布霉素、哌拉西林-三唑巴坦、亚胺培南、阿米卡星显示较好的敏感度,对头孢曲松、头孢替坦、头孢唑林高度耐药。结论应重视铜绿假单胞菌ESBLs、AmpC和金属β-内酰胺酶检测;对于该菌引起的呼吸道感染宜采用哌拉西林-三唑巴坦、头孢他啶联合氨基甙类或喹诺酮类抗菌药物治疗。     

铜绿假单胞菌染色质介导的AmpC β-内酰胺酶表达调控的研究进展

随着抗菌药物的大量应用,多重耐药菌日益增多,尤以铜绿假单胞菌严重.多重耐药的铜绿假单胞菌的产生,严重影响了临床对铜绿假单胞菌感染的控制,与之相应的铜绿假单胞菌感染的发病率和病死率也显著增加.     

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的检测及分析

目的对多重耐药铜绿假单胞菌所产β-内酰胺酶进行检测分析。方法采用K—B法或MIC法进行药物敏感试验筛选多重耐药铜绿假单胞菌：再进行改良三维试验．对多重耐药铜绿假单胞菌所产β-内酰胺酶进行分析。结果在93株多重耐药铜绿假单胞菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）有16株（17．20％），8株高产AmpCβ-内酰胺酶（8．60％），6株为金属β-内酰胺酶（MBL）（6．45％），有2株同时产ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶（2．15％），2株菌（2．15％）可能产丝氨酸碳青霉烯酶或有胞壁屏障。总产酶率为36．56％。结论产β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一．研究铜绿假单胞菌β-内酰胺酶，正确认识它的耐药机制，有助于了解和控制医院内感染以及医院内耐药基因的播散和流行。     

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的检测及分析

目的对多重耐药铜绿假单胞菌所产β-内酰胺酶进行检测分析。方法采用K—B法或MIC法进行药物敏感试验筛选多重耐药铜绿假单胞菌：再进行改良三维试验．对多重耐药铜绿假单胞菌所产β-内酰胺酶进行分析。结果在93株多重耐药铜绿假单胞菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）有16株（17．20％），8株高产AmpCβ-内酰胺酶（8．60％），6株为金属β-内酰胺酶（MBL）（6．45％），有2株同时产ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶（2．15％），2株菌（2．15％）可能产丝氨酸碳青霉烯酶或有胞壁屏障。总产酶率为36．56％。结论产β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一．研究铜绿假单胞菌β-内酰胺酶，正确认识它的耐药机制，有助于了解和控制医院内感染以及医院内耐药基因的播散和流行。     

医院耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的 了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌的产金属酶情况,分析其耐药特点.方法 使用全自动细菌鉴定药敏分析仪对临床送检各种标本进行菌种鉴定和药敏分析,采用药敏纸片法对金属β-内酰胺酶进行检测.结果 在591株铜绿假单胞菌中,耐亚胺培南214株,耐药率为36.2％,其中产金属β-内酰胺酶36株,产酶率为16.8％ (36/214);药敏结果显示,591株铜绿假单胞菌对舒普深、阿米卡星和特治星敏感率较高,对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林和头孢泊肟耐药率较高.结论 耐亚胺培南铜绿假单胞菌检出率较高,多重耐药现象严重,金属酶的产生是铜绿假单胞菌对碳青酶烯类及头孢类抗菌药物耐药的主要因素之一.临床应参考实验室的药敏结果,合理选用抗菌药物.     

铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的临床调查研究

目的调查临床分离铜绿假单胞菌产金属β内酰胺酶株分布情况及耐药现状，为临床合理应用抗生素提供依据。方法收集临床分离的铜绿假单胞菌，采用κ—B法筛选对亚胺培南和头孢他啶同时耐药菌株，E—test法检测产金属伊内酰胺酶菌株，最后用最低抑菌浓度（MIC）法测定产金属β-内酰胺酶菌株对8种常用抗菌药物的敏感度。结果300株铜绿假单胞菌中同时耐亚胺培南和头孢他啶者34株，占11．3％（34／300）；其中检出产金属伊内酰胺酶15株，占5．0％（15／300），产酶株分布较为集中，产酶株对亚胺培南和头孢他啶等抗生素高水平耐药，对阿米卡星和环丙沙星部分耐药。结论铜绿假单胞菌产金属伊内酰胺酶检出率升高，产酶株的多重耐药较严重，应高度重视产金属β内酰胺酶铜绿假单胞菌的监测与控制。