植物雌激素与突触素表达及空间认知水平的相关性研究

目的观察两种雌激素—α-玉米赤霉醇(α-ZAL)和苯甲酸雌二醇(EB)对β淀粉蛋白毒性片段Aβ25-35所致神经损伤小鼠学习记忆的保护作用。方法选用雌性Balb/C小鼠,经侧脑室注射Aβ25-35造成拟老年性痴呆模型,用Morris水迷宫测其空间学习记忆能力,用RT-PCR,Westernblot等方法观察脑突触素的表达。结果模型组小鼠寻找平台的潜伏期明显延长,经两种雌激素治疗后有明显改善。模型组小鼠海马突触素mRNA表达水平较对照组明显降低,经两种雌激素治疗后其表达明显增强。结论模型小鼠学习记忆能力下降的原因之一与突触素表达下降密切相关。植物雌激素α-ZAL和EB一样能对抗Aβ25-35的毒性作用,促进突触素的表达,从而改善小鼠的学习记忆能力。     

β淀粉样肽及冈田酸对大鼠脑内突触素和发动蛋白Ⅰ表达的影响

目的:探讨β淀粉样肽(Aβ)及冈田酸(OA)对大鼠学习记忆能力及脑内突触素和发动蛋白Ⅰ的表达影响。方法:采用立体定向方法将Aβ1-42及OA分别注入SD大鼠双侧海马CA1区,2个月后水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,Western印迹及实时聚合酶链反应(real-time PCR)检测大鼠脑组织中突触素和发动蛋白及mRNA表达水平。结果:与对照组相比,Aβ注射组、OA注射组及Aβ+OA共同注射组均能引起大鼠学习记忆能力降低,各组脑组织中突触素、发动蛋白Ⅰ及mRNA表达均降低(P0.01),其中以Aβ+OA共同注射组改变尤为明显。结论:Aβ和OA均可降低大鼠学习记忆能力,降低突触素和发动蛋白Ⅰ的表达,该改变可能与AD发病机制中学习记忆能力减退有关。     

栀子粗提物对拟痴呆模型鼠学习记忆功能障碍的影响

目的观察中药栀子粗提物对Aβ25-35致痴呆小鼠模型及鹅膏蕈氨酸(IBO)致大鼠记忆获得障碍模型的影响。方法采用Aβ25-35脑室注射致痴呆小鼠模型及前脑基底核注射IBO致大鼠记忆获得障碍模型,通过Morris水迷宫实验和避暗实验,观察栀子粗提物低、中、高3个剂量组(12.5、25、50mg/kg)对模型鼠学习记忆功能的影响。阳性药采用多奈派齐(0.75mg/kg)。结果栀子粗提物3个剂量均可提高Aβ25-35致痴呆小鼠的Morris水迷宫空间学习记忆能力(P0.05),中剂量对IBO致记忆获得障碍大鼠水迷宫空间学习记忆能力有明显改善作用(P0.01);各给药组大鼠受到避暗箱内电击的潜伏期均有所延长,3min内受到电击的次数均有所减少。结论栀子粗提物有改善拟痴呆模型鼠学习记忆功能的作用。     

卡托普利对Aβ1-42诱导的痴呆模型大鼠记忆功能的影响

目的观察血管紧张素酶抑制剂(ACEI)类药物卡托普利对Aβ1-42诱导的阿尔茨海默痴呆模型大鼠的记忆能力,学习能力的影响以及相关机制的探究。方法把SD成年大鼠60只,随机分为,模型组和假手术组,其中模型组四个亚组各12只,假手术组12只。在各组鼠脑部两侧海马区注射Aβ1-42制作大鼠AD(Alzheimer disease)痴呆模型。假手术组,使用生理盐水注射到两侧海马区,作为对照。模型组为使用卡托普利按大、中、小剂量分三亚组和生理盐水亚组。假手术组不使用药物。用Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,检测大脑皮层和海马区的血管紧张素转化酶(ACE)、超氧化物歧化酶(SOD)、突触素(SYP)含量。结果 Aβ1-42诱导的模型组大鼠,水迷宫实验逃避潜伏期明显延长,学习记忆能力明显障碍;与模型盐水亚组相比,使用卡托普利高剂量可以使逃避潜伏期变短,穿越平台次数增加2.1倍,平台象限时间与总时间之比增加15.7%,显示改善大鼠学习记忆能力;与模型盐水亚组相比,高剂量卡托普利亚组大鼠大脑中的ACE明显增加2.9倍,SOD含量也增加28%,海马中的突触素SYP增加2.3倍,大鼠清除β淀粉蛋白能力增加,抗氧化能力增强,记忆能力增加。结论卡托普利中高剂量明显改善Aβ1-42诱导的大鼠模型的学习记忆能力,大鼠脑皮质中的ACE和SOD含量上升,海马中突触素SYP增加,记忆能力增强。     

针康法对局灶性海马缺血大鼠学习记忆能力及突触素表达的影响

目的 探讨头穴丛刺结合康复训练(针康法)对海马梗死大鼠学习记忆能力及突触素表达的影响.方法 将50只大鼠随机分为假手术组、模型组、头穴丛刺组、康复组、针康组,每组10只.采用光化学法诱导局灶性海马缺血大鼠模型,术后24 h进行干预,治疗14 d后采用Y-型迷宫评价大鼠学习记忆能力,免疫组化法观察突触素表达情况.结果 与假手术组比较,各组大鼠学习能力下降,突触素表达增加(P<0.05).与模型比较,头穴丛刺组、康复组、针康组学习能力明显提高(P<0.01),突触素表达增加(P<0.05),且针康组优于头穴丛刺组和康复组(P<0.05).结论 针康法能促进学习记忆能力的恢复,上调突触素的表达,其疗效优于单纯头穴丛刺和单纯康复训练.     

淫羊藿黄酮对阿尔茨海默病模型神经炎性反应的影响

目的 观察淫羊藿黄酮(EF)对阿尔茨海默病(AD)小鼠模型神经炎性反应的影响.方法 2月龄ICR雄性小鼠侧脑室注射β淀粉样肽1-40(Aβ),建立AD小鼠模型.应用Morris水迷宫法和避暗试验检测小鼠的学习记忆功能,放射免疫法测定脑内白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,免疫组织化学法测定脑内神经胶质元纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞(星形胶质细胞)的表达.结果 与对照组比较,模型组小鼠学习记忆能力降低( P<0.05, P<0.01),脑内IL-1β和TNF-α含量增加( P<0.01),星形胶质细胞增生( P<0.05).与模型组比较,EF给药组(100 mg/kg、300 mg/kg)小鼠的学习记忆能力明显改善( P<0.05, P<0.01),IL-1β和TNF-α含量及GFAP阳性细胞表达数均降低( P<0.05, P<0.01).结论 EF可降低Aβ诱导的小鼠脑内炎性反应.     

螺旋藻改善铝中毒小鼠学习记忆障碍机制探讨

目的：探讨螺旋藻改善铝中毒小鼠学习记忆障碍的作用机制。方法：用口服氯化铝方法建立小鼠铝中毒学习记忆障碍模型，并用螺旋藻多糖灌胃进行实验性治疗。用跳台试验和避暗试验检测各组小鼠的学习记忆行为，并用免疫组化ABC法检测各组小鼠海马神经元型一氧化氮合酶（nNOS)的表达。结果：与对照组比较，模型组小鼠表现出明显的学习记忆障碍，海马nNOS表达下降。实验组的学习记忆能力较模型组有明显改善，海马nNOS表达增加。结论：螺旋藻对铝中毒小鼠的学习记忆障碍有明显的改善作用，其作用机制可能与增加nNOS的表达有关。     

淀粉样β蛋白所致大鼠突触素及其行为学改变

目的：观察淀粉样β蛋白对大鼠学习记忆能力及突触含量的影响。方法：实验于2004—02在郑州大学医学院生理学教研室完成。实验动物为三四月龄的健康雄性SD大鼠（Y迷宫筛选对电击敏感并逃避迅速）24只，随机数字表法分成正常对照组、假手术组、阿尔茨海默病模型组，每组8只，大鼠双侧海马微量注射聚合态淀粉样β蛋白1-40制备阿尔茨海默病动物模型，Y-型迷宫测定大鼠学习记忆能力。①学习测试：规定大鼠受电击后从起步区直接逃至安全区为正确反应，以连续10次中有9次（9／10）正确反应前所需的电击次数（即尝试次数）表示其学习获得能力。若尝试次数超过100次则不再测试：并以100次为最大值计数。以正确反应数占总测试数的百分比计算正确反应率。②记忆再现测试：大鼠休息24h后，同法检测其记忆力。以达9／10标准前的尝试次数表示记忆再现能力，并计算其正确反应率。随后处死大鼠，行突触素免疫组织化学染色。选择海马CA1区利用捷达801系列形态分析系统测定突触素免疫产物的平均吸光度，并以其代表突触素的量。每例标本检测4张切片，求其平均值，再计算每组动物的均值。结果：各组大鼠无意外死亡，全部结果进入结果分析。①光镜下观察突触素的产物呈颗粒状，主要分布在海马CA1、CA3区多形层和分子层及齿状回，呈点状沿多形层和分子层长轴分布。阿尔茨海默病模型组海马CA1区多形层和分子层突触素染色较正常对照组浅。②假手术组大鼠海马结构内突触素吸光度值与对照组接近，差异无显著性意义[（0．268&;#177;0．01），（0．270&;#177;0．01），t=1．549，P〉0．05]；阿尔茨海默病模型组大鼠海马结构内突触素吸光度值明显低于对照组，差异有显著性意义[（0．176&;#177;0．01），（0．270&;#177;0．01），t=2．875,P〈0．05]。③阿尔茨海默病模型组大鼠学习能力和记忆能力均显著下降，学习记忆获得尝试次数显著高于正常组和假手术组（P〈0．05），并且在整个过程中正确反应率明显低于正常组和假手术组（P〈0．05）。结论：海马内注射淀粉样β蛋白1-40可引起大鼠学习记忆能力下降，淀粉样β蛋白1-40所致阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆减退与海马CA1区突触的减少有关。     

原发老年性痴呆淀粉样β25～35多肽诱导乙酰胆碱能受体缺损的研究

目的：探讨活性肽段Aβ25～35是否可以直接改变神经元烟碱型乙酰胆碱受体(nAchRs)亚型的表达及其机制。方法：实验于2002／2003在瑞典皇家医学院老年病研究所中心进行。采用配体结合实验以及Western Blot，RPA法，观察在Aβ25～35侵害早期，PC12细胞损伤机制。结果：用nmol浓度Aβ25～35能明显降低PC12细胞nAchRs结合位点数量，引起α7等亚单位蛋白和mRNA水平不同程度的下降，Aβ25～35(0．1～100nmol／L)作用后，[^3H]epibatidine结合力平均显下降37．4％，Aβ25～35(10～100nmol／L)共同孵育，[^125I]α-BTX结合力平均降低为28．2%。α7亚单位随Aβ25～35(1～100nmol／L)呈剂量依赖性递减分别为23．4％，α3亚单位随Aβ25～35(0．1～100nmol／L)呈剂量依赖性递减分别为42．8％。α7亚单位mRNA水平随Aβ25～35(1～100nmol／L)呈浓度依赖性下降分别为33．8％。对照组反转肽段Aβ25～35对PC12细胞nAchRs结合位点，α3，α7，β2亚单位的蛋白和mRNA水平无明显影响。nmol浓度Aβ25～35与nAchRs的特异结合力较弱，但明显抑制细胞活性。结论：在AD病程早期，Aβ可直接引起nAchRs退行性改变；细胞内在信号传导系统的失衡可能是引起nAchRs生物合成降低的原因之一。     

寰枢椎周围软组织损伤对老龄小鼠脑衰老进程的影响

目的观察老龄小鼠寰枢椎肌肉、韧带、筋膜损伤对其脑衰老进程的影响。方法利用手术损伤小鼠寰枢椎周围软组织。利用跳台试验检测小鼠学习、记忆能力；组织切片HE染色观察脑海马神经元数量；免疫组织化学染色观察β-淀粉样多肽（Aβ）、caspase-3的表达；试剂盒检测血清NO及脑组织SOD、MDA的变化。结果与对照组相比，跳台试验：模型组小鼠反应期明显延长，潜伏期明显缩短，错误次数显著增加（P〈0．01）；HE染色可见模型组脑海马神经元数量明显减少，大脑皮层嗜神经现象明显；免疫组化：模型组脑海马区Aβ、caspase-3阳性细胞数均明显增加；生化指标检测结果：模型组小鼠脑组织MDA含量显著增加（P〈0．05），SOD活性明显下降（P〈0．01）；其血清NO含量也显著增加（P〈0．05）。结论寰枢椎软组织损伤促进老龄小鼠脑细胞凋亡，导致其学习、记忆功能明显减退，加速了脑衰老的进程。