肺间质纤维化形成中相关细胞因子mRNA表达的实验研究

目的观察肺间质纤维化形成过程中相关细胞因子mRNA表达的动态变化。方法通过逆转录聚合酶链反应(RTPCR)观察博莱霉素所诱导的肺间质纤维化大鼠模型不同时期肺组织细胞中相关细胞因子的mRNA表达(IL1,IL8,TGFβ)的动态变化。结果用博莱霉素诱导的肺组织细胞相关细胞因子的mRNA的相对含量明显高于对照组。IL1在1d内mRNA的含量是对照组的18倍(t=1316,P<001)持续升高,2周后有所下降;IL8在1d内高于对照组16倍(t=1067,P<001)持续性升高无明显下降趋势;TGF在1～3d增高是对照组的19倍,但1～2周中有下降的趋势,3～4周再次表现为高表达,并保持较高的水平。结论这些致纤维化细胞因子可能作为肺间质纤维化的进程的启动因素和肺间质炎症反应的直接参与者。     

己酮可可碱抗肝纤维化及对I型胶原表达影响的实验研究

目的 研究己酮可可碱对胆管阻塞性肝纤维化大鼠Ⅰ型胶原基因表达的影响和抗纤维化的作用.方法 雄性SD大鼠60只,分为假手术组、肝纤维化模型组、己酮可可碱组.6周后比较各组肝组织学评分,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)mRNA表达水平,分析其对胶原合成的影响.结果 已酮可可碱能够降低纤维化的组织学评分,降低Col-Ⅰ mRNA表达水平.结论 己酮可可碱在大鼠胆管阻塞性肝纤维化模型中具有一定的抗纤维化作用.     

磁共振靶向成像检测心肌纤维化大鼠模型中TGF-β1表达的实验研究

目的 构建载转化生长因子-β1 (transforming growth factor beta-1, TGF-β1)的超小超顺磁性氧化铁（ultrasmall supperparamagneticironoxide,USPIO）靶向探针（USPIO-anti-TGF-β1）,探究其表征及磁共振成像（magneticresonance imaging, MRI）靶向检测大鼠心肌纤维化（myocardial fibrosis, MF）模型中TGF-β1表达的可行性。材料与方法 选择40只雄性SD大鼠,其中30只采用异丙肾上腺素（isoprenaline, ISO）皮下注射法建立MF模型,另外10只作为健康对照组。通过超声评估大鼠模型建立情况。将造模成功的30只大鼠随机分为实验组、单纯对照组及空白对照组,每组10只;构建USPIO-anti-TGF-β1靶向探针,通过尾静脉注入实验组大鼠体内,单纯对照组及空白对照组分别注入相同剂量的USPIO和生理盐水,并于注射12 h后行T2*序列扫描。扫描完成后取大鼠心肌标本行病理学分析。采用独立样本t检验对给药前后的MRI信号强度变化进行分析。结果 ...     

萝卜硫素通过Nrf2/ARE通路缓解矽肺模型大鼠肺组织纤维化及氧化应激的实验研究

目的研究萝卜硫素对矽肺模型大鼠肺组织纤维化、氧化应激及抗氧化通路核因子E2相关因2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)通路的影响。方法选择SD大鼠并随机分为对照组、模型组和萝卜硫素组,对照组支气管灌注生理盐水,后两组给予1 ml含有50 mg/ml二氧化硅的生理盐水支气管灌注以建立矽肺模型。造模当天开始,萝卜硫素组给予5 mg/kg萝卜硫素腹腔注射,对照组和模型组给予等剂量生理盐水腹腔注射,1次/d,连续8周。取肺组织进行HE染色并检测胶原蛋白、氧化应激介质的含量及Nrf2/ARE通路分子的表达量。结果与对照组比较,模型组大鼠HE染色可见明显的病理变化且肺组织中胶原蛋白-I(Col-I)、胶原蛋白-III(Col-III)、丙二醛(MDA)的含量及Nrf2、ARE的表达量明显增多,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)的含量及Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap-1)的表达量明显减少,差异均有显著性(P<0.05);与模型组比较,萝卜硫素组大鼠HE染色可见病理变化减轻且肺组织中Col-I、Col-III、MDA的含量及Keap-1的表达量减少,SOD、GSH的含量及Nrf2、ARE的表达量明显增多,差异均有显著性(P<0.05)。结论萝卜硫素能够缓解矽肺模型大鼠肺组织纤维化及氧化应激,且该作用与Nrf2/ARE通路的激活有关。     

携载阿霉素磁性纳米Fe3O4颗粒的制备及逆转多药耐药的实验研究

为了建立一种磁性纳米Fe3O4颗粒携载聚合阿霉素的制备方法,探讨载药纳米颗粒对K562及其耐药株K562/A02的作用,用机械吸附聚合法在4℃、37℃下以不同药球比聚合24、48小时合成载药纳米颗粒,用噻唑蓝比色法检测细胞与载药纳米颗粒悬液孵育48小时后的生存率,并计算细胞抑制率。结果表明：随着磁性纳米Fe3O4颗粒浓度增加,两种细胞抑制率均提高,聚合在4℃、48小时时的细胞抑制率分别高于37℃、24小时的细胞抑制率。结论：磁性纳米Fe3O4颗粒可通过机械吸附法携载阿霉素,聚合具有温度、时间依赖特性;载药纳米颗粒有逆转多药耐药作用。     

透骨消痛颗粒水提与醇提物含药血清干预骨髓基质干细胞活性的实验研究

背景：骨髓基质干细胞根据环境而有不同的分化路径,在特定的环境中有分化为透明软骨细胞的趋势,可能为治疗骨性关节炎提供新思路。目的：观察透骨消痛颗粒水提与醇提物含药血清对骨髓基质干细胞活性的影响。方法：制备透骨消痛颗粒水、醇提物,108只SD大鼠随机摸球法均分为低、中、高剂量对照组、水、醇提物组,腹主动脉采血制备含药血清。取4周龄SD大鼠四肢骨髓基质干细胞,第3代同步化后用含药血清进行干预,MTT检测其活性,流式细胞仪检测其周期分布,Real time PCR检测Cyclin D1 mRNA表达,Western Blot检测Cyclin D1蛋白表达。结果与结论：透骨消痛颗粒水、醇提物含药血清干预48h后,软骨细胞的A值中高剂量组明显高于对照组（P〈0.01,P〈0.05）;各组G0/G1期细胞,水、醇提物组明显低于对照组（P〈0.01）,水提物组明显低于醇提物组（P〈0.05）;各组增殖指数及Cyclin D1 mRNA及蛋白表达水、醇提物组明显高于对照组（P〈0.01）,水提物组明显高于醇提物组（P〈0.05）。说明透骨消痛颗粒水醇提物含药血清通过上调Cyclin D1的表达,加速骨髓基质干细胞周期的进程,从而促进其增殖,且透骨消痛颗粒水提物的效果优于醇提物。