儿童原发性肾病综合征外周血GRβ及TNF-α的变化及意义

目的 探讨原发性肾病综合征（PNS）患儿外周血单个核细胞（PBMC）上糖皮质激素受体β（GRβ）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）与糖皮质激素治疗效应之间的关系.方法 以30例PNS患儿作为观察组,根据随访结果分成激素耐药型（SRNS）和激素敏感型（SSNS）2 组,各15例.10名健康儿童作为正常对照组.应用RT-PCR 检测各组PBMC上GRβmRNA的表达;采用ELISA方法检测各组血浆中TNF-α的含量;并分析以上指标与肾脏病理及相关实验室指标的关系.结果 （1）SSNS组患儿PBMC GRβmRNA的表达及血浆TNF-α水平均高于对照组（P＜0.05）.（2）SRNS组患儿PBMC GRβmRNA的表达及血浆TNF-α水平均高于SSNS组（P＜0.01）.（3）15例SRNS组患儿PBMC GRβmRNA的表达与肾脏病理分级成等级正相关（r=0.496,P＜0.05）;与24小时尿蛋白定量（24hUTP）成等级正相关（r=0.458,P＜0.05）.（4）15例SSNS组患儿PBMC GRβmRNA的表达与24hUTP无相关性（P＞0.05）.（5）30例PNS患儿PBMC GRβmRNA的表达与血浆TNF-α水平成等级正相关（r=0.450,P＜0.05）.结论 GRβ可以作为监测PNS患儿病情以及预后的指标之一.TNF-α升高可能导致GRβmRNA的表达升高,在SRNS形成与发展中起到重要作用.     

大疱性类天疱疮皮损糖皮质激素受体α和β表达的研究

目的了解大疱性类天疱疮（BP）皮损中糖皮质激素受体（GR）的表达与激素治疗反应的关系，探讨其表达在糖皮质激素（GC）治疗抵抗中的作用及意义。方法选择33例病理诊断为BP皮损的患者，根据既往病案调查分为激素治疗敏感组、激素治疗抵抗组，26例外科手术切取的健康皮肤作为正常对照。用免疫组化SP法（链酶卵白素-过氧化物酶法）检测BP患者皮损、正常对照组皮肤GR-α、GR-β的表达数量、强度和分布特点。结果激素治疗敏感组、激素治疗抵抗组、正常对照组的表皮各层细胞中GR阳性细胞分布、强度及数量不完全相同。结论GR在皮损组织中的表达强度及数量与是否产生GC治疗抵抗密切相关，检测BP患者皮损中表达可做为预测激素治疗反应的重要指标。     

肾细胞癌中Mina 53的表达及其与临床病理及预后的关系

目的探讨肾细胞癌组织中Mina53的表达水平及其与临床病理及预后的关系。方法采用RT-PCR技术测定96例肾细胞癌组织及20例癌旁正常肾组织中Mina53的表达,免疫组化法测定其蛋白水平的表达,分析其结果与临床病理及预后的关系。结果 Mina53平均模板量在肾细胞癌组织中的表达明显高于正常肾组织的表达（P〈0.01）,且在Ⅲ期、Ⅳ期肾细胞癌组织中的表达明显高于Ⅰ期、Ⅱ期的表达水平（P〈0.01）,Mina53蛋白在肾细胞癌组织中的表达水平明显高于其在正常肾组织的表达水平（P〈0.01）;Mina53高表达者的预后较低表达者明显要差（P〈0.01）。结论 Mina53基因及蛋白的高表达与肾细胞癌临床病理分期有关,其表达水平越高,预后越差,Mina53有望成为预后判断的新指标。     

急性白血病病人骨髓细胞BAALC基因表达及意义

目的通过检测脑和急性白血病胞质（BAALC）mRNA在急性白血病（AL）病人表达,探讨其与AL病情进展及预后关系。方法应用逆转录聚合酶链反应技术,检测20例急性髓系白血病（AML）、8例急性淋巴细胞白血病（ALL）及11例特发性血小板减少性紫癜（ITP）、缺铁性贫血（IDA）等非恶性血液病病人（对照组）骨髓单个核细胞BAALC mRNA表达水平。结果初治组AL病人BAALC mRNA表达水平较对照组显著升高（F=8.59,q=5.62,P〈0.05）;经治疗获完全缓解后,与初治组比较,其表达水平显著下降,两组比较差异有显著性（q=3.99,P〈0.05）。BAALC mRNA表达水平与AL病人外周血白细胞计数及骨髓原始细胞比例无明显相关性（P〉0.05）。结论 BAALC mRNA表达与AL疾病进展及预后密切相关,可作为AL预后判断的有意义指标。     

急性冠状动脉综合征患者外周血单个核细胞核因子-κB和糖皮质激素受体及活化蛋白-1的表达

目的探讨核因子-κB（NF-κB）、糖皮质激素受体（GR）和活化蛋白-1（AP-1）的核内蛋白水平的变化与急性冠状动脉综合征（ACS）的关系。方法初步诊断为冠心病并行选择性冠状动脉造影患者共52例。其中急性心肌梗死（AMI）14例,不稳定型心绞痛（UAP）14例;稳定型心绞痛（SAP）患者13例,冠状动脉造影正常者11例。采用Western-blot法检测外周血单个核细胞（PBMC）NF-κB、GR和AP-1蛋白表达水平的变化。结果 ACS组NF-κBp65、c-Jun/AP-1蛋白表达水平较SAP组和对照组明显增高（P〈0.05）;ACS组GR-α蛋白表达水平较SAP组和对照组明显降低（P〈0.05）。结论 ACS患者与SAP患者比较,存在NF-κB、AP-1的激活和GR的抑制。     

黄芪甲苷对体外炎症状态下单核细胞NF-κB及糖皮质激素受体表达的影响

目的：研究体外炎症状态下,黄芪甲苷对单核细胞糖皮质激素受体和NF-κB及主要细胞因子表达水平的影响。方法：以脂多糖（LPS）刺激体外培养的大鼠单个核细胞以建立体外炎症模型;按照黄芪甲苷95%有效量（ED95）干预炎症状态下的单核细胞,实验分为6组：①正常单核细胞对照组（NC）;②黄芪甲苷对照组（AS）;③脂多糖对照组（LPS）;④糖皮质激素实验组（LPS＋Dex）;⑤黄芪甲苷实验组Ⅰ（LPS＋As）;⑥黄芪甲苷实验组Ⅱ（LPS＋As＋Dex）。用反转录PCR（RT-PCR）和Western blot方法检测糖皮质激素受体（GR）、核因子κB（NF-κB）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达水平。结果：①LPS刺激后GRαmRNA表达量有所下降,加激素组与单纯LPS刺激比较无明显差异,黄芪甲苷可使GRαmRNA表达量表达显著增加;②LPS刺激后GRβmRNA表达显著增加,加激素或黄芪甲苷后与单纯LPS刺激比较均无明显差异;③LPS刺激后NF-κBmRNA表达显著增加,加激素或黄芪甲苷后与单纯LPS刺激比较均无明显差异;④LPS刺激后TNF-αmRNA表达增加,地塞米松能抑制其表达,单用黄芪甲苷对其表达也具有抑制作用,联合激素和黄芪甲苷对其抑制作用更明显。结论：黄芪甲苷能显著增加GRα的表达,与地塞米松联合能显著抑制细胞因子TNF-α的表达。     

GR亚型α和β在口腔扁平苔藓中的表达及临床分析

目的研究糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)亚型α和β在口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)中的表达特点,探讨GR与OLP发生及临床分型的关系。方法分别采用RT-PCR和免疫组化法检测GR亚型α和β在32例OLP患者(斑纹型18例,糜烂型14例)局部病损口腔黏膜和12例健康口腔黏膜的表达情况,并分析GRα/GRβ比值的差异。结果 GRα和GRβ均主要表达于OLP角质形成细胞。OLP病变口腔黏膜中GRαmRNA的表达水平降低(P=0.000),GRα/GRβ比值下降(P=0.000),而GRβmRNA的表达水平与健康对照组无统计学差异(P=0.07)。GRαmRNA、GRβmRNA及GRα/GRβ比值在斑纹型和糜烂型OLP中的表达均无统计学差异(分别为P=0.263,P=0.729,P=0.150)。结论 OLP中GR主要表达于局部病损区的角质形成细胞,GR亚型表达改变可能与OLP局部病损的发生有关。此外,GR亚型的表达水平可能与OLP病情的严重程度无关。     

激素对肺损伤大鼠肺内水通道蛋白-1及钠钾-ATP酶的影响

目的 观察不同剂量氢化可的松（hydrocortisone,HC）对急性肺损伤（ALI）大鼠肺内水通道蛋白-1（AQP-1）和钠钾-ATP酶的影响及机制.方法 间隔5 h分2次注射灭活大肠杆菌建立早期休克Wistar大鼠ALI模型.40只鼠随机分为5组：正常对照组、肺损伤组、大剂量HC组（150 mg/kg）、中剂量HC组（20 mg/kg）、小剂量HC组（6 mg/kg）.给药2 h后收集肺组织标本,观察肺组织病理形态和计算肺损伤病理评分,并采用免疫组化法观察肺内水通道蛋白-1、钠钾-ATP酶、糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）的表达.结果 肺损伤组肺损伤病理评分显著高于正常对照组（P＜0.05）.使用HC干预后,各剂量组较肺损伤组明显降低（P＜0.05）,以小剂量组下降最明显（P＜0.05）.中剂量组肺损伤病理评分虽较大剂量组降低,但两组间差异无显著性;肺内AQP-1和钠钾-ATP酶表达,肺损伤组显著低于正常对照组（P＜0.05）,使用HC干预后,各剂量组肺内AQP-1和钠钾-ATP酶表达均较肺损伤组升高,以小剂量组最明显（P＜0.05）,中剂量组较大剂量组表达增强,但差异无显著性;肺内GR表达,肺损伤组显著低于正常对照组（P＜0.05）,使用HC干预后,各剂量组肺内GR表达均较肺损伤组升高,但仅小剂量组差异达显著性（P＜0.05）.大、中剂量组间差异无显著性.指标间相关性分析提示,GR与AQP-1和钠钾-ATP酶表达均存在明显直线正相关关系（r=0.43,P=0.007;r=0.31,P=0.015）.结论 不同剂量HC干预早期休克大鼠ALI显示,在改善肺泡液体转运、肺组织病理改变等方面,均以小剂量HC最佳,未发现剂量依赖效应.不同剂量HC干预效果差异的原因可能与GR表达水平有关.     

研究PODXL在肾透明细胞癌中的表达及相关意义

目的：研究足细胞标志蛋白在透明细胞肾细胞癌组织与正常组织中的表达差异,并初步分析足细胞标志蛋白与肾透明细胞癌的临床诊断和患者预后的关系。方法：运用癌症基因组图谱数据库收集转录组测序技术数据和临床数据,观察透明细胞肾细胞癌患者组织与正常组织中足细胞标志蛋白基因表达量的差异,同时分析足细胞标志蛋白与临床病理学及预后之间的关系。结果：在癌症基因组图谱数据库中,总体526例透明细胞肾细胞癌样本的癌和癌旁组织中的足细胞标志蛋白的表达水平分别为（6.42±1.42）和（3.61±1.31）,差异有统计学意义（P＜0.001）。72例配对的透明细胞肾细胞癌和癌旁组织中的足细胞标志蛋白表达水平分别为（6.55±1.23）和（3.53±1.35）,差异有统计学意义（P＜0.001）。足细胞标志蛋白的表达因患者性别、病理分级、TNM分期、远处转移、临床分期等不同均有差异（P＜0.001）。生存分析发现,足细胞标志蛋白低表达量组和高表达量组的生存时间分别为（1 446.75±956.32） d和（1 253.81±939.57） d,差异有统计学意义（P＜0.001）。受试者工作特征曲线结果显示,足细胞标志蛋白基因可作为一个灵敏度和特异度较高的透明细胞肾细胞癌诊断指标：其中ROC曲线下面积为0.805,敏感性为67.26%,特异性为78.17%。结论：足细胞标志蛋白在透明细胞肾细胞癌中高表达与临床病理特征呈正相关,是预后不良因素,有望作为肾透明细胞癌患者的生存预后及诊断的潜在生物学标志。     

肾透明细胞癌中c-FLIP mRNA表达及临床意义

目的探讨细胞型Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白（c-FLIP）在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学及RT-PCR方法对56例肾透明细胞癌组织及10例癌旁正常肾组织中c-FLIP蛋白及c-FLIP mRNA表达进行分析,观察c-FLIP mRNA表达与临床分期及预后之间的关系。结果c-FLIP蛋白及c-FLIP mRNA在肾透明细胞癌组织中呈高表达（P〈0.05）,其表达与肾透明细胞癌的临床分期无关,但阳性表达患者的生存率低于阴性表达者（P〈0.05）。结论肾透明细胞癌组织中c-FLIP mRNA表达较高,特异性较强,可作为观察肾透明细胞癌预后的重要指标之一。