小窝蛋白-1和NF-κB在机械通气肺损伤大鼠肺组织中的表达

目的通过观察小窝蛋白-l(cav-1)及NF-κB p65、IL-8在大潮气量机械通气大鼠肺组织中的表达变化,探讨cav-1在通过对NF-κB信号转导通路的影响而导致对肺组织的损伤作用。方法将雄性SD大鼠随机分为三组:对照组、大潮气量通气0.5 h组(H-VT0.5h组)和大潮气量通气2 h组(H-VT2h组)。光镜下观察各组大鼠肺组织病理学改变;免疫组织化学染色法检测肺组织中cav-1的蛋白含量;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NF-κB p65的m RNA表达;计算肺湿/干重比值(W/D);酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-8的含量,并对cav-1及NF-κB p65进行相关性分析。结果 H-VT2h组肺组织中肺W/D比值、cav-1的蛋白表达、NF-κB p65 m RNA的表达水平及BALF中IL-8的含量均大于H-VT0.5h组,差异有统计学意义(均P<0.05);H-VT0.5h组肺组织中肺W/D比值、cav-1的蛋白表达、NF-κB p65 m RNA的表达水平以及BALF中IL-8的含量均大于对照组,但差异无统计学意义(均P>0.05)。相关性分析结果显示,各组大鼠肺组织cav-1蛋白表达水平与NF-κB p65 m RNA表达水平之间呈正相关(r=0.820,P<0.01)。结论 cav-1在机械通气导致肺损伤发生中可能起损伤作用。这种损伤作用可能与cav-1经过多种途径激活NF-κB炎症信号通路,使IL-8等细胞因子释放有关,最终导致炎症的加重和肺组织损伤。     

胆碱能抗炎通路对大鼠呼吸机相关性肺损伤的影响

目的 研究胆碱能抗炎通路对呼吸机相关性肺损伤(VILI)的影响.方法 36只SD大鼠按随机数字表法分为自主呼吸对照组、机械通气组、烟碱治疗组,每组12只.采用大潮气量(VT)通气制作大鼠VILI模型.于机械通气前10 min腹腔注射烟碱生理盐水2 mg/kg,其余两组注射等量生理盐水.各组大鼠均行血流动力学和动脉血气监测;通气2 h处死大鼠取肺组织,测定肺湿/干重(W/D)比值和髓过氧化物酶(MPO)活性,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-8(IL-8)含量及肺组织匀浆细胞间黏附分子-1(ICAM-1)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变,按修改后弥漫性肺泡损伤评分系统(DAD)进行评分.结果 机械通气期间,机械通气组和烟碱治疗组动脉血pH值呈升高趋势,动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、平均动脉压(MAP)均呈下降趋势.机械通气2 h,烟碱治疗组PaO2(mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa)显著高于机械通气组(85±4比76±3,P<0.05).机械通气组肺W/D比值和MPO活性显著高于对照组[W/D比值:5.66±0.33比4.53±0.21,P<0.01;MPO(U/g):1.73±0.50比0.89±0.17,P<0.05];烟碱治疗组肺W/D比值(5.02±0.37)和MPO活性(1.11±0.33)显著低于机械通气组(均P<0.05).与对照组比较,机械通气组和烟碱治疗组DAD评分(分:10.40±1.85、7.90±1.67比1.60±1.20)、IL-8(ng/L:1 625.3±271.7、965.5±310.5比428.5±120.6)及ICAM-1(μg/L:589.4±87.5、452.5±89.3比247.5±73.7)显著升高(均P<0.01),但烟碱治疗组各指标明显低于机械通气组(P<0.05或P<0.01).结论 胆碱能抗炎通路可抑制VILI大鼠肺组织中IL-8、ICAM-1的表达,减少中性粒细胞在肺内的黏附与渗出,从而减轻肺损伤.     

不同潮气量机械通气对肺损伤的影响及其针对性护理

目的 研究不同潮气量机械通气对肺损伤的影响,探讨机械通气时的针对性护理措施.方法 将24只健康SD大鼠随机分为对照组（n=8）、小潮气量通气组（n=8,VT=8 ml/kg）和大潮气量通气组（n=8,VT=40ml/kg）.通气时间均为4 h.检测肺组织总蛋白、肺湿干重比（W/D）、白细胞计数和中性粒细胞髓过氧化物酶（MPO）含量以及肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白和mRNA的含量.结果与对照组比较,大潮气量通气组肺组织总蛋白、W/D、白细胞计数和MPO含量以及TNF-α蛋白和mRNA含量均显著增加（P〈0.05）,而小潮气量通气组上述指标的变化无统计学意义（P〉0.05）.结论 大潮气量机械通气可导致呼吸机所致肺损伤,临床上应加强对机械通气患者的护理防护.     

TNF—α、IL—8在机械通气致肺损伤中的作用

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素8(IL-8)在机械通气致肺损伤中的可能作用。方法24只普通健康小猪随机等分为对照组、低潮气量组(A组)、正常潮气量组(B组)、大潮气量组(C组),采用持续给予小猪不同潮气量通气动物模型,利用放射免疫法、酶联免疫法(ELISA)和髓过氧化物酶(MPO)测定法,分别检测不同潮气量组通气1、3、7d后,血清和肺组织匀浆中TNF-α、IL-8及MPO含量的变化。结果A、B、C组血清、肺组织匀浆TNF-α、IL-8及MPO的含量较对照组升高(P＜0.05或P＜0.01),其中3d后,TNF-α达峰值;7d后IL-8及MPO达峰值,以A、C组明显。结论TNF-α、IL-8在机械通气致肺损伤中可能发挥重要作用。     

动态通气参数对急性呼吸窘迫综合征犬肺损伤的作用机制

目的 探讨机械通气动态通气参数对ARDS犬肺内肺炎症介质的影响及其作用途径.方法 取36条健康杂种犬,采用气管内盐酸吸入法建立ARDS模型,随机(随机数字法)分为对照组,ARDS模型组及实验犬组,实验犬组随机分成A,B,c,D四组,每组6条.A组:小潮气量(6 mL/kg),低吸气流速[6mL/kg·s)],高通气频率(30次/min);B组:大潮气量(20mL/kg),高吸气流速[20mL/(kg·s)],高通气频率(30次/min);C组:大潮气量(20 mL/kg),高吸气流速[17 mL/(kg·s)],低通气频率(15次/min);D组:大潮气量(20 mL/kg),低吸气流速[10 mL/(kg·s)],低通气频率(15次/min).机械通气4 h后处死动物,留取肺组织标本行免疫组化、Western blotting检测TNF-α,IL-8,p38 MAPK蛋白的变化,RT-PCR测定TNF-α,IL-8 mRNA的表达,流式细胞仪检测NF-κB活性.结果 B组IL-8蛋白表达明显较A,D组高,c组IL-8蛋白表达较B组有下降趋势,但B,C组之间差异无统计学意义;B组TNF-α的灰度比值明显较其他组高(P<0.01),但与C组比较差异无统计学意义(P>0.05);B组p38 MAPK表达明显较A,D组高(P<0.01);A,D组之间的p38 NAPK表达差异无统计学意义(P>0.05).B组NF-κB p65(33.56±2.85)%表达较A(10.35±0.6)%,D(7.11±0.47)%两组差异有统计学意义,B组与C组(30.87±1.16)%之间差异无统计学意义.结论 在相同的大潮气量基础上,高吸气流速和高通气频率可以激活肺组织p38 MAPK及NF-κB通道,炎症介质的释放增加,导致呼吸机相关性肺损伤,小潮气量机械通气可减轻炎症反应.     

p38信号通路参与呼吸机所致肺损伤大鼠高迁移率族蛋白B1的表达

目的 研究p38信号通路在呼吸机所致肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)大鼠肺组织表达高迁移率族蛋白BI(high mobility group box 1 protein,HMGB1)中的作用.方法健康sD大鼠24只随机分为3组:对照组(A组)不行机械通气,保留自主呼吸;常规通气组(B组)潮气量(Vt)为8mL/kg;大潮气量通气组(C组)Vt为40 mL/kg.机械通气4 h后处死动物,测定支气管肺泡灌洗液中总蛋白水平、白细胞计数以及肺湿干重比值(W/D)和中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性.采用Western blot方法检测肺组织HMGB1蛋白和p38激酶活性变化,采用RT-PCR方法检测HMGB1 mRNA的表达.应用单因素方差分析进行不同组别间的比较.结果 通气4 h后,与A组相比,C组总蛋白水平(1.77±0.68)g/L、白细胞计数(106.55±28.17)×10~7 L~(-1)、肺W/D比值(7.16±1.02)、MPO活性(3.94±1.21)U/g、HMGB1蛋白(0.64±0.17)和mRNA(1.17±0.45)表达以及p38激酶活性(0.51±0.12)均明显增加(P<0.05),而B组上述各项指标的变化均无统计学意义(P>0.05).结论大潮气量机械通气可引起大鼠急性肺损伤,p38参与了机械牵张诱导肺组织HMGB1的表达.     

机械通气致肺损伤的防护

[目的]通过研究大潮气量机械通气引起的肺损伤(VILI),提出机械通气时通气机所致VELI的护理防护.[方法]将24只健康雄性SD大鼠随机等分为对照组与实验组,对照组小潮气量通气(VT=8mL/kg);实验组为致伤组大潮气量通气(VT=40mL/kg).通气时间均为4 h,每小时行1次动脉血气分析.通气后行支气管肺泡灌洗液(BAIF)中性粒细胞计数,血清和BALF中TNF-α、IL-1β含量测定.[结果]实验组大鼠氧合指数较对照组显著下降,BALF中性粒细胞计数、血清和BALF中TNF-α、IL-1β水平较对照组显著增加.[结论]大潮气量机械通气能引起明显的VILI,临床上对于机械通气的病人,应尽量避免大潮气量通气,加强对通气机所致VILI的护理防护.     

机械通气致肺损伤的防护

[目的]通过研究大潮气量机械通气引起的肺损伤（VILI），提出机械通气时通气机所致VELI的护理防护。[方法]将24只健康绎巨SD大鼠随机等分为对照组与实验组，对照组小潮气量通气（VT=8mL／kg）；实验组为致伤组大潮气量通气（VT=40mL／kg）。通气时间均为4h，每小时行1次动脉血气分析。通气后行支气管肺泡灌洗液（BALF）中性粒细胞计数，血清和BALF中TNF—α、IL-1β含量测定。[结果]实验组大鼠氧合指数较对照组显著下降，BALF中性粒细胞计数、血清和BALF中TNF—α、IL-1β水平较对照组显著增加。[结论]大潮气量机械通气能引起明显的VILI，临床上对于机械通气的病人，应尽量避免大潮气量通气。加强对通气机所致VILI的护理防护。     

呼吸机致大鼠急性肺损伤的实验研究

目的探讨不同潮气量机械通气在大鼠急性肺损伤发生中的作用。方法32只Wistar大鼠随机分为对照组、小潮气量组、常规潮气量组和大潮气量组。分别在肉眼、光镜和电镜下观察各组大鼠肺组织病理学改变,测定动脉血气和BALF中性粒细胞计数(PMN)、蛋白含量和髓过氧化物酶(MPO)活性。结果小潮气量组肺组织在肉眼、光镜和电镜下观察与对照组比较差异无显著性；常规潮气量和大潮气量组肺组织在光镜和电镜下可观察到具有不同程度损伤改变,其BALF中PMN、MPO活性和蛋白含量均明显高于对照组和小潮气量组,而动脉血氧分压(PaO_2)明显低于对照组和小潮气量组(P＜0．01,P＜0．05)；大潮气量组BALF中MPO活性和蛋白含量与常规潮气量组比较差异也有显著性(P＜0．01)；小潮气量组各项指标与对照组比较差异均无统计学意义(P＞0．05)。结论小潮气量通气对正常肺组织无明显影响,但没有任何肺保护措施的常规潮气量通气对正常肺组织具有一定损伤作用,其损伤作用与中性粒细胞在肺内募集和活化有密切关系。     

不同潮气量机械通气过程中呼吸机相关性肺损伤的病理学变化

目的：观察不同潮气量机械通气下大鼠肺组织的病理学变化. 方法：实验于2006-05/2007-02在解放军第四军医大学唐都医院呼吸科实验室完成.①实验分组：SD大鼠60只按随机数字表法分为4组：对照组（未行机械通气）,常规潮气量组（潮气量10 mL/kg）,过度通气小潮气量组（潮气量20 mL/kg）,过度通气大潮气量组（潮气量40 mL/kg）,每组15只.②实验方法：除对照组外,其余各组大鼠均通过胶管与动物人工呼吸机相连接,行机械通气.各组大鼠的通气参数除潮气量外,其余参数均相同,即频率为60次/min,吸/呼比为1∶3,吸入氧的体积分数为0.21.各通气组分别于机械通气结束后采集相关组织标本.③实验评估：大鼠麻醉处死后,分别在肉眼和光镜下观察各组大鼠肺组织的病理学改变;测定肺湿/干质量比值. 结果：①大鼠肺组织大体观察和病理学观察：常规潮气量组大鼠肺组织在肉眼和光镜下观察与对照组相比较均无明显差别;过度通气小潮气量组在光镜下可见肺间质水肿及炎性细胞浸润;过度通气大潮气量组大鼠肺组织有明显的损伤表现.②肺湿/干质量比值：过度通气大潮气量组和小潮气量组的肺湿/干质量比值高于对照组和常规潮气量组,差异均有显著性意义（P均＜0.05）,常规潮气量组与对照组之间的差异无显著性意义（P＞0.05）. 结论：呼吸机相关性肺损伤的发生与机械通气的过度通气潮气量大小有密切关系,而常规潮气量通气对正常肺组织结构无明显影响.