阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药机制研究

目的了解阴沟肠杆菌临床分离株AmpC酶和ESBLs的产生情况并分析其耐药特性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法采用改良的酶提出物三维试验法对186株阴沟肠杆菌进行AmpC酶和ESBLs检测,用K-B法对14种常用抗菌药物进行药物敏感试验。结果186株阴沟肠杆菌中,产AmpC酶的菌株63株,占33．9％;产ESBI_s的菌株有28株,占15．1％;同时产AmpC酶和ESBLs的菌株有18株,占9．7％。药敏结果显示,186株阴沟肠杆菌对头孢唑林、氨苄西林、头孢西丁等抗菌药物的耐药率较高,对亚胺培南、舒普深的耐药率较低。结论阴沟肠杆菌已呈现出多重耐药性,其耐药机制较为复杂,可表现为阻遏高产AmpC酶、产ESBLs,也可表现为同时产AmpC酶和ESBLs等多种耐药表型。     

武汉地区医院内感染阴沟肠杆菌耐药监测及现状分析

目的 了解近两年武汉地区四家教学医院院内感染阴沟肠杆菌耐药现状，以及去阻遏持续高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）及同时表达这两类酶的发生率。方法 收集武汉地区四家医院558株医院内感染阴沟肠杆菌，用Kirby-Bauer法对15种抗菌药物进行药物敏感试验，并用改良的酶提取物三维试验法，检测阴沟肠杆菌去阻遏持续高产AmpC酶，用改良双纸片法检测ESBLs。结果 阴沟肠杆菌仅对亚胺培南、头孢吡肟显示较好的敏感性。三维试验和表型筛选试验表明，558株实验菌中，65（11．6%）株持续高产AmpC酶，135（24．2％）株产ESBLs，28（5．0%）株同时表达这两种酶。结论阴沟肠杆菌对常用抗生素耐药现象较严重，耐药性呈上升趋势。高产AmpC酶和ESBLs的阴沟肠杆菌在四家教学医院的分离率较高。对阴沟肠杆菌进行耐药性监测及去阻遏持续高产AmpC酶和ESBLs检测，能较好了解该地区细菌耐药的现状，为当地临床医生抗生素的使用提供合理建议。     

阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

目的明确阴沟肠杆菌产头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,分析细菌产酶与药物耐药间的关系,指导临床合理用药。方法非重复阴沟肠杆菌共174株采用Microscan walkaway-40SI全自动细菌鉴定与药敏分析仪进行细菌鉴定及药敏试验;采用多底物协同-拮抗法(MSSAT)检测ESBLs和AmpC酶。结果 174株阴沟肠杆菌中,单产AmpC酶92株(52.87%),其中高诱导型25株,部分去阻遏型33株,完全去阻遏型22株;同时产AmpC酶和ESBLs 54株(31.03%);单产ESBLs 1株(0.57%);AmpC酶和ESBLs均不产有27株(15.52%);阴沟肠杆菌产酶株的耐药率明显高于不产酶株的耐药率(P0.05),同时产AmpC酶和ESBLs菌株的耐药率高于单产AmpC酶株的耐药率(P0.05);产AmpC酶和ESBLs菌株对头孢曲松、头孢噻肟、哌拉西林的耐药率均高于92.0%,对氨曲南耐药率高达88.9%,对阿米卡星耐药率较低(14.8%),对亚胺培南耐药率为0%。结论阴沟肠杆菌以产AmpC酶为主,单产ESBLs菌株少,同时产AmpC酶和ESBLs的菌株对三代头孢菌素、单环类、青霉素类具有高度耐药性,对碳青霉烯类药物敏感;碳青霉烯类抗菌药物依然是治疗多重耐药阴沟肠杆菌感染的首选。     

介绍一种同时存在AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的检测方法

目的：研究自血培养分离的阴沟肠杆菌的耐药特点，以指导临床用药。方法：收集1997-2000年期间我院住院患血液中分离到的10株阴沟肠杆菌，用纸片扩散法对13种抗菌药物进行了检测，用改良的酶提取物三维试验方法进行持续高产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的双重检测。结果：10株阴沟肠杆菌中1株持续高产AmpC酶，1株既有持续主产AmpC酶，又产ESBLs；3株只产ESBLs，其余5株未发现持续高产AmpC酶和ESBLs。2株持续高产AmpC酶和3株产ESBLs均对第三代头孢菌素和β内酰胺酶抑制剂的复方制剂等多种抗菌药显示高度耐药。结论：使用改良的酶提取物三维试验可同时检测高产AmpC酶（包括染色体型和质粒型）和ESBLs的菌株。根据阴沟杆菌产生不同的β内酰胺酶选择性用药，治疗高产AmpC酶多耐药菌，使用第三代头孢菌素和酶抑制复方制剂通常导致临床治疗失败，应选用第四代头孢菌素或碳青霉烯类，或两与氨基糖苷类或氟喹诺酮类联合治疗。碳青霉烯类抗生素是惟一对AmpC酶和ESBLs均稳定的β内酰胺类抗生素，可用于治疗产ESBLs菌引起的重症感染。     

改良三维试验同时检测阴沟肠杆菌中的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶

目的研究瑞安市人民医院临床标本分离出的的阴沟肠杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）情况，以指导临床用药。方法收集瑞安市人民医院2006年1～12月临床标本分离到的96株阴沟肠杆菌，用纸片扩散法对14种抗菌药物进行了药敏试验，用改良三维试验进行持续高产AmpC酶和ESBLs的双重检测。结果96株阴沟肠杆菌中11株（11．5％）高产AmpC酶；2株（2．1％）既持续高产AmpC酶又产ESBLs；40株（41．6％）只产ESBLs；其余43株（44．8％）未发现持续高产AmpC酶或ESBLs。结论使用改良的酶提取物三维试验可同时检测高产AmpC酶和ESBLs菌株，应根据阴沟肠杆菌产生不同的ESBLs来选择性用药。     

用纸片双抑制剂平行抑制试验分析阴沟肠杆菌AmpC酶

目的　建立一种能快速有效分析阴沟肠杆菌AmpC酶的方法。方法　分别以大肠埃希菌(ATCC25922)、肺炎克雷伯菌(ATCC700603)、阴沟肠杆菌(029、029M和1194E)为β内酰胺酶阴性对照、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、普通型阴沟肠杆菌、持续高产型AmpC酶、高诱导型AmpC酶标准菌株,用纸片双抑制剂平行抑制试验(DDIST)对华山医院连续的不重复的58株阴沟肠杆菌临床菌株进行AmpC酶分析,用三维试验检测高产AmpC酶以验证DDIST。结果　三维试验法从58株阴沟肠杆菌中检出持续高产型AmpC酶产株21株,DDIST检出持续高产型AmpC酶产株18株、高诱导型AmpC酶产株6株。结论　DDIST是一种能快速有效分析阴沟肠杆菌AmpC酶的方法。     

用纸片双抑制剂平行抑制试验分析阴沟肠杆菌AmpC酶

目的建立一种能快速有效分析阴沟肠杆菌AmpC酶的方法。方法分别以大肠埃希菌(ATCC 25922)、肺炎克雷伯菌(ATCC 700603)、阴沟肠杆菌(029、029M和1194E)为β-内酰胺酶阴性对照、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、普通型阴沟肠杆菌、持续高产型AmpC酶、高诱导型AmpC酶标准菌株，用纸片双抑制剂平行抑制试验(DDIST)对华山医院连续的不重复的58株阴沟肠杆菌临床菌株进行AmpC酶分析，用三维试验检测高产AmpC酶以验证：DDIST。结果三维试验法从58株阴沟肠杆菌中检出持续高产型AmpC酶产株21株，DDIST检出持续高产型AmpC酶产株18株、高诱导型AmpC酶产株6株。结论DDIST是一种能快速有效分析阴沟肠杆菌AmpC酶的方法。     

临床评价VITEK2高级专家系统对常见细菌β内酰胺耐药表型的检测和分析

目的 评价VITEK2高级专家系统(AES)对临床常见细菌β内酰胺耐药表型的检测和分析。方法 用VITEK2 AES检测并分析已知耐药表型的葡萄球菌、大肠埃希菌、克雷伯菌和阴沟肠杆菌共124株。结果 VITEK2 AES耐甲氧西林葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌产超广语β内酰胺酶[ESBLs(TEM型、SHV型或CTX—M型)]、阴沟肠杆菌产诱导型AmpC酶或高产AmpC酶、ESBLs均能正确检测。对9株同时产ESBLs和高产AmpC酶阴沟肠杆菌检测，其中1株正确，其余8株只报告高产AmpC酶。结论 VITEK2 AES能够对临床菌株中重要的β内酰胺耐药表型准确检测，并能根据所测耐药表型对某些影响临床抗菌药物治疗的药敏结果进行修订。对阴沟肠杆菌某些耐药表型的分析、判断有待进一步改进。     

多药耐药阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶的检测

目的调查川北医学院附属医院临床分离的多药耐药阴沟肠杆菌（E.cloacae）超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrum β-lactamases,ESBLs）、AmpC酶的流行情况。方法随机收集2005～2008年经法国生物梅里埃VITEK-32系统GNI＋卡和GNS132卡鉴定为多药耐药阴沟肠杆菌的不重复菌株30株,同时用纸片扩散法（K-B法）补做氨曲南（AZT）、头孢西丁（FOX）、复方新诺明（SXT）、头孢匹美（FEP）等药敏试验,利用改良三维试验检测ESBLs和AmpC酶。结果 30株多药耐药阴沟肠杆菌产ESBLs的有21株,占70.0%;产AmpC酶的有3株,占10.0%;30株菌均对亚胺培南全敏感,对氨苄西林、头孢西丁100.0%耐药。结论本次试验检测出我院多药耐药阴沟肠杆菌以产ESBLs为主（70%）,产AmpC酶较少（10%）。     

佳木斯地区大肠埃希菌和阴沟肠杆菌质粒介导头孢菌素酶、超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的 了解佳木斯地区临床分离的大肠埃希菌和阴沟肠杆菌中质粒介导头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)流行情况及主要的基因型别.方法 127株临床分离无重复大肠埃希菌81株与阴沟肠杆菌46株,采用酶提取物三维实验检测产AmpC酶和ESBLs菌株,聚合酶链反应(PCR)扩增质粒型AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定以确定其基因亚型.结果 46株阴沟肠杆菌中,单产AmpC酶者、单产ESBLs者、高产AmpC酶并产ESBLs者分别占21.7％、28.3％、6.5％;81株大肠埃希菌中,单产AmpC酶者、单产ESBLs者、高产AmpC酶并产ESBLs者分别占19.8％、38.3％、9.9％.大肠埃希菌ESBLs基因型为TEM、SHV、CTX-M,质粒AmpC酶基因型为DHA.阴沟肠杆菌ESBLs基因型为TEM、SHV、CTX-M,质粒AmpC酶基因型为DHA.结论 CTX-M型和DHA-1型分别是本地区大肠埃希菌和阴沟肠杆菌ESBLs和质粒介导AmpC酶的主要流行基因型.     

252株金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性分析

目的了解金黄色葡萄球菌(SA)的临床分布及耐药性特征。方法收集该院2009年1月至2010年12月临床分离的SA,采用WHONET5.4软件进行分析。结果共分离SA252株,其分离出的SA标本以痰为主,占47.62%,其次为分泌物和脓液。检出率前3位的科室为ICU、骨外科和呼吸内科。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)78株,占30.95%,其中ICU的MRSA检出52株,检出率高于非ICU。除万古霉素、利奈唑胺、利福平及氯霉素对其保持较低耐药率外,对其他抗菌药物耐药率均较高。ICU内SA耐药率高于非ICU。结论通过分析SA的临床分布及耐药性特征,有利于采取措施控制NRSA的流行和指导临床用药。     

Emergence and management of drug-resistant enterococcal infections

The treatment of multidrug-resistant enterococcal infections continues to be a challenge for clinicians. Glycopeptide and β-lactam resistance is now a common feature of the majority of Enterococcus faecium hospital isolates, and resistance to aminoglycosides, quinupristin–dalfopristin, linezolid and daptomycin further complicates the problem. New antibiotics, such as tigecycline, lipoglycopeptides (dalbavancin, oritavancin and telavancin) and cephalosporins with activity against Enterococcus faecalis (ceftobiprole and ceftaroline), may have potential activity against certain resistant enterococcal strains in specific clinical settings, as may some older antibiotics, such as ampicillin, chloramphenicol, doxycycline, minocycline and nitrofurantoin. However, the treatment of endovascular infections (particularly endocarditis, where bactericidal therapy is important for optimal cure rates) caused by resistant enterococci continues to be an immense challenge even with the availability of new agents. The optimal therapy for these infections is not well established and clinical data are usually limited to case reports with conflicting results. Therefore, treatment decisions may have to be based on animal models and sporadic experiences and the best approach is for the physician to consider carefully each patient on a case by case manner and gather all the clinical and microbiological information possible regarding species identification and susceptibilities in order to choose a therapeutic regimen that would appear to be active.     

某院近5年多重耐药菌流行病学特点及耐药性研究

目的回顾性分析广东省第二中医院近5年多重耐药菌的种类、标本类型及临床科室分布,以及其耐药情况,为临床多重耐药菌的治疗、防控提供科学的指导。方法统计2011~2015年该医院实验室细菌培养阳性标本,分析各菌种中多重耐药菌产生的种类、比例、耐药情况及其在临床标本、科室之间的分布情况。结果 5年间分离的多重耐药菌有2 568例,占阳性标本的37.41%,其中数量排在前5位的为大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌;多重耐药菌阳性率较高的标本是痰液、中段尿、血液、分泌物、脓液,从导管头、耳分泌物中分离阳性率较低(P0.05);多重耐药菌在病区之间存在差异,其中重症监护室、呼吸科、外科最高,脾胃科和乳腺科最低(P0.05);多重耐药菌的耐药性发生较广泛,对β-内酰胺类、氨基糖苷类抗菌药物的耐药性较高,对复合抗菌药物如复方磺胺甲噁唑、含酶类抑制剂的敏感性相对较高。结论多重耐药菌在临床上越来越多见,阳性率逐年增高,耐药菌株分布广,临床科室应予高度重视。合理、科学地使用抗菌药物,严格控制多重耐药菌的传播,加强此类患者的隔离,对有效防控多重耐药菌的扩散有重要意义。     

5504株临床分离细菌和念珠菌的分布及耐药性分析

目的了解本院临床分离细菌和念珠菌的分布特征和耐药谱,为合理使用抗生素提供依据。方法大多数分离细菌的鉴定和药敏试验利用BD Phoenix仪,少数利用手工鉴定和K-B法。念珠菌利用显色平板分离和鉴定,K-B法药敏。数据分析用WHONET5.4软件。结果5504株细菌念珠菌中前6位为铜绿假单胞菌12.0%、大肠埃希菌9.7%、白色念珠菌8.7%、金黄色葡萄球菌6.9%、肺炎克雷伯菌6.8%、表皮葡萄球菌6.5%。G-杆菌中耐药率较低的为美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦、亚安培南、哌拉西林-他唑巴坦、头孢他啶、阿米卡星和头孢吡肟。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率为44.6%和40.1%。G 球菌耐药率较低的为万古霉素、替考拉宁、呋喃妥因、阿米卡星、氯霉素和头孢哌酮/舒巴坦。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌和腐生葡萄球菌甲氧西林耐药性分别为55.9%、43.8%、48.2%和41.7%。念珠菌对两性霉素B和制菌霉素的耐药率均低于1.1%。结论本院临床分离肠杆菌科产ESBLs水平、非发酵菌多重耐药率和葡萄球菌甲氧西林耐药率居高不下,应加强抗生素的合理使用。     

汉中地区2010年细菌耐药性监测分析

目的 了解2010年在该院就诊患者临床分离细菌的耐药情况,指导抗生素的合理使用.方法分离菌采用美国德灵WalkAway 40SI全自动细菌鉴定仪和法国梅里埃API手工鉴定系统进行鉴定;药物敏感性实验的MIC法采用美国德灵WalkAway 40SI全自动细菌鉴定仪自动分析,纸片扩散法按美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的纸片扩散法进行;判读标准依据2009年CLSI的抗菌药物敏感性实验执行标准M100-S19.结果 2010年1～12月门诊及住院患者细菌培养标本8 792例中收集的非重复临床分离菌株2 745株,其中革兰阴性菌占72%,革兰阳性菌占28%.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检出率48.4%和46.3%;金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率12.7%;凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率44.4%.未分离到万古霉素不敏感的葡萄球菌和肠球菌.结论 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs产生率较高而葡萄球菌中的MRSA和MRCNS产生率低;对于肺炎链球菌红霉素和阿奇霉素耐药率为100%,是本地区耐药监测的特点,整体监测结果与全国和其他地方有很多相似之处,但又存在差异,所以各自区域的耐药监测是必要的.     

细菌对多粘菌素耐药机制的研究进展与展望

随着临床使用的增加,多粘菌素作为“最后一道防线”的耐药率呈逐渐上升趋势,使得难治性感染的抗菌治疗陷入困境,因而深入了解其耐药机制显得尤为重要。本文从脂多糖修饰、质粒介导、外排泵、外膜蛋白等多个层面对多粘菌素的获得性耐药机制进行了综述,以期为临床合理使用多粘菌素及控制耐药菌的产生提供理论依据。     

2018年贵州省人民医院细菌耐药监测报告

目的:了解贵州省人民医院2018年临床分离株对常用抗菌药物的耐药性.方法:采用自动化仪器MIC法,纸片扩散法(K-B法)和E-Test法对临床分离株进行药敏试验,并按美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2017年标准判断药敏试验结果,数据分析采用WHONET5.6软件,对2018年细菌耐药资料作回顾性调查分析.结果:2018年共收集非重复分离菌8534株,革兰阴性菌为67.8%(5784/8534),革兰阳性菌33.2%(2750/8534).排名前三的细菌分别为大肠埃希氏菌,肺炎克雷伯氏菌,金黄色葡萄球菌.其中分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)308株,检出率为37%(308/834);大肠埃希菌,肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药率分别为1.2%,18.5%;铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率分别为22.1%;鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率分别为64.4%.结论:对细菌耐药性进行长期监测有助于了解我院细菌耐药性的变迁,为临床合理用药提供依据.     

HBV基因分型和耐药突变基因检测

目的探讨东营地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布,乙型肝炎患者耐药情况,HBV基因型别与耐药以及突变位点关系。方法收集乙型肝炎患者血清300例,采用离心柱法提取HBV-DNA,聚合酶链反应(PCR)-反向点杂交法检测HBV分型和耐药突变。结果 300例HBV-DNA阳性患者中,检出B型、C型、B/C型及其他未检测出的基因型,未检出D型分型,检出结果中以C型为主,占81.8%;HBV患者耐药药物以拉米夫定和替比夫定的联合耐药为主,占43.6%;HBV耐药突变基因型主要为rt204I(24.35%)、rt204V(17.39%)及rt180M(17.39%);B型和C型的耐药突变率分别为30.77%和42.42%,差异有统计学意义(P0.05)。结论东营地区HBV基因C型多于B型,C型容易产生耐药,以rt204I,rt204V及rt180M基因突变型多见,拉米夫定和替比夫定的联合耐药多见,应根据基因分型和耐药突变结果对乙型肝炎患者选择适合的治疗方案。     

Distribution of fibronectin-binding protein genes (prtF1 and prtF2) and streptococcal pyrogenic exotoxin genes (spe) among Streptococcus pyogenes in Japan

Two hundred and seventy-two strains of Streptococcus pyogenes isolated from patients with invasive and noninvasive infections in Japan were evaluated for the prevalence of fibronectin-binding protein genes (prtF1 and prtF2). The possible associations of the genes with streptococcal pyrogenic exotoxin genes, macrolide resistance genes, and emm types were also evaluated. Overall, about 50% of S. pyogenes isolates carried fibronectin-binding protein genes. The prevalence of the prtF1 gene was significantly higher among isolates from noninvasive infections (71.4%) than among isolates from invasive infections (30.8%; P = 0.0037). Strains possessing both the prtF1 and prtF2 genes were more likely to be isolates from noninvasive infections than isolates from invasive infections (50.6% vs 15.4%; P = 0.019). S. pyogenes isolates with streptococcus pyrogenic exotoxin genes (speA and speZ) were more common among isolates without fibronectin-binding protein genes. The speC gene was more frequently identified among isolates with fibronectin-binding protein genes (P = 0.05). Strains belonging to emm75 or emm12 types more frequently harbored macrolide resistance genes than other emm types (P = 0.0094 and P = 0.043, respectively). Strains carrying more than one repeat at the RD2 region of the prtF1 gene and the FBRD region of the prtF2 gene were more prevalent among strains with macrolide resistance genes than among strains negative for macrolide resistance genes. These genes (i.e., the prtF1, prtF2, and spe genes) may enable host-bacteria interaction, and internalization in the host cell, but may not enable infection complications such as invasive diseases.